遗传实验课总结课件.ppt
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- 遗传 实验 总结 课件
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1、有丝分裂有丝分裂材料:黑麦根尖。材料:黑麦根尖。1 1)材料的准备和取材)材料的准备和取材选取黑麦种子浸泡于水中,使种子吸胀选取黑麦种子浸泡于水中,使种子吸胀(浸泡时间视不同浸泡时间视不同作物而异作物而异)。然后将吸胀的种子捞出,放在垫有滤纸的培养皿中。然后将吸胀的种子捞出,放在垫有滤纸的培养皿中。再将培养皿置于再将培养皿置于2525度条件下(温箱)发芽。度条件下(温箱)发芽。待根长约待根长约1 1时此时大量细胞进行分裂时剪根时此时大量细胞进行分裂时剪根(一般以上午一般以上午10:30-11:3010:30-11:30为宜为宜)。2 2)预处理:)预处理:a a:目的:目的:为了有利于对有丝分
2、裂中染色体的观察和计数,在固定之前为了有利于对有丝分裂中染色体的观察和计数,在固定之前应用理化因素进行预处理,这样可以改变细胞质的粘度,抑应用理化因素进行预处理,这样可以改变细胞质的粘度,抑制或破坏纺锤丝的形成,促使染色体缩短和分散等。制或破坏纺锤丝的形成,促使染色体缩短和分散等。b b:预处理方法:预处理方法:低温预处理:低温预处理:剪取黑麦根尖放入盛有蒸馏水的指形管中,再剪取黑麦根尖放入盛有蒸馏水的指形管中,再将指形管置于冰水共存的冰瓶中,将冰瓶置将指形管置于冰水共存的冰瓶中,将冰瓶置0-30-3度冰箱处理度冰箱处理2424小时。染色体数较多的材料可适当延长处理时间。小时。染色体数较多的材
3、料可适当延长处理时间。)固定:)固定:a:目的:采用各种渗透力强的固定液将植物的组目的:采用各种渗透力强的固定液将植物的组织、细胞迅速杀死,使蛋白质沉淀并尽量保持其原织、细胞迅速杀死,使蛋白质沉淀并尽量保持其原有状态。有状态。b:固定液的配制:固定液的配制:Carnoy s固定液固定液:冰醋酸:纯酒精冰醋酸:纯酒精1:3固定时间:固定时间:24hr4 4)解离、染色)解离、染色解离解离:酸解法;用清水冲洗根尖几次,将根放入:酸解法;用清水冲洗根尖几次,将根放入1mol/L1mol/L盐酸溶盐酸溶液中。解离是为了使胞间连丝离解掉,使细胞分散,便于压片。液中。解离是为了使胞间连丝离解掉,使细胞分散
4、,便于压片。染色染色:染液:醋酸洋红染液:醋酸洋红将根取出后,用清水冲洗几次,冲掉残留在组织间地酸。用醋酸将根取出后,用清水冲洗几次,冲掉残留在组织间地酸。用醋酸洋红染色。洋红染色。5 5)制片)制片取一条根置于载玻片上,切取根尖分生组织约,大小取一条根置于载玻片上,切取根尖分生组织约,大小2-32-3段段加加一滴醋酸洋红一滴醋酸洋红盖上盖玻片盖上盖玻片用挑针尖轻敲根尖材料成雾状用挑针尖轻敲根尖材料成雾状用用拇指轻压材料拇指轻压材料镜检镜检减数分裂减数分裂偶线期偶线期:同源染色体相互纵向靠拢配对,称为:同源染色体相互纵向靠拢配对,称为联会联会。这样联会的一对同源染色体,称为这样联会的一对同源染
