黄酮类化合物总结优质课件.pptx

1、第一节第一节 概概 述述 n 黄酮类化合物广泛分布于植物界中，而且生理活性黄酮类化合物广泛分布于植物界中，而且生理活性多种多样，引起了国内外的广泛重视，研究进展很快。多种多样，引起了国内外的广泛重视，研究进展很快。仅截止到仅截止到19741974年为止，国内外已发表的黄酮类化合物年为止，国内外已发表的黄酮类化合物共共16741674个（主要是天然黄酮类，也有少部分为合成品，个（主要是天然黄酮类，也有少部分为合成品，其中苷元其中苷元902902个，苷个，苷722722个），并以黄酮醇类最为常见，个），并以黄酮醇类最为常见，约占总数的三分之一，其次为黄酮类，占总数的四分约占总数的三分之一，其次为黄

2、酮类，占总数的四分之一以上，其余则较少见。至于双黄酮类多局限分布之一以上，其余则较少见。至于双黄酮类多局限分布于裸子植物，尤其松柏纲，银杏纲和凤尾纲等植物中。于裸子植物，尤其松柏纲，银杏纲和凤尾纲等植物中。至至19801980年，黄酮类化合物总数已达到年，黄酮类化合物总数已达到27212721个。个。含义 1.1.经典的概念：指基本母核为经典的概念：指基本母核为2-2-苯基色原酮苯基色原酮（2-2-phenylchromonephenylchromone）的一系列化合物。的一系列化合物。由于该类化合物大多呈淡黄色或黄色，且分子中多具酮基，因此称为黄酮。2.2.现在黄酮类化合物是泛指两个苯环（现

3、在黄酮类化合物是泛指两个苯环（A A与与B B环）通过三个碳原子相互联结而成的一系列化合环）通过三个碳原子相互联结而成的一系列化合物。物。即具有C6-C3-C6结构的一类化合物的总称。其基本其基本碳架碳架:OO12345678OO12345678123456OO12345678123456色原酮2苯基色原酮C6C3C6 根据根据中央三碳链的氧化程度中央三碳链的氧化程度 B-环联接位置环联接位置（2-或或3-位）位）三碳链是否构成环状等特点，可将重三碳链是否构成环状等特点，可将重要的天然黄酮类化合物分类如下所示。要的天然黄酮类化合物分类如下所示。名称名称 三碳链部分结构三碳链部分结构 黄酮类黄酮

4、类 (flavones)黄酮醇黄酮醇(flavonol)OOOHOO一、分类 二氢黄酮类二氢黄酮类 二氢黄酮醇类二氢黄酮醇类 黄烷黄烷-3-3-醇类醇类 黄烷黄烷-3,4-3,4-二醇类二醇类 OOOOOHOOHOHOOH 异黄酮类异黄酮类 二氢异黄酮类二氢异黄酮类 查耳酮类查耳酮类 OOOOOOH 二氢查耳酮类二氢查耳酮类 橙酮类（噢橙酮类（噢 哢类）哢类）OHOOOCH 双苯吡酮类双苯吡酮类(酮类酮类)OOO高异黄酮类高异黄酮类分类分类黄酮黄酮醇异黄酮查耳酮黄烷3-醇类花色素类橙酮类异橙酮二氢黄酮二氢黄酮醇二氢异黄酮二氢查耳酮黄烷3、4-二醇类 酮（双苯吡酮）高异黄酮类氧化型还原型二二、生

5、物合成途径、生物合成途径 莽草酸途径和乙酸莽草酸途径和乙酸-丙二酸（复合）途丙二酸（复合）途径，由一个桂皮酰辅酶径，由一个桂皮酰辅酶A A和三个丙二酰辅酶和三个丙二酰辅酶A A在查耳酮合成酶的作用下生成查耳酮。生在查耳酮合成酶的作用下生成查耳酮。生成的查尔酮，再经过异构化酶的作用形成成的查尔酮，再经过异构化酶的作用形成二氢黄酮。二氢黄酮在各种酶的作用下，二氢黄酮。二氢黄酮在各种酶的作用下，经转化而得到其它类型黄酮类化合物经转化而得到其它类型黄酮类化合物 。祥。祥图见教材第二章。图见教材第二章。三、主要的生理活性三、主要的生理活性1.1.对心血管的作用，如葛根总黄酮及葛根素对心血管的作用，如葛根

6、总黄酮及葛根素(puerarin)puerarin)、银杏叶总黄酮等具有扩张冠状血管作银杏叶总黄酮等具有扩张冠状血管作用用 。芦丁（。芦丁（rutinrutin）、）、橙皮苷（橙皮苷（hesperidinhesperidin）、）、d-d-儿茶素（儿茶素（d-catechind-catechin）等具有降低毛细血管脆性和等具有降低毛细血管脆性和异常通透性作用，可用作毛细血管性出血的止血药异常通透性作用，可用作毛细血管性出血的止血药及治疗高血压、动脉硬化的辅助药及治疗高血压、动脉硬化的辅助药 。2.2.抗菌、抗病毒作用，如黄芩苷，木犀草素苷等。抗菌、抗病毒作用，如黄芩苷，木犀草素苷等。3.3.止

7、咳祛痰作用，如杜鹃素、甘草素和甘草苷等。止咳祛痰作用，如杜鹃素、甘草素和甘草苷等。单糖类：D-glc、D-gal、D-xyl、L-rha、L-ara 双糖类：槐糖、龙胆二糖、芸香糖、新橙皮糖三糖类：龙胆三糖、槐三糖酰化糖类：2-乙酰基葡萄糖、咖啡酰基葡萄 糖另外：除O-苷外还有C-苷四、组成黄酮苷的糖四、组成黄酮苷的糖五、分布及自然界存在形式五、分布及自然界存在形式 1.1.黄酮类化合物类型多样，分布广泛，最集中分黄酮类化合物类型多样，分布广泛，最集中分布于被子植物中。如黄酮类以唇形科、玄参科、爵麻科、布于被子植物中。如黄酮类以唇形科、玄参科、爵麻科、苦苣苔科、菊科等植物中存在较多；黄酮醇类较

