选题基础研究选准科学问题-课件.ppt
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- 选题 基础 研究 科学 问题 课件
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1、浅谈博士后基金申请浅谈博士后基金申请邱丽娟邱丽娟()中国农业科学院作物科学研究所中国农业科学院作物科学研究所第四章第四章 申报评审申报评审 第十二条第十二条 申请资助的博士后研究人员必须具备良好的思申请资助的博士后研究人员必须具备良好的思想品德、较高的学术水平和较强的科研能力;申报评审的想品德、较高的学术水平和较强的科研能力;申报评审的项目应具有项目应具有基础性、原创性和前瞻性基础性、原创性和前瞻性,具有,具有重要科学意义重要科学意义和和应用价值应用价值 第十四条第十四条 博士后研究人员申请基金资助所报项目,应为博士后研究人员申请基金资助所报项目,应为本人承担本人承担。申报材料的内容应当真实可
2、靠,不得弄虚作假。申报材料的内容应当真实可靠,不得弄虚作假 第十七条第十七条 评审专家对申请者的评审专家对申请者的研究基础研究基础、研究方法研究方法、研研究思路究思路、支出预算支出预算和和创新能力创新能力等方面做出分析判断,评审等方面做出分析判断,评审出具有出具有发展潜力发展潜力和和创新能力创新能力的博士后研究人员,予以资助。的博士后研究人员,予以资助。中国博士后科学基金资助规定中国博士后科学基金资助规定 一、选一、选 题题 基础研究基础研究 选准选准科学科学问题,结合科学发展前沿问题,结合科学发展前沿 应用研究应用研究 选择国民经济和社会发展中迫切需要解决关键选择国民经济和社会发展中迫切需要
3、解决关键科技科技问题问题 题目要具体明确,避免过宽,过大题目要具体明确,避免过宽,过大 资源筛选到种质创新和育种资源筛选到种质创新和育种 结合问题用最实用的方法,不是方法越新越好结合问题用最实用的方法,不是方法越新越好 如差异显示,蛋白组学,如差异显示,蛋白组学,miRNAmiRNA等等 题目要具有科学性,不能只具有操作性题目要具有科学性,不能只具有操作性 如转基因研究,可针对方法进行研究如转基因研究,可针对方法进行研究 符合需要性、合理性、可行性、创新性原则选选 题题 启动子超表达基因对作物特性的影响启动子超表达基因对作物特性的影响 EST-SSREST-SSR标记开发和遗传作图标记开发和遗
4、传作图 蛋白激酶对作物耐盐胁迫的调控机理研究蛋白激酶对作物耐盐胁迫的调控机理研究 黑龙江作物遗传多样性及耐冷性研究黑龙江作物遗传多样性及耐冷性研究 抗性突变体的鉴定及其抗性机理研究抗性突变体的鉴定及其抗性机理研究 春化基因的分子标记春化基因的分子标记 抗性种质的遗传多样性及优异抗源发掘抗性种质的遗传多样性及优异抗源发掘 受体蛋白的选择性剪接对抗性影响的研究受体蛋白的选择性剪接对抗性影响的研究 病原菌资源与其宿主的遗传分化研究病原菌资源与其宿主的遗传分化研究 二、个人及申报项目基本信息二、个人及申报项目基本信息1、考虑现有项目与现在项目的关系,非越多越好2、已完成项目与申报项目之间的关系 内容、
5、经费的考虑3、博士后时间短、精力有限摘要摘要研究意义研究基础研究基础研究内容与目标摘摘 要要 利用基因工程改良油菜耐湿性,对提高甘蓝型油菜的耐湿性和研究植物耐湿机理具有重要意义。在前期的研究中发现.,连通植物抗旱和耐湿信号传导途径,具有重要意义。这些材料携带有高产、抗病、抗逆等众多的优异基因摘要叙述 简练 严谨三、项目立论依据三、项目立论依据 1、研究意义 基础研究需结合科学研究发展趋势来论述科学意义 应用研究需结合国民经济和社会发展中迫切需要解决的关键科技问题来论述其应用前景 2、国内外研究现状综述 要求内容翔实、清晰,层次分明,标题突出3、项目创新之处(粗细处理)1 1)以往对)以往对NA
