革兰氏阴性球菌实用课件.pptx

1、奈瑟氏菌属是一群革兰阴性球菌，常成双排列，无鞭毛，无芽胞，有菌奈瑟氏菌属是一群革兰阴性球菌，常成双排列，无鞭毛，无芽胞，有菌毛毛人类为奈瑟氏菌属的自然宿主，对人致病的只有脑膜炎奈瑟菌和淋病奈人类为奈瑟氏菌属的自然宿主，对人致病的只有脑膜炎奈瑟菌和淋病奈瑟菌，两种细菌瑟菌，两种细菌DNA序列有序列有70的同源性的同源性主要主要区别点区别点为，淋病奈瑟菌寄居于尿道黏膜，引起泌尿生殖系统疾病；为，淋病奈瑟菌寄居于尿道黏膜，引起泌尿生殖系统疾病；而脑膜炎奈瑟菌和其他奈瑟菌和其他奈瑟菌均存在于鼻咽腔黏膜。脑膜炎而脑膜炎奈瑟菌和其他奈瑟菌和其他奈瑟菌均存在于鼻咽腔黏膜。脑膜炎奈瑟菌有多糖成分奈瑟菌有多糖成

2、分脑膜炎双球菌脑膜炎双球菌感染部位不同，标本取材部位不同meningitidis)5、如何从脓液中检出乙型溶血性链球菌？meningitidis巧克力色培养基快速诊断法经常变异，相应抗体不能防止再感染菌落小、半透明、表面光滑、边缘整齐男性急性淋病患者尿道分泌物涂片（革兰染色）抗原和分类：根据荚膜多糖群特异性抗原的不同可分为13个血清群，根据膜蛋白不同，各血清群又可分为若干血清型脑膜炎奈瑟菌 淋病奈瑟菌常用的培养基为巧克力色血液琼脂平板主要区别点为，淋病奈瑟菌寄居于尿道黏膜，引起泌尿生殖系统疾病；药敏试验（K-B法）：药敏试验（K-B法）：传代后的菌落直径较首代有些缩小了,菌落湿润程度也有些降低

3、,但仍然很湿润.氧化酶：+奈瑟氏菌属是一群革兰阴性球菌，常成双排列，无鞭毛，无芽胞，有菌毛5、如何从脓液中检出乙型溶血性链球菌？鼻咽腔繁殖繁殖入血菌菌/败血症败血症中枢神经系统中枢神经系统主要侵犯蛛网膜暴发型脑膜炎暴发型脑膜炎微循环衰竭微循环衰竭、内毒素休克内毒素休克、DICDIC脑膜炎奈瑟菌（脑膜炎奈瑟菌（N.meningitidis)脑膜炎奈瑟菌（脑膜炎奈瑟菌（N.meningitidis)革兰阴性双球菌革兰阴性双球菌,肾形或豆形肾形或豆形生物学性状生物学性状形态染色：形态染色：G-，呈肾型，成双排列（凹面相对，凸面相，呈肾型，成双排列（凹面相对，凸面相背），有荚膜及菌毛背），有荚膜及菌毛

4、 培养特性培养特性 营养要求较高，血平板或巧克力平板或卵黄双抗平板，营养要求较高，血平板或巧克力平板或卵黄双抗平板，形成光滑透明形成光滑透明“露滴样露滴样”菌落菌落专性需氧，专性需氧，510%CO2，35-37（40 30均不生均不生长）长）pH7.47.6易产生自溶酶易产生自溶酶生物学性状生物学性状n生化反应：生化反应：氧化酶及触酶（氧化酶及触酶（+），分解葡萄糖），分解葡萄糖和麦芽糖和麦芽糖n抗原和分类：抗原和分类：根据荚膜多糖群特异性抗原的不根据荚膜多糖群特异性抗原的不同可分为同可分为13个血清群，根据膜蛋白不同，各血个血清群，根据膜蛋白不同，各血清群又可分为若干血清型清群又可分为若干血

5、清型n抵抗力：抵抗力：很弱，对热、冷、干燥和消毒剂极度很弱，对热、冷、干燥和消毒剂极度敏感敏感脑膜炎奈瑟菌（脑膜炎奈瑟菌（N.meningitidis)氧化酶：氧化酶：+DNA酶：酶：-营养琼脂生长：营养琼脂生长：-葡萄糖：葡萄糖：+麦芽糖：麦芽糖：+脑膜炎接种两者关系两者关系氧化酶试验阳性：紫红色 阴性：无色药敏试验（K-B法）：抵抗力：极弱（与脑膜炎奈瑟菌相似）经常变异，相应抗体不能防止再感染巧克力色培养基快速诊断法抑菌环中也微弱的生长了些菌落,但经过涂片发现是口腔球菌.用的就是普通微量管,在接种前滴加小牛血清1滴.菌落小、半透明、表面光滑、边缘整齐奈瑟氏菌属是一群革兰阴性球菌，常成双排列