8、广泛分苦苣苔科、菊科等植物中存在较多；黄酮醇类较广泛分布于双子叶植物；二氢黄酮类特别在蔷薇科、芸香科、布于双子叶植物；二氢黄酮类特别在蔷薇科、芸香科、豆科、杜鹃花科、菊科、姜科中分布较多；二氢黄酮醇豆科、杜鹃花科、菊科、姜科中分布较多；二氢黄酮醇类较普遍地存在于豆科植物中；异黄酮类以豆科蝶形花类较普遍地存在于豆科植物中；异黄酮类以豆科蝶形花亚科和鸢尾科植物中存在较多。在裸子植物中也有存在，亚科和鸢尾科植物中存在较多。在裸子植物中也有存在，如双黄酮类多存在松柏纲、银杏纲和凤尾纲等植物中。如双黄酮类多存在松柏纲、银杏纲和凤尾纲等植物中。2.2.黄酮类化合物在植物体内大部分以与糖结合成苷黄酮类化合物

9、在植物体内大部分以与糖结合成苷的形式存在，一部分以游离形式存在。的形式存在，一部分以游离形式存在。第二节、典型黄酮类化合物的结构第二节、典型黄酮类化合物的结构1.1.黄酮类：黄酮类：黄酮类即以黄酮类即以2-2-苯基色原酮为基本母核，苯基色原酮为基本母核，且且3 3位上无含氧基团取代的一类化合物。位上无含氧基团取代的一类化合物。典型化合物：典型化合物：芹菜素芹菜素 木犀草素木犀草素 黄芩苷黄芩苷OOABC1234567823465 芹菜素（5，7，4-三OH黄酮）木犀草素（5，7，3，4-四OH黄酮）黄芩素(5，6，7-三OH黄酮)黄酮黄酮2.2.黄酮醇类：黄酮醇类：黄酮醇类的结构特点是在黄酮基

10、本母核黄酮醇类的结构特点是在黄酮基本母核的的3 3位上连有羟基或其他含氧基团。位上连有羟基或其他含氧基团。典型化合物：典型化合物：山柰酚山柰酚 槲皮素槲皮素 芦芦 丁丁 杨梅素杨梅素 加入诊断试剂 醋酸钠/硼酸：邻二酚羟基络和 相应吸收峰红移酸性强弱顺序依次为：7，4-二OH 7-或4-OH 一般酚OH 5-OH。异黄酮类母核为3-苯基色原酮的结构，即B环连接在C环的3位上。交叉共轭 分子间排列不紧密，水分子易于进入莽草酸途径和乙酸-丙二酸（复合）途径，由一个桂皮酰辅酶A和三个丙二酰辅酶A在查耳酮合成酶的作用下生成查耳酮。仅红移1720 nm 示除5-OH外，尚有6-含氧取代H-：6.Gibb

11、s反应呈阳性；H-：6.引入羟基，数目多，7、4-位，水溶度较大。1H-NMR在黄酮结构研究中的应用95(1H,s),8.3聚酰胺柱色谱用于分离黄酮类化合物（苷、苷元）的原理、方法及洗脱规律。黄酮醇类基本裂解途径（以途径-II为主）NaOAc/H3BO3 268,302(sh),338带I不变，无邻-二-OH与二氢黄酮关系：甲醇钠：强碱，所有酚羟基解离黄酮醇3-O-葡萄糖苷5.（一）黄酮类化合物骨架类型的判断查耳酮类的结构特点是二氢黄酮C环的1、2位键断裂生成的开环衍生物，即三碳链不构成环。n黄酮醇黄酮醇23OOOH 山柰酚（5，7，4-三OH黄酮醇）槲皮素（5，7，3，4-四OH黄酮醇）杨梅

12、素（5，7，3，4，5-五OH黄酮醇）3.3.二氢黄酮类：二氢黄酮类：二氢黄酮类结构可视为是黄酮二氢黄酮类结构可视为是黄酮基本母核的基本母核的2 2、3 3位双键被氢化而成位双键被氢化而成。典型化合物：典型化合物：橙皮素橙皮素 橙皮苷橙皮苷 甘草素甘草素 甘草苷甘草苷 23OO橙皮苷（5，7，3-三OH，4-OCH3二氢黄酮）甘草苷（甘草素-7-O-glu苷）甘草素（7，4 二OH二氢黄酮）二氢黄二氢黄酮酮4.4.二氢黄酮醇类：二氢黄酮醇类：二氢黄酮醇类具有黄酮醇类的、位二氢黄酮醇类具有黄酮醇类的、位被氢化的基本母核，且常与相应的黄酮醇共被氢化的基本母核，且常与相应的黄酮醇共存于同一植物体中。

13、存于同一植物体中。典型化合物：典型化合物：二氢槲皮素二氢槲皮素 二氢桑色素二氢桑色素 23OOOH 二氢黄酮醇二氢黄酮醇二氢槲皮素（5，7，3，4-四OH二氢黄酮醇）二氢桑色素（5，7，2，4-四OH二氢黄酮醇）5.5.异黄酮类：异黄酮类：异黄酮类母核为异黄酮类母核为3-3-苯基色原酮的苯基色原酮的结构，即结构，即B B环连接在环连接在C C环的环的3 3位上。位上。典型化合物：典型化合物：大豆素、大豆苷大豆素、大豆苷、大豆素大豆素-7-7，4-4-二二葡萄糖苷葡萄糖苷、葛根素和葛根素木糖苷葛根素和葛根素木糖苷 23OO 大豆素（大豆素（7，4-二二OHOH异黄酮异黄酮）大豆苷（大豆素大豆苷（