6、C NAC 基因的研究主要在于模式植物如拟南芥的胚胎早期发育或基因的研究主要在于模式植物如拟南芥的胚胎早期发育或在耐逆境中的作用,还没有系统研究在耐逆境中的作用,还没有系统研究NAC NAC 基因对大豆种子发育的影响。基因对大豆种子发育的影响。因此,本项目特色之一是阐明因此,本项目特色之一是阐明NACNAC蛋白在大豆种子发育过程中生物学功能。蛋白在大豆种子发育过程中生物学功能。2 2)本项目结合转基因技术、基因芯片分析技术和蛋白质组技术,同时在)本项目结合转基因技术、基因芯片分析技术和蛋白质组技术,同时在基因水平和蛋白水平阐明基因水平和蛋白水平阐明NAC NAC 基因在大豆种子发育过程中的调控
7、机理,基因在大豆种子发育过程中的调控机理,这也是本项目的特色之一。这也是本项目的特色之一。3 3)植物的种子发育是一个非常复杂的过程,目前对种子发育的分子机制)植物的种子发育是一个非常复杂的过程,目前对种子发育的分子机制还了解较少。本研究通过大豆种子发育过程中还了解较少。本研究通过大豆种子发育过程中NAC NAC 转录因子的调控机理转录因子的调控机理研究,初步明确研究,初步明确NAC NAC 基因直接或间接参与的大豆种子发育调控网络,这基因直接或间接参与的大豆种子发育调控网络,这对于进一步完善和丰富对植物种子发育分子机制的认识具有重要意义。对于进一步完善和丰富对植物种子发育分子机制的认识具有重
8、要意义。学科交叉明显:本项目涉及到植物生物学、分子生物学、遗传学、作物学等学科,学科间交叉明显,容易产生新理论。4、参考文献(新、全、高)Cao D,Hou WS,Liu W,Yao WW,Wu CX,Liu XB,and Han TF,(2011).Overexpression of TaNHX2 enhances salt tolerance of composite and whole transgenic soybean plants.Plant Cell,Tissue and Organ Culture 107(3):541-552Gleason C.,Chaudhuri S.,Ya
9、ng T.,Munoz A.,Poovaiah B.W.,Oldroyd G.E.(2006).Nodulation independent of rhizobia induced by a calcium-activated kinase lacking autoinhibition.Nature 441(7097):1149-1152Hao Y J,Wei W,Song Q X,Chen H W,Zhang Y Q,Wang F,Zou H F,Lei G,Tian A G,Zhang W K,Ma B,Zhang J S,Chen S Y.(2011).Soybean NAC trans
10、cription factors promote abiotic stress tolerance and lateral root formation in transgenic plants.Plant Journal 68:302-313Hayashi T,Banba M,Shimoda Y,Kouchi H,Hayashi M,Imaizumi-Anraku H.(2010).A dominant function of CCaMK in intracellular accommodation of bacterial and fungal endosymbionts.The Plan
