《放射免疫分析质控》课件.ppt

1、精选ppt1河北医科大学第三医院河北医科大学第三医院黄建敏黄建敏精选ppt2精选ppt3 自自70年代起年代起,放免技术广泛应用放免技术广泛应用 为了规范放射免疫分析试剂盒的生产和为了规范放射免疫分析试剂盒的生产和销售销售,我国在我国在1989年年4月颁布了月颁布了,1995年年12卫生部药政局卫生部药政局颁布了颁布了精选ppt4 同时为了使放射免疫同时为了使放射免疫分析的结果更为准确、分析的结果更为准确、操作行为更加规范，操作行为更加规范，各地也出台了相应的各地也出台了相应的质控手册等质控手册等精选ppt5精选ppt6浙江省核医学中心：浙江省核医学中心：1993年年2月浙江省核医学中心成立，

2、月浙江省核医学中心成立，负责全省核医学技术指导、培训核医学负责全省核医学技术指导、培训核医学从业人员（核医学上岗培训及在岗培训）从业人员（核医学上岗培训及在岗培训）及全省核医学质量控制、管理等工作。及全省核医学质量控制、管理等工作。精选ppt7 误误 差差 的的 种种 类类 产生误差的主要原因和控制方法产生误差的主要原因和控制方法 内部质量评价内部质量评价 外部质量评价外部质量评价精选ppt8 误误 差差系系 统统 误误 差差随随 机机 误误 差差可可 以以 避避 免免不可避免不可避免可以控制可以控制精选ppt9 用于评价系统误差的指标称为偏倚（用于评价系统误差的指标称为偏倚（biasbias

3、），而在体），而在体外放射分析中更多的使用准确度（外放射分析中更多的使用准确度（accuracyaccuracy），是指：），是指：测定值与真值的一致程度测定值与真值的一致程度 评价随机误差的指标称为精密度评价随机误差的指标称为精密度(precision),(precision),指在一指在一定条件下，由一种实验方法对某一样品多次重复检测定条件下，由一种实验方法对某一样品多次重复检测时所得结果的一致性时所得结果的一致性精选ppt10精选ppt11玻璃容器玻璃容器加样器具加样器具仪器和设备仪器和设备解释及评价解释及评价生物样品生物样品的制备的制备 操操 作作 试试 剂剂 数据数据处理处理精选pp

4、t12放放 射射 性性 探探 测测 仪仪离离 心心 机机混混 匀匀 器器精选ppt13仪器是否在最佳公作条件下工作，例：用测仪器是否在最佳公作条件下工作，例：用测131I的条件测的条件测125I就不妥就不妥测量的误差：样品的放射性活度过低，则使误差增大；测量的误差：样品的放射性活度过低，则使误差增大；本底同样对测量结果产生影响本底同样对测量结果产生影响生物样品也是引进误差的常见原因：例：对于能量较低生物样品也是引进误差的常见原因：例：对于能量较低的的125I来说，管壁的自吸收现象来说，管壁的自吸收现象精选ppt14 一般的离心机只通过转速来表示工作状态，而忽略了一般的离心机只通过转速来表示工作

5、状态，而忽略了半径对离心力的影响，因此建议将每分钟转速转换为半径对离心力的影响，因此建议将每分钟转速转换为相对离心力，其公式为：相对离心力，其公式为：RCF=0.00001118RN2 温度同样会对离心产生影响温度同样会对离心产生影响 一般控制在一般控制在40C为宜为宜精选ppt15 使用混匀器的目的是使参加反应的试剂能够充使用混匀器的目的是使参加反应的试剂能够充分的混匀，应加注意的是防止将溶液溅出管外分的混匀，应加注意的是防止将溶液溅出管外造成损失，引起误差造成损失，引起误差精选ppt16质量控制样品：实际工作中只利用标准曲线而不用质量质量控制样品：实际工作中只利用标准曲线而不用质量控制样品

6、的现象并不少见，这样会使样品测定值发生控制样品的现象并不少见，这样会使样品测定值发生变化而难以觉察变化而难以觉察其它试剂：例如体外分析常用双蒸馏水或去离子水及缓其它试剂：例如体外分析常用双蒸馏水或去离子水及缓冲液，其质量是否合格？冲液，其质量是否合格？精选ppt17由于体外放射分析是微量由于体外放射分析是微量操作技术，所以所使用的操作技术，所以所使用的移液枪除应校准其容量外，移液枪除应校准其容量外，还应观察其气密程度；而还应观察其气密程度；而操作中更应注意其正确的操作中更应注意其正确的排液方式及是否存在气泡排液方式及是否存在气泡的影响的影响精选ppt18标准品：不同的试剂盒对标准品的组装方案不

