骨髓活检免疫组化的具体运用及病例分享实用课件.ppt
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1、骨髓活检免疫组化的具体运用及病例分享王蓉Ppt骨髓活检的适应症 1.全血细胞减少 2.不明原因的肝脾肿大 3.不明原因的发热 4.骨髓干抽或稀释 5.低增生性MDS或AL 6.淋巴瘤侵犯骨髓 7.再生障碍性贫血 8.骨髓转移性肿瘤病例一病例一 男,23岁,因“发热伴头痛1月余,右侧肢体疼痛20天”入院。每日仍有发热,体温波动于约37-39,无明显畏寒、寒战,无盗汗纳差、腹胀,伴大便次数较前减少,肛门未停止排气,活动上肢时偶有胸骨旁局限性疼痛,无明显腹痛、腹泻,无恶心、呕吐,无咳嗽、咳痰,无皮疹,无尿频、尿急、尿痛,睡眠一般,近2月体重减轻15斤。实验室检查实验室检查 血常规提示:WBC1.12
2、 109/L,LY92%,HB 88g/L,PLT112 109/L。生化:白蛋白 37.1 g/L,乳酸脱氢酶 416 U/L,-谷氨酰转肽酶 62.9 U/L。ECT:全身多处骨代谢异常增高。骨髓涂片检查骨髓涂片检查提示三系增生明显活跃,血小板散在少见。骨髓活检骨髓活检结果提示:骨髓腔中见大量肿瘤细胞。免疫组化结果免疫组化结果 CD3(-),CD20(-),CD38(-),CD138(+),MUM1(-),Ki-67(+),(+),(+),EMA(+),CKpan(+),Des(-),Myo D1(-),CD30(-),CD56(-),Syn(-),CgA(-),AFP(-),PLAP(-
3、),CD117(-),P63(-),CD99(-),S100(-),CK7(-),CK20(-),TTF-1(-),结合HE切片,本例为骨髓转移性恶性肿瘤,倾向转移性癌。初诊MM,联合骨髓活检病理、骨髓穿刺及涂片流式细胞仪检测检测是目前MM骨髓诊断的“金标准”。9%CD10:66.EB病毒DNA定量:1.典型CLL(LEF1阳性)标本TCR、TCR重排检测阴性髓系肿瘤由于细胞分化阶段不如淋系明显,所以髓系肿瘤主要依靠骨髓象及遗传学,仅作辅助诊断。LEF1调节一系列与髓系肿瘤由于细胞分化阶段不如淋系明显,所以髓系肿瘤主要依靠骨髓象及遗传学,仅作辅助诊断。细胞周期和增殖相关的基因在CLL组和非CL
4、L组(包括所有WM、MCL、FL、SMZL、B-CLPD-U等)比较存在显著差异(P=0.44 109/L,中性粒细胞 82.2%CD13:20%CD11b:阴性 CD34:6.LEF1在机体造血细胞,尤其是前B细胞和T淋巴细胞的正常分化过程中发挥着重要的调控作用结合HE切片,本例考虑为多发性骨髓瘤。LEF1在结肠癌、乳腺癌、卵巢癌、胰腺癌等多种实体肿瘤均呈高表达典型CLL(LEF1阳性)LEF1蛋白在CLL、FL标本中存在表达,阳性率分别为87.血清免疫固定电泳:轻链L型;CD117:阴性 CD19:96.血清免疫固定电泳:轻链L型;骨髓涂片再次复片骨髓涂片再次复片阅片可见一处成堆出血的异常
5、细胞,骨髓转移性肿瘤。成堆出现的有核红细胞成堆出现的有核红细胞结果结果 诊断骨髓转移性肿瘤病例二病例二 女,60岁,因“全身肌肉关节疼痛8月余”入院(风湿科)。患者8月余前无明显诱因下出现全身多部位疼痛,包括肢带肌及多关节疼痛,肩背及腰臀部疼痛明显,关节以双髋、双膝、双肩受累明显,伴头痛、双眼复视、耳鸣,伴面部麻木。全身无皮疹,皮肤湿润;两侧颈部分别可触及肿大淋巴结一枚,约蚕豆大小,无触痛,质地韧,活动度可。实验室检查实验室检查 血常规:白细胞17.44 109/L,中性粒细胞 82.10%,红细胞计数 1.95 109/L,血红蛋白 57 g/L,血小板计数 65 109/L。生化示:谷丙转
