14章棒状杆菌检验课件.ppt

1、种类 白喉棒状杆菌（C.diphtheriae）假白喉棒状杆菌（C.pseudodiphtheriticum）干燥棒状杆菌（C.xerosis）化脓棒状杆菌（C.pyogenes）溃疡棒状杆菌（C.ulcerans）假结核棒状杆菌（C.pseudotuberculosis）溶血棒状杆菌（C.haemolyticum）J-K 群棒状杆菌（C.jeikeium-CDC group JK）第14章 棒状杆菌属?致病物质 1、白喉外毒素?毒力强?抗原性强?编码外毒素的tox基因-棒状杆菌噬菌体 一、临床意义 第一节 白喉棒状杆菌 C.diphtheriae 作用机制：作用机制：-影响蛋白质的合成 作用

2、特点：?作用于多种细胞，心肌、神经细胞均有毒素受体?肿瘤细胞对此毒素敏感 2、索状因子 细菌表面的一种糖脂，能破坏细胞的线粒体，影响细胞的呼吸与磷酸化 3、K抗原?细胞壁外面的一种不耐热糖蛋白?抗吞噬?有利于细菌在黏膜表面的定植?所致疾病所致疾病 白喉（急性呼吸道传染病）传染源：患者及带菌者 传播途径：飞沫或污染的物品 临床表现：?局部炎症：炎性渗出，坏死，纤维蛋白 假膜窒息?全身中毒症状?外周N-N炎：膈肌麻痹-呼吸困难 声带麻痹-声音嘶哑 咽肌麻痹-吞咽困难?心肌-心肌炎 白喉假膜白喉假膜?感染后机体可获得牢固的免疫力?机体还可通过其它方式获得免疫力：?六月以下婴儿-母亲?成人-隐性感染、

3、人工主动免疫?易感者：?24岁儿童?成人-也有可能?免疫性：免疫性：二、生物学特性二、生物学特性 形态与染色:?G+细长微弯的杆菌?一端或两端膨大呈棒状?常排列呈V、L、X等文字形?异染颗粒形态上的鉴别特征?无荚膜、无芽胞、无鞭毛 白喉棒状杆菌异染颗粒 1000 培养特性?营养要求高?吕氏(Loeffler)血清斜面或鸡蛋斜面：?形成灰白色、湿润、有光泽的光滑型菌苔/菌落 BAP中菌落 BAP（血琼脂平板）（血琼脂平板）?菌落灰白色、光滑型，直径12mm、有狭窄溶血环（轻型）?多次传代后菌体变为球形 亚碲酸钾BAP（选择鉴别培养基）?黑色菌落鉴别依据?根据菌落特征及生化反应特点可将本菌分为：重

4、型、中间型、轻型?不同菌型还原能力不同，呈现黑色或灰黑色菌落 白喉棒状杆菌 在亚碲酸钾BAP中菌落 三、微生物学检验三、微生物学检验 检验程序 见图14-3 标本采集 分泌物，取双份 直接涂片染色镜检：?23张涂片革兰染色、异染颗粒染色 镜检初报“直接涂片检出形似白喉杆菌”早期诊断?用无菌棉拭子浸以动物血清，采集标本，3710h，涂片染色镜检提高阳性率 分离培养与鉴定分离培养与鉴定 1、分离培养、分离培养?吕氏血清斜面：吕氏血清斜面：37、812h 涂片染色镜检涂片染色镜检-检出率要比直接涂片高，有助于快速诊断检出率要比直接涂片高，有助于快速诊断?亚碲酸钾亚碲酸钾BAP：37、2448h，黑色

5、菌落，黑色菌落?BAP：轻型有轻型有溶血环，应注意与溶血环，应注意与溶血性链球菌溶血性链球菌鉴鉴别别 2、鉴定?形态染色、菌落特点、生化反应?糖发酵试验、尿素酶、硝酸盐还原 鉴别棒状杆菌属不同的种 3、毒力试验（鉴定致病菌株的重要依据）、毒力试验（鉴定致病菌株的重要依据）?体外法：?琼脂平板毒力试验（Elek平板毒力测定）?SPA协同凝集试验?对流电泳?体内法：用豚鼠作毒素-抗毒素中和试验 对流免疫电泳 琼脂平板毒力试验-Elek平板 白喉抗毒素 待测菌 白喉抗毒素 标准产毒株 阴性菌(-)待测菌(+)待测菌(-)（五）免疫力测定 1、锡克试验（Schick test）白喉外毒素皮内试验?调查人群在感染或预防接种后对白喉是否产生免疫力?根据外毒素与抗毒素中和的原理，以少量白喉外毒素测定机体有无相应抗毒素?缺点观察时间长、操作繁琐，不易进行广泛测试 2、致敏红细胞凝集试验、致敏红细胞凝集试验?测定血清中抗毒素水平?0.1ml血清，倍比稀释+外毒素致敏红细胞，37、1h后观察结果?敏感度可达10-4单位，简便快速