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类型遗传重组之同源重组课件.ppt

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    关 键  词:
    遗传 重组 同源 课件
    资源描述:

    1、哈工大哈工大-遗传学遗传学第八章第八章 遗传重组遗传重组上一章主要内容回顾上一章主要内容回顾几个主要的概念:几个主要的概念:转化转化 转导转导 普遍性转导普遍性转导 局限性转导局限性转导 流产转导流产转导几个主要的知识点:几个主要的知识点:转化时重组率的计算转化时重组率的计算 转导时基因顺序的判断转导时基因顺序的判断哈工大哈工大-遗传学遗传学第八章第八章 遗传重组遗传重组第八章第八章 遗传重组遗传重组哈工大哈工大-遗传学遗传学第八章第八章 遗传重组遗传重组生物生物遗传重组遗传重组遗传遗传变异变异DNA重排重排DNA突变突变DNA 的复制的复制DNA 的修复的修复同源重组同源重组位点专一性重组位

    2、点专一性重组异常重组异常重组哈工大哈工大-遗传学遗传学第八章第八章 遗传重组遗传重组第一节第一节 同源重组同源重组哈工大哈工大-遗传学遗传学第八章第八章 遗传重组遗传重组同源重组:依赖大范围的同源重组:依赖大范围的DNADNA同源序列的联会同源序列的联会,重组过,重组过程中,两个染色体或程中,两个染色体或DNADNA分子交换对等的部分。分子交换对等的部分。例:例:同源染色体非姐妹单体交换;同源染色体非姐妹单体交换;细菌的转化、转导、接合;细菌的转化、转导、接合;噬菌体的重组噬菌体的重组一、概念一、概念条件:条件:2个个DNA分子序列同源;分子序列同源;不同物种同源重组所需的最小的同源序列不同;

    3、不同物种同源重组所需的最小的同源序列不同;哈工大哈工大-遗传学遗传学第八章第八章 遗传重组遗传重组(c mi)噬菌体噬菌体1 13C和和14N 重链重链 (+)噬菌体噬菌体2 12C和和14N 轻链轻链 同时感染同时感染E.coli子代噬菌体子代噬菌体CsCl密度梯度离心密度梯度离心重链重链重链重链+轻链轻链轻链轻链二、同源重组的分子机制二、同源重组的分子机制(一一)、异源、异源DNADNA双链断裂与重双链断裂与重(错错)接接 证据:证据:1961,M.Meselson and J.J.Wergle哈工大哈工大-遗传学遗传学第八章第八章 遗传重组遗传重组 c mi 轻亲代 +重亲代 c +图

    4、23-4 轻、重标记噬菌体的重组实验 535353353535哈工大哈工大-遗传学遗传学第八章第八章 遗传重组遗传重组交叉理论(交叉理论(chiasmatatype hypothesis)1909年,年,Janssens提出;提出;断裂和重接模型断裂和重接模型 1937年,年,Darlington提出;提出;模板选择学说(模板选择学说(copy choice)Belling J.首先提出,首先提出,1933年又撤回;年又撤回;1948年,年,Hershey再次提出;再次提出;Holliday模型模型 1964年年Robin Holliday提出;提出;(二二)、同源重组的、同源重组的Holli

    5、day模型模型哈工大哈工大-遗传学遗传学第八章第八章 遗传重组遗传重组 1 2.断裂重接模型 3.4.1 2.模板选择复制 模型 3.4.图 23-3 断裂重接模型和模板选择复制模型的比较 哈工大哈工大-遗传学遗传学第八章第八章 遗传重组遗传重组断裂重接模型和模板选择复制模型存在的问题断裂重接模型和模板选择复制模型存在的问题断裂重接模型:断裂重接模型:不能解释基因转变和极化子现象;不能解释基因转变和极化子现象;模板选择复制模型:模板选择复制模型:(1)违背了半保留复制;违背了半保留复制;(2)DNA复制在复制在S期,重组在偶线期,不应同时发生;期,重组在偶线期,不应同时发生;(3)不能解释不能