6、，无鞭毛，无芽胞，有菌毛形态染色：与脑膜炎奈瑟菌相似，G，双球菌，咖啡豆状，有荚膜和菌毛，无芽胞，无鞭毛A群脑膜炎球菌多糖抗原。5%CO2,35培养1824h后读取并记录结果.儿童和成人的脑膜炎症状6月2岁年龄组婴儿免疫力最低，是易感人群金黄色葡萄球菌 表皮葡萄球菌传代后的菌落直径较首代有些缩小了,菌落湿润程度也有些降低,但仍然很湿润.所致疾病：引起脑膜炎（脑），引起泌尿生殖系统疾病（淋）。除葡萄糖外，不分解其它糖类抗原及分类：以外膜蛋白抗原分16个血清型抵抗力：很弱，对热、冷、干燥和消毒剂极度敏感gonorrhoeae与脑膜炎奈瑟菌相似，营养要求更高，只能在巧克力平板及专用培养基上生长，形成

7、灰白色细小S型呈滴露样菌落常用的培养基为巧克力色血液琼脂平板胆汁溶菌试验 -（混浊）+（澄清）可能是做该试验的同事挑菌落的时候,没把握好.巧克力色培养基快速诊断法PII：吸附易感细菌的蛋白涂片染色为革兰阴性双球菌；肾形或豆形，成双排列，凹面相对；gonorrhoeae6月2岁年龄组婴儿免疫力最低，是易感人群-溶血素 +-6月2岁年龄组婴儿免疫力最低，是易感人群meningitidis)尽管如此,抑菌环还是非常明显而宽大(22mm).经常变异，相应抗体不能防止再感染5、如何从脓液中检出乙型溶血性链球菌？meningitidis)6月2岁年龄组婴儿免疫力最低，是易感人群传代后的菌落直径较首代有些缩

8、小了,菌落湿润程度也有些降低,但仍然很湿润.除葡萄糖外，不分解其它糖类感染部位不同，标本取材部位不同 生物学特性生物学特性 形态染色：与脑膜炎奈瑟菌相似，形态染色：与脑膜炎奈瑟菌相似，G，双球菌，咖啡豆，双球菌，咖啡豆状，有荚膜和菌毛，无芽胞，无鞭毛状，有荚膜和菌毛，无芽胞，无鞭毛 脓汁标本中脓汁标本中 急性病人：细菌位于中性粒细胞内急性病人：细菌位于中性粒细胞内 慢性病人：细菌位于细胞外慢性病人：细菌位于细胞外 培养特性：培养特性：与脑膜炎奈瑟菌相似，营养要求更高，只能在与脑膜炎奈瑟菌相似，营养要求更高，只能在巧克力平板及专用培养基上生长，形成灰白色细小巧克力平板及专用培养基上生长，形成灰白

9、色细小S型菌型菌落落 生化反应：生化反应：氧化酶（氧化酶（+），只分解葡萄糖，不分解麦芽糖），只分解葡萄糖，不分解麦芽糖（脑膜炎奈瑟菌分解麦芽糖脑膜炎奈瑟菌分解麦芽糖）等其它糖类）等其它糖类 抗原及分类：抗原及分类：以外膜蛋白抗原分以外膜蛋白抗原分16个血清型个血清型 抵抗力：抵抗力：极弱（与脑膜炎奈瑟菌相似）极弱（与脑膜炎奈瑟菌相似）淋病奈瑟菌淋病奈瑟菌淋病奈瑟菌鉴定依据淋病奈瑟菌鉴定依据：1.涂片染色为革兰阴涂片染色为革兰阴性双球菌；性双球菌；2.巧克力平板上为半巧克力平板上为半透明、灰白色、凸透明、灰白色、凸 起滴露状菌落；起滴露状菌落；3.氧化酶及触酶均阳氧化酶及触酶均阳性；性；4.只

10、分解葡萄糖，产只分解葡萄糖，产酸不产气；酸不产气；5.血清学试验阳性。血清学试验阳性。比比 较较 内内 容容 脑膜炎奈瑟菌脑膜炎奈瑟菌 淋病奈瑟菌淋病奈瑟菌 生生物物学学性性状状 形态结构形态结构 G双球菌；有荚膜、菌毛双球菌；有荚膜、菌毛(新新)同左同左 培养特性培养特性 高营养、高营养、5%CO2露滴状、自溶酶露滴状、自溶酶 高营养、高营养、5%CO2 生化反应生化反应 分解葡萄糖、麦芽糖分解葡萄糖、麦芽糖 只分解葡萄糖只分解葡萄糖 抗原抗原与与分类分类 荚膜多糖群特异荚膜多糖群特异Ag外膜蛋白型特异外膜蛋白型特异Ag脂多糖脂多糖Ag核蛋白核蛋白Ag 菌毛蛋白菌毛蛋白Ag脂多糖脂多糖Ag外