14、大豆素-7-O-glc苷）苷）葛根素（葛根素（7，4-二二OHOH，8-8-glc异黄酮异黄酮苷）苷）异黄酮异黄酮6.6.二氢异黄酮类：二氢异黄酮类：二氢异黄酮类具有异黄酮的二氢异黄酮类具有异黄酮的2 2、3 3位被氧化的基本母核。位被氧化的基本母核。典型化合物：典型化合物：紫檀素紫檀素 三叶豆紫檀苷三叶豆紫檀苷 高丽槐素高丽槐素 鱼藤酮鱼藤酮 23OO紫檀素紫檀素鱼藤酮鱼藤酮二氢异黄酮二氢异黄酮7.7.查尔酮类：查尔酮类：查耳酮类的结构特点是二氢黄酮查耳酮类的结构特点是二氢黄酮C C环的环的1 1、2 2位位键断裂生成的开环衍生物，即三碳链不构成环。键断裂生成的开环衍生物，即三碳链不构成环。

15、与二氢黄酮关系：与二氢黄酮关系：典型化合物：典型化合物：红花苷红花苷单糖类：D-glc、D-gal、D-xyl、L-rha、L-ara 旋光性NaOAc/H3BO3 266300(sh)3535(1H,d,J=2.异黄酮 带II红移1014nm 示有5-OH仅红移1720 nm 示除5-OH外，尚有6-含氧取代C环上的氢（二氢黄酮）Gibbs反应阴性酚羟基对位无活泼H所有黄酮苷（糖）游离黄酮深红 紫红1mol/L NH4OH），含盐水溶液(0.1分子离子峰为基峰 用于测定分子量。羟基甲基化或苷化后，原酚羟基的供电能力下降，引起相应的吸收峰紫移。黄酮类化合物多为晶状固体，少数（如黄酮苷类）为无定

16、形粉末。二氢查耳酮类 橙酮类（噢 哢类）A、B-环取代情况确定取代基 诊断试剂 位移规律 归 属与二氢黄酮关系：2345623465OOHOOHOHOHOHOglc红花苷红花苷查耳酮查耳酮8.8.二氢查尔酮类：二氢查尔酮类：二氢查耳酮类为查耳酮二氢查耳酮类为查耳酮，位双键氢位双键氢化而成。此种类型在植物界分布极少，如蔷化而成。此种类型在植物界分布极少，如蔷薇科梨属植物根皮和苹果种仁中含有的梨根薇科梨属植物根皮和苹果种仁中含有的梨根苷（苷（phloridzinphloridzin）。）。典型化合物：典型化合物：梨根苷梨根苷 OOHOO HO HOHOglc梨根苷梨根苷二氢查耳酮二氢查耳酮34OO

17、CH256723456OOHOHOHOHOHOH+34OOH+飞燕草苷元橙酮橙酮花色素花色素硫磺菊素（6，3，4-三OH橙酮）OOH3OOHOHOHOHHHOH （+）儿茶素）儿茶素OOHOH34OOHOHOHOHOHOHOH 无色飞燕草素无色飞燕草素黄烷黄烷-3，4-二醇二醇黄烷黄烷3-醇醇OOOHOHOHOHglcOO异芒果素 OO 高异黄高异黄酮酮双苯吡酮双苯吡酮OOHOOOHHHCH2OHHOCHOHOHOH3 木脂素黄酮木脂素黄酮（水飞蓟素）（水飞蓟素）其它类其它类第三节 黄酮类化合物的理化性质1、性状性状 黄酮类化合物多为晶状固体，少数（如黄酮苷黄酮类化合物多为晶状固体，少数（如黄

18、酮苷类）为无定形粉末。类）为无定形粉末。旋光性旋光性 取决于取决于 不对称碳原子的有无不对称碳原子的有无 有有 无无 所有黄酮苷（糖）所有黄酮苷（糖）游离黄酮游离黄酮 游离黄酮游离黄酮 黄酮黄酮 二氢黄酮二氢黄酮 黄酮醇黄酮醇 二氢黄酮醇二氢黄酮醇 异黄酮异黄酮 二氢异黄酮二氢异黄酮 查耳酮（二氢查耳酮（二氢 ）黄烷醇类黄烷醇类 橙酮橙酮 花色素类等花色素类等 *OHOOOO2*OO2旋光性：旋光性：交叉共轭体系（电子交叉共轭体系（电子转移、重排，共轭增转移、重排，共轭增强，产生颜色的基础）强，产生颜色的基础）助色团（给系统提供助色团（给系统提供电子，使颜色加深，电子，使颜色加深，尤其尤其7，

19、4-位，辅助位，辅助作用）作用）3.颜色颜色：多为黄色多为黄色C环上的氢(查耳酮)SrCl2反应阴性无邻二酚羟基AlCl3 及AlCl3/HCl黄酮 二氢类（C-环半椅式结构）现在黄酮类化合物是泛指两个苯环（A与B环）通过三个碳原子相互联结而成的一系列化合物。IR(KBr)cm-1:3430,3200酚羟基 1660,1580 苯环二氢黄酮（醇）270295（强）(sh)2、NaOAc（熔融）:带I 红移40-65nm,强度下降少数情况下，在加水去活化后也可用于分离极性较大的化合物，如多羟基黄酮醇及其苷类等。1H-NMR(DMSO-d6):12.R为淡黄色结晶，mp260-262，HCl-Mg

