肠道杆菌-课件.ppt

1、肠道杆菌肠道杆菌分布：是一大群寄居在人类和动物肠道中、生 物学性状近似的革兰氏阴性杆菌，可随人和动物排泄物广泛分布于土壤、水和腐物中。种类：肠杆菌科、种类众多，30个菌属、120多 个菌种。致病：正常菌群-条件致病菌-致病菌、引起多 器官、多组织的病变。肠杆菌科中与医学有关的常见菌族和菌属埃希菌族 埃希菌属 大肠杆菌 志贺菌属 痢疾志贺菌爱德华菌族 爱德华菌属 迟钝爱德华菌沙门菌族 沙门菌属 伤寒沙门菌 枸橼酸菌属 佛劳第枸橼酸菌克雷伯菌族 克雷伯菌属 肺炎克氏菌 肠杆菌属 产气肠杆菌 哈夫尼亚菌属 蜂窝哈夫尼亚菌 沙雷菌属 粘质沙雷菌变形杆菌族 变形杆菌属 普通变形杆菌 摩根菌属 摩氏摩根菌

2、属 普罗威登斯菌属 雷氏普罗威登斯菌耶尔森菌族 耶尔森菌属 鼠疫耶尔菌欧文菌族本 欧文菌属 草原居民欧文菌菌族 菌属（菌种数）代表种共同特性共同特性 一、形态与结构一、形态与结构:G 杆菌、中等大小、无芽胞；大多有菌毛（粘附于肠道粘膜上皮细胞表面）；多数有鞭毛（志贺菌-无鞭毛）。二、培养特性二、培养特性:兼性厌氧菌或需氧菌；营养要求不高。三、生化反应、生化反应:活泼；能分解多种糖类和蛋白质，产生各不相同的代谢产物；可用各种生化反应检测其产物，以鉴别不同的细菌。乳糖发酵试验乳糖发酵试验初步鉴别肠道致病菌和肠道非致病菌肠道致病菌肠道非致病菌不发酵不发酵乳糖 发酵发酵乳糖 生化反应对乳糖的分解可初步

3、鉴别 肠道致病菌（志贺菌、沙门菌）：-非致病菌（大肠杆菌）：+变形杆菌例外。重要的试验v分离肠杆菌科的培养基：EMB-伊红美兰平板、MAC麦康凯平板、SS琼脂平板v定科试验：革兰氏染色阴性、触酶阳性、氧化酶阴性、硝酸盐还原试验阳性。v定属和定种试验：KIA、MIU、IMViC等，再结合血清学试验。EMBEMB平板平板：弱选择性培养基，有利肠杆菌科生长，肠道致 病菌无色菌落、非致病菌紫黑色等有色菌落。MACMAC平板平板：中选择性培养基，有利肠杆菌科生长，肠道致 病菌无色菌落、非致病菌红色菌落。SSSS琼脂平板琼脂平板：强选择性培养基，有利志贺菌属、沙门菌属 生长，致病菌无色菌落、非致病菌红色菌

4、落。触酶试验触酶试验：细菌分泌过氧化氢酶。氧化酶试验氧化酶试验：细菌含有细胞色素氧化酶。硝酸盐还原试验硝酸盐还原试验：还原硝酸盐成为亚硝酸盐的能力。KIA：低层黄色，发酵葡萄糖；斜面黄色，发酵乳糖；黄色-产酸-A；红色-产碱-K；黑色-H2S。MIU：接种线模糊，有鞭毛；培养基变红色，产生尿素酶；加吲哚试剂，变红色，反应阳性。IMViC：吲哚试验、甲基红试验、VP试验、枸橼 酸盐利用试验的合称。4、抗原构造复杂、抗原构造复杂 鞭毛抗原（H）菌体抗原（O）K或Vi抗原抗原结构：O抗原、H抗原、表面抗原O O抗原抗原v细胞壁结构的脂多糖，包含类属抗原和特异性抗原，最外端的特异性多糖赋予其高度的特异

5、性。v耐热，100 不被破坏。v是肠道杆菌血清学分型和分群的主要抗原、如大肠杆菌O157，霍乱弧菌O139。vIgM型抗体，凝聚反应vS-R变异H H抗原：抗原：即细菌的鞭毛蛋白；v不耐热，60 30分钟即被破坏；v其特异性取决于多肽链氨基酸的组成、排列顺序和空间构型。vIgG型抗体表面抗原表面抗原v包绕O抗原的多糖抗原，如K抗原、Vi抗原等；v不耐热，60 30分钟即被破坏；v可阻断O抗原与相应抗体的结合。5、抵抗力、抵抗力不强6、易变异、易变异溶源性转换生化反应性变异通过引起耐药性变异毒力性变异转导接合变异 肠杆菌易出现变异菌株，在诊断、治疗方面有重要意义。变异方式：表型变异、基因型变异（