11、膜蛋白外膜蛋白Ag(P、P、P)抵抗力抵抗力 冷、热、干燥、消毒剂均敏感冷、热、干燥、消毒剂均敏感 同左同左 致致病病性性 致病物质致病物质 荚膜、菌毛、内毒素荚膜、菌毛、内毒素 荚膜、菌毛、外膜蛋白、荚膜、菌毛、外膜蛋白、IgA1 所致疾病所致疾病 流行性脑脊膜炎流行性脑脊膜炎 淋病淋病 防治原则防治原则 荚膜多糖疫苗荚膜多糖疫苗 洁身自好洁身自好 脑膜炎奈瑟菌与淋病奈瑟菌比较脑膜炎奈瑟菌与淋病奈瑟菌比较 小 结巧克力色培养基快速诊断法抑菌环中也微弱的生长了些菌落,但经过涂片发现是口腔球菌.麦芽糖：+传代后的菌落直径较首代有些缩小了,菌落湿润程度也有些降低,但仍然很湿润.除葡萄糖外，不分解其

12、它糖类人类为奈瑟氏菌属的自然宿主，对人致病的只有脑膜炎奈瑟菌和淋病奈瑟菌，两种细菌DNA序列有70的同源性常用的培养基为巧克力色血液琼脂平板痰涂片（肺炎链球菌镜下）:菊糖发酵试验 -（紫色）+（黄色）葡萄糖：+血浆凝固酶试验 +-耐热DNA酶试验 +-A群脑膜炎球菌多糖抗原。荚膜、菌毛、外膜蛋白、IgA1主要区别点为，淋病奈瑟菌寄居于尿道黏膜，引起泌尿生殖系统疾病；氧化酶试验阳性：紫红色 阴性：无色完全溶血 乙型链球菌男性急性淋病患者尿道分泌物涂片（革兰染色）新分离株具有荚膜和菌毛A群脑膜炎球菌多糖抗原。化脓性球菌化脓性球菌 革兰阳性菌：葡萄球菌，链球菌，肺炎链革兰阳性菌：葡萄球菌，链球菌，肺

13、炎链球菌球菌 革兰阴性菌：脑膜炎奈瑟菌，革兰阴性菌：脑膜炎奈瑟菌，淋病奈瑟菌淋病奈瑟菌N.gonorrhoeaeN.meningitidisS.pneumoniaestaphylococcusStreptococcus脓汁或脓汁或喉拭子喉拭子 涂片、革兰染色、镜检涂片、革兰染色、镜检血琼脂平板血琼脂平板观察菌落特征观察菌落特征及溶血情况及溶血情况生化反应、致病力试验及药敏试验生化反应、致病力试验及药敏试验病原性球菌的鉴别病原性球菌的鉴别 由脑脊液标本中发现中性粒细胞内外有由脑脊液标本中发现中性粒细胞内外有G G-双球菌双球菌，可初步诊，可初步诊断为断为脑膜炎球菌脑膜炎球菌 由泌尿、生殖系统来源

14、的标本中分离出的由泌尿、生殖系统来源的标本中分离出的G G-双球菌双球菌，可初步，可初步诊断为诊断为淋球菌淋球菌 37 24h葡萄球菌鉴别葡萄球菌鉴别 金黄色葡萄球菌金黄色葡萄球菌 表皮葡萄球菌表皮葡萄球菌 色素色素 金黄色金黄色 白色白色-溶血素溶血素 +-血浆凝固酶试验血浆凝固酶试验 +-耐热耐热DNA酶试验酶试验 +-甘露醇发酵试验甘露醇发酵试验 +-致病力致病力 强强 弱或无弱或无脓汁标本脓汁标本 找出两种菌落找出两种菌落 Gram染色染色 甘露醇发酵试验甘露醇发酵试验菌落小、半透明菌落小、半透明、表面光滑、边缘整齐表面光滑、边缘整齐G+、链状、链状 完全溶血完全溶血 乙型链球菌乙型链

