还原糖的测定课件.pptx
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1、一般成分碳水化合物的测定食品理化检验技术主讲教师:刘丹赤02食品一般成分的检验任务五 还原糖的测定 4 碳水化合物概述1 1 直接滴定法2 2目录页CONTENTS PAGE 高锰酸钾滴定法3 3 5 学习目标知识目标:1.了解碳水化合物的概念、分类、性质及在食品中的存在形式。2.掌握还原糖、蔗糖、总糖的测定原理、方法及适用范围。3.了解淀粉、粗纤维等的测定方法。技能目标:1.会用直接滴定法和高锰酸钾法测定食品中的还原糖。2.能进行酸水解、酶水解等基本操作。3.会使用“相当于氧化亚铜质量的葡萄糖、果糖、乳糖、转化糖的质量表”。6 1 碳水化合物概述食品理化检验技术 7 碳水化合物统称为糖类,是
2、由碳、氢、氧三种元素组成的一大类化合物。糖+蛋白质糖蛋白 糖+脂肪糖脂碳水化合物概念 9 碳碳水水化化合合物物单糖单糖双糖双糖多糖多糖葡萄糖葡萄糖果糖果糖半乳糖半乳糖蔗糖蔗糖乳糖乳糖麦芽糖麦芽糖淀粉淀粉纤维素纤维素果胶果胶有效碳水化合物有效碳水化合物无效碳水化合物无效碳水化合物 10 食品中糖类测定是食品的主要分析项目之一,在食品工业中具有十分重要的意义。1、食品加工中常需要控制一定量的糖酸比2、糖果中糖的组成及比例直接关系到其风味和质量3、糖的焦糖化作用及羰氨反应既可使食品获得诱人的色泽和风味,又能引起食品的褐变,必须根据工艺需要加以控制4、食品中糖类含量也在一定程度上标志着营养价值的高低,
3、是某些食品的主要质量指标糖类物质测定意义 11 典型食品糖类含量国家标准国标品名糖含量GB/T 23968-2009肉松总糖含量(以蔗糖计)35g/100gGB/T 23493-2009中式香肠总糖(以葡萄糖计)22g/100gGB/T 18623-2011镇江香醋(特级,优级,一级,二级)还原糖(以葡萄糖计)2.50,2.30,2.20,2.00 g/100mLGB14963-2011蜂蜜果糖和葡萄糖60 g/100g;蔗糖10g/100g(桉树蜂蜜、柑橘蜂蜜、紫苜蓿蜂蜜、荔枝蜂蜜野桂花蜜),5g/100g(其他蜂蜜)GB/T 13662-2008 黄酒总糖含量15.0g/L(干黄酒),15
4、.140.0g/L(半干黄酒),40.1100g/L(半甜黄酒),100g/L(甜黄酒)GB/T 21730-2008浓缩橙汁蔗糖(复原后)50g/kg,葡萄糖(复原后)20.035.0,果糖(复原后)20.035.0,12 糖类物质的测定方法什么是还原糖?具有还原性的糖类。在糖类中,分子中含有游离醛基或酮基的单糖和含有游离半缩醛羟基的双糖都具有还原性。还原糖的测定方法是一般糖类定量的基础。还原糖:葡萄糖、果糖、乳糖和麦芽糖还原性还原性无还原性无还原性1.果糖 2.葡萄糖 3.蔗糖 4.麦芽糖 5.乳糖 17 相关标准vGB 5009.7-2016 食品安全国家标准 食品中还原糖的测定vGB
5、5009.8-2016 食品安全国家标准 食品中果糖、葡萄糖、蔗糖、麦芽糖、乳糖的测定vGB 5009.9-2016 食品安全国家标准 食品中淀粉的测定vGB 5009.88-2014 食品安全国家标准 食品中膳食纤维的测定vGB 5413.5-2010 食品安全国家标准 婴幼儿食品和乳品中乳糖、蔗糖的测定 18 可溶性糖类的提取和澄清v 常用的提取剂:水、乙醇溶液。v 提取液制备的原则 取样量与稀释倍数的确定,使(0.53.5mg/mL)。含脂肪的食品,须脱脂后再提取。含有大量淀粉、糊精的食品,用乙醇溶液提取。含酒精和二氧化碳的液体样品,应先除酒精、CO2。?19 可溶性糖类的澄清干扰物质色