6、自发突变、可通过转导、接合或溶原性转换等转移遗传信息）。变异性状：S-R变异、H-O变异、耐药性、毒力、生化反应特 性改变等。检验方法 标本采集-v 肠外标本：依据感染部位而定。v 肠道标本多采自新鲜粪便，最好带脓血或粘液。分离培养-v 肠外标本：无菌标本用血平板分离培养、有菌标本用MAC、EMB分离培养。v 肠道标本用强选择性SS平板分离培养。细菌鉴定：v 革兰氏染色阴性、触酶阳性、氧化酶阴性、硝酸盐还原试验阳性。v KIA、MIU、IMViC等v 血清学试验等。第一节 埃希菌属(Escherichia)大肠埃希菌（大肠埃希菌（E.coli)E.coli)是典型代表。分布：婴儿出生后数小时即

7、进入肠道，并终生伴随，是人 体肠道正常菌群的重要构成菌。A A：分解代谢产物，抑制痢疾杆菌等致病菌的生长：分解代谢产物，抑制痢疾杆菌等致病菌的生长 B B：合成：合成 ViBViB、ViKViK等，供人体吸收利用。等，供人体吸收利用。C C：天然抗原，：天然抗原，致病：正常菌群-肠道外感染 特殊菌株-肠道内感染 应用：v环境卫生、食品卫生的检测指标-饮水 3个大肠菌群数/升、瓶装汽水 5个大肠菌群数/100ml。v分子生物学、基因工程-实验材料和研究对象。一、生物学性状 G 小杆菌，有鞭毛、菌毛、多数菌株有多糖微荚膜。发酵多种糖类，产酸并产气，大部分菌株迅速发酵乳糖，但引起肠内感染的菌株（致病

8、性大肠杆菌）不发酵或缓慢发酵乳糖；在肠道鉴别培养基上呈现有色菌落；IMViC，脲酶试验阴性、硫化氢试验阴性。三种抗原，血清型表示式-O：K：H O111：K58：H2大肠埃希菌(乳糖发酵试验和吲哚试验)二、致病性 肠道外感染-机会性感染以化脓感染最为常见：泌尿系统感染、伤口感染、腹膜炎、阑尾炎、胆囊炎。在婴儿、老年人：败血症、脑膜炎。肠道内感染-腹泻v 肠产毒性大肠杆菌（enterotoxigenic E.coli ETEC)v 肠侵袭性大肠杆菌（enteroinvasive E.coli EIEC)v 肠致病性大肠杆菌（enteropathogenic E.coli EPEC)v 肠出血性大

9、肠杆菌（enterohemorrhagic E.coli EHEC)v 肠集聚型大肠杆菌（enteroaggregative E.coli EAggEC)引起腹泻的大肠埃希菌 菌株 作用 部位 疾病与症状 致病机制 ETEC6、8、15、25、27、78、148、159 小肠 旅行者腹泻，婴幼儿腹泻，水样便，恶心，呕吐，腹痛，低热 LT 和（或）ST 肠毒素，大量分泌液体和电解质 EIEC28ac、29、112ac124、136、143。大肠 水样便，少量血便，腹痛，发热 质粒介导侵袭和破坏结肠粘膜上皮细胞 EPEC2、55、86、111、114、119、125-128、142、158小肠 婴

10、儿腹泻，水样便，恶心，呕吐，发热 粘附和破坏上皮细胞 EHEC157、26、111大肠 水样便，大量出血，剧烈腹痛，低热或无，可并发HUS、血小板减少性紫癜 SLT-I 或 SLT-II，中断蛋白质合成 EAggEC42、44、3、86 小肠 婴儿持续性腹泻，呕吐，脱水，低热 集聚性粘附上皮细胞，阻止液体吸收 1.1.肠产毒性大肠杆菌肠产毒性大肠杆菌 （ETEC)ETEC)ETECETEC 粘粘 定居因子（定居因子（colonization factorcolonization factor）附附 又称粘附素（又称粘附素（adhesinadhesin）是细菌的特殊菌毛是细菌的特殊菌毛 CFA/

