结核感染T细胞检测呼吸科课件.pptx

1、contents目录目录1.1.结核病的诊断现状结核病的诊断现状2.TB-IGRA2.TB-IGRA产品介绍产品介绍3.TB-IGRA3.TB-IGRA的临床应用的临床应用4.TB-IGRA4.TB-IGRA检测方法及结果解释检测方法及结果解释3结核病结核病(tuberculosis)是由结核分枝杆菌(tubercle bacillus)引起的一种慢性肉芽肿性炎。以肺结核最常见，死亡人数仅次于艾滋病。也可见于全可见于全身各器官身各器官。肺外结核肺外结核占整个发病率的10%-20%10%-20%，死亡率，死亡率占结核病全部死亡率的14.1%-17.6%14.1%-17.6%。全世界约三分之一的人

2、群感染，2014年全球结核病报告显示：2013年有900万新发病例，150万人死亡。中国是结核病高发区中国是结核病高发区，发病数居全球第二发病数居全球第二，现有600万活动性肺结核，且患者人数逐年增加，始终位居全国甲乙类传染病的前列。电镜下的结核杆菌电镜下的结核杆菌LTBI结核分枝杆菌（MTB）暴露感染自愈自愈90%不发展为结核病不发展为结核病Latency 2-5%疾病进展疾病进展1%活动性结核病活动性结核病细菌全部被清除细菌全部被清除一直存在活菌一直存在活菌需预防性服药不需要预防性服药Latency 潜伏潜伏9%复燃复燃注：感染后发病与否和机体易感性有关！注：感染后发病与否和机体易感性有关

3、！5-10%HIV10%治愈治愈l活动性结核：发病状态l潜伏性结核感染（LTBI）：是宿主感染结核杆菌后尚未发病的一种特殊状态未根治未根治COPD合并肺结核的特点结核症状不典型结核症状不典型老年男性为多，男性为女性7倍之多痰结核菌检查涂片或培养阳性率70%PPD呈呈阴性或弱阳，结核抗体亦呈阴性或阳性呈呈阴性或弱阳，结核抗体亦呈阴性或阳性X线胸片不典型，线胸片不典型，类似于一般炎症而常被误诊对对COPDCOPD合并肺结核诊断的延误，导致治疗不及时，易造成：合并肺结核诊断的延误，导致治疗不及时，易造成：1.1.肺部病灶痰菌量增加，传染性扩大肺部病灶痰菌量增加，传染性扩大2.2.病人体质进一步消耗，

4、抗结核药物耐受能力差，不良反应加大病人体质进一步消耗，抗结核药物耐受能力差，不良反应加大3.3.免疫力进一步下降，痰菌阴转率降低，耐药菌增加免疫力进一步下降，痰菌阴转率降低，耐药菌增加4.4.病情迅速恶化，甚至危及生命，死亡率增加病情迅速恶化，甚至危及生命，死亡率增加大量流行病学资料发现，矽肺患者合并结核发生率为10%30%。矽肺患者的肺结核患病率为全国平均肺结核患病率的3.1628倍。潜伏性结核感染的诊断潜伏性结核感染的诊断u皮肤结核菌素试验皮肤结核菌素试验（TSTTST）10mm10mmu 干扰素释放试验（干扰素释放试验（IGRAsIGRAs）潜伏性结核感染潜伏性结核感染 免疫学检测阳性，

5、显示结核感染 体内有活的结核分枝杆菌，但非活动型 无疾病和症状 不传播给他人 给予药物，防止发展为活动性结核活动性结核活动性结核结核诊断结核诊断u 影像学方法影像学方法u 细菌学方法细菌学方法u 病理学方法病理学方法u 免疫学方法免疫学方法有临床症状或影像学改变具传染性主要的传播源需及时治疗APCT cell细胞因子活化/细胞因子细胞因子ELISAELISPOT流式细胞术流式细胞术细胞因子活化标志物IGRAsIFN-g release assayTNFaIFNgCK体外刺激：体外刺激：RD1RD1抗原抗原 原理原理:机体内被结核菌抗原致敏的效效应应T细胞细胞，在体外受到相同抗原的刺激（在APC