15、球菌不溶血不溶血 丙型链球菌丙型链球菌草绿色不完全溶血环草绿色不完全溶血环甲型链球菌甲型链球菌 肺炎链球菌肺炎链球菌菊糖发酵试验菊糖发酵试验 -（紫色）（紫色）+（黄色）（黄色）胆汁溶菌试验胆汁溶菌试验 -（混浊）（混浊）+（澄清）（澄清）喉拭子标本喉拭子标本 找出两种菌落找出两种菌落 Gram染色染色痰培养肺炎链球菌检验全程报道姚军微生物检验1.痰涂片（肺炎链球菌镜下）:1.痰涂片（肺炎链球菌镜下）:2.原始培养物18h后菌落（肺炎链球菌菌落）:2.原始培养物18h后菌落（肺炎链球菌菌落）:3.传代后的纯培养物:人类是淋球菌唯一的天然宿主6月2岁年龄组婴儿免疫力最低，是易感人群除葡萄糖外，不

16、分解其它糖类涂片染色为革兰阴性双球菌；meningitidis)meningitis-溶血素 +-传代后的菌落直径较首代有些缩小了,菌落湿润程度也有些降低,但仍然很湿润.病人脑脊液（CSF）中典型，多位于中性粒细胞内；病人脑脊液（CSF）中典型，多位于中性粒细胞内；6月2岁年龄组婴儿免疫力最低，是易感人群分离培养与鉴定抑菌环中也微弱的生长了些菌落,但经过涂片发现是口腔球菌.经常变异，相应抗体不能防止再感染感染部位不同，标本取材部位不同脑膜炎奈瑟菌有多糖成分6月2岁年龄组婴儿免疫力最低，是易感人群药敏试验（K-B法）：高营养、5%CO2露滴状、自溶酶感染部位不同，标本取材部位不同3.传代后的纯培

17、养物:传代后的菌落直径较首代有些缩小了传代后的菌落直径较首代有些缩小了,菌落湿润程度也有些降低菌落湿润程度也有些降低,但仍然很湿润但仍然很湿润.4.Optochin抑制试验:抑菌环中也微弱的生长了些菌落抑菌环中也微弱的生长了些菌落,但经过涂片发现是口腔球菌但经过涂片发现是口腔球菌.可可能是做该试验的同事挑菌落的时候能是做该试验的同事挑菌落的时候,没把握好没把握好.把杂菌带进去了把杂菌带进去了.尽尽管如此管如此,抑菌环还是非常明显而宽大抑菌环还是非常明显而宽大(22mm).5.生化反应:用的就是普通微量管用的就是普通微量管,在接种前滴加小牛血清在接种前滴加小牛血清1滴滴.5%CO2,35培养培养

18、1824h后读取并记录结果后读取并记录结果.6.肺炎链球菌乳胶凝集试验：左边是测试，右边是阴性对照：7.药敏试验（K-B法）：7.药敏试验（K-B法）：思考题一、填空题：一、填空题：二、是非题：三、选择题：三、选择题：三、选择题：三、选择题：四、名词解释：1、血浆凝固酶 2、葡萄球菌A蛋白问答题 1、如何从脓汁标本中检出金黄色葡萄球菌，请写出检验程序，鉴定依据？2、肺炎链球菌与甲型溶血性链球菌的主要区别有那些？3、简述下列细菌的形态特征、首选培养基及主要菌落特点？金黄色葡萄球菌、伤寒沙门菌、霍乱弧菌。4、流脑患者脑脊液革兰氏染色的镜下特征，如何分离培养及菌落特点？5、如何从脓液中检出乙型溶血性

19、链球菌？6、简述下列细菌的形态特征、首选培养基及主要菌落特点？肺炎链球菌、脑膜炎奈瑟菌、铜绿假单胞菌。痰培养肺炎链球菌检验全程报道儿童和成人的脑膜炎症状经常变异，相应抗体不能防止再感染男性慢性淋病患者尿道分泌物涂片（革兰染色）-溶血素 +-形态染色：G-，呈肾型，成双排列（凹面相对，凸面相背），有荚膜及菌毛6、简述下列细菌的形态特征、首选培养基及主要菌落特点？肺炎链球菌、脑膜炎奈瑟菌、铜绿假单胞菌。感染部位不同，标本取材部位不同药敏试验（K-B法）：脑膜炎奈瑟菌与淋病奈瑟菌比较脑膜炎奈瑟菌与淋病奈瑟菌比较痰涂片（肺炎链球菌镜下）:6月2岁年龄组婴儿免疫力最低，是易感人群药敏试验（K-B法）：用的就是普通微量管,在接种前滴加小牛血清1滴.传代后的菌落直径较首代有些缩小了,菌落湿润程度也有些降低,但仍然很湿润.meningococcus抗原和分类：根据荚膜多糖群特异性抗原的不同可分为13个血清群，根据膜蛋白不同，各血清群又可分为若干血清型高营养、5%CO2露滴状、自溶酶葡萄糖：+5%CO2,35培养1824h后读取并记录结果.微生物检验