11、CFA CFA/CFA （colonization factor antigencolonization factor antigen，）小肠粘膜小肠粘膜以免被肠蠕动、肠分泌液所清除以免被肠蠕动、肠分泌液所清除 释释 放放 肠毒素肠毒素 由细菌的质粒由细菌的质粒DNADNA编码编码 不耐热肠毒素（不耐热肠毒素（heat labile enterotoxinheat labile enterotoxin，LTLT）65306530分钟失去活性分钟失去活性 耐热肠毒素（耐热肠毒素（heat stable enterotoxinheat stable enterotoxin，STST）100100加

12、热加热2020分钟仍不被破坏分钟仍不被破坏 不耐热肠毒素（不耐热肠毒素（LTLT）B B亚单位亚单位 受体受体：肠粘膜上皮细胞膜肠粘膜上皮细胞膜 表面的表面的GMGM1 1神经节苷脂神经节苷脂 A A亚单位（毒性活性部分）亚单位（毒性活性部分）穿越细胞膜穿越细胞膜 活化活化 腺苷环化酶腺苷环化酶 ATP cAMPATP cAMP 水、电解质紊乱水、电解质紊乱 腹泻腹泻临床症状：轻度腹泻临床症状：轻度腹泻/严重的霍乱样症状严重的霍乱样症状是婴幼儿和旅游者腹泻的重要病原菌是婴幼儿和旅游者腹泻的重要病原菌 耐热肠毒素（耐热肠毒素（STST）鸟苷环化酶鸟苷环化酶 GTP cGMPGTP cGMP水、电

13、解质紊乱水、电解质紊乱 腹泻腹泻 2 2、肠侵袭性大肠杆菌（、肠侵袭性大肠杆菌（EIEC)EIEC)无外毒素无外毒素-肠毒素，但有强的侵袭力（类似痢疾杆菌肠毒素，但有强的侵袭力（类似痢疾杆菌）定位于结肠定位于结肠 侵入肠粘膜上皮细胞，生长繁殖，产生内毒素。侵入肠粘膜上皮细胞，生长繁殖，产生内毒素。破坏细胞形成炎症和溃疡，破坏细胞形成炎症和溃疡，引起腹泻，呈脓血便引起腹泻，呈脓血便 ，有里急后重，有里急后重，临床症状酷似志贺菌感染，主要侵犯较大儿童、成人。临床症状酷似志贺菌感染，主要侵犯较大儿童、成人。3 3、肠致病性大肠杆菌（、肠致病性大肠杆菌（EPEC)EPEC)是婴儿腹泻的主要病原菌；是婴

14、儿腹泻的主要病原菌；不产生肠毒素；不产生肠毒素；也无侵袭力；也无侵袭力；但能粘附小肠粘膜上皮细胞但能粘附小肠粘膜上皮细胞,在小肠黏膜表面在小肠黏膜表面大量繁殖，破坏微绒毛大量繁殖，破坏微绒毛,导致刷状缘破坏，绒导致刷状缘破坏，绒毛萎缩，上皮细胞结构、功能受损，干扰细胞毛萎缩，上皮细胞结构、功能受损，干扰细胞的再吸收的再吸收,造成严重腹泻，严重者可致死；造成严重腹泻，严重者可致死；最近报导，可产生类志贺毒素。最近报导，可产生类志贺毒素。4 4、肠出血性大肠杆菌（、肠出血性大肠杆菌（EHECEHEC）亦称为亦称为VeroVero毒素大肠埃希菌毒素大肠埃希菌 主要血清型：主要血清型：O157O157

15、：H7H7 主要毒力因子：主要毒力因子：v 菌毛菌毛质粒编码质粒编码,介导细菌与肠粘膜细胞结合。介导细菌与肠粘膜细胞结合。v 志贺样毒素（志贺样毒素（Shiga-like toxinShiga-like toxin，SLTSLT）噬菌体编码噬菌体编码 细胞毒素细胞毒素 主要临床症状：主要临床症状：出血性结肠炎、伴以剧烈腹痛、血便。出血性结肠炎、伴以剧烈腹痛、血便。轻重不一。轻重不一。10%10%小于十岁患儿，有严重并发症，死亡小于十岁患儿，有严重并发症，死亡率高率高 5 5、肠集聚性大肠埃希菌、肠集聚性大肠埃希菌质粒编码粘附素、使细菌吸附在肠粘膜细胞表面。质粒编码粘附素、使细菌吸附在肠粘膜细胞