7、同，标准品：不同的试剂盒对标准品的组装方案不同，应认真区分并尽量取样准确，例，类固醇激素应认真区分并尽量取样准确，例，类固醇激素只能用选定的稀释液来稀释只能用选定的稀释液来稀释标记物：随时间延长，应考虑到放射元素的脱标标记物：随时间延长，应考虑到放射元素的脱标和物理衰变的影响，而放射性浓度较高则可能和物理衰变的影响，而放射性浓度较高则可能因因“衰变损伤衰变损伤”导致配体分子免疫活性下降导致配体分子免疫活性下降精选ppt19结合剂：保存不当是使结合剂质量下降的主要原因，因结合剂：保存不当是使结合剂质量下降的主要原因，因此此“不能反复冻融；一旦稀释，一次性使用不能反复冻融；一旦稀释，一次性使用”分

8、离剂：足量以供在一定时期内连续使用，如需更换，分离剂：足量以供在一定时期内连续使用，如需更换，必须鉴定，因即使是同一厂家同一批次其性能也可有必须鉴定，因即使是同一厂家同一批次其性能也可有所差别所差别精选ppt20生物样品的采集应注意以下几点：生物样品的采集应注意以下几点：体位：例：对血浆肾素活性测定的影响体位：例：对血浆肾素活性测定的影响 饮食：例：对基础胰岛素水平的影响饮食：例：对基础胰岛素水平的影响 时间：例：昼夜对对皮质醇和时间：例：昼夜对对皮质醇和ACTH的影响的影响 机体状态：例：应激对皮质醇和机体状态：例：应激对皮质醇和ACTH的影响的影响 性别性别.年龄年龄.月经周期：例：对性激

9、素水平的影响月经周期：例：对性激素水平的影响 药物：例：氢氯塞嗪对血清醛固酮的影响药物：例：氢氯塞嗪对血清醛固酮的影响精选ppt21生物样品的制备生物样品的制备:目的目的:适于检测方法的需要而同时保存适于检测方法的需要而同时保存 分析物在在生物样品中的本来面目而不出现可分析物在在生物样品中的本来面目而不出现可以影响检测结果的任何变化以影响检测结果的任何变化 例如：是否需要抗凝？用何种抗凝剂？不能例如：是否需要抗凝？用何种抗凝剂？不能马上检测是否需要离心？保存的温度如何？避马上检测是否需要离心？保存的温度如何？避免溶血！等等！免溶血！等等！精选ppt22 操作技术不熟练是产生随机误差的主要原因，

10、其中加操作技术不熟练是产生随机误差的主要原因，其中加样环节尤其重要样环节尤其重要!加样速度是否均一，移液枪的使用是加样速度是否均一，移液枪的使用是否规范？所用容器等是否清洁或受到污染？离心的时否规范？所用容器等是否清洁或受到污染？离心的时间、速度、分离剂的量、离心后至分离上清液的时间、间、速度、分离剂的量、离心后至分离上清液的时间、吸取上清液的技巧等等吸取上清液的技巧等等 精选ppt23关于标准曲线拟合方式的选择关于标准曲线拟合方式的选择:虽然其目的是最佳反映出剂量和效应虽然其目的是最佳反映出剂量和效应的关系，但目前没有任何一种拟合方式的关系，但目前没有任何一种拟合方式能最佳的满足所有的检测系

11、统，因此，能最佳的满足所有的检测系统，因此，需要去选择！需要去选择！精选ppt24Logit Y=a+blog XLogit Y=a+blog X优点：常用、计算简单、使用方便优点：常用、计算简单、使用方便缺点：有一定的偏离，特别是线性两端缺点：有一定的偏离，特别是线性两端3/23/2次方曲线回归或次方曲线回归或logit Y=a+blogX+clogit Y=a+blogX+c（logXlogX）2 2+d+d（logXlogX）3 3优点：真实性强优点：真实性强缺点：计算复杂，不易发现并舍弃坏点缺点：计算复杂，不易发现并舍弃坏点WHO WHO 推荐四参数推荐四参数logisticlogis

12、tic法法其适应性强，但计算复杂其适应性强，但计算复杂精选ppt25但目前的放射免疫分析系统自带的软件但目前的放射免疫分析系统自带的软件能够对拟合方式作出最佳的选择！能够对拟合方式作出最佳的选择！精选ppt26 单位的统一：单位的统一：最好使用国际制单位并统一最好使用国际制单位并统一起来起来正常值及正常范围正常值及正常范围:各实验室应该建立自己各实验室应该建立自己的正常值及正常范围，借用文献或以往的正常值及正常范围，借用文献或以往的数据不可取，因为抽样群体的差别和的数据不可取，因为抽样群体的差别和检测技术的不同，都可能会影响到正常检测技术的不同，都可能会影响到正常值及正常范围值及正常范围。建立