11、t Journal 63(1):141-154Kang H,Zhu H,Chu X,Yang Z,Yuan S,Yu D,Wang C,Hong Z,Zhang Z.(2011).A Novel Interaction between CCaMK and a Protein Containing the Scythe_N Ubiquitin-Like Domain in Lotus japonicus.Plant Physiology 155(3):1312-1324.细节决定胜败 好中求好需要注意的问题 每段最好有标题,段落要清晰,主题要突出,以事实(文献)为依据 后面的研究内容,前面必须有
12、该领域的进展,前后呼应 体现出本研究的重要性和地位,让外行也能明白附主要参考文献:规范,前后一致 文献期刊要具有影响 新、全 矿物质对作物生长的题目申请者的研究前期工作进展及进一步的研究方向申请者的研究前期工作进展及进一步的研究方向 我们的前期研究也发现,两个NAC 同源基因可能参与了大豆种子发育的进程(Meng et al,in press)。本项目组应用生物信息学结合分子克隆技术从大豆中分离了6 个NAC 同源基因(GmNAC1-GmNAC6)。组织表达分析表明,GmNAC1 主要表达于根和花芽,GmNAC2 主要表达于叶片、茎和发育中的种子,GmNAC3 在花芽中强烈表达,在种子中表达较
13、弱。GmNAC4 和GmNAC6 则表现为组成型表达。GmNAC5 主要表达于发育中的大豆种子,在花芽和荚皮中也有微弱的表达。进一步分析发现:GmNAC2和GmNAC5 都在大豆种子代谢旺盛时期即30-35DAF 的表达量最高,表明这两个基因的表达可能与种子发育状态 密切有关,但它们是如何参与调节大豆种子发育进程的?有哪些基因参与调节?目前还不清楚,需要进一步深入研究。这部分与后面的工作基础不要重复这部分与后面的工作基础不要重复四、项目研究方案四、项目研究方案1.研究目标(明确)2.研究内容(适当)3.拟解决的关键问题(本研究科学和科技问题)4.拟采取的研究方法(技术方法)5.技术路线(画图)
14、6.实验方案(内容的实施)7.可行性分析8.研究计划及预期进展(详细)1、研究目标 1)明确GmNAC2 和GmNAC5 在大豆种子发育中的生物学功能;2)初步阐明GmNAC2 和GmNAC5 在大豆种子发育过程中的调控网络,并探讨GmNAC2和GmNAC5 的潜在育种利用价值。该项目完成后,可望筛选到一批转基因植株,发表SCI科研论文1-2篇,申请专利1项,培养研究生1-2名。在现已克隆的GmNAC2 和GmNAC5 基因的基础上,进一步开展:4)GmNAC2 和GmNAC5 基因与其他基因的关系研究 一是在基因表达水平上,应用基因芯片技术比较转基因植株和非转化植株种子发育过程特定时期(开花
15、后5 天,15 天,25 天,35 天,45 天)的基因表达差异,鉴定差异表达的基因;二是在蛋白质水平上,应用蛋白质组技术比较转基因植株和非转化植株种子发育过程特定时期(开花后5 天,15 天,25 天,35 天,45 天)的蛋白表达差异,鉴定差异表达的蛋白。进一步分析差异表达基因与差异表达蛋白的关系。2、研究内容3、拟解决的关键问题 1)目前对于NAC 基因家族的研究报道多集中在模式植物的胚胎发育以及耐逆方面作用。对于大豆而言,由于其种子含有高蛋白和高油份(其种子组成与拟南芥明显不同),NAC 基因在大豆种子发育过程中具体作用还不清楚,因此,本项目拟解决的关键问题之一是阐明本项目拟解决的关键
16、问题之一是阐明NAC 基因在大豆种子发育过程中基因在大豆种子发育过程中的生物学功能。的生物学功能。2)我们的前期研究表明,GmNAC2 和GmNAC5 在种子中表达量较高,而在其他组织中表达量相对较少,且在种子不同发育时期的表达量也不同。但对这两个基因之间及它们与其他基因间的关系还一无所知。因此,本项目拟解本项目拟解决的关键问题之二是在转基因研究的基础上,结合基因芯片和蛋白质组技术,决的关键问题之二是在转基因研究的基础上,结合基因芯片和蛋白质组技术,探明探明GmNAC2 和和GmNAC5 以及它们与其他基因间的关系。以及它们与其他基因间的关系。项目内;项目外(抗除草剂)研究目标 本课题以诱变产