16、表面。分泌肠毒素、导致肠液大量分泌。分泌肠毒素、导致肠液大量分泌。婴儿水样腹泻。婴儿水样腹泻。三、微生物学检查法三、微生物学检查法1 1、临床细菌学检查、临床细菌学检查 标本标本 肠外感染：尿液；脓液；血液肠外感染：尿液；脓液；血液 肠道感染：粪便肠道感染：粪便 分离培养分离培养 计数培养计数培养 纯培养纯培养形态学检查形态学检查 生化反应生化反应 毒素检测毒素检测 血清血清学试验学试验 报告结果报告结果 埃希菌属鉴定 肠杆菌科：革兰氏染色阴性、触酶阳性、氧化酶阴性、硝酸盐还原试验阳性。定属和定种试验：v KIA（K/AH2S-或A/AH2S-）v IMViC（+-）v MIU(-+-或+-）

17、v 多价血清和单价血清的凝集试验，确定血清型。致病性大肠杆菌：v ETEC-毒素v EIEC-侵袭力试验。在环境和食品卫生学上，常被用作粪便污染的检测指标 3个大肠菌群/1L饮水 100个细菌总数/1ml饮水卫生学指标卫生学指标大肠菌群指数每1000ml水中大肠菌群数我国的卫生标准：细菌总数每1ml或1g样品中细菌总数 在分子生物学和基因工程实验中重要的实验材料和研究对象重要的实验材料和研究对象也是重要的实验材料和研究对象能分解葡萄糖，产酸不产气，不分解乳糖,除宋内志贺菌第二节 志贺菌属 shigella是人类细菌性痢疾最为常见的病原菌，通称痢疾杆菌dysentery bacteria无鞭毛无

18、鞭毛，有菌毛生化反应低于其他肠道杆菌，对酸敏感形态对理化因素的抵抗力 抗原构造及分类抗原构造及分类 志贺菌志贺菌O O抗原抗原-分类、分类、4 4群群4444个血清型个血清型 菌种菌种 群群 型型 亚型亚型 痢疾志贺菌痢疾志贺菌 A 110 8aA 110 8a，8b8b，8c 8c 福氏志贺菌福氏志贺菌 B 16B 16，1a1a，1b1b，2a2a，2b 2b X X，Y Y变种变种 3a3a，3b3b，4a4a，4b 4b 鲍氏志贺菌鲍氏志贺菌 C 118C 118宋内志贺菌宋内志贺菌 D 1D 1 K K抗原抗原-与分类无关。与分类无关。中国福氏志贺菌多见。中国福氏志贺菌多见。致病性传

19、染源:患者和带菌者粪口传播感染灶局限于结肠粘膜层，一般不入血病后免疫期短，也不巩固志贺菌属 致病物质1、侵袭力：、侵袭力：菌毛有利于菌粘附至肠粘膜2、毒、毒 素素：内毒素内毒素肠粘膜通透性升高毒素吸收发热、神志障碍、休克破坏肠粘膜炎症、溃疡、脓血粘液便肠壁植物神经肠蠕动失调、痉挛腹痛、里急后重内毒素血症外毒素（A群、型）志贺毒素 ST(VT)有3种毒性，与内毒素协同作用，加重局部和全身症状局部（肠壁）全身 致病过程：志贺菌痢疾 粪口传播（传染源：病人/带菌者）潜伏期 10-200个细菌即使人感染 1-3天 突破人体防御能力 胃酸 正常菌群拮抗作用 局部免疫作用（SIgA）大肠部位 侵入 侵袭力

20、（菌毛）粘膜上皮细胞（生长繁殖，形成感染灶）内毒素、外毒素内毒素、外毒素 坏死、脱落粘膜组织坏死、脱落粘膜组织 局部刺激局部刺激 进入血流进入血流粘液、粘液、1 1、肠功能紊乱、肠功能紊乱 发热、发热、WBCWBC细菌、细菌、痉挛、腹痛痉挛、腹痛 脱水、酸中毒脱水、酸中毒炎性细胞、炎性细胞、大便次数增多大便次数增多 微循环衰竭微循环衰竭血液血液 里急后重里急后重 中毒性脑炎中毒性脑炎 2 2、肠壁通透性增、肠壁通透性增 DICDIC 促进毒素吸收促进毒素吸收 腹泻腹泻 中毒性菌痢中毒性菌痢死亡率高死亡率高 所致疾病所致疾病急性细菌性痢疾急性典型：发热、腹痛、脓血粘液便、里急后重急性非典型：易误