    6、解释3线和线和4线交换;线交换;哈工大哈工大-遗传学遗传学第八章第八章 遗传重组遗传重组交叉理论(交叉理论(chiasmatatype hypothesis)1909年,年,Janssens提出;提出;断裂和重接模型断裂和重接模型 1937年,年,Darlington提出;提出;模板选择学说(模板选择学说(copy choice)Belling J.首先提出,首先提出,1933年又撤回;年又撤回;1948年,年,Hershey再次提出;再次提出;霍利迪霍利迪(Holliday)模型模型 1964年年Robin Holliday提出;提出;(二二)、同源重组的、同源重组的Holliday模型模型

    7、1.同源的非姐妹染色单体联会同源的非姐妹染色单体联会;2.DNA内切酶在非姐妹染色单内切酶在非姐妹染色单体的相同位置同时切开两个体的相同位置同时切开两个方向相同的一条单链;方向相同的一条单链;3.切开的单链交换重接切开的单链交换重接;4.形成交联桥结构;形成交联桥结构;5.分支迁移:形成一大段异源分支迁移:形成一大段异源双链双链DNA(Holliday结构结构)6.绕交联桥旋转绕交联桥旋转1800,形成,形成Holliday异构体;异构体;7.切开与重接:切开与重接:左右切,形成非重组体左右切,形成非重组体 上下切,形成重组体。上下切,形成重组体。12345 67旋转旋转1800 无论无论 H

    8、olliday 结构断裂是否导致旁侧遗传标结构断裂是否导致旁侧遗传标记的重组,它们都含有一个记的重组,它们都含有一个异源双链区异源双链区。哈工大哈工大-遗传学遗传学第八章第八章 遗传重组遗传重组 (1)5 A B 3 (8)A 3 5 B3 55 a b 3 两臂旋转 联会 (2)5 A B 3 b 3 5 a3 55 a b 3 (9)A 酶切 B (3)5 A B 33 5 b 3 5 a5 a b 3 游离端移动联会 (4)5 A B 3 (10)A A 3 5 B B 3 55 a b 3 游离端交叉连接 b b(5)5 A B 3 a a3 53 5 (11)A B A b5 a b

    9、 3 形成单链交叉 a b a B(6)5 A B 33 5 3 5 A B A b 5 a b 3 分支点移动(7)A a b a B B a b 图 238 Holiday 重组模型。哈工大哈工大-遗传学遗传学第八章第八章 遗传重组遗传重组支持支持Holliday遗传重组模型的证据:遗传重组模型的证据:1、形态学上,、形态学上,Holliday中间体中间体(Chi 结构结构)的电镜照片;的电镜照片;哈工大哈工大-遗传学遗传学第八章第八章 遗传重组遗传重组 两个环状两个环状DNA分子配对、断裂、重接形成分子配对、断裂、重接形成“8”字字型结构中间物,根据切割的位置不同,可分别形成两型结构中间

    10、物,根据切割的位置不同,可分别形成两个亲本环、大的单体环或者是滚环结构,个亲本环、大的单体环或者是滚环结构,也可以形成也可以形成“”结构。结构。Holliday模型同样适用于环状模型同样适用于环状DNA间的重组间的重组哈工大哈工大-遗传学遗传学第八章第八章 遗传重组遗传重组哈工大哈工大-遗传学遗传学第八章第八章 遗传重组遗传重组支持支持Holliday遗传重组模型的证据:遗传重组模型的证据:1、形态学上,、形态学上,Holliday中间体中间体(Chi 结构结构)的电镜照片;的电镜照片;2、异源双链形成时,产生碱基错配导致与重组相关联、异源双链形成时,产生碱基错配导致与重组相关联 的的基因转变