17、生的低植酸种质为材料,采用生物技术、生物信息学、现代仪器分析技术和传统的育种手段相结合的方法,对其进行了系列研究,预期目标如下:1、精细定位两个突变基因,获得与其连锁的分子标记,遗传距离1.0 cM,为标记辅助选择、图位克隆或通过比较基因组分析确定候选基因打下基础。2、明确两个低植酸突变单独使用和组合使用的育种价值。(三)拟解决的关键问题(三)拟解决的关键问题 通过本项目的实施,获得可以用于提高大豆营养品质、对农艺和其它品质性状又没有负面效应的低植酸突变基因,找到与其紧密连锁的分子标记。研究内容 本项目主要开展TW lpa1-2 和 ZC lpa2-1 两个低植酸突变基因的定位和育种价值的研究
18、。包括 1、微卫星标记初步定位突变基因。(太粗)2、突变基因目标区段多态性标记的挖掘,并用于该区段分离单株的HAPLOTYPE 分析,从而完成突变基因的精细定位。3、通过突变种质和常规品种杂交后代群体中,低植酸和野生型株系的产量、种子田间出苗率和品质性状(低聚糖、脂肪酸含量和组分)的比较分析,研究两个独立的低植酸突变是否对上述性状具有负面影响;确定两个突变基因在大豆营养品质改良中的价值。4、利用分子标记辅助选择,获得携带两个突变基因的纯合株系,通过分析其植酸含量、农艺和品质性状表现,确定两个突变基因组合使用时的效果。标题标题4、拟采取的研究方法详细叙述或引用文献5.技术路线(标出基础,不能太复
19、杂)例一例一6、研究方案 1)蛋白质亚细胞定位:蛋白质亚细胞定位:GmNAC2 与与GFP 基因融合后的基因融合后的Gateway 载体载体pMDC44 系列系列(Curtis&Grossniklaus,2003,Plant Physi,133:462-469),用农杆菌介导的方法进行洋葱表皮细胞的用农杆菌介导的方法进行洋葱表皮细胞的瞬时表达,结合激光共聚焦显微镜分析,研究瞬时表达,结合激光共聚焦显微镜分析,研究GmNAC2 编码产编码产物的亚细胞定位。物的亚细胞定位。2)蛋白质转录活性分析)蛋白质转录活性分析 3)基因表达分析(原位杂交)基因表达分析(原位杂交)4)转基因大豆的获得与分析)转
20、基因大豆的获得与分析 5)基因芯片分析)基因芯片分析 6)GmNAC2 和和GmNAC5 下游基因的鉴定下游基因的鉴定 7)蛋白质组分析)蛋白质组分析从研究内容的角度进行阐述,不要与研究方法重复目前有关目前有关NAC NAC 基因在大豆种子发育过程中功能尚不清楚,但申请者已克隆了基因在大豆种子发育过程中功能尚不清楚,但申请者已克隆了两个可能与种子发育相关的两个可能与种子发育相关的NAC NAC 基因,为进一步研究准备了基础材料和信息。基因,为进一步研究准备了基础材料和信息。转基因大豆的培育是本项目实施的重要环节,本实验室经过转基因大豆的培育是本项目实施的重要环节,本实验室经过10 10 多年的
21、摸索,多年的摸索,已经建立了较稳定大豆遗传转化体系,经已经建立了较稳定大豆遗传转化体系,经Southern Southern 杂交验证,可以获得杂交验证,可以获得1%1%左右的转化效率(左右的转化效率(Yi&Yu,2006Yi&Yu,2006)。此外)。此外,我们也在大豆上建立了基因过我们也在大豆上建立了基因过量表达和量表达和RNAiRNAi技术转基因体系(技术转基因体系(易新萍,南农博士论文易新萍,南农博士论文,2006,2006););通过基因芯片技术大规模研究差异表达基因,由于商品化大豆基因芯片产品通过基因芯片技术大规模研究差异表达基因,由于商品化大豆基因芯片产品(AffymetrixA
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