酶联免疫吸附测定法在课件.ppt

1、2023-1-19酶联免疫吸附测定法在酶联免疫吸附测定法在酶联免疫吸附测定法在酶联免疫吸附测定法在酶联免疫吸附测定法在酶联免疫吸附测定法在酶联免疫吸附测定法在酶联免疫吸附测定法在酶联免疫吸附测定法在酶联免疫吸附测定法在酶联免疫吸附测定法在酶联免疫吸附测定法在酶联免疫吸附测定法在酶联免疫吸附测定法在酶联免疫吸附测定法在酶联免疫吸附测定法在酶联免疫吸附测定法在竞争法竞争法ELISA原理（图原理（图2-18）如图所示.在进行测定时首先将包被了抗体的酶标板的微孔分为测定孔和对照孔，在对照孔中加入已知浓度的系列标准品溶液和酶标记物；在测定孔中同时加入酶标记物和待检样本（抗原），酶标记物和样品互相竞争包被

2、抗体的结合点，形成酶标记的抗原抗体复合物固定在微孔内，没有吸附的酶标记物通过洗涤去除，加入底物溶液于微孔中，复合物上的酶催化底物使其水解、氧化还原成为有色的产物。当测定孔内的样本不含抗原时，固相上的抗体将和酶标记物结合加入底物后呈色较深，当样本含有抗原时，样本中的抗原和酶标记物共同竞争抗体的结合位点，酶标抗原的比例越高，结合在固相抗体上的酶标抗原就越多，酶标抗原的比例越低，结合在固相上的抗体就越少，而在一定的条件下，复合物上酶的量（也反映了固定化的抗原抗体复合物的量）和酶产物呈现的色泽成正比，因此可以用分光光度计进行测定，从而计算出参与反应的抗原和抗体的量，从而进一步得知样本中抗原的多少。这就

3、是竞争法ELISA的原理。測定孔EEEEE酶标记物底物溶液对照孔EEEEEEEEEEEEEE酶标记物底物溶液參考液(不含抗原)EE樣本(含抗原)酶联免疫吸附测定法在酶联免疫吸附测定法在酶联免疫吸附测定法在酶联免疫吸附测定法在酶联免疫吸附测定法在酶联免疫吸附测定法在酶联免疫吸附测定法在作酶联免疫吸附测定法在酶联免疫吸附测定法在酶联免疫吸附测定法在酶联免疫吸附测定法在酶联免疫吸附测定法在酶联免疫吸附测定法在酶联免疫吸附测定法在）酶联免疫吸附测定法在，酶联免疫吸附测定法在，酶联免疫吸附测定法在酶联免疫吸附测定法在酶联免疫吸附测定法在酶联免疫吸附测定法在酶联免疫吸附测定法在使酶联免疫吸附测定法在酶联免

4、疫吸附测定法在酶联免疫吸附测定法在酶联免疫吸附测定法在酶联免疫吸附测定法在、酶联免疫吸附测定法在酶联免疫吸附测定法在酶联免疫吸附测定法在酶联免疫吸附测定法在免疫层析快速免疫层析快速检测试纸结构及检测试纸结构及原理原理如图所示：将样本加到如图所示：将样本加到S S区后，由于层析作用样本会进入区后，由于层析作用样本会进入B B区和区和B B区的金标抗体发生免疫反应，再层析到区的金标抗体发生免疫反应，再层析到T T线位置时，线位置时，如果如果样本中含有待测抗原则在样本中含有待测抗原则在B B区时将同金标抗体结合，金标抗体上的位点将被其占据，再到区时将同金标抗体结合，金标抗体上的位点将被其占据，再到T

5、 T位置时就无空余的位置时就无空余的位点和测试线上的抗原结合，故位点和测试线上的抗原结合，故T T线不显色或显色很淡，线不显色或显色很淡，C C线显色，这样得到的是阳性结果。当待测样本中不含抗线显色，这样得到的是阳性结果。当待测样本中不含抗原时，样本与金标抗体不反应，再层析到原时，样本与金标抗体不反应，再层析到T T线位置时，固定在线位置时，固定在NCNC膜上的抗原会膜上的抗原会“捕捉捕捉”金标抗体复合物，故金标抗体复合物，故T T线显色，线显色，C C线线也显色，得到阴性结果。当无也显色，得到阴性结果。当无T T线时，表示测试效。线时，表示测试效。SBTCD酶联免疫吸附测定法在2023-1-19酶联免疫吸附测定法在