20、反应红色，Molish反应为阳性，酸水解后检出有葡萄糖。8Hz)A环 H-6异黄酮（二氢）黄色二氢黄酮醇类较普遍地存在于豆科植物中；（最常用）35(1H,s)5-OH质子Rf值：苷元 苷 苷元 苷（TLC色谱鉴别）Mg-HCl反应显紫红色；68(1H,d,J=8.（一）黄酮类化合物骨架类型的判断 黄酮（灰黄黄酮（灰黄黄色）黄色）二氢黄酮二氢黄酮黄酮醇（灰黄黄酮醇（灰黄黄色）黄色）二氢黄酮醇二氢黄酮醇查耳酮（黄查耳酮（黄橙橙黄色）黄色）二氢查耳酮二氢查耳酮 二氢异黄酮二氢异黄酮 黄烷醇类黄烷醇类 异黄酮（无或微黄色）异黄酮（无或微黄色）花色素类（颜色随花色素类（颜色随pH而改变）而改变）红色（红

21、色（pH 8.8.5）OOOOOO47+交叉共轭体系交叉共轭体系 黄酮的色原酮部分无色，在黄酮的色原酮部分无色，在2-2-位上引入苯环后，位上引入苯环后，即形成交叉共轭体系，使共轭链延长，因而呈现出即形成交叉共轭体系，使共轭链延长，因而呈现出颜色。颜色。黄酮、黄酮醇及其苷类多显灰黄黄酮、黄酮醇及其苷类多显灰黄黄色，查黄色，查耳酮为黄耳酮为黄橙黄色，异黄酮类显微黄色，橙黄色，异黄酮类显微黄色，二氢黄酮、二氢黄酮、二氢黄酮醇不显色。二氢黄酮醇不显色。在上述黄酮、黄酮醇分子中，尤其在在上述黄酮、黄酮醇分子中，尤其在7-7-位及位及4 4-位引入位引入OHOH及及OCHOCH3 3等供电基后，化合物的

22、颜色加等供电基后，化合物的颜色加深，但在其它位置引入深，但在其它位置引入OHOH、OCHOCH3 3等供电基影响等供电基影响较小。较小。花色苷及其苷元的颜色随花色苷及其苷元的颜色随pH不同而改变，一般显不同而改变，一般显红色红色(pH 7)、紫色紫色(pH8.5)、蓝色蓝色(pH 8.5)等颜等颜色。色。OOOOOO+_ _ _+符合苷的溶解性规律。但水符合苷的溶解性规律。但水溶性与结构的平面性、取代基团溶性与结构的平面性、取代基团的种类和数目等有一定关系。的种类和数目等有一定关系。4.溶解性溶解性:（1）分子的立体结构 平面型分子 非平面型分子 黄酮 二氢类（C-环半椅式结构）黄酮醇 异黄酮

23、（羰基与B-环立体障碍）查耳酮 交叉共轭 分子间排列不紧密，水分子易于进入 水溶度小 水溶度大 2OOHRH R=OH 二氢黄酮醇R=H 二氢黄酮（2）取代基团的性质、数目、连接位置 引入羟基，数目多，7、4-位，水溶度较大。羟基甲基化（-OCH3）,水溶度降低。（1）三糖苷 双糖苷 单糖苷 苷元（2）3-O-糖苷 7-O-糖苷（平面性分子）（3）花色素(平面性分子,离子型)非平面性分子 平面性分子黄酮苷黄酮苷(亲水性亲水性)5酸碱性酸碱性 酸性：（1）来源：酚羟基（数目、位置）（2）酸性规律 a、7，4-OH酸性强于其他位置羟基的酸性（处于羰基对位，羰基的共轭诱导）。b、5-OH酸性最弱（处

24、于羰基邻位，形成分子内氢键）。c、酚羟基数目越多，酸性越强。酸性强弱顺序依次为：酸性强弱顺序依次为：7 7，4 4-二二OH OH 7-7-或或4 4-OHOH 一般酚一般酚OH OH 5-OH 5-OH。此性质可用此性质可用于提取、分离及鉴定工作于提取、分离及鉴定工作。7，4-OH 7或4-OH 其他位-OH 5-OH NaHCO3 +-Na2CO3 +-NaOH +应用：应用：pH梯度法分离梯度法分离OOH+Cl碱性：碱性：-吡喃酮环吡喃酮环1-氧原子氧原子 微弱碱性（孤对电子，接受质子）微弱碱性（孤对电子，接受质子）仅溶于强的、浓酸仅溶于强的、浓酸+水水 （浓硫酸）（浓硫酸）烊烊 盐（呈

25、色）盐（呈色）应用应用 初步鉴别黄酮母核类型：黄酮、黄酮醇初步鉴别黄酮母核类型：黄酮、黄酮醇 黄黄橙色，并有荧光橙色，并有荧光 二氢黄酮二氢黄酮 橙红（冷）、紫红（热）橙红（冷）、紫红（热）查耳酮查耳酮 橙红橙红洋红洋红 异黄酮（二氢）异黄酮（二氢）黄色黄色 橙酮橙酮 红红洋红洋红锆盐 枸橼酸黄酮醇（3-OH游离）358385（强）3-OH供电共轭，带1红移母核光谱特征 二氢黄酮类、异黄酮类：带 II强、带I弱 母核的推断B-H 6.5-OH（与羰基形成分子内氢键）甲基化，带I、带II均紫移515nm，二氢查耳酮类为查耳酮，位双键氢化而成。1H-NMR(DMSO-d6):12.1mol/L N