21、诊，导致带菌和慢性 中毒性痢疾：小儿慢性细菌性痢疾：病程迁移两个月以上带菌者 微生物学检查法：痢疾杆菌微生物学检查法：痢疾杆菌肛拭肛拭 病人、带菌者（服药前采集）病人、带菌者（服药前采集）粪便（脓血、粘液部分）粪便（脓血、粘液部分）S S、S S平板平板 荧光菌球法荧光菌球法 协同凝集试验协同凝集试验（分离培养）（分离培养）标本（标本（AgAg）+可溶性可溶性AgAg（？）（？）无色半透明菌落无色半透明菌落 荧光标记荧光标记Ab Ab 荧光显微镜荧光显微镜IgGCowanIgGCowan葡萄球葡萄球菌菌 血清学试验血清学试验生化反应生化反应 +综合判断综合判断及时送检及时送检/暂用暂用30%3

22、0%甘油缓冲盐水保存甘油缓冲盐水保存快速诊断快速诊断双糖培养基双糖培养基玻片凝集玻片凝集志贺菌属鉴定肠杆菌科：革兰氏染色阴性、触酶阳性、氧化酶阴性、硝酸盐还原试验阳性。定属和定种试验：vKIA（K/AH2S-）vIMViC（-+-或+-）vMIU(-+-或-）v多价血清和单价血清的凝集试验，确定血清型。预防：预防：控制传染源，切断传播途径控制传染源，切断传播途径 链霉素依赖株活疫苗（链霉素依赖株活疫苗（SdSd）治疗：治疗：易引起耐药性，联合用药易引起耐药性，联合用药其中许多为人畜共患病其中许多为人畜共患病第三节第三节 沙门菌属（沙门菌属（Salmonella）一大群人与动物肠道中的寄生菌一大

23、群人与动物肠道中的寄生菌菌群菌型甚多，仅少数对人致病菌群菌型甚多，仅少数对人致病生物学性状 生化反应：不发酵乳糖 发酵葡萄糖产酸产气 （伤寒沙门菌外）沙门菌属 伤寒杆菌的抗原构造伤寒杆菌的抗原构造 O-AgO-Ag：LPSLPS成分、耐热；成分、耐热；共同抗原；共同抗原；0.1%0.1%石碳酸不破坏；石碳酸不破坏；TI-AgTI-Ag、产生、产生IgMIgM。H-AgH-Ag：蛋白质、不耐热；蛋白质、不耐热；特异抗原；特异抗原；0.1%0.1%石碳酸破坏；石碳酸破坏；TD-AgTD-Ag、产生、产生IgGIgG。Vi-AgVi-Ag：多糖成分，性质不稳定；多糖成分，性质不稳定；位于菌体表面；位

24、于菌体表面；抵抗吞噬，毒力抗原（抵抗吞噬，毒力抗原（VirulenceVirulence）；）；阻止阻止O-AgO-Ag与相应与相应AbAb的体内外结合；的体内外结合；检测抗检测抗Vi-AgVi-Ag的抗体，筛选带菌者。的抗体，筛选带菌者。伤寒、希氏沙门菌的表面抗原与毒力有关Vi抗原抗原抗原性弱，刺激机体产生短暂低效价抗体伴随活菌一起存在测定Vi抗体有助于检出带菌者因因为为所以所以本本质质1、致病物质：致病性与免疫性致病性与免疫性侵袭力：侵袭素、Vi抗原毒 素：内毒素外毒素-肠毒素（鼠伤寒沙门菌）2、所致疾病：伤寒副伤寒-肠热症败血症胃肠炎（食物中毒）（无症状带菌者）致病过程致病过程：伤寒杆菌

25、伤寒杆菌潜伏期潜伏期伤寒杆菌（随食物）伤寒杆菌（随食物）未被胃酸杀灭未被胃酸杀灭小肠上部小肠上部（以菌毛吸附在粘膜表面）（以菌毛吸附在粘膜表面）穿过组织间隙（鞭毛）穿过组织间隙（鞭毛）肠壁固有层淋巴组织，由肠壁固有层淋巴组织，由MM吞噬吞噬ViVi抗原抵抗杀伤，继续生长繁殖抗原抵抗杀伤，继续生长繁殖淋巴液、肠系膜淋巴组织淋巴液、肠系膜淋巴组织 血液血液（第一期菌血症第一期菌血症）初期初期（病程第（病程第1W1W）第一期菌血症第一期菌血症血液血液骨髓、肝、脾、胆、肾等脏器骨髓、肝、脾、胆、肾等脏器 被其中吞噬细胞吞噬，被其中吞噬细胞吞噬，细菌在其中大量繁殖细菌在其中大量繁殖 血液、骨髓细菌培养阳