6、辅助下）后，会分泌大量IFN-(细胞因子)。通过IFN-的检测，判断结核感染情况。TNFaIFNgCKTB-IGRATB-IGRA快速简便快速简便，是一种值得推广的检测方法：，是一种值得推广的检测方法：国内外相关国内外相关研究研究国内文章国内文章sensitivitysensitivity结核分枝杆菌结核分枝杆菌-干扰素体外释放定量试验诊断结核感染的临床应用干扰素体外释放定量试验诊断结核感染的临床应用90.2490.24%（74/8274/82）TB-IGRATB-IGRA与与TSTTST检测菌培阳性肺结核患者比较检测菌培阳性肺结核患者比较80.380.3%（118/147)118/147)-

7、干扰素释放试验诊断结核分枝杆菌感染的临床意义干扰素释放试验诊断结核分枝杆菌感染的临床意义88.6488.64%（39/4539/45）结核分枝杆菌相关结核分枝杆菌相关-干扰素体外释放试验在结核病诊断中的应用价值干扰素体外释放试验在结核病诊断中的应用价值90.790.7%（243/268243/268）两种结核分枝杆菌相关两种结核分枝杆菌相关-干扰素定量检测试剂盒检测结核分枝杆菌感染结果比较研究干扰素定量检测试剂盒检测结核分枝杆菌感染结果比较研究90.990.9%（290/319290/319）体外释放酶联免疫法检测结核杆菌体外释放酶联免疫法检测结核杆菌-干扰素的实验研究干扰素的实验研究89.1

8、189.11%（90/10190/101）干扰素释放酶联免疫法（干扰素释放酶联免疫法（TB-IGRATB-IGRA）用于检测结核分枝杆菌的优越性）用于检测结核分枝杆菌的优越性96.12%(99/103)96.12%(99/103)体外体外-干扰素检测结核分枝杆菌不同方法的应用价值比较干扰素检测结核分枝杆菌不同方法的应用价值比较90.1%(308/34290.1%(308/342干扰素体外释放酶联免疫法在结核潜伏感染诊断中的价值干扰素体外释放酶联免疫法在结核潜伏感染诊断中的价值88.6%(39/44)88.6%(39/44)国外同类试剂国外同类试剂优势优势A Three-Way Comparis

9、on of Tuberculin Skin Testing,QuantiFERON-TB Gold and T-A Three-Way Comparison of Tuberculin Skin Testing,QuantiFERON-TB Gold and T-SPOT.TB in ChildrenSPOT.TB in ChildrenLatent TBLatent TB检出高检出高Positive Tuberculin Skin Test or Interferon-Gamma Release Assay in Patients Positive Tuberculin Skin Test

10、or Interferon-Gamma Release Assay in Patients with Radiographic Lesions Suggesting Old Healed Tuberculosiswith Radiographic Lesions Suggesting Old Healed TuberculosisLatent TBLatent TB检出高检出高Estimating diagnostic accuracy of tests for latent tuberculosis infection Estimating diagnostic accuracy of te

11、sts for latent tuberculosis infection without a gold standard among healthcare workerswithout a gold standard among healthcare workers特异性特异性93.6%93.6%Clinical Utility of Interferon Gamma Assay in the Diagnosis of TuberculosisClinical Utility of Interferon Gamma Assay in the Diagnosis of Tuberculosis