13、自己的正常值和正。建立自己的正常值和正常范围时也应注意两点：常范围时也应注意两点：1受检人群是否受检人群是否健康健康 2 受检人群样本含量大小受检人群样本含量大小精选ppt27 主要是探讨体外放射分析过程中对实验质量的主要是探讨体外放射分析过程中对实验质量的控制，它包括从采集生物样品到发出检测报告控制，它包括从采集生物样品到发出检测报告的全过程，及时发现误差，找出引起误差的原的全过程，及时发现误差，找出引起误差的原因和改正的办法，保证检测的质量，而对试剂因和改正的办法，保证检测的质量，而对试剂盒的评价是十分重要的内容盒的评价是十分重要的内容精选ppt28评价试剂盒质量的基本准则：评价试剂盒质量

14、的基本准则：精密度精密度:指同一样品在多次重复测定中所得结果的一指同一样品在多次重复测定中所得结果的一致程度，反映随机误差。反应精密度的指标有变异系致程度，反映随机误差。反应精密度的指标有变异系数数/反应误差关系反应误差关系/精密度图精密度图 准确度准确度:指测定值与真值或标示值在数量上的符合程度，指测定值与真值或标示值在数量上的符合程度，反映系统误差。常用回收率来表示反映系统误差。常用回收率来表示 特异性特异性:指不受干扰物质影响测定结果的程度，反映对指不受干扰物质影响测定结果的程度，反映对分析物测定的专一性。通过交叉反应率测定来表示分析物测定的专一性。通过交叉反应率测定来表示精选ppt29

15、灵敏度：灵敏度：指刚能与不含有标准配体的零标准管的指刚能与不含有标准配体的零标准管的测定结果在在统计学上区别开来的配体的最低测定结果在在统计学上区别开来的配体的最低浓度。一般采用最低可探测浓度来表示浓度。一般采用最低可探测浓度来表示有效性：又称健全性，指试剂盒能够达到实验的有效性：又称健全性，指试剂盒能够达到实验的某一具体目标的有效程度，因此应有其正常值某一具体目标的有效程度，因此应有其正常值和正常范围，正常与异常之间有良好的界限。和正常范围，正常与异常之间有良好的界限。健全性实验对于评价检测结果不可或缺健全性实验对于评价检测结果不可或缺精选ppt30 稳定性：稳定性：指试剂盒在合理的保存条件

16、下，在指试剂盒在合理的保存条件下，在规定的时间内能保持其全部原有性能不变的能规定的时间内能保持其全部原有性能不变的能力，常用的质量指标有零标准试管结合率力，常用的质量指标有零标准试管结合率（B0%）/非特异结合率（非特异结合率（NSB%）/经直线化经直线化后的标准曲线的截距后的标准曲线的截距/斜率斜率/及相关系数或者有及相关系数或者有效剂量浓度（效剂量浓度（ED75/ED50/ED25）/质控样品的质控样品的质控图表等质控图表等精选ppt31 但在日常的常规工作中，每测一批样品但在日常的常规工作中，每测一批样品要进行如此众多的质量指标的计算，实要进行如此众多的质量指标的计算，实际上是难以做到的

17、！为此，需要拟订能际上是难以做到的！为此，需要拟订能够在日常工作中完成的够在日常工作中完成的/又能反应检测质又能反应检测质量的方案，这种方案分为两种类型：实量的方案，这种方案分为两种类型：实验室批内监测和实验室批间监测验室批内监测和实验室批间监测精选ppt32推荐以下十项指标：推荐以下十项指标：零标准管结合率（零标准管结合率（B0%）非特异性结合率（非特异性结合率（NSB%）反应误差关系（反应误差关系（RER）精选ppt33当标准曲线应用双对数转换并经线性回归获得当标准曲线应用双对数转换并经线性回归获得方程方程Y=a+bX时，选用截距（时，选用截距（a），斜率（），斜率（b），），相关系数（相

18、关系数（r）及有效剂量浓度值）及有效剂量浓度值50（ED50）等四个指标，以反应标准曲线的质量等四个指标，以反应标准曲线的质量应用质量控制样品测得值求出标准差及偏差值；应用质量控制样品测得值求出标准差及偏差值；精密度图在允许的变异系数限度下（如精密度图在允许的变异系数限度下（如10%），），所包括的标准剂量浓度点数所包括的标准剂量浓度点数精选ppt34 批间监测的基础是每批检测的质量，着重是观批间监测的基础是每批检测的质量，着重是观察检测的稳定性，并从相关指标的分析中，及察检测的稳定性，并从相关指标的分析中，及时发现发生误差的原因，并提供消除的方法，时发现发生误差的原因，并提供消除的方法，以保