26、性率高血液、骨髓细菌培养阳性率高出现乏力、头痛、全身酸痛等前期症状出现乏力、头痛、全身酸痛等前期症状血液血液再次再次释放释放第二期菌血症第二期菌血症极期极期（病程第（病程第2 2、3W3W）肝肝 肾肾各脏器各脏器胆囊胆汁胆囊胆汁 肠道 尿液肠道 尿液 血液血液第二期菌血症第二期菌血症刺激已致敏的肠壁淋巴刺激已致敏的肠壁淋巴组织，发生组织，发生导致变态导致变态反应，坏死、溃疡反应，坏死、溃疡 释放大量内毒素加重全身中毒症状释放大量内毒素加重全身中毒症状 血液、粪便、尿液，细菌血液、粪便、尿液，细菌培养可呈阳性培养可呈阳性 血清中：血清中：IgG IgMIgG IgM粪便排出细菌粪便排出细菌 尿液

27、排出细菌尿液排出细菌 血液有细菌血液有细菌持续高热、肝脾肿大、全身中毒症状显著持续高热、肝脾肿大、全身中毒症状显著恢复期（第恢复期（第3W3W以后）以后）特异性抗体特异性抗体升高，作用于细胞外细菌特异性细胞免疫特异性细胞免疫加强，TD细胞释放淋巴因子，激活M，使 其活性增强，有效杀灭M内的伤寒杆菌。（TC细胞杀伤 细菌感染的靶细胞？）抗伤寒杆菌抗伤寒杆菌O-AgO-Ag的抗体（的抗体（IgMIgM）：）：抗伤寒杆菌抗伤寒杆菌H-AgH-Ag的抗体（的抗体（IgGIgG）：带菌者带菌者 恢复期带菌者：恢复后3周-3月 长期带菌者：3月伤寒的痊愈指标：伤寒的痊愈指标：胆囊、胆汁细菌培养阴性。胆囊-

28、肠道-粪排菌皮肤-血栓出血-玫瑰疹肾-尿肝脾-肿大骨髓伤寒和副伤寒的致病过程伤寒沙门和甲型副伤寒杆菌、肖氏沙门菌、希氏沙门菌小肠上部粘膜肠系膜淋巴结 固有层淋巴结进入血液再次进入血液第一次菌血症第二次菌血症3 3、免疫性、免疫性 细胞免疫细胞免疫 免疫力牢固免疫力牢固微生物学检查查病原查病原标本伤寒和付伤寒 食物中毒 败血症第1周取静脉血可疑食物 血第1-3周取骨髓液呕吐物第2周起取粪、尿 粪SS平板生化反应血清学鉴定双糖发酵等玻片凝集试验微生物学检查法：伤寒杆菌微生物学检查法：伤寒杆菌因病程不同采取不同标本因病程不同采取不同标本标本静脉血（第静脉血（第1 1周）周）骨髓（第骨髓（第1-31-

29、3周）周）粪便和尿液（第粪便和尿液（第2 2周以后）周以后）增菌 离心沉淀（分离培养）SS平板挑取可疑菌落 鉴定：KIA；MIU；血清学试验 因病程不同采取不同标本因病程不同采取不同标本 血液细菌培养阳性率血液细菌培养阳性率 血液血液Ab 粪便细菌培养阳性率粪便细菌培养阳性率 尿液细菌培养阳性尿液细菌培养阳性 发发 病病 时时 间间微生物学检查血清学诊断1、肥达试验肥达试验原理：用已知伤寒沙门菌O、H抗原，以及引起副伤寒的甲型副伤寒沙门菌、肖氏沙门菌和希氏沙门菌H抗原的诊断菌液与受检血清作定定量凝集试验量凝集试验，测定受检血清中有无相应抗体及其效价的试验。用途：辅助诊断伤寒，副伤寒血清学试验血

30、清学试验Widal testWidal test原理：原理：定量凝集反应定量凝集反应 已知伤寒杆菌已知伤寒杆菌O-AgO-Ag 伤伤 寒寒 杆杆 菌菌 H-Ag H-Ag +病人血清病人血清 甲型副伤寒杆菌甲型副伤寒杆菌H-Ag H-Ag 乙型副伤寒杆菌乙型副伤寒杆菌H-Ag H-Ag 检测检测相应相应AbAb的有的有/无、含量。无、含量。结果判定结果判定：v 正常抗体水平正常抗体水平 O O凝集价凝集价180180；H H凝集价凝集价11601160O-Ab H-Ab O-Ab H-Ab 伤寒早期伤寒早期或有交叉反应的其它沙门菌感染或有交叉反应的其它沙门菌感染O-Ab H-Ab O-Ab H