26、H4OH），含盐水溶液(0.醇或醇水不同比例。止咳祛痰作用，如杜鹃素、甘草素和甘草苷等。黄酮类化合物在植物体内大部分以与糖结合成苷的形式存在，一部分以游离形式存在。交叉共轭体系（电子转移、重排，共轭增强，产生颜色的基础）助色团（给系统提供电子，使颜色加深，尤其7，4-位，辅助作用）6-H(1H,dd,J=8.0Hz)H-2,6:6.（甲醇）查耳酮、橙酮：带 II弱、带I强2%NaOH及4%NaOH水溶液萃取，来达到分离的目的。二氢黄酮醇类 棕黄色二氢查耳酮类为查耳酮，位双键氢化而成。6显色反应显色反应（1）还原显色反应）还原显色反应反应类型反应类型 鉴别特征鉴别特征 鉴别意义鉴别意义 备注备注

27、 盐酸盐酸-镁粉镁粉 黄酮、二氢黄酮、黄酮、二氢黄酮、红红紫红紫红 黄酮类特征性黄酮类特征性 假阳性假阳性 反应反应 黄酮醇、二氢黄酮醇黄酮醇、二氢黄酮醇 红红紫红紫红 鉴别反应鉴别反应 （花色素）（花色素）（最常用）（最常用）查耳酮、橙酮、查耳酮、橙酮、（-）儿茶素类、异黄酮儿茶素类、异黄酮 （-）四氢硼钠四氢硼钠 二氢黄酮、二氢黄酮醇二氢黄酮、二氢黄酮醇 红红紫红紫红 二氢黄酮类特有二氢黄酮类特有 还原反应还原反应 其它黄酮类其它黄酮类 （-）钠汞齐反应钠汞齐反应 黄酮、二氢黄酮黄酮、二氢黄酮 红红 异黄酮、二氢异黄酮异黄酮、二氢异黄酮 红红 黄酮醇类黄酮醇类 黄黄淡红色淡红色 二氢黄酮醇

28、类二氢黄酮醇类 棕黄色棕黄色（2）与金属盐类试剂络合反应）与金属盐类试剂络合反应反应类型反应类型 鉴别特征及鉴别意义鉴别特征及鉴别意义 备备 注注 锆盐 枸橼酸 锆盐锆盐-枸橼酸枸橼酸 3-OH或或3，5-二二OH 黄色 黄色不褪 PPC(ZrOCl2)5-OH 黄色褪去 示 氨性氯化锶(SrCl2)邻二酚羟基邻二酚羟基 绿、棕乃至黑色沉淀 三氯化铁(FeCl3)酚羟基酚羟基 紫、蓝、绿三氯化铝 3-OH，4-C=O 黄色（AlCl3）5-OH，4-C=O 鲜黄色荧光 PPCTLC 邻二酚羟基邻二酚羟基 （4或7，4黄酮醇，天蓝色荧光）（3）硼酸显色反应硼酸显色反应 硼酸硼酸 5-羟基，羟基，

29、4-羰基黄酮羰基黄酮 黄色，绿色荧光（草酸液）黄色，绿色荧光（草酸液）（H3BO3）6-羟基，羟基，4-羰基查耳酮羰基查耳酮 黄色，无荧光（枸橼酸）黄色，无荧光（枸橼酸）（4）碱性试剂反应碱性试剂反应反应类型反应类型 鉴别特征及鉴别意义鉴别特征及鉴别意义 备备 注注氢氧化钠溶液氢氧化钠溶液 黄酮黄酮 黄黄 橙色橙色 查耳酮、橙酮查耳酮、橙酮 红红 紫红紫红 二氢黄酮二氢黄酮 黄黄橙色（冷）橙色（冷）深红深红 紫红紫红 （较长时间或加热）（较长时间或加热）母核类型鉴别母核类型鉴别 稀氢氧化钠稀氢氧化钠 邻三酚羟基黄酮类邻三酚羟基黄酮类 暗绿暗绿蓝绿色纤维状蓝绿色纤维状 邻三酚羟基邻三酚羟基氨蒸气

30、或碳酸钠溶液氨蒸气或碳酸钠溶液 颜色变化颜色变化 TLC、PPC五氯化锑五氯化锑(SdCl5)：查耳酮特征性显色反应查耳酮特征性显色反应(红或紫红色沉淀红或紫红色沉淀)黄酮、二氢黄酮、黄酮醇类呈橙色。黄酮、二氢黄酮、黄酮醇类呈橙色。Gibb，s反应：酚羟基对位活泼质子的特征（蓝反应：酚羟基对位活泼质子的特征（蓝 或蓝绿色）或蓝绿色）（5）与五氯化锑反应）与五氯化锑反应（6）其他显色反应）其他显色反应第四节 黄酮类化合物的提取分离（一）提取（一）提取黄酮苷类以及极性稍大的苷元（如羟基黄酮等），黄酮苷类以及极性稍大的苷元（如羟基黄酮等），一般可用丙酮、醋酸乙酯、乙醇提取。一般可用丙酮、醋酸乙酯、乙

31、醇提取。一些多糖苷类一些多糖苷类可用沸水提取可用沸水提取。在提取花青素类化合物时，可加入少在提取花青素类化合物时，可加入少量酸（量酸（0.1%盐酸，应当慎用，避免发生水解）。盐酸，应当慎用，避免发生水解）。大多数黄酮苷元宜用用氯仿、乙醚、醋酸乙酯等中大多数黄酮苷元宜用用氯仿、乙醚、醋酸乙酯等中极性溶剂提取，极性溶剂提取，而对多甲氧基黄酮类游离苷元，甚至可而对多甲氧基黄酮类游离苷元，甚至可用苯等低极性溶剂进行提取。用苯等低极性溶剂进行提取。对得到的粗提物可进行下列精制处理，常用方法有：对得到的粗提物可进行下列精制处理，常用方法有：（一）溶剂萃取法（一）溶剂萃取法 利用黄酮类化合物与混入的杂质极性