6、氨酶 41.7 U/L 谷草转氨酶 59.4 U/L 乳酸脱氢酶 1000 U/L,-谷氨酰转肽酶 154 U/L,碱性磷酸酶 495.8 U/L,总胆红素 22.3 umol/L,间接胆红素 15.9 umol/L,白蛋白 34.2 g/L。骨髓涂片骨髓涂片提示三系增生减低,阅片可见原幼细胞。骨髓活检骨髓活检提示骨髓中原幼细胞明显增多,灶性增生。免疫组化结果免疫组化结果 CD3:散在小簇+,CD5:散在小簇+,CD20:+,PAX5:+,CD34:散在+,MPO:粒细胞+,TdT:-,BCL-6:-,CD10:-结合HE切片,本例提示为B细胞淋巴瘤侵犯骨髓三月后复查骨髓涂片三月后复查骨髓涂片
7、提示急性淋巴细胞白血病流式细胞结果流式细胞结果100101102103104CD45 PerCP1.R1门原始细胞占68.0%,R2淋巴细胞占18.3%;R1门表达:HLA-DR:97.2%CD13:20%CD11b:阴性 CD34:6.1%CD117:阴性 CD19:96.1%CD64:阴性 CD33:52.2%CD14:阴性 CD15:65.1%CD56:阴性 CD38:98.7%CD22:43.4%CD20:64.9%CD10:66.9%CD3:阴性 CD7:阴性 CD5:阴性 CD8:阴性 CD4:阴性 CD2:阴性 TDT:33.7%cMPO:阴性 cCD3:阴性cCD79a:88.
8、5%结论:CD13+CD33+CD15+B-ALL,建议进一步检测t(9;22).染色体结果染色体结果46,XX20分子生物学结果分子生物学结果IGH、IGK重排检测阳性标本TCR、TCR重排检测阴性结果结果 诊断B-ALL转录因子家族的成员之一转录因子家族的成员之一LEF1是LEF1/TCFLEF1蛋白的表达水平在WM、MCL、FL、SMZL、B-CLPD-U等表达较低,组间比较无统计学差异(P=0.8 U/L,总胆红素 22.阅片可见一处成堆出血的异常细胞,骨髓转移性肿瘤。骨髓提示大量吞噬组织细胞,三系增生活跃,形态大致正常。脾脏内侧缘团块样稍低密度影及脾门处低密度影,性质待定。77 10
9、9/L,PLT 50 109/L。LEF1在机体造血细胞,尤其是前B细胞和T淋巴细胞的正常分化过程中发挥着重要的调控作用提示三系增生明显活跃,血小板散在少见。CD3:散在小簇+,CD5:散在小簇+,CD20:+,PAX5:+,CD34:散在+,MPO:粒细胞+,TdT:-,BCL-6:-,CD10:-免疫球蛋白:免疫球蛋白M 0.肝脏膈顶部不规则片状低密度影,考虑偏良性病变可能。胆囊增大,结合MR,考虑胆囊炎。该检测标本IGK重排检测阳性LEF1是LEF1/TCF男,23岁,因“发热伴头痛1月余,右侧肢体疼痛20天”入院。在78例CLL中共发现10例LEF1阴性患者胆囊增大,结合MR,考虑胆囊
10、炎。对异常细胞进行定位及定性病例三病例三 男,70岁,因“腹痛半月余,加重伴皮肤巩膜黄染8天”入院。(消化科)3月前,患者无明显诱因出现腹部隐痛,伴腹胀、厌食,偶有恶心,无呕吐,无发热,未予重视。1周后,患者饮酒1斤后,腹痛、腹胀、厌食等症状加重。患者诉血便,共4次,每次量约50ml,色鲜红,不成形,诉便后腹痛轻微缓解,无呕吐、恶心、发热,发现皮肤、巩膜逐渐增黄。实验室检查实验室检查 血常规:N 0.77 109/L,PLT 50 109/L。生化:ALT 321U/L,AST 334U/L,LDH 601U/L,ALB 23.60g/L,TBIL 82.70umol/L,DBIL 72.10