    11、基因转变的发生;的发生;哈工大哈工大-遗传学遗传学第八章第八章 遗传重组遗传重组1、异常分离与基因转变、异常分离与基因转变 粗糙脉孢菌:粗糙脉孢菌:pdxp:酸度敏感的酸度敏感的VB6依赖型依赖型 pdx:酸度不敏感的酸度不敏感的VB6依赖型依赖型(三三)、基因转变及其分子机理、基因转变及其分子机理AaAaAAaaAAaaAAAAaaaa减数分裂减数分裂I减数分裂减数分裂II有丝分裂有丝分裂第一次分裂分离第一次分裂分离(MI)模式模式AAAAaaaaaaaa AAAAAaaA减数分裂减数分裂I减数分裂减数分裂II有丝分裂有丝分裂第二次分裂分离第二次分裂分离(MII)模式模式AaAaAaaAAA

    12、aAaaaAAAaaAAaaaaAAa aAAaaAAAAaa AAaaaaAAAAAAaaaaaaaa AAAAMIMII哈工大哈工大-遗传学遗传学第八章第八章 遗传重组遗传重组哈工大哈工大-遗传学遗传学第八章第八章 遗传重组遗传重组哈工大哈工大-遗传学遗传学第八章第八章 遗传重组遗传重组1、异常分离与基因转变、异常分离与基因转变 粗糙脉孢菌:粗糙脉孢菌:pdxp:酸度敏感的酸度敏感的VB6依赖型依赖型 pdx:酸度不敏感的酸度不敏感的VB6依赖型依赖型(三三)、基因转变及其分子机理、基因转变及其分子机理哈工大哈工大-遗传学遗传学第八章第八章 遗传重组遗传重组 +pdxp pdx +孢子对孢

    13、子对子囊子囊1 +pdxppdx +pdx +2 +pdx +pdxp +pdxp3 +pdxp +pdx +4pdx +pdxp pdx +pdx +585个子囊中个子囊中?-+-+-+-+-+-+-+-+-+-+-+-+-+-+-基因转变基因转变(gene conversion):一个基因转变为它的等位基一个基因转变为它的等位基因的遗传学现象(源于基因内重组)。因的遗传学现象(源于基因内重组)。粪生粪壳菌粪生粪壳菌(Olive):g+g-+-+-6:2(或或 2:6)+-+-5:3(或或 3:5)+-+-3:1:1:3+-+?-+?-半染色单体转变半染色单体转变染色单体转变染色单体转变12

    14、0/200000 100/200000 16/200000哈工大哈工大-遗传学遗传学第八章第八章 遗传重组遗传重组(1).染色单体转变染色单体转变:(chromatid conversion)6:2/2:6 分离分离(2).半染色单体转变半染色单体转变:(half-chromatid conversion)5:3/3:5 3:1:1:3哈工大哈工大-遗传学遗传学第八章第八章 遗传重组遗传重组在在5:3和和6:2分离的子囊中,约有分离的子囊中,约有30%也在也在g基因两侧基因两侧 发生重组;发生重组;发生基因转变的子囊中,基因转变和遗传重组都发生发生基因转变的子囊中,基因转变和遗传重组都发生 于

    15、同样的两个染色单体上的子囊的比例高达于同样的两个染色单体上的子囊的比例高达90%;2 2、基因转变的分子机制、基因转变的分子机制基因转变的实质:基因转变的实质:重组过程中留下的重组过程中留下的局部异源双局部异源双链区链区,在细胞内的修复系统识别下不同的修复产,在细胞内的修复系统识别下不同的修复产生的结果;生的结果;哈工大哈工大-遗传学遗传学第八章第八章 遗传重组遗传重组哈工大哈工大-遗传学遗传学第八章第八章 遗传重组遗传重组哈工大哈工大-遗传学遗传学第八章第八章 遗传重组遗传重组 Holliday 模型中,由于重组而产生的异源双链区存在模型中,由于重组而产生的异源双链区存在不配对碱基,可被细胞