32、不同，选用不利用黄酮类化合物与混入的杂质极性不同，选用不同溶剂进行地萃取可达到精制纯化目的。同溶剂进行地萃取可达到精制纯化目的。例如植物例如植物叶子的醇浸液，可用石油醚处理，以便除去叶绿素、叶子的醇浸液，可用石油醚处理，以便除去叶绿素、胡萝卜素等脂溶性色素。胡萝卜素等脂溶性色素。而某些药料水溶液则可加而某些药料水溶液则可加入多倍量浓醇，以沉淀除去蛋白质、多糖类等水溶入多倍量浓醇，以沉淀除去蛋白质、多糖类等水溶性杂质。性杂质。有时溶剂萃取过程也可以用逆流分配法连续进行。常有时溶剂萃取过程也可以用逆流分配法连续进行。常用的溶剂系统有：水用的溶剂系统有：水-醋酸乙酯，正丁醇醋酸乙酯，正丁醇-石油醚等

33、。石油醚等。溶剂萃取过程在除去杂质的同时，往往还可以收到分溶剂萃取过程在除去杂质的同时，往往还可以收到分离苷和苷元或极性苷元与非极性苷元的效果离苷和苷元或极性苷元与非极性苷元的效果。（二）碱提取酸沉淀法（二）碱提取酸沉淀法 黄酮苷类虽有一定极性，可溶于水，但却难溶于酸性黄酮苷类虽有一定极性，可溶于水，但却难溶于酸性水，易溶于碱性水，故可用碱性水提取，再于碱水提水，易溶于碱性水，故可用碱性水提取，再于碱水提取液中加入酸，黄酮苷类即可沉淀析出。此法简便易取液中加入酸，黄酮苷类即可沉淀析出。此法简便易行，如芦丁、橙皮苷、黄芩苷的提取都应用了这个方行，如芦丁、橙皮苷、黄芩苷的提取都应用了这个方法。法。

34、n在用碱酸法进行提取纯化时，应当注意所用碱液浓在用碱酸法进行提取纯化时，应当注意所用碱液浓度不宜过高，以免在强碱性下，尤其加热进破坏黄度不宜过高，以免在强碱性下，尤其加热进破坏黄酮母核。在加酸酸化时，酸性也不宜过强，以免生酮母核。在加酸酸化时，酸性也不宜过强，以免生成（金羊）盐，致使析出的黄酮类化合物又重新溶成（金羊）盐，致使析出的黄酮类化合物又重新溶解，降低产品收率。解，降低产品收率。n 当药料中含有大量果胶、粘液等不溶性杂质时，如当药料中含有大量果胶、粘液等不溶性杂质时，如花、果类药材，宜用花、果类药材，宜用石灰乳或石灰水石灰乳或石灰水代替其它碱代替其它碱性水溶液进行提取，以使上述含羟基的

35、杂质生成钙性水溶液进行提取，以使上述含羟基的杂质生成钙盐沉淀，不致溶出。这也有利于黄酮类化合物的纯盐沉淀，不致溶出。这也有利于黄酮类化合物的纯化处理。化处理。（三）碳粉吸附法三）碳粉吸附法 主要适于苷类的精制工作主要适于苷类的精制工作。通常，在植物的甲醇通常，在植物的甲醇粗提取物中，分次加入活性炭，搅拌，静置，直至粗提取物中，分次加入活性炭，搅拌，静置，直至定性检查上清液无黄酮反应时为止。过滤，收集吸定性检查上清液无黄酮反应时为止。过滤，收集吸苷炭末，依次用沸甲醇、沸水、苷炭末，依次用沸甲醇、沸水、7%7%酚酚/水、水、15%15%酚酚/醇醇溶液进行洗脱，各部分洗脱液进行定性检查（或用溶液进行

36、洗脱，各部分洗脱液进行定性检查（或用PPCPPC鉴定）。通过对鉴定）。通过对Baptisia lecontei Baptisia lecontei 中黄酮类化中黄酮类化合物的研究证明，大部分黄酮苷类可用合物的研究证明，大部分黄酮苷类可用7%7%酚酚/水洗下。水洗下。洗脱液经减压蒸发浓缩至小体积，再用乙醚振摇除洗脱液经减压蒸发浓缩至小体积，再用乙醚振摇除去残留的酚，余下水层减压浓缩即得较纯的黄酮苷去残留的酚，余下水层减压浓缩即得较纯的黄酮苷类成分。类成分。8-H (1H,d,J=2.（2）酸性规律查耳酮 二氢黄酮二氢查耳酮类 橙酮类（噢 哢类）抗菌、抗病毒作用，如黄芩苷，木犀草素苷等。（NaOA

37、c）:284nm,390nmMeOH 267,296(sh),336 AlCl3 276,301,348,3842、黄酮类化合物1H-NMR谱(DMSO-d6)特征黄酮类核中引入-OH（酚羟基）等供电基团，使共轭程度增强，相应的吸收峰红移。C环上的氢（橙酮）四、黄酮类化合物的波谱利用13C-NMR谱中黄酮类化合物的中央三个碳核四、黄酮类化合物的波谱IR(KBr)cm-1:3430,3200酚羟基 1660,1580 苯环13C-NMR(DMSO-d6):182.芹菜素 木犀草素 黄芩苷92(1H,s),6.二、分离二、分离现将较常用的方法介绍如下：现将较常用的方法介绍如下：（一）柱层析法（一）

