血红蛋白的提取和分离试用课件.ppt

1、医学医学ppt1医学医学ppt2医学医学ppt3医学医学ppt4医学医学ppt5医学医学ppt6医学医学ppt7医学医学ppt8医学医学ppt9医学医学ppt10医学医学ppt11医学医学ppt12医学医学ppt13医学医学ppt14医学医学ppt15如何证明色谱法获得的蛋白质是目的蛋白？如何证明色谱法获得的蛋白质是目的蛋白？医学医学ppt16带电粒子在电场作用下发生迁移的过程。带电粒子在电场作用下发生迁移的过程。许多重要的生物大分子，如多肽、许多重要的生物大分子，如多肽、核酸等都具有可解离的基团，在一定的核酸等都具有可解离的基团，在一定的PHPH下，这下，这些基团会带上正电或负电。些基团会带

2、上正电或负电。在电场的作用下，这些带电分子会向着与其所在电场的作用下，这些带电分子会向着与其所带电荷相反的电极移动。带电荷相反的电极移动。电泳利用了待分离样品中各种分子带电性质的电泳利用了待分离样品中各种分子带电性质的差异以及分子本身的大小，形状的不同，使带电差异以及分子本身的大小，形状的不同，使带电分子产生不同的迁移速度，从而实现样品中各种分子产生不同的迁移速度，从而实现样品中各种分子的分离分子的分离。医学医学ppt17琼脂糖琼脂糖凝胶电泳、凝胶电泳、聚丙稀酰胺聚丙稀酰胺凝胶电泳。凝胶电泳。医学医学ppt18 1 1、在测定蛋白质分子量时常用、在测定蛋白质分子量时常用十二烷基硫酸十二烷基硫酸

3、钠（钠（SDSSDS）聚丙烯酰胺凝胶电泳。聚丙烯酰胺凝胶电泳。聚丙烯酰胺凝聚丙烯酰胺凝胶是由单体丙烯酰胺和交联剂胶是由单体丙烯酰胺和交联剂N,NN,N-亚甲基双丙亚甲基双丙烯酰胺在烯酰胺在引发剂引发剂和和催化剂催化剂的作用下聚合交联成的的作用下聚合交联成的具有三维网状结构的凝胶。具有三维网状结构的凝胶。N,N-亚甲基双丙烯酰胺（形成交联）亚甲基双丙烯酰胺（形成交联）丙烯酰胺和交联剂丙烯酰胺和交联剂N,N-亚甲基双丙烯酰胺的交联共聚反应亚甲基双丙烯酰胺的交联共聚反应医学医学ppt19医学医学ppt20医学医学ppt21医学医学ppt22医学医学ppt23医学医学ppt24血每个肽链环绕一个每个肽

4、链环绕一个亚铁血红素亚铁血红素基团，基团，此基团可携带此基团可携带一分子氧一分子氧或一分子二氧化碳，或一分子二氧化碳，血红蛋白血红蛋白因含有因含有血红素血红素而呈而呈红色。红色。医学医学ppt25医学医学ppt26医学医学ppt27医学医学ppt28初次离心后的结果医学医学ppt293次洗涤后的结果医学医学ppt30医学医学ppt31医学医学ppt32医学医学ppt33医学医学ppt34医学医学ppt35利用透析袋透析医学医学ppt36医学医学ppt37医学医学ppt38医学医学ppt39医学医学ppt40医学医学ppt41医学医学ppt42医学医学ppt43医学医学ppt44医学医学ppt4

5、5医学医学ppt46医学医学ppt47开始进行层析开始进行层析医学医学ppt48收集得到的纯化后的蛋白医学医学ppt49医学医学ppt50医学医学ppt51医学医学ppt52医学医学ppt53医学医学ppt54医学医学ppt55医学医学ppt561.红细胞的洗涤：红细胞的洗涤：洗涤次数不能过少；低速、短时离心。洗涤次数不能过少；低速、短时离心。2.凝胶的预处理：凝胶的预处理：沸水浴法时间短，还能除去微生物和沸水浴法时间短，还能除去微生物和气泡气泡3.色谱柱的装填：色谱柱的装填：装填尽量紧密，降低颗粒间隙；无气装填尽量紧密，降低颗粒间隙；无气泡；洗脱液不能断流。泡；洗脱液不能断流。4.色谱柱成功

6、标志：色谱柱成功标志：红色区带均匀一致红色区带均匀一致地移动。地移动。注意事项注意事项医学医学ppt57教学反馈教学反馈 1凝胶色谱法是根据（凝胶色谱法是根据（）分离蛋白质的有效方法。）分离蛋白质的有效方法。A分子的大小分子的大小 B相对分子质量的大小相对分子质量的大小 C带电荷的多少带电荷的多少 D溶解度溶解度2缓冲液的作用是：在一定范围内，抵制外界的影响来缓冲液的作用是：在一定范围内，抵制外界的影响来维持（维持（）基本不变。）基本不变。A温度温度 B pH C渗透压渗透压 D氧气浓度氧气浓度3电泳是指带电粒子在电场的作用下向着与其所带电荷电泳是指带电粒子在电场的作用下向着与其所带电荷（）的

7、电极移动。）的电极移动。A相同相同 B相反相反 C相对相对 D相向相向4.哺乳动物和人的成熟的红细胞中的（哺乳动物和人的成熟的红细胞中的（）与氧气的）与氧气的运输有关。运输有关。A血红蛋白血红蛋白 B肌红蛋白肌红蛋白 C肌动蛋白肌动蛋白 D肌球蛋白肌球蛋白BBBA医学医学ppt585血液由血浆和各种血细胞组成，其中（血液由血浆和各种血细胞组成，其中（）的含量最多。的含量最多。A白细胞白细胞 B血小板血小板 C红细胞红细胞 D淋巴细胞淋巴细胞6为防止血液凝固，在采血容器中要预先加入抗为防止血液凝固，在采血容器中要预先加入抗凝血剂（凝血剂（）。）。A.NaCl B.甲苯甲苯 C.蒸馏水蒸馏水 D.柠檬酸钠柠檬酸钠7将搅拌好的混合液转移到离心管中，离心后，将搅拌好的混合液转移到离心管中，离心后，可以明显看到试管中的溶液分为可以明显看到试管中的溶液分为4层，层，其其中第中第3层是（层是（）A无色透明的甲苯层无色透明的甲苯层 B脂溶性物质的沉淀层脂溶性物质的沉淀层 C血红蛋白的水溶液血红蛋白的水溶液 D其他杂质的暗红色沉淀物其他杂质的暗红色沉淀物CDC医学医学ppt59影响蛋白质分子运动速度的因素影响蛋白质分子运动速度的因素