    16、内的修复系统能够识别并以一条链不配对碱基,可被细胞内的修复系统能够识别并以一条链为模板进行切除修复:为模板进行切除修复:(1).两个杂种分子均未得到校正,两个杂种分子均未得到校正,有丝分裂后分离形成有丝分裂后分离形成4:4或或 3:1:1:3的异常孢子分离比,属于半染色单体转变;的异常孢子分离比,属于半染色单体转变;(2).一个杂种分子得到校正,另一条未校正,一个杂种分子得到校正,另一条未校正,有丝分裂后有丝分裂后分离形成分离形成 5:3 或或 3:5 的分离比,属于半染色单体转变;的分离比,属于半染色单体转变;(3).两个杂种分子都被校正到同一种类型,两个杂种分子都被校正到同一种类型,有丝分

    17、裂后分有丝分裂后分离形成离形成 6:2或或2:6 的分离比,属于染色单体转变;的分离比,属于染色单体转变;(4).两个杂种分子都被校正到不同类型,两个杂种分子都被校正到不同类型,有丝分裂后分离有丝分裂后分离形成形成 4:4 分离比,未出现基因转变;分离比,未出现基因转变;哈工大哈工大-遗传学遗传学第八章第八章 遗传重组遗传重组 Holliday 模型中为对称的杂合双链,而实际情况有模型中为对称的杂合双链,而实际情况有不均等分离现象,不均等分离现象,1975年年Meselson-Radding 提出模型解提出模型解释这种不对称重组现象;释这种不对称重组现象;(四四)、同源重组的、同源重组的Mes

    18、elson Radding 模型模型哈工大哈工大-遗传学遗传学第八章第八章 遗传重组遗传重组+/+/g+/g g/g+g+gg+g+gg修复校正修复校正:若一个杂种分子若一个杂种分子被校正为野生型被校正为野生型(突变型突变型),另一个,另一个未被校正未被校正+g+gg+g gg三型子囊三型子囊四型子囊四型子囊Meselson-Radding 模型模型困难困难哈工大哈工大-遗传学遗传学第八章第八章 遗传重组遗传重组负干涉:负干涉:两个邻近基因,或者是同一基因不同突变点间,两个邻近基因,或者是同一基因不同突变点间,双交换的频率比预期高,并发系数双交换的频率比预期高,并发系数C1,即一个区域,即一个

    19、区域的交换引起邻近区域交换的增加;的交换引起邻近区域交换的增加;局部负干涉:局部负干涉:有些噬菌体、细菌或真菌的某些局部位点有些噬菌体、细菌或真菌的某些局部位点明显的出现负干涉的现象;明显的出现负干涉的现象;(五五)基因转变与高度负干涉基因转变与高度负干涉基因转变时的高度负干涉:基因转变时的高度负干涉:伴随重组的基因转换常常能伴随重组的基因转换常常能模仿双交换的结果,仿佛是一次交换增加了附近基因交模仿双交换的结果,仿佛是一次交换增加了附近基因交换的几率;换的几率;哈工大哈工大-遗传学遗传学第八章第八章 遗传重组遗传重组共转变:共转变:子囊中几个相近位点同时发生转换的现象;子囊中几个相近位点同时

    20、发生转换的现象;m1 +m1 +m1 +m1 +m1 +m1 +m2 +m2 +m2 m1 +m2 +m2 +m2 +m2 +m2未转变未转变单转变单转变共转变共转变共转变共转变哈工大哈工大-遗传学遗传学第八章第八章 遗传重组遗传重组极化子:极化子:距离单链断裂点的位置距离单链断裂点的位置越近越容易发生基因越近越容易发生基因转变转变,越远越不易发生转变,由此,越远越不易发生转变,由此基因转变频率由高基因转变频率由高到低到低形成一个梯度,形成一个梯度,染色体上呈现基因转变极化现象染色体上呈现基因转变极化现象的区域称为极化子的区域称为极化子;m3m2m1m4m5转变频率转变频率单链断裂点单链断裂点