31、-Ab 伤寒急性期伤寒急性期O-Ab H-Ab O-Ab H-Ab 伤寒恢复期伤寒恢复期O-Ab H-Ab AO-Ab H-Ab A：伤寒愈后期：伤寒愈后期 B B：曾患伤寒杆菌：曾患伤寒杆菌 C C：预防接种疫苗预防接种疫苗v 辅助诊断辅助诊断 ：A A：O O凝集价凝集价180180；H H凝集价凝集价11601160 B B：2 2次检测凝集价递增次检测凝集价递增 4 4倍或以上倍或以上防治原则防治原则 口服减毒活疫苗（Ty21a）v带菌者检查：带菌者检查：Vi-AbVi-Ab的效价的效价 110 110，反复粪便培养。，反复粪便培养。TYPHOID MARY3w-3m3w-3m3m-1

32、2m3m-12m1y1y附：其他沙门菌的致病性伤寒：由伤寒杆菌引起。伤寒：由伤寒杆菌引起。副伤寒：由副伤寒杆菌引起，临床症状与伤寒相似，但较轻。副伤寒：由副伤寒杆菌引起，临床症状与伤寒相似，但较轻。败血症败血症肠炎型（食物中毒）：肠炎型（食物中毒）：v最常见的沙门菌感染：鼠伤寒沙门、猪霍乱沙门、肠炎沙门菌最常见的沙门菌感染：鼠伤寒沙门、猪霍乱沙门、肠炎沙门菌v潜伏期潜伏期6-246-24小时；小时；v主要症状：发热、恶心、呕吐、腹痛、腹泻主要症状：发热、恶心、呕吐、腹痛、腹泻v常为集体性食物中毒。常为集体性食物中毒。志贺菌属（Shigella）：人类细菌性痢疾最为常见的病原菌 通称痢疾杆菌（d

33、ysentery bacteria）沙门菌属（Salmonella）：引起肠热症-伤寒、副伤寒 食物中毒 败血症 一、生物学性状一、生物学性状志志 贺贺 菌菌有菌毛有菌毛不分解乳糖不分解乳糖无鞭毛（动力无鞭毛（动力-）分解葡萄糖分解葡萄糖 产酸不产气产酸不产气不产生不产生H H2 2S S沙沙 门门 菌菌有菌毛有菌毛不分解乳糖不分解乳糖周身鞭毛（动力周身鞭毛（动力+）分解葡萄糖分解葡萄糖 产酸产气（伤寒杆菌不产气）产酸产气（伤寒杆菌不产气）大多产生大多产生H H2 2S Sflagella二、致病性二、致病性志志 贺贺 菌菌 沙沙 门门 菌菌 致病部位：致病部位：大肠大肠 不侵入血流不侵入血流

34、 致病物质：致病物质：侵袭力：侵袭力：v菌毛菌毛 粘附上皮细胞粘附上皮细胞v侵袭侵袭 侵入结肠粘膜上皮细侵入结肠粘膜上皮细胞，繁殖、扩散，形成感染胞，繁殖、扩散，形成感染病灶病灶 内毒素内毒素 外毒素：外毒素：ST 致病部位：致病部位：小肠小肠 侵入血流，引起侵入血流，引起 菌血症菌血症 致病物质：致病物质：侵袭力侵袭力v 菌毛菌毛v 鞭毛鞭毛 穿越小肠粘膜达皮下组织穿越小肠粘膜达皮下组织v Vi抗原抗原 抵抗吞噬细胞的杀伤抵抗吞噬细胞的杀伤 内毒素内毒素 肠毒素肠毒素细菌性痢疾细菌性痢疾 肠道症状：有肠道症状：有 不侵入血流不侵入血流 全身中毒症状：全身中毒症状：中毒性痢疾中毒性痢疾 血象血

35、象 WBC WBC 脓血粘液便，粪便是脓血粘液便，粪便是唯一的标本唯一的标本 以局部体液免疫，以局部体液免疫，-SIgA-SIgA为主为主所致疾病所致疾病临床症状的差异临床症状的差异伤寒伤寒 肠道症状：有肠道症状：有 侵入血流引起菌血症侵入血流引起菌血症 全身中毒症状：有全身中毒症状：有 尚影响肝、肾、脾、胆等器官。尚影响肝、肾、脾、胆等器官。血象血象 WBCWBC？嗜酸性粒细胞嗜酸性粒细胞 除粪便外，血液、骨髓、尿液、除粪便外，血液、骨髓、尿液、胆汁均可分离到细菌。胆汁均可分离到细菌。以细胞免疫为主，病后获牢固以细胞免疫为主，病后获牢固免疫力免疫力其他肠道杆菌其他肠道杆菌克雷伯菌属克雷伯菌属