12、灵敏度灵敏度90%,90%,特异性特异性97%97%11整理课件廖明等对比了血IGRAIGRA、TST、抗酸杆菌、结核抗体在SCTB中的检测性能：敏感度分别为94.4%94.4%、52.8%、38.9%、41.7%；阴性预测值分别为91.7%91.7%、52.8%、48.8%、55.3%IGRAIGRA在矽肺合并结核病中的应用在矽肺合并结核病中的应用12整理课件IGRAIGRA方法辅助诊断结核性胸膜炎：方法辅助诊断结核性胸膜炎：天津市海河医院，124例受试者，包括健康对照者30名、初诊结核性胸膜炎患者37例、恶性胸腔积液患者32例、非结核性胸膜炎患者25例。结论：用结论：用IGRA方法对结核性

13、胸膜炎诊断的敏感方法对结核性胸膜炎诊断的敏感性、特异性和诊断准确率分别为性、特异性和诊断准确率分别为91.9、90.6、91.3，优于，优于ADA和和TB-Ab。17临床应用案例临床应用案例MTBMTB与与NTMNTM的的鉴别诊断：鉴别诊断：某院感染科病人，男 临床临床症状：症状：发热1周，咳嗽，少量痰 检测结果：检测结果：两次痰涂片（两次痰涂片（+），两次），两次TB-IGRATB-IGRA（-），肺部），肺部X X射线射线无异常，后经菌培鉴定为菌培（无异常，后经菌培鉴定为菌培（-）结果结果分析：分析：痰涂片不能区分非结核分枝杆菌，造成假阳性，而TB-IGRA与菌培结果相符，对结核分枝杆菌有

14、很好的特异性。临床诊断：临床诊断：鸟型分枝杆菌感染鸟型分枝杆菌感染发病率发病率/100.000 患者患者/年年Dixon W G et al.Ann Rheum Dis 2010;69:522528.Tubach et al.Arthritis&Rheum 2009;60:1884-1894发病率发病率/100.000 患者患者/年年某中学高三年级小规模结核爆发初始病例1例（7班）6月初第一批疫情5例（7班）8-9月第二批疫情10例（8例7班）9月对师生采血进行IGRA检测IGRA阳性者进行预防性服药疫情控制疫情控制自行住院全年级师生胸透，胸透阴影预防性服药全年级师生PPD试验疫情发展阶段疫情

15、发展阶段结核病例及分布结核病例及分布疫情时间疫情时间疫情初处理疫情初处理l一起小规模结核暴发流行的调查与控制潜伏性感染、抗结核治疗监控潜伏性感染、抗结核治疗监控定量检测定量检测干扰素释放强度，可用于持续监控：干扰素释放强度，可用于持续监控：国内潜伏性感染人群占结核感染人群国内潜伏性感染人群占结核感染人群40%40%以上；以上；无干预情况下无干预情况下2 2年内发展成活动性结核的比例为年内发展成活动性结核的比例为5%-10%5%-10%；使用使用IGRAsIGRAs可以有效发现潜伏性感染，通过定量检测可以有效发现潜伏性感染，通过定量检测IGRAsIGRAs强度，可以监控病人病情发展状态，防治潜伏

16、性感强度，可以监控病人病情发展状态，防治潜伏性感染发展成为活动性结核。染发展成为活动性结核。潜伏性潜伏性感染感染 耐药结核比例逐渐增加，主要由于抗结核治疗不规范；耐药结核比例逐渐增加，主要由于抗结核治疗不规范；TB-IGRATB-IGRA具有宽泛的具有宽泛的 干扰素定量量程，可跟踪抗结核治干扰素定量量程，可跟踪抗结核治疗效果，为临床治疗方案调整做参考。疗效果，为临床治疗方案调整做参考。抗结核抗结核治疗治疗23整理课件 治疗开始后，结核患者中IGRA的敏感性和反应强度均有明显的下降趋势n综上，综上，TB-IGRATB-IGRA：高特异性，高灵敏性，体外，全血，定量检测高特异性，高灵敏性，体外，全