    21、哈工大哈工大-遗传学遗传学第八章第八章 遗传重组遗传重组(一一)、细菌同源重组的特点、细菌同源重组的特点 发生在环状双链发生在环状双链DNA分子与一个双链或单链分子与一个双链或单链DNA 分子之间;分子之间;转化:转化:单链单链 双链双链 接合:接合:双链双链 双链双链 转导:转导:双链双链 双链双链三、细菌的同源重组三、细菌的同源重组哈工大哈工大-遗传学遗传学第八章第八章 遗传重组遗传重组存在存在8个碱基组成的重组热点个碱基组成的重组热点(Chi位点位点)E.coli 5-10Kb:chi 位点位点 5 GCTGGTGG 3 3 CGACCACC 5需要几种重要的蛋白质:需要几种重要的蛋白质

    22、:RecBCD复合体:复合体:具有具有核酸酶,解旋酶核酸酶,解旋酶和和ATPase活性,在活性,在 Chi位点位点产生单链产生单链 3游离未端;游离未端;RecA:促进促进DNA单链的同化,即单链的同化,即促进单链与同源双链分子促进单链与同源双链分子发生链的交换发生链的交换;RuvAB复合体:复合体:促进促进分支迁移分支迁移;RuvC:核酸内切酶,核酸内切酶,切开重组中间体切开重组中间体(Holliday连接体连接体);RecBCD 结合在双链断裂处 chi B C D 5 3 RecBCD 解链并作为外切酶降解 DNA chi RecBCD 停留在 chi 处,内切酶切开单链 RecD 在

    23、chi 顺序解离 RecBC 继续作为解链酶 图 23-15 RecBCD 核酸酶从一侧接近 chi 顺序,当它前进 时降解 DNA。在 chi 位点它作为内切酶剪切单链,释放 RecD,仅保留了解链酶活性。(二二)、细菌同源重组的机制、细菌同源重组的机制-接合和转导接合和转导(双链和双链双链和双链)哈工大哈工大-遗传学遗传学第八章第八章 遗传重组遗传重组1).RecA蛋白与单链蛋白与单链DNA结结 合,形成合,形成螺旋状纤丝螺旋状纤丝;2).螺旋状纤丝螺旋状纤丝与同源双链与同源双链DNA结合;结合;3).螺旋状纤丝螺旋状纤丝中的单链中的单链(入入侵单链侵单链)与双链中的互补链配与双链中的互补

    24、链配对,同源链被置换出来;对,同源链被置换出来;RecA蛋白介导的蛋白介导的DNA链交换模型链交换模型哈工大哈工大-遗传学遗传学第八章第八章 遗传重组遗传重组游离的游离的3单链末端单链末端单链侵入并置换单链侵入并置换形成形成Holliday连接体连接体哈工大哈工大-遗传学遗传学第八章第八章 遗传重组遗传重组Ruv AB复合物结合于复合物结合于Holliday连接体连接体哈工大哈工大-遗传学遗传学第八章第八章 遗传重组遗传重组哈工大哈工大-遗传学遗传学第八章第八章 遗传重组遗传重组Ruv C 蛋白切开蛋白切开Holliday连接体连接体置换延伸置换延伸 (recA)内切酶内切酶(recBCD)D

    25、NA侵扰侵扰(recA)内切酶内切酶(recBCD)DNA 连接酶连接酶5 3 5 3 5 3 5 3 5 3 5 3 5 3 5 3 5 3 3 5 5 3 3 5 3 5 5 3 3 3 5 3 5 3 3 5 5 3 5 3 5 3 Holiday中间体中间体5 3 5 3 5 3 5 3 分支迁移分支迁移(Ruv AB)5 3 5 3 5 3 5 3 5 3 5 5 5 3 3 3 5 5 5 5 3 3 3 3 5 5 5 5 3 3 3 3 5 5 5 5 3 3 3 3 5 5 5 5 3 3 3 3 内切酶内切酶(RuvC)内切酶内切酶(RuvC)DNA连接酶连接酶 DNA连接