38、柱层析法 分离黄酮类化合物常用的吸附剂或载体有分离黄酮类化合物常用的吸附剂或载体有硅胶硅胶、聚聚酰胺酰胺及及纤维素粉纤维素粉等。等。此外，也有用此外，也有用氧化铝氧化铝、氧化镁氧化镁及硅藻土等。及硅藻土等。1.硅胶柱层析硅胶柱层析：此法应用范围最广，此法应用范围最广，主要适于分离主要适于分离异黄酮、二氢黄酮、二氢黄酮醇及高度甲基化（或异黄酮、二氢黄酮、二氢黄酮醇及高度甲基化（或乙酰化）的黄酮及黄酮醇类乙酰化）的黄酮及黄酮醇类。少数情况下，在加水少数情况下，在加水去活化后也可用于分离极性较大的化合物，如多羟去活化后也可用于分离极性较大的化合物，如多羟基黄酮醇及其苷类等。基黄酮醇及其苷类等。2.聚

39、酰胺柱层析：对分离黄酮类化合物来说，聚酰胺是较为理想聚酰胺柱层析：对分离黄酮类化合物来说，聚酰胺是较为理想的吸附剂。其吸附强度主要取决于黄酮类化合物分子中羟基的的吸附剂。其吸附强度主要取决于黄酮类化合物分子中羟基的数目与位置及溶剂与黄酮类化合物或与聚酰胺之间形成氢键缔数目与位置及溶剂与黄酮类化合物或与聚酰胺之间形成氢键缔合能力的大小。合能力的大小。聚酰胺柱层析可用于分离各种类型的黄酮类化合物，包括苷及聚酰胺柱层析可用于分离各种类型的黄酮类化合物，包括苷及苷元、查耳酮与二氢黄酮等苷元、查耳酮与二氢黄酮等 黄酮类化合物从聚酰胺柱上洗脱时大体有下列规律：黄酮类化合物从聚酰胺柱上洗脱时大体有下列规律：

40、（1）酚羟基数目越多，吸附能力越强。）酚羟基数目越多，吸附能力越强。（2）酚羟基数目相同的情况下，酚羟基所处的位置有利）酚羟基数目相同的情况下，酚羟基所处的位置有利于形成分子内氢键，吸附能力减弱。于形成分子内氢键，吸附能力减弱。3-OH或或5-OH黄酮的吸附力小于其他位置黄酮的吸附力小于其他位置-OH黄酮；黄酮；邻二酚羟基黄酮的吸附力弱于间位或对位酚羟基黄酮。邻二酚羟基黄酮的吸附力弱于间位或对位酚羟基黄酮。（3）分子内芳香化程度越高，吸附力越强。）分子内芳香化程度越高，吸附力越强。查耳酮查耳酮 二氢黄酮二氢黄酮 黄酮醇黄酮醇 黄酮黄酮 二氢黄酮醇二氢黄酮醇 异黄酮异黄酮（4）苷元相同，洗脱先后

41、顺序一般是：）苷元相同，洗脱先后顺序一般是：参糖苷参糖苷 双糖苷双糖苷 单糖苷单糖苷 苷元苷元（5）与介质的关系：吸附力）与介质的关系：吸附力 水（中）水（中）甲醇、甲醇、乙醇（浓度乙醇（浓度 由低到高）由低到高）碱性溶剂碱性溶剂洗脱规律：与吸附规律正好相反，即吸附能力越强，越洗脱规律：与吸附规律正好相反，即吸附能力越强，越难洗脱难洗脱 聚酰胺聚酰胺“双重色谱双重色谱”原理原理 正相色谱正相色谱 反相色谱反相色谱聚酰胺：极性固定相（极性酰胺基团）非极性固定相（非极性脂肪链）洗脱剂：有机溶剂（氯仿-甲醇，极性小）含水溶剂（甲醇-水，极性大）先洗脱：游离黄酮（苷元，极性小）苷（极性大）（柱色谱分离

42、）Rf值：苷元 苷 苷元 双糖苷 单糖苷 苷元 一-OH 二-OH 三-OH 四-OH 五-OH 黄酮 “双重色谱双重色谱”原理原理常用洗脱剂：常用洗脱剂：碱水（碱水（0.1mol/L NH3.H2O）盐水（盐水（0.5mol/L NaCl）醇或醇水不同比例。醇或醇水不同比例。葡聚糖凝胶分离黄酮类化合物的机理是：葡聚糖凝胶分离黄酮类化合物的机理是：分离游离黄酮时，主要靠吸附作用。凝胶对黄酮类分离游离黄酮时，主要靠吸附作用。凝胶对黄酮类化合物的吸附程度取决于游离酚羟基的数目。化合物的吸附程度取决于游离酚羟基的数目。但分但分离黄酮苷时，则分子筛的属性起主导作用。离黄酮苷时，则分子筛的属性起主导作用

43、。葡聚糖凝胶柱层析中常用的洗脱剂有：葡聚糖凝胶柱层析中常用的洗脱剂有：(1)碱性水溶液（如碱性水溶液（如0.1mol/L NH4OH），），含盐水溶液含盐水溶液(0.5mol/L NaCl等等)。(2)醇及含水醇，如甲醇，甲醇醇及含水醇，如甲醇，甲醇-水（不同比例）、水（不同比例）、t-丁丁醇醇-甲醇甲醇(3:1)、乙醇等。、乙醇等。(3)其它溶剂：如含水丙酮、甲醇其它溶剂：如含水丙酮、甲醇-氯仿等。氯仿等。应用：适用于各种黄酮类化合物的分离应用：适用于各种黄酮类化合物的分离 原理：反相柱色谱（黄酮类化合物极性大）原理：反相柱色谱（黄酮类化合物极性大）固定相：固定相：ODS 流动相：水流动相：

44、水-乙晴，水与甲醇不同比例乙晴，水与甲醇不同比例4高效液相色谱法（高效液相色谱法（HPLC）（二）梯度（二）梯度pH萃取法萃取法梯度梯度pH萃取法适合于酸性强弱不同的黄酮苷元的分离。萃取法适合于酸性强弱不同的黄酮苷元的分离。根据黄酮类苷元酚羟基数目及位置不同其酸性强弱也根据黄酮类苷元酚羟基数目及位置不同其酸性强弱也不同的性质，可以将混合物溶于有机溶剂（如乙醚）不同的性质，可以将混合物溶于有机溶剂（如乙醚）后，依次用后，依次用5%NaHCO3、5%Na2CO3、0.2%NaOH及及4%NaOH水溶液萃取，来达到分离的目的。水溶液萃取，来达到分离的目的。酸性酸性：7，4-二二OH 7-或或4-OH

