结直肠癌Tiam1高表达与其启动子低甲基化相关课件.ppt

1、背景背景Tiam1:T淋巴瘤侵袭转移诱导因子淋巴瘤侵袭转移诱导因子1 1Tiam1与肿瘤与肿瘤的增殖、侵袭和转移的增殖、侵袭和转移Tiam1的表达调控机制尚未完全阐明的表达调控机制尚未完全阐明表观遗传学：表观遗传学：DNA异常甲基化异常甲基化 蓝色区域为蓝色区域为CpG岛，该岛，该CpG岛长岛长2183bp，跨越启动子和，跨越启动子和第一外显子，存在第一外显子，存在256个个CpG位点位点Tiam1基因基因5端端CpG岛预测岛预测 去甲基化药物处理HT29细胞前后Tiam1 mRNA表达1.SW620 2.HT29(5-aza-dC)3.HT29(对照)C.空白对照GAPDH(580bp)Ti

2、am1(252bp)marker 1 2 3 c.116例配对结直肠癌组织中Tiam1蛋白的表达Tiam1蛋白在结直肠癌配对组织中的表达分布蛋白在结直肠癌配对组织中的表达分布*Z=-4.608，P0.000#Z-3.115，P0.002 Z-2.584，P0.01 Tiam1蛋白表达与结直肠癌转移的关系 Tiam1蛋白在癌组织中的表达与临床病理资料之间的关系.结直肠癌组织中结直肠癌组织中Tiam1基因异常甲基化的研究基因异常甲基化的研究 MSP原理原理 C M U 2n 2t 12n 12t 31n 31t 48n 48t 83n83t116n116tmu 2 12 31 48 83 116n

3、t部分配对组织中Tiam1 DNA甲基化及其蛋白表达情况MSP扩增产物测序部分结果扩增产物测序部分结果 umoo.未转化的原始序列 m.甲基化引物扩增产物 u.未甲基化引物扩增产物Z=-2.244,P=0.025 r=-0.494,P0.001116例配对组织中Tiam1基因的甲基化状况 232例组织中Tiam1蛋白表达与甲基化之间的相关性 肿瘤组织Tiam1甲基化状态与临床病理资料之间的关系.结直肠癌细胞株中结直肠癌细胞株中Tiam1基因异常甲基化的研究基因异常甲基化的研究Tiam1高高表达结直肠癌细胞株：表达结直肠癌细胞株：LoVo细胞、细胞、SW620细胞细胞Tiam1低低表达结直肠癌细

4、胞株：表达结直肠癌细胞株：LS174T细胞细胞Tiam1不不表达结直肠癌细胞株：表达结直肠癌细胞株：HT29 细胞细胞5-aza-dC处理对处理对Tiam1 mRNA在在HT29及及LS174T中表达的影响中表达的影响GAPDH(580bp)Tiam1(252bp)1 2 3 4 c markerLS174T(+)LS174T(-)HT29(+)HT29(-)5-aza-dC5-aza-dC（+）X2005-aza-dC（-）X200免疫细胞化学检测5-aza-dC处理对HT29细胞中Tiam1蛋白表达的影响免疫细胞化学检测5-aza-dC处理对LS174T细胞中Tiam1蛋白表达的影响5-a

5、za-dC（-）X2005-aza-dC（+）X2001.SW620 2.HT29 3.HT29(5-aza-dC)4.SW620 5.LS174T 6.LS174T(5-aza-dC)1 2 34 5 6GAPDHTiam1Western blot法检测5-aza-dC处理对HT29、LS174T细胞中Tiam1蛋白表达的影响结论结论1.Tiam1是一种促进结直肠癌增殖及转移的重是一种促进结直肠癌增殖及转移的重要基因要基因2.DNA异常甲基化可能是结直肠癌异常甲基化可能是结直肠癌Tiam1基因基因表达改变的重要调控机制之一表达改变的重要调控机制之一 致谢：丁彦青教授李建明教授金贺博士张香梅博士李婷婷硕士