    26、酶连接酶上下切上下切左右切左右切哈工大哈工大-遗传学遗传学第八章第八章 遗传重组遗传重组实质:单链实质:单链DNA片段与双链环状片段与双链环状DNA之间的重组之间的重组(三三)、细菌的重组机制、细菌的重组机制-转化转化(单链和双链单链和双链)哈工大哈工大-遗传学遗传学第八章第八章 遗传重组遗传重组 切除外源切除外源DNA无重组无重组 切除受体切除受体DNA发生重组发生重组 无修复作用无修复作用 子代细胞出现两种基因型(受体基因型子代细胞出现两种基因型(受体基因型 和重组体基因型)和重组体基因型)通常采用有利于重组体基因型生长的选择条件通常采用有利于重组体基因型生长的选择条件(四四)、细菌修复系

    27、统对异源双链区的校正:、细菌修复系统对异源双链区的校正:哈工大哈工大-遗传学遗传学第八章第八章 遗传重组遗传重组 高效率标记高效率标记(high-efficiency maker):在转化中,有些遗传在转化中,有些遗传标记或是很少发生校正作用,或是校正切除几乎总是在受标记或是很少发生校正作用,或是校正切除几乎总是在受体体DNA上,因此转化频率较高,这类遗传标记称为上,因此转化频率较高,这类遗传标记称为。低效率标记低效率标记(low-efficiency maker):转化中一些标记的校转化中一些标记的校正切除总是倾向于发生在供体单链上,因而出现很低的转正切除总是倾向于发生在供体单链上,因而出现

    28、很低的转化频率,这类标记称为化频率,这类标记称为。哈工大哈工大-遗传学遗传学第八章第八章 遗传重组遗传重组(一一)、噬菌体的整合和切除噬菌体的整合和切除1、整合和切除的分子基础、整合和切除的分子基础O:15bp(核心核心);富含;富含A-TP:-160 bp 0P:0 80bp 噬菌体噬菌体attP(POP)O:15bp(核心核心);富含;富含A-TB:-11 bp 0B:0 11bp 大肠杆菌大肠杆菌attB(BOB)共共240bp共共23bp参与的酶:整合酶参与的酶:整合酶(Int)、整合宿主因子、整合宿主因子(IHF)和切除酶和切除酶四、四、噬菌体与噬菌体与E.coliE.coli的重组

    29、的重组哈工大哈工大-遗传学遗传学第八章第八章 遗传重组遗传重组 140 120 100 80 60 40 20 20 40 60 80 IntIHF CAGC TTTTTT TTTATACTAAGTTGGTCGAAAAAA AAATATGATTCAAC Int 整合位点整合位点 Int整合位点整合位点Int、IHF 和和 Xis在在 attP 上的结合位点上的结合位点IHFXisXisIHFIntInt-160 核心区核心区0 PPO哈工大哈工大-遗传学遗传学第八章第八章 遗传重组遗传重组噬菌体编码噬菌体编码宿主编码宿主编码噬菌体编码噬菌体编码 噬菌体噬菌体 P O P 包装包装 感染宿主感染

    30、宿主 P O P B O B Int Int IHF IHF Xis B O P P O B 噬菌体的整合和切离噬菌体的整合和切离galbiogalbioattB:23bpattP:240bp噬菌体整噬菌体整合的方式:合的方式:断裂、重接断裂、重接哈工大哈工大-遗传学遗传学第八章第八章 遗传重组遗传重组35、功与失每个人都有一不的理想,这种理想决定着他的努力判断的方向。就在这个意义上,我从来不把安逸和享乐看做是生活目的的本身功与失每个人都有一不的理想,这种理想决定着他的努力判断的方向。就在这个意义上,我从来不把安逸和享乐看做是生活目的的本身-这种基础,我叫它猪栏的理想。照亮我的道路,并且不断地

    31、给我新的勇气去愉快地正视生活的理想,是善、美、真。这种基础,我叫它猪栏的理想。照亮我的道路,并且不断地给我新的勇气去愉快地正视生活的理想,是善、美、真。-爱因斯坦(美国)无论何时,不管怎样,我也绝不允许自己有一点灰心丧气。爱因斯坦(美国)无论何时,不管怎样,我也绝不允许自己有一点灰心丧气。-爱迪生(美国)爱迪生(美国)对我来说,信念意味着不担心。对我来说,信念意味着不担心。-杜威(美国)杜威(美国)希望贯穿一切,临死也不会抛弃我们。希望贯穿一切,临死也不会抛弃我们。-波普(美国)波普(美国)希望永远在人的胸膛汹涌。人要经常感觉不是现在幸福,而是就要幸福了。希望永远在人的胸膛汹涌。人要经常感觉不