17、血，定量检测n应用方向：应用方向：n肺结核辅助诊断肺结核辅助诊断n肺外结核辅助诊断肺外结核辅助诊断n结核感染排查结核感染排查n潜伏性感染监控，抗结核治疗追踪潜伏性感染监控，抗结核治疗追踪 肺结核的辅助诊断，尤其是细菌学检测阴性的肺结核的辅助诊断：TB-IGRA从细胞水平上检测结核感染，检出率高，早期感染即可检出，实现早诊断早治疗。肺外结核的辅助诊断：TB-IGRA取静脉血进行检测，克服肺外结核患者痰样找不到结核菌，病灶部位取样难的问题。呼吸系统疾病与结核的鉴别诊断：发热、咳嗽、咳痰2周；咯血；胸痛等症状疑似结核，胸片/CT不能明确诊断者；抗炎治疗治疗效果不佳患者的结核排查，阴性结果在很大程度上

18、可以排除结核。2周以上不明原因发热病人的结核感染排查：有研究发现其中20%是结核引起的，大部分是肺外结核。高危人群的结核感染筛查：如使用生物制剂/免疫抑制剂、大剂量激素患者，HIV患者，糖尿病患者，血液病和癌症放化疗之前患者进行结核筛查，以防陈旧性结核、潜伏性结核爆发以及近期结核感染。抗结核治疗效果跟踪以及潜伏性结核定期监控：TB-IGRA结果是一个定量值，活动性结核患者随治疗进行阳性强度降低甚至转阴；潜伏感染患者若发生阳性强度明显升高，有发展成活动性结核风险。流调显示有85%90%新诊断的活动性肺结核由潜伏性结核演变而来。国家传染病诊断试剂与疫苗工程技术研究中心TB-IGRATB-IGRA检

19、测方法检测方法阴性对照管阴性对照管NN阳性对照管阳性对照管P P检测管检测管T T培养液培养液无刺激原无刺激原培养液培养液刺激抗原刺激抗原培养液培养液PHAPHATB特异性特异性刺激抗原刺激抗原（RD1区：区：ESAT-6、CFP-10）无刺激效应无刺激效应非特异性非特异性刺激抗原刺激抗原（PHAPHA）评估评估-IFNIFN升高水平升高水平评估评估-IFNIFN本底水平本底水平评估评估T T淋巴淋巴细胞活性细胞活性ELISAELISA定量分析定量分析T：测试培养管（T）含量值N：本底对照培养管（N）含量值P：阳性对照培养管（P）含量值 TB-IGRATB-IGRA结果判定结果判定TB-IGR

20、ATB-IGRA检验报告单检验报告单n采血管推荐使用采血管推荐使用BDBD或或Greiner Bio-OneGreiner Bio-One肝素锂采血管，内毒素最肝素锂采血管，内毒素最少，对结果影响最小少，对结果影响最小n采血到分装不超过采血到分装不超过4 4小时，避免混血激烈小时，避免混血激烈/溶血等溶血等n病人情况病人情况 n免疫系统异常患者检出效果受限n不能严格区分活动或潜伏不能严格区分活动或潜伏n无症状阳性的处理无症状阳性的处理 n依据下一步治疗和病人意愿做预防性治疗n不确定结果的原因不确定结果的原因 n免疫系统异常患者容易因免疫力低下或干扰素本底过高造成无法判断TB-IGRA的临床参考的临床参考高灵敏度：高灵敏度：肺内、肺外结核辅助诊断，尤其可用于涂/菌阴肺结核的辅助诊断；高特异性：高特异性：排除卡介苗及非结核分枝杆菌的干扰，降低假阳性；体外全血检测：体外全血检测：有效检出肺外结核，并发现早期感染者；定量分析：定量分析：可进行疗效的辅助评估；采用酶免平台，具有高通量检测能力，简便快捷，采用酶免平台，具有高通量检测能力，简便快捷，无需对技术人员进行专业培训。无需对技术人员进行专业培训。