5、色体,称为二价体二价体。偶线期所。偶线期所表现的这一特征时间很短,一般较难观察到。表现的这一特征时间很短,一般较难观察到。粗线期:粗线期:配对后的染色体逐渐缩短变粗,含有两条配对后的染色体逐渐缩短变粗,含有两条姐妹染色单体,这样一个二价体中就包含了四条染色姐妹染色单体,这样一个二价体中就包含了四条染色单体,故又称为四合体。在此期间各同源染色体的非单体,故又称为四合体。在此期间各同源染色体的非姐妹染色单体间可能发生片段姐妹染色单体间可能发生片段交换交换。中期中期:核仁和核膜消失,所有二价体排列在赤:核仁和核膜消失,所有二价体排列在赤道板两侧,细胞质里出现纺锤体,每个二价体的道板两侧,细胞质里出现
6、纺锤体,每个二价体的两条染色体的着丝点分别趋向纺锤体的两极,两条染色体的着丝点分别趋向纺锤体的两极,此此时最适于计数染色体的数目和观察各染色体的形时最适于计数染色体的数目和观察各染色体的形态特征。态特征。第一次减数分裂后期完成染色体数目的减半。第一次减数分裂后期完成染色体数目的减半。二分体二分体:减数分裂末期:减数分裂末期I I出现,一个细胞分出现,一个细胞分裂形成两个染色体数目减半的子细胞。裂形成两个染色体数目减半的子细胞。四分体四分体:减数分裂:减数分裂IIII末期形成,最终形成末期形成,最终形成四个配子。四个配子。1.取材及固定取材及固定:取材的时间及材料大小必须十分恰当,才能获得更多的
7、花取材的时间及材料大小必须十分恰当,才能获得更多的花粉母细胞分裂相,以供观察。粉母细胞分裂相,以供观察。蚕豆:蚕豆现蕾后,于上午蚕豆:蚕豆现蕾后,于上午810时(视气温而定,但必时(视气温而定,但必须在上午须在上午11时前)摘取茎顶有效花序,将周围小叶与苞叶时前)摘取茎顶有效花序,将周围小叶与苞叶去掉,将花苞放入卡诺固定液中。去掉,将花苞放入卡诺固定液中。减数分裂减数分裂2.2.染色制片:染色制片:取出经固定的花苞,至于吸水纸上,吸去保取出经固定的花苞,至于吸水纸上,吸去保存液或固定液,移至载玻片上,剥出花药。存液或固定液,移至载玻片上,剥出花药。用解剖针截断花药。轻轻挤压,使花粉母细用解剖针
8、截断花药。轻轻挤压,使花粉母细胞在切口处散出。滴一小滴醋酸洋红染色液。胞在切口处散出。滴一小滴醋酸洋红染色液。用镊子把药壁夹碎用镊子把药壁夹碎将细胞壁残渣除去将细胞壁残渣除去静置染色静置染色5 510mim10mim再盖上盖玻片再盖上盖玻片后后用挑针背部或铅笔橡皮头处轻敲用挑针背部或铅笔橡皮头处轻敲用拇指用拇指压片压片镜检镜检果蝇唾腺染色体的观察果蝇唾腺染色体的观察 双翅目昆虫的幼虫期都具有很大的唾腺细双翅目昆虫的幼虫期都具有很大的唾腺细胞。胞。因为这些细胞发育到一定阶段后就不再进因为这些细胞发育到一定阶段后就不再进行有丝分裂,停止在间期。但是染色质还行有丝分裂,停止在间期。但是染色质还是不断
9、地复制,形成约是不断地复制,形成约1000400010004000拷贝的拷贝的染色质丝,比普通的有丝分裂中期的染色染色质丝,比普通的有丝分裂中期的染色体大得多,称为多线染色体和巨大染色体。体大得多,称为多线染色体和巨大染色体。巨大,是多线染色体;巨大,是多线染色体;正常:间期正常:间期DNADNA复制复制 两条染色单体两条染色单体 着丝点裂开着丝点裂开 子染色体子染色体 核分裂核分裂 胞质分裂胞质分裂 果蝇:有丝分裂停止在分裂间期,果蝇:有丝分裂停止在分裂间期,DNADNA不断自我复制,着丝点不裂开不断自我复制,着丝点不裂开 同源染色体紧密配对:同源染色体紧密配对:体细胞联会体细胞联会,所以染