    32、是现在幸福,而是就要幸福了。-波普(美国)波普(美国)毫无理想而又优柔寡断是一种可悲的心理。毫无理想而又优柔寡断是一种可悲的心理。-培根(英国败的岭,可以用这五个字来表达培根(英国败的岭,可以用这五个字来表达-我没有时间。我没有时间。-富兰克林(美国)富兰克林(美国)马云语:今天很残酷,明天更残酷,后天会很美好,但绝大多数人都死在明天晚上。马云语:今天很残酷,明天更残酷,后天会很美好,但绝大多数人都死在明天晚上。马云语:今天很残酷,明天更残酷,后天会很美好,但绝大多数人都死在明天晚上。马云语:今天很残酷,明天更残酷,后天会很美好,但绝大多数人都死在明天晚上。想要有空余时间,就不要浪费时间。想要

    33、有空余时间,就不要浪费时间。-富兰克林(美国)富兰克林(美国)忽视当前一刹那的人,等于虚掷了他所有的一切。忽视当前一刹那的人,等于虚掷了他所有的一切。-富兰克林(美国)富兰克林(美国)时间不可空过,惟用之于有益的工作;一切无益的行动,应该完全制止。时间不可空过,惟用之于有益的工作;一切无益的行动,应该完全制止。-富兰克林(美国)富兰克林(美国)如果说时间是最宝贵的东西,那么浪费时间就是最大的挥霍如果说时间是最宝贵的东西,那么浪费时间就是最大的挥霍你热爱生命吗?那么别浪费时间,也别和不值得交往的人来往你热爱生命吗?那么别浪费时间,也别和不值得交往的人来往.陈帅佛语陈帅佛语懒鬼起来吧!别再浪费时间

    34、,将来在坟墓内有足够的时间让你睡的。懒鬼起来吧!别再浪费时间,将来在坟墓内有足够的时间让你睡的。-富兰克林(美国)富兰克林(美国)人生太短暂了,事情是这样的多,能不兼程而进吗?人生太短暂了,事情是这样的多,能不兼程而进吗?-爱迪生(美国)真正的敏捷是一件很有价值的事。因为时间是衡量事业的标准,一如金钱是衡量货物的标准;所在在做事爱迪生(美国)真正的敏捷是一件很有价值的事。因为时间是衡量事业的标准,一如金钱是衡量货物的标准;所在在做事我有两个忠实的助手,企业在市场竞争中输赢的关键在于其核心竞争力的强弱,而实现核心竞争力更新的惟一途径就是创新。一项权威的调查显示:与缺乏创新的企业相比,成功创新的企

    35、业能获得20甚至更高的成长率;如果企业80的收入来自新产品开发并坚持下去,五年內市值就能增加一倍;全球83的高级经理人深信,自己企业今后的发展将更依赖创新。23、不创新,就灭亡福特公司创始人亨利?福特24、可持续竞争的惟一优势来自于超过竞争对手的创新能力著名管理顾问詹姆斯?莫尔斯25、创新是做大公司的惟一之路管理大师杰弗里26、顾客是重要的创新来源管理学家汤姆?彼得斯27、创新是惟一的出路,淘汰自己,否则竞争将淘汰我们英特尔公司总裁安迪?格罗夫28、创造性模仿不是人云亦云,而是超越和再创造哈佛大学教授西奥多?莱维特29、创新就是创造一种资源管理大师彼得?杜拉克第五章管理就是沟通、沟通再沟通P6