11、umol/L。腹部增强CT:胆囊泥沙样结石,胆囊炎。前列腺肿大。脾大。全腹部增强全腹部增强CT 肝脏膈顶部不规则片状低密度影,考虑偏良性病变可能。炎性病变?脂肪肝;胆囊增大,结合MR,考虑胆囊炎。脾大;脾脏内侧缘团块样稍低密度影及脾门处低密度影,性质待定。腹腔干周围脂肪密度稍高,局限性腹脂炎可能。盆腔少许积液。CT引导下脾穿刺术引导下脾穿刺术 病理检查结果:(脾穿刺)极少量穿刺组织,见出血,极少量纤维结缔组织,和极少量肝组织。肝脏穿刺肝脏穿刺 病理示:(肝穿刺)条索样肝组织,可见3个汇管区,肝小叶结构存在,肝细胞轻度水肿变性,部分肝细胞脂肪变性,部分肝细胞内胆汁淤积,汇管区少量炎细胞浸润。PE
12、T-CT 腹部显影清晰,肝脏密度较低,CT值约37HU,肝脏顶部见一大小约3.3cm 2.8cm稍低密度影,CT值约30HU,放射性摄取增高,SUV最大值12.6;脾脏体积稍大,其内见2处放射性摄取增高灶,较大约5.3cm 4.4cm,密度稍低,CT值约35HU,SUV最大值12.2;右侧心包脂肪垫见一大小约稍大淋巴结影,放射性摄取增高,SUV最大值5.8。第一次骨髓涂片(第一次骨髓涂片(3.06)提示三系增生减低,骨髓稀释可能。041012/L;EB病毒DNA定量:1.MM患者骨髓瘤细胞呈局灶性分布、骨髓粘滞度高以及骨髓穿刺抽取骨髓量较多导致标本稀释所致,因此判定肿瘤负荷以骨髓活检最为准确。
13、患者8月余前无明显诱因下出现全身多部位疼痛,包括肢带肌及多关节疼痛,肩背及腰臀部疼痛明显,关节以双髋、双膝、双肩受累明显,伴头痛、双眼复视、耳鸣,伴面部麻木。三系增生减低,异常细胞占2%,可见吞噬组织细胞。提示三系增生明显活跃,血小板散在少见。CD3(-),CD20(-),CD38(-),CD138(+),MUM1(-),Ki-67(+),(+),(+),EMA(+),CKpan(+),Des(-),Myo D1(-),CD30(-),CD56(-),Syn(-),CgA(-),AFP(-),PLAP(-),CD117(-),P63(-),CD99(-),S100(-),CK7(-),CK20
14、(-),TTF-1(-),结合HE切片,本例为骨髓转移性恶性肿瘤,倾向转移性癌。髓系肿瘤由于细胞分化阶段不如淋系明显,所以髓系肿瘤主要依靠骨髓象及遗传学,仅作辅助诊断。1%CD56:阴性 CD38:98.血清免疫固定电泳:轻链L型;每日仍有发热,体温波动于约37-39,无明显畏寒、寒战,无盗汗纳差、腹胀,伴大便次数较前减少,肛门未停止排气,活动上肢时偶有胸骨旁局限性疼痛,无明显腹痛、腹泻,无恶心、呕吐,无咳嗽、咳痰,无皮疹,无尿频、尿急、尿痛,睡眠一般,近2月体重减轻15斤。24h尿轻链总量:L轻链 7.两侧颈部分别可触及肿大淋巴结一枚,约蚕豆大小,无触痛,质地韧,活动度可。EB病毒DNA定量
15、:1.95 109/L,血红蛋白 57 g/L,血小板计数 65 109/L。ECT:全身多处骨代谢异常增高。提示三系增生明显活跃,血小板散在少见。79,XX,-1,-1,-3,-4,-4,-5,+8,-9,-10,-13,-16,-16,-16,-16,+18,-21,-22,+mar1,+mar2cp3/46,XX7胆囊增大,结合MR,考虑胆囊炎。转录因子家族的成员之一第二次骨髓涂片(第二次骨髓涂片(3.24)三系增生减低,异常细胞占2%,可见吞噬组织细胞。第三次骨髓涂片(第三次骨髓涂片(3.30)骨髓提示大量吞噬组织细胞,三系增生活跃,形态大致正常。骨髓活检(骨髓活检(3.24)提示异常
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