革兰氏阴性球菌-课件.ppt

1、革兰氏阴性球菌奈瑟氏菌属是一群革兰阴性球菌，常成双排列，无鞭毛，无芽胞，有菌奈瑟氏菌属是一群革兰阴性球菌，常成双排列，无鞭毛，无芽胞，有菌毛毛人类为奈瑟氏菌属的自然宿主，对人致病的只有脑膜炎奈瑟菌和淋病奈人类为奈瑟氏菌属的自然宿主，对人致病的只有脑膜炎奈瑟菌和淋病奈瑟菌，两种细菌瑟菌，两种细菌DNA序列有序列有70的同源性的同源性主要区别点为，淋病奈瑟菌寄居于尿道黏膜，引起泌尿生殖系统疾病；主要区别点为，淋病奈瑟菌寄居于尿道黏膜，引起泌尿生殖系统疾病；而脑膜炎奈瑟菌和其他奈瑟菌和其他奈瑟菌均存在于鼻咽腔黏膜。脑膜炎而脑膜炎奈瑟菌和其他奈瑟菌和其他奈瑟菌均存在于鼻咽腔黏膜。脑膜炎奈瑟菌有多糖成分

2、奈瑟菌有多糖成分脑膜炎双球菌脑膜炎双球菌形态培养特性最常用的培养基是巧克力色培养基n生化反应u可产生自溶酶，人工培养时若不及时移种，数日后菌体自溶抗原构造 TaizhouUniversity TaizhouUniversity鼻咽腔繁殖繁殖入血菌菌/败血症败血症中枢神经系统中枢神经系统主要侵犯蛛网膜暴发型脑膜炎暴发型脑膜炎微循环衰竭微循环衰竭、内毒素休克内毒素休克、DICDIC微生物、外有革兰阴性双球菌，即可作出初步诊断n分离培养与鉴定u巧克力色血琼脂平板n快速诊断法对流免疫电泳SPA协同凝集试验脑膜炎奈瑟菌（脑膜炎奈瑟菌（N.meningitidis)脑膜炎奈瑟菌（脑膜炎奈瑟菌（N.meni

3、ngitidis)革兰阴性双球菌革兰阴性双球菌,肾形或豆形肾形或豆形生物学性状生物学性状形态染色：形态染色：G-，呈肾型，成双排列（凹面相对，凸面相，呈肾型，成双排列（凹面相对，凸面相背），有荚膜及菌毛背），有荚膜及菌毛 培养特性培养特性 营养要求较高，血平板或巧克力平板或卵黄双抗平板，营养要求较高，血平板或巧克力平板或卵黄双抗平板，形成光滑透明形成光滑透明“露滴样露滴样”菌落菌落专性需氧，专性需氧，510%CO2，35-37（40 30均不生均不生长）长）pH7.47.6易产生自溶酶易产生自溶酶生物学性状生物学性状n生化反应：氧化酶及触酶（生化反应：氧化酶及触酶（+），分解葡萄糖），分解葡萄

4、糖和麦芽糖和麦芽糖n抗原和分类：根据荚膜多糖群特异性抗原的不抗原和分类：根据荚膜多糖群特异性抗原的不同可分为同可分为13个血清群，根据膜蛋白不同，各血个血清群，根据膜蛋白不同，各血清群又可分为若干血清型清群又可分为若干血清型n抵抗力：很弱，对热、冷、干燥和消毒剂极度抵抗力：很弱，对热、冷、干燥和消毒剂极度敏感敏感脑膜炎奈瑟菌（脑膜炎奈瑟菌（N.meningitidis)氧化酶：氧化酶：+DNA酶：酶：-营养琼脂生长：营养琼脂生长：-葡萄糖：葡萄糖：+麦芽糖：麦芽糖：+脑膜炎接种两者关系两者关系培养特性的培养基为巧克力色血液琼脂平板n生化反应u除葡萄糖外，不分解其它糖类 TaizhouUnive

5、rsity与脑膜炎奈瑟菌相似，营养要求更高，只能在巧克力平板及专用培养基上生长，形成灰白色细小S型呈滴露样菌落主要菌体表u经常变异，相应抗体不能防止再感染n外膜蛋白uPI：主要外膜蛋白，将淋病奈瑟菌分为18个血清型uPII：吸附易感细菌的蛋白致病所致淋病绝大多数通过性接触感染，是重要的性传播疾病（sexually transmitted disease，STD）n新生儿淋球菌性结膜炎u“脓漏眼”微生物保湿、立即送检n直接涂片镜检n分离培养与鉴定u巧克力色培养基快速诊断法uELISA法、核酸杂交、PCR技术 TaizhouUniversity 生物学特性生物学特性 形态染色：与脑膜炎奈瑟菌相似，

6、形态染色：与脑膜炎奈瑟菌相似，G，双球菌，咖啡豆，双球菌，咖啡豆状，有荚膜和菌毛，无芽胞，无鞭毛状，有荚膜和菌毛，无芽胞，无鞭毛 脓汁标本中脓汁标本中 急性病人：细菌位于中性粒细胞内急性病人：细菌位于中性粒细胞内 慢性病人：细菌位于细胞外慢性病人：细菌位于细胞外 培养特性：与脑膜炎奈瑟菌相似，营养要求更高，只能在培养特性：与脑膜炎奈瑟菌相似，营养要求更高，只能在巧克力平板及专用培养基上生长，形成灰白色细小巧克力平板及专用培养基上生长，形成灰白色细小S型菌型菌落落 生化反应：氧化酶（生化反应：氧化酶（+），只分解葡萄糖，不分解麦芽糖），只分解葡萄糖，不分解麦芽糖（脑膜炎奈瑟菌分解麦芽糖）等其它糖