    36、9松下幸之助关于管理有句名言:“企业管理过去是沟通,现在是沟通,未来还是沟通。”管理离不开沟通,沟通已渗透于管理的各个方面。正如人体内的血液循环一样,如果没有沟通的话,企业就会趋于死亡。30、管理就是沟通、沟通再沟通通用电器公司总裁杰克?韦尔奇31、沟通是管理的浓缩沃尔玛公司总裁萨姆?沃尔顿32、管理者的最基本能力:有效沟通英国管理学家L?威尔德33、不善于倾听不同的声音,是管理者最大的疏忽美国女企业家玛丽?凯34、企业管理过去是沟通,现在是沟通,未来还是沟通日本经营之神松下幸之助第六章管理就是决策P81美国著名管理学家赫伯特?西蒙指出:“决策是管理的心脏,管理是由一系列决策组成的,管理就是决

    37、策。”35、管理就是决策美国著名管理学家赫伯特?西蒙36、世界上每100家破产倒闭的大企业中,85%是因为企业管理者的决策不慎造成的世界著名的咨询公司美国兰德公司37、正确的决策来自众人的智慧美国社会学家T?戴伊38、一个成功的决策,等于90%的信息加上10%的直觉美国企业家S?M?沃尔森39、犹豫不决固然可以免去一些做错事的可能,但也失去了成功的机会美籍华裔企业家王安博士40、在没出现不同意见之前,不做出任何决策美国通用汽车公司总裁艾尔弗雷德?斯隆41、不要把所有的鸡蛋放在同一个篮子里美国经济学家托宾42、一次良好的撤退,应和一次伟大的胜利一样受到奖赏瑞士军事理论家菲米尼43、抓住时机并快速

    38、决策是现代企业成功的关键美斯坦大学教授艾森哈特44、决不能在没有选择的情况下,作出重大决策美国克莱斯勒汽车公司总裁李?艾柯卡45、如果有一个项目,首先要考虑有没有人来做。如果没有人做,就要放弃,这是一个必要条件。联想集团总裁柳传志第七章爱你的员工吧,他会百倍地爱你的企业P109法国企业界有一句名言:“爱你的员工吧,他会百倍地爱你的企业。”这一管理学的新观念,已经越来越深入人心,而且被越来越多的企业管理者所接受。实践使他们懂得,没有什么比关心员工、热爱员工更能调动他们的积极性、提高工作效率了。46、爱你的员工吧,他会百倍地爱你的企业法国企业界名言47、管理是一种严肃的爱美国国际农机商用公司董事长

    39、西洛斯?梅考克48、以爱为凝聚力的公司比靠畏惧维系的公司要稳固得多美国西南航空公司总裁赫伯?凯莱赫49、感情投资是在所有投资中,花费最少,回报率最高的投资一个是我的耐心,另一个就是我的双手。法蒙田36、无论什么时候,不管遇到什么情况,我绝不允许自己有一点点灰心丧气。爱迪生37、下苦功,三个字,一个叫下,一个叫苦,一个叫功,一定要振作精神,下苦功。毛泽东38、向着某一天终于要达到的那个终极目标迈步还不够,还要把每一步骤看成目标,使它作为步骤而起作用。歌德39、学而时习之,不亦说乎?孔子论语学而40、要从容地着手去做一件事,但一旦开始,就要坚持到底。比阿斯41、要在这个世界上获得成功,就必须坚持到底:至死都不能放手。伏尔泰42、一个人只要强烈地坚持不懈地追求,他就能达到目的。司汤达43、一个人做事,在动手之前,当然要详慎考虑;但是计划或方针已定之后,就要认定目标前进,不可再有迟疑不决的态度,这就是坚毅的态度。邹韬奋44、一日一钱,十日十钱。绳锯木断,水滴石穿。班固45、有罪是符合人性的,但长期坚持不改就是魔鬼乔叟46、欲速而不达。孔丘论语47、只要持之以恒,知识丰富了,终能发现其奥秘。杨振宁48、只要功夫深,铁杵磨成针。中国谚语49、只有毅力才会使我们成功,而毅力的来源又在于毫不动摇,坚决采取为达到成功所需要的手段。俄车尔尼雪夫斯基

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