36、-医源性感染的重要细菌医源性感染的重要细菌变形杆菌变形杆菌-条件致病菌条件致病菌食物中毒食物中毒多形性多形性 迁徙生长现象迁徙生长现象分解尿素分解尿素外斐试验外斐试验空肠弯曲菌空肠弯曲菌 幽门螺杆菌幽门螺杆菌铜绿假单胞菌铜绿假单胞菌流感嗜血杆菌流感嗜血杆菌百日咳鲍特菌百日咳鲍特菌嗜肺军团菌嗜肺军团菌气单胞菌属气单胞菌属产单核细胞李氏菌产单核细胞李氏菌革兰阴性革兰阴性无芽胞无芽胞杆菌杆菌 弯曲菌属弯曲菌属 (CampylobacterCampylobacter)空肠弯曲菌空肠弯曲菌(C.jejuniC.jejuni）生物学特性生物学特性 革兰阴性形态细长，呈革兰阴性形态细长，呈弧形、螺旋形、弧形

37、、螺旋形、S S形或形或海鸥状海鸥状 单鞭毛，运动活泼单鞭毛，运动活泼 无芽胞，无荚膜无芽胞，无荚膜 微需氧，微需氧，4242能生长，能生长，营养要求高营养要求高 抵抗力较弱抵抗力较弱 致病性致病性 产生细胞毒素和一种不耐热肠毒素产生细胞毒素和一种不耐热肠毒素 散发性细菌性肠炎散发性细菌性肠炎 病程病程5 58d8d，自愈，自愈诊断与防治诊断与防治 粪便标本涂片、镜检粪便标本涂片、镜检 主要是注意饮水和食品卫生主要是注意饮水和食品卫生螺杆菌属螺杆菌属（HelicobacterHelicobacter)幽门螺杆菌幽门螺杆菌（H.pyloriH.pylori）最适温度：最适温度：37 37 不能生

38、长：不能生长：42 42，25 25 生物学特性生物学特性 在胃粘膜粘液层中常呈鱼群样排列，传在胃粘膜粘液层中常呈鱼群样排列，传代培养可变为杆状或球型。代培养可变为杆状或球型。微需氧菌，营养要求高，需血液或血清微需氧菌，营养要求高，需血液或血清 菌落：细小、针尖、半透明菌落：细小、针尖、半透明 脲酶、氧化酶、过氧化氢酶丰富脲酶、氧化酶、过氧化氢酶丰富幽门螺杆菌幽门螺杆菌 与人类与人类B型胃炎、消化性溃疡以及胃癌等密切关系型胃炎、消化性溃疡以及胃癌等密切关系确切机制尚未完全阐明确切机制尚未完全阐明 呈弧形、呈弧形、S形形 微需氧微需氧 尿素酶丰富，分解尿素释放氨尿素酶丰富，分解尿素释放氨-抵抗胃

39、酸抵抗胃酸 也是鉴别依据之一也是鉴别依据之一 幽门螺杆菌对胃酸敏感，但能在胃中生长，原因：幽门螺杆菌对胃酸敏感，但能在胃中生长，原因：定居在胃粘液层中定居在胃粘液层中 分解尿素释放氨分解尿素释放氨-抵抗胃酸，缓冲抵抗胃酸，缓冲PH 运动活泼运动活泼 机体胃酸低下机体胃酸低下幽门螺杆菌与疾病幽门螺杆菌与疾病 胃炎胃炎 消化性溃疡消化性溃疡 胃癌胃癌 胃粘膜相关胃粘膜相关淋巴样组织淋巴样组织（MALTMALT）淋）淋巴瘤巴瘤诊断与防治诊断与防治 诊断：直接涂片镜检诊断：直接涂片镜检 快速脲酶分解试验快速脲酶分解试验 血清学诊断血清学诊断 分子生物学技术分子生物学技术 防治：重组脲酶幽门螺杆菌疫苗防治：重组脲酶幽门螺杆菌疫苗肠道杆菌生化反应 乳糖 葡萄糖 动力 硫化氢 尿素酶大肠杆菌 +-痢疾杆菌 -+-伤寒杆菌 -+/-副伤寒杆菌 -+-变形杆菌 -+