7、类（脑膜炎奈瑟菌分解麦芽糖）等其它糖类 抗原及分类：以外膜蛋白抗原分抗原及分类：以外膜蛋白抗原分16个血清型个血清型 抵抗力：极弱（与脑膜炎奈瑟菌相似）抵抗力：极弱（与脑膜炎奈瑟菌相似）淋病奈瑟菌淋病奈瑟菌 TaizhouUniversity淋病奈瑟菌鉴定依据淋病奈瑟菌鉴定依据：1.涂片染色为革兰阴涂片染色为革兰阴性双球菌；性双球菌；2.巧克力平板上为半巧克力平板上为半透明、灰白色、凸透明、灰白色、凸 起滴露状菌落；起滴露状菌落；3.氧化酶及触酶均阳氧化酶及触酶均阳性；性；4.只分解葡萄糖，产只分解葡萄糖，产酸不产气；酸不产气；5.血清学试验阳性。血清学试验阳性。防治当的两性关系n新生儿1%硝

8、酸银滴眼，或红霉素、四环素眼药膏n药物首选青霉素，但多有耐药性，应用新型青霉素族抗生素 TaizhouUniversity脑膜炎奈瑟菌与淋病奈瑟菌比较脑膜炎奈瑟菌与淋病奈瑟菌比较 TaizhouUniversity小 结化脓性球菌化脓性球菌 革兰阳性菌：葡萄球菌，链球菌，肺炎链革兰阳性菌：葡萄球菌，链球菌，肺炎链球菌球菌 革兰阴性菌：脑膜炎奈瑟菌，革兰阴性菌：脑膜炎奈瑟菌，淋病奈瑟菌淋病奈瑟菌N.gonorrhoeaeN.meningitidisS.pneumoniaestaphylococcusStreptococcus脓汁或脓汁或喉拭子喉拭子 涂片、革兰染色、镜检涂片、革兰染色、镜检血琼脂

9、平板血琼脂平板观察菌落特征观察菌落特征及溶血情况及溶血情况生化反应、致病力试验及药敏试验生化反应、致病力试验及药敏试验病原性球菌的鉴别病原性球菌的鉴别 由脑脊液标本中发现中性粒细胞内外有由脑脊液标本中发现中性粒细胞内外有G G-双球菌，可初步诊双球菌，可初步诊断为脑膜炎球菌断为脑膜炎球菌 由泌尿、生殖系统来源的标本中分离出的由泌尿、生殖系统来源的标本中分离出的G G-双球菌，可初步双球菌，可初步诊断为淋球菌诊断为淋球菌 37 24h葡萄球菌鉴别葡萄球菌鉴别 金黄色葡萄球菌金黄色葡萄球菌 表皮葡萄球菌表皮葡萄球菌 色素色素 金黄色金黄色 白色白色-溶血素溶血素 +-血浆凝固酶试验血浆凝固酶试验

10、+-耐热耐热DNA酶试验酶试验 +-甘露醇发酵试验甘露醇发酵试验 +-致病力致病力 强强 弱或无弱或无脓汁标本脓汁标本 找出两种菌落找出两种菌落 Gram染色染色 甘露醇发酵试验甘露醇发酵试验菌落小、半透明菌落小、半透明、表面光滑、边缘整齐表面光滑、边缘整齐G+、链状、链状 完全溶血完全溶血 不溶血不溶血 草绿色不完全溶血环草绿色不完全溶血环菊糖发酵试验菊糖发酵试验 -（紫色）（紫色）+（黄色）（黄色）胆汁溶菌试验胆汁溶菌试验 -（混浊）（混浊）+（澄清）（澄清）喉拭子标本喉拭子标本 找出两种菌落找出两种菌落 Gram染色染色痰培养肺炎链球菌检验全程报道姚军微生物检验1.痰涂片（肺炎链球菌镜下

11、）:1.痰涂片（肺炎链球菌镜下）:2.原始培养物18h后菌落（肺炎链球菌菌落）:2.原始培养物18h后菌落（肺炎链球菌菌落）:3.传代后的纯培养物:3.传代后的纯培养物:传代后的菌落直径较首代有些缩小了传代后的菌落直径较首代有些缩小了,菌落湿润程度也有些降低菌落湿润程度也有些降低,但仍然很湿润但仍然很湿润.4.Optochin抑制试验:抑菌环中也微弱的生长了些菌落抑菌环中也微弱的生长了些菌落,但经过涂片发现是口腔球菌但经过涂片发现是口腔球菌.可可能是做该试验的同事挑菌落的时候能是做该试验的同事挑菌落的时候,没把握好没把握好.把杂菌带进去了把杂菌带进去了.尽尽管如此管如此,抑菌环还是非常明显而宽

12、大抑菌环还是非常明显而宽大(22mm).5.生化反应:用的就是普通微量管用的就是普通微量管,在接种前滴加小牛血清在接种前滴加小牛血清1滴滴.5%CO2,35培养培养1824h后读取并记录结果后读取并记录结果.6.肺炎链球菌乳胶凝集试验：左边是测试，右边是阴性对照：7.药敏试验（K-B法）：7.药敏试验（K-B法）：TaizhouUniversity思考题 TaizhouUniversity一、填空题：TaizhouUniversity一、填空题：TaizhouUniversity二、是非题：TaizhouUniversity三、选择题：TaizhouUniversity三、选择题：TaizhouUniversity三、选择题：TaizhouUniversity三、选择题：TaizhouUniversity四、名词解释：1、血浆凝固酶 2、葡萄球菌A蛋白