19、证检测的质量。进行批间监测的主要形式以保证检测的质量。进行批间监测的主要形式是制备各种质量控制图或表，以了解其稳定性是制备各种质量控制图或表，以了解其稳定性及变化趋势及变化趋势精选ppt35 工作中还应注意以下几点工作中还应注意以下几点:对于检测结果应密切结合临床对于检测结果应密切结合临床,必要时积极与临床科室必要时积极与临床科室 联系联系,指导其正确采集及送检各种标本指导其正确采集及送检各种标本 不任意更换试剂盒不任意更换试剂盒 测定结果必须由有经验的主治医师或主管技师复核后签测定结果必须由有经验的主治医师或主管技师复核后签发发 多项指标联合测定时多项指标联合测定时,如有矛盾者应及时复查后发

20、报告如有矛盾者应及时复查后发报告 对异常结果及特殊病例要及时与临床医生沟通对异常结果及特殊病例要及时与临床医生沟通一一二二三三四四精选ppt36 即室间质控即室间质控:对各实验室之间测定结果对各实验室之间测定结果按统一评价方案及方法比较分析按统一评价方案及方法比较分析,必须建必须建立在严格的内部质量控制的基础上立在严格的内部质量控制的基础上 组织单位组织单位:各省临床检验中心各省临床检验中心,卫生部临床卫生部临床检验中心检验中心精选ppt37我国于我国于1982年部临检中心成立时开始在全国范围内开年部临检中心成立时开始在全国范围内开展临床检验室间质量评价活动展临床检验室间质量评价活动卫医发卫医

21、发200673号卫生部关于印发号卫生部关于印发的通知和卫医发号的通知和卫医发号卫生部关于印发卫生部关于印发的通的通知均要求临床实验室参加室间质量评价活动知均要求临床实验室参加室间质量评价活动室间质量评价是临床实验室全面质量管理的重要组成室间质量评价是临床实验室全面质量管理的重要组成部分部分,也是医院管理年督导的重要内容之一也是医院管理年督导的重要内容之一精选ppt38室间质量评价可用于室间质量评价可用于 确定某个实验室进行检测或测量的能力确定某个实验室进行检测或测量的能力,以及监控以及监控实验室的持续能力实验室的持续能力 识别实验室中的问题并制定相应的补救措施识别实验室中的问题并制定相应的补救

22、措施 确定新的检测和测量方法的有效性和可比性确定新的检测和测量方法的有效性和可比性,并对并对这些方法进行相应的监控这些方法进行相应的监控 增加实验用户的信心增加实验用户的信心 识别实验室间的差异识别实验室间的差异精选ppt39精选ppt40 临床常用近临床常用近 200 种种 肿瘤相关抗原的测定：肿瘤相关抗原的测定：AFP、CEA、CA199、CA-125、CA153、CA724、CYFRA211、PSA 等等 激素的测定：下丘脑激素的测定：下丘脑-垂体垂体-甲状腺轴激素，下丘甲状腺轴激素，下丘脑脑-垂体垂体-性腺轴激素，下丘脑性腺轴激素，下丘脑-垂体垂体-肾上腺皮质轴激素，肾上腺皮质轴激素，

23、胃肠道激素，心血管激素，甲状旁腺素与降钙素，生胃肠道激素，心血管激素，甲状旁腺素与降钙素，生长激素等长激素等 非激素蛋白质的测定：铁蛋白、各种尿微量蛋非激素蛋白质的测定：铁蛋白、各种尿微量蛋白、铜蓝蛋白、肌红蛋白、血栓素、白、铜蓝蛋白、肌红蛋白、血栓素、III 型前胶原肽、型前胶原肽、层黏蛋白等层黏蛋白等 精选ppt41 （4）酶的测定：前列腺酸性磷酸酶、）酶的测定：前列腺酸性磷酸酶、SOD、NSE 等等 （5）药物及维生素的测定：地高辛、叶酸、）药物及维生素的测定：地高辛、叶酸、VitB12 等等 （6）免疫分子的测定：各种）免疫分子的测定：各种 Ig、抗、抗 DNA、IL、CD、CIC （7）病原学研究：现已基本淘汰，但细菌代谢产物的）病原学研究：现已基本淘汰，但细菌代谢产物的测定仍有一定的价值测定仍有一定的价值 （8）其它：甘胆酸、透明质酸等）其它：甘胆酸、透明质酸等精选ppt42