45、 （溶于溶于）：5%NaHCO3液液 5%Na2CO3液液 一般一般OH 5-OH 0.2%NaOH液液 4%NaOH液）液）（三）（三）根据分子中某些特定官能团进行分离根据分子中某些特定官能团进行分离n在黄酮类成分的混合物中，具有邻二酚羟基成分与在黄酮类成分的混合物中，具有邻二酚羟基成分与无此结构的成分，可用铅盐法分离。无此结构的成分，可用铅盐法分离。有邻二酚羟基有邻二酚羟基的成分可被醋酸铅沉淀，的成分可被醋酸铅沉淀，不具有邻二酚羟基的成分不具有邻二酚羟基的成分可被碱式醋酸铅沉淀可被碱式醋酸铅沉淀，达到分离的目的。，达到分离的目的。n 与黄酮类成分混存的其它杂质，如分子中有羧基与黄酮类成分混

46、存的其它杂质，如分子中有羧基（如树胶、粘液、果胶、有机酸、蛋白质、氨基酸（如树胶、粘液、果胶、有机酸、蛋白质、氨基酸等）或邻二酚羟基（如鞣质等）时，也可为醋酸铅等）或邻二酚羟基（如鞣质等）时，也可为醋酸铅沉淀达到去杂目的。沉淀达到去杂目的。n具黄酮类化合物与铅盐生成的沉淀，滤集后按具黄酮类化合物与铅盐生成的沉淀，滤集后按常法悬浮在乙醇中，通入常法悬浮在乙醇中，通入H2S进行复分解，滤进行复分解，滤除硫化铅沉淀，滤液中可得到黄酮类化合物。除硫化铅沉淀，滤液中可得到黄酮类化合物。但初生态的但初生态的PbS沉淀具有较高的吸附性，因此沉淀具有较高的吸附性，因此现多不主张用现多不主张用H2S脱铅，而用硫

47、酸盐或磷酸盐，脱铅，而用硫酸盐或磷酸盐，或用阳离子交换树脂脱铅。或用阳离子交换树脂脱铅。有邻二酚羟基的黄有邻二酚羟基的黄酮可与硼酸络合，生成物易溶于水，借此也可酮可与硼酸络合，生成物易溶于水，借此也可与不具上述结构的黄酮类化合物相互分离。与不具上述结构的黄酮类化合物相互分离。n 在实际工作中，常将上述柱层析法与各种在实际工作中，常将上述柱层析法与各种经典方法相互配合应用，以达到较好的分离效经典方法相互配合应用，以达到较好的分离效果。果。第五节第五节 黄酮类化合物的结构研究黄酮类化合物的结构研究一一.紫外可见光谱在黄酮类化合物结构测定中的应用紫外可见光谱在黄酮类化合物结构测定中的应用 一般鉴定程

48、序：一般鉴定程序：1、先测定在甲醇中的光谱。2、再测定在加入各种诊断试剂后的紫外光谱。3、如为苷类，则可水解或甲基化后再水解，并测定苷元或其衍生物的紫外光谱。4、将以上各种光谱数据（或光谱图）进行对比分析，即可获得有关结构信息。OOROOROOR+1.黄酮类化合物在甲醇中紫外光谱特征黄酮类化合物在甲醇中紫外光谱特征 苯甲酰系统苯甲酰系统 桂皮酰系统桂皮酰系统（带（带II 220280nm）（带（带1 300400nm）黄酮类化合物结构中的交叉共轭体系黄酮类化合物结构中的交叉共轭体系OOBOORAB 二氢黄酮（醇）异黄酮（二氢）（由（由B环产生的桂皮酰系统不存在，带环产生的桂皮酰系统不存在，带I

49、弱，带弱，带II强）强）黄酮类化合物在甲醇中紫外光谱特征黄酮类化合物在甲醇中紫外光谱特征 甲醇钠：强碱，所有酚羟基解离 醋酸钠：碱性弱，酸性强的酚羟基解离 加入诊断试剂 醋酸钠/硼酸：邻二酚羟基络和 相应吸收峰红移 黄酮（醇）：带 II、带I均强母核光谱特征 二氢黄酮类、异黄酮类：带 II强、带I弱 母核的推断母核的推断 （甲醇）查耳酮、橙酮：带 II弱、带I强 取代基：OH等，为助色团 依红移规律推断取代基团依红移规律推断取代基团 三氯化铝：3-OH，4-羰基 5-OH，4-羰基 络和 邻二酚羟基黄酮类化合物母核黄酮类化合物母核UV吸收特征吸收特征 母核类型母核类型 带带II（nm）带带I（

50、nm）备注备注黄酮 250280（强）304350（强）典型的交叉共轭系统黄酮醇（3-OH取代）328357（强）3-OH供电减弱，使黄酮黄酮醇（3-OH游离）358385（强）3-OH供电共轭，带1红移 异黄酮 245278（强）(sh)桂皮酰系统破坏 二氢黄酮（醇）270295（强）(sh)查耳酮 220270（弱）340390（强）橙酮 230270（弱）370430（强）花青素（苷）270280 465560（可见区）（2）取代基团对共轭吸收的影响n黄酮类核中引入-OH（酚羟基）等供电基团，使共轭程度增强，相应的吸收峰红移。一般，A环引入 OH，带II红移，B环引入 OH带I红移。n羟