10、色体只呈现单倍,所以染色体只呈现单倍数;数;形成染色中心,从染色体中心处伸出形成染色中心,从染色体中心处伸出5 5条长臂,条长臂,1 1条短臂;条短臂;染色后,出现一系列宽窄不同、染色深浅不一的横纹。染色后,出现一系列宽窄不同、染色深浅不一的横纹。这些横纹的数目、位置、宽窄及排列顺序都具有种的特异性。一旦染色这些横纹的数目、位置、宽窄及排列顺序都具有种的特异性。一旦染色体上发生了缺失,重复,倒位,易位等,也可较容易地在唾腺染色体上体上发生了缺失,重复,倒位,易位等,也可较容易地在唾腺染色体上观察识别出来。观察识别出来。可见唾腺染色体技术是遗传学研究中一项基本的技术。可见唾腺染色体技术是遗传学研
11、究中一项基本的技术。果蝇唾腺染色体特点:果蝇唾腺染色体特点:1 1、幼虫选取、幼虫选取果蝇的三龄幼虫活体果蝇的三龄幼虫活体当幼虫爬上瓶壁准备当幼虫爬上瓶壁准备化蛹前,即为三龄幼化蛹前,即为三龄幼虫。虫。肥大、行动迟缓。肥大、行动迟缓。一龄幼虫两龄幼虫三龄幼虫 取三龄幼虫,取三龄幼虫,置于载玻片上,并滴加一滴生理盐水,置于载玻片上,并滴加一滴生理盐水,观察幼虫结构:具一钝尾和带黑色口器的尖头端观察幼虫结构:具一钝尾和带黑色口器的尖头端 2 2、腺体剖取:、腺体剖取:n取两支解剖针,一针压住幼虫身体的近头端取两支解剖针,一针压住幼虫身体的近头端1/31/3处,固定幼处,固定幼 虫,另一针压住幼虫头
12、部,压点尽可能靠头部口器处。虫,另一针压住幼虫头部,压点尽可能靠头部口器处。n将解剖针平稳前移,使头部与身体拉开,口器部分断开,将解剖针平稳前移,使头部与身体拉开,口器部分断开,体内各器官从切口挤出,一对唾腺也随之而出体内各器官从切口挤出,一对唾腺也随之而出。唾腺脂肪体解剖针解剖针解剖针解剖针3 染色:用染色:用1%1%醋酸洋红染色醋酸洋红染色101020min20min。4 4 压片:用铅笔轻轻敲盖片几下,然后用拇指压片。压片:用铅笔轻轻敲盖片几下,然后用拇指压片。5 5 镜检:先在低倍镜下找到染色体分散良好的图像,镜检:先在低倍镜下找到染色体分散良好的图像,再在高倍镜下仔细观察唾腺染色体的
13、特征。再在高倍镜下仔细观察唾腺染色体的特征。果蝇的杂交试验果蝇的杂交试验果蝇作为遗传学研究的材料的优点生活史的观察 图3-1 果蝇生活史 1卵 2一龄幼虫 3二龄幼虫 4三龄幼虫 5蛹 6成虫(雄)7成虫(雌)雌雄果蝇的比较:雌雄果蝇的比较:1 1体型体型 雌果蝇体型较大,雄果蝇较小;雌果蝇体型较大,雄果蝇较小;2 2腹部末端腹部末端 雌性腹部椭圆,末端稍尖,雄性末端钝雌性腹部椭圆,末端稍尖,雄性末端钝圆;圆;3 3腹部背面腹部背面 雌性有明显雌性有明显5 5条黑色条纹,雄性有三条,条黑色条纹,雄性有三条,前两条细,后一条宽,延至腹面,肉眼看其腹部末端呈前两条细,后一条宽,延至腹面,肉眼看其腹
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