6、素蛋白质可溶性果胶可溶性淀粉有机酸氨基酸单宁 乙酸锌和亚 铁氰化钾溶液硫酸铜和氢氧化钠溶液中性醋酸铅碱性醋酸铅 Al(OH)3乳剂活性炭 澄清常用澄清剂常用澄清剂要符合三点要求 20 可溶性糖类的澄清中性乙酸铅(最常用):可除去蛋白质、单宁、果胶、有机酸等杂质,但脱色力较差;适用于浅色糖液、果蔬制品、焙烤食品等。乙酸锌亚铁氰化钾:生成氰亚铁酸锌沉淀吸附或带去干扰物质,对除去蛋白质能力强,脱色力差。硫酸铜氢氧化钠溶液:碱性条件下,铜离子使蛋白质沉淀,适合于富含蛋白质样品,如乳品等。21 直接滴定法1高锰酸钾滴定法2检测依据铁氰化钾法3GB 5009.7-2016奥氏试剂滴定法4 22 2 直接滴
7、定法食品理化检验技术 23 测定原理测定原理试样经除去蛋白质后,以亚甲蓝作指示剂,在加热条件下滴定标定过的碱性酒石酸铜溶液(已用还原糖标准溶液标定),根据样品液消耗体积计算还原糖含量。适用范围:适合于各类食品中还原糖的快速测定。但是测定深色样品时,滴定终点常常模糊不清。24 25 这个过程发生了什么?(1)Cu2SO4 2NaOH=2 Cu(OH)2 Na2SO4 甲液 乙液 产物A(2)Cu(OH)2在酒石酸钾钠存在时呈溶液状态 Cu(OH)2 KNaC4H4O6 =KNaC4H2O6Cu2H2O 产物A 乙液中酒石酸钾钠 产物B(酒石酸钾钠铜)(络合性)(可溶性络合物)26 (4)3Cu2
8、O+K4Fe(CN)6 +H2O =K2Cu2Fe(CN)6+2KOH 产物C 乙液中亚铁氰化钾 可溶性无色络合物(3)上述溶液与还原糖作用,在加热滴定时,产生砖红色Cu2O C6H12O66KNaC4H2O6Cu6H2O=C6H12O76KNaC4H4O6 3Cu2OH2CO3 葡萄糖 产物B 酒石酸钾钠 产物C 乙液中加入少量亚铁氰化钾:为消除Cu2O对滴定终点的干扰 27 Cu2O酒石酸铜甲液酒石酸铜甲液+酒石酸铜酒石酸铜乙液乙液亚甲基蓝亚甲基蓝(蓝色(蓝色 无色)无色)样品消耗体积样品消耗体积计算还原糖计算还原糖亚甲基蓝亚甲基蓝酒石酸钾钠铜酒石酸钾钠铜络合物络合物(可溶、蓝色)(可溶、
9、蓝色)样品液样品液(还原糖)(还原糖)28 仪器设备仪器设备25mL的酸式滴定管、可调电炉、150mL锥形瓶4个、10mL量筒、5mL移液管2根、250mL容量瓶1个、250mL锥形瓶2个、漏斗2个、50mL烧杯1个 29 所需试剂所需试剂 30 所需试剂所需试剂碱性酒石酸铜甲液碱性酒石酸铜甲液:称取称取1515g g 硫酸铜硫酸铜(CuSOCuSO4 45H5H2 2O O)及)及0.05g0.05g亚亚甲蓝甲蓝(C C1616H H1818CINCIN3 3S3HS3H2 2O O),),溶于水中并稀释至溶于水中并稀释至10001000 mLmL。亚甲蓝的水溶液在亚甲蓝的水溶液在氧化性氧化
10、性环境中环境中蓝色蓝色,但遇锌、氨水等还原剂会被但遇锌、氨水等还原剂会被还原成无色还原成无色状态状态。亚甲蓝亚甲蓝3,7-3,7-双双(二甲氨基二甲氨基)吩噻嗪吩噻嗪-5-5-翁氯化物翁氯化物 31 所需试剂所需试剂碱性碱性酒石酸铜乙液酒石酸铜乙液:称称取取 50g50g 酒石酸酒石酸钾钾钠钠 C C4 4H H4 4O O6 6K KN Na a4H4H2 2O O、7575g g 氢氢氧化钠氧化钠,溶于水中,再加入,溶于水中,再加入4 4g g 亚铁亚铁氰化钾氰化钾,完全溶解,完全溶解后后用水用水稀释至稀释至10001000 mLmL,贮存于橡胶玻璃瓶内。,贮存于橡胶玻璃瓶内。亚铁氰化钾:
11、为消除亚铁氰化钾:为消除CuCu2 2OO对滴定终点的干扰,乙液中加入少量亚铁氰对滴定终点的干扰,乙液中加入少量亚铁氰化钾。化钾。三水合六氰合铁三水合六氰合铁()()酸钾酸钾K K4 4Fe(CN)Fe(CN)6 63 H3 H2 2OO 32 所需试剂所需试剂斐林斐林试剂(试剂(Fehlings solutionFehlings solution)v 德国德国化学家化学家,斐林在斐林在18491849年发明年发明。v 由由氢氧化钠氢氧化钠的含量的含量为为 0.1 0.1 g/mLg/mL的溶液和的溶液和硫酸铜硫酸铜的含量的含量为为 0.05 0.05 g/mLg/mL的的溶液,还有含量溶液,
12、还有含量为为 0.2g/mL0.2g/mL酒石酸钾钠酒石酸钾钠配制而成的,配制而成的,其本质是其本质是新配制新配制的氢氧化铜的氢氧化铜。v 斐林斐林试剂试剂:常用于常用于鉴定可溶性的还原性糖的存在与否鉴定可溶性的还原性糖的存在与否。斐林试剂斐林试剂 33 所需试剂所需试剂乙酸锌溶液(乙酸锌溶液(219g/L219g/L):):称取称取 21.9g 21.9g 乙酸锌,加乙酸锌,加 3mL3mL冰乙酸,加水冰乙酸,加水溶解并稀释至溶解并稀释至100mL100mL。乙酸亚铁氰化钾溶液(乙酸亚铁氰化钾溶液(106g/L106g/L):):称取称取 10.6g 10.6g 亚铁氰化钾,加水溶亚铁氰化钾
13、,加水溶解并稀释至解并稀释至 100 mL100 mL。乙酸锌:可去除蛋白质、鞣质、树脂等,使它们形成沉淀,经过滤除去。乙酸锌:可去除蛋白质、鞣质、树脂等,使它们形成沉淀,经过滤除去。利用利用乙酸锌乙酸锌与与亚铁氰化钾亚铁氰化钾反应生成的反应生成的氰亚铁酸锌氰亚铁酸锌沉淀来挟走或吸附干扰沉淀来挟走或吸附干扰物质。这种澄清剂除蛋白质能力强,但脱色能力差,适用于色泽较浅,物质。这种澄清剂除蛋白质能力强,但脱色能力差,适用于色泽较浅,蛋白质含量高的样液的澄清,如乳制品、豆制品等。蛋白质含量高的样液的澄清,如乳制品、豆制品等。34 所需试剂所需试剂葡萄糖标准溶液:葡萄糖标准溶液:称取称取1g1g(精确
14、至精确至0.0001g0.0001g)经过)经过9810098100干燥干燥 2h 2h 的葡萄糖,加水溶解后加入的葡萄糖,加水溶解后加入5mL5mL盐酸,并以水稀释至盐酸,并以水稀释至1000mL1000mL。此溶液此溶液每毫升相当于每毫升相当于1.0mg1.0mg葡萄糖。葡萄糖。果糖标准溶液:果糖标准溶液:称取称取1g1g(精确至精确至0.0001g0.0001g)经过)经过9810098100干燥干燥 2h 2h 的果糖,加水溶解后加入的果糖,加水溶解后加入 5mL 5mL 盐酸,并以水稀释至盐酸,并以水稀释至1000mL1000mL。此溶。此溶液液每毫升相当于每毫升相当于1.0mg1.
15、0mg果糖。果糖。35 所需试剂所需试剂乳糖标准溶液:乳糖标准溶液:称取称取1g1g(精确至精确至0.0001g0.0001g)经过)经过969622干燥干燥2h2h的的乳糖,加水溶解后加入乳糖,加水溶解后加入5mL5mL盐酸,并以水稀释至盐酸,并以水稀释至1000mL1000mL此溶液每毫此溶液每毫升相当于升相当于 1.0mg 1.0mg 乳糖(含水)。乳糖(含水)。转化糖标准溶液:转化糖标准溶液:准确称取准确称取 1.0526 g 1.0526 g 蔗糖,用蔗糖,用100mL100mL水溶解,置具水溶解,置具塞三角瓶中,加塞三角瓶中,加 5mL5mL盐酸盐酸(1+1)(1+1),在,在68
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