血小板血型系统及检测技术-课件.ppt

1、单击此处编辑母版标题样式2023-1-181五、交叉配血五、交叉配血(Matchcross Blood)2023-1-182交叉配血交叉配血(Matchcross Blood)一、交叉配血的概念交叉配血的概念 交叉配血实验也称配合性实验，实际上是交叉配血实验也称配合性实验，实际上是检查不配合性。检查患者和献血员之间是检查不配合性。检查患者和献血员之间是否有对应的抗原、抗体存在否有对应的抗原、抗体存在。1.主侧交叉配血主侧交叉配血 供血者的红细胞与受血者的供血者的红细胞与受血者的血清反应血清反应2.次侧交叉配血次侧交叉配血 受血者的红细胞与供血者的受血者的红细胞与供血者的血清反应血清反应3.自身

2、对照自身对照 受血者红细胞与自身血清反应，受血者红细胞与自身血清反应，排除自身抗体，排除自身抗体，DAT+，假凝集等干扰，假凝集等干扰2023-1-1832023-1-184交叉配血交叉配血(Matchcross Blood)二，交叉配血的方法交叉配血的方法 1.只能检出不配合的完全抗体 盐水介盐水介质法质法 2.可检出不配合的不完全抗体 抗人球抗人球蛋白法蛋白法 蛋白酶法蛋白酶法 低离子介质法低离子介质法等 3.改良的交叉配血方法改良的交叉配血方法2023-1-185交叉配血交叉配血(Matchcross Blood)聚凝胺（聚凝胺（Polybrene)配血法配血法 利用高价阳离子的多聚季氨

3、盐溶解后利用高价阳离子的多聚季氨盐溶解后产生的大量正电荷可中和红细胞表面产生的大量正电荷可中和红细胞表面的负电荷缩小其之间的距离的负电荷缩小其之间的距离 微柱凝胶配血法（卡式配血法）微柱凝胶配血法（卡式配血法）2023-1-186几种交叉配血试验的方法学评价几种交叉配血试验的方法学评价配血方法配血方法 缺点缺点 优点优点 盐水配血试验盐水配血试验 简单、快速简单、快速 检不出检不出IgGIgG酶介质试验酶介质试验 简便、经济简便、经济 准确性、稳定性准确性、稳定性差差抗球蛋白试验抗球蛋白试验 准确、可靠准确、可靠 复杂、费时复杂、费时、贵、贵凝聚胺试验凝聚胺试验 快速、准确快速、准确 需特殊试

4、剂需特殊试剂微柱凝胶试验微柱凝胶试验 灵敏灵敏 成本高成本高2023-1-187交叉配血交叉配血(Matchcross Blood)三，交叉配血不合的原因三，交叉配血不合的原因（一）主侧不合：（一）主侧不合：Rs+Dc 1.不规则抗体不规则抗体 有同种抗体或自身抗体有同种抗体或自身抗体 2.冷凝集冷凝集 3.假凝集假凝集 4.A2抗抗A1(1%-8%A2,22%A2B个体有抗个体有抗-A1)5.Dc的的DAT+2023-1-188交叉配血交叉配血(Matchcross Blood)（二二）次侧不合：次侧不合：Pc+Ds1.Pc做做DAT：阳性见于自身抗体，输血反应阳性见于自身抗体，输血反应2.

5、Ds中有不规则抗体中有不规则抗体3.忽略忽略ABO亚型误定血型亚型误定血型4.冷凝集素吸附于冷凝集素吸附于Pc5.异型输血异型输血2023-1-189四，交叉配血的注意事项四，交叉配血的注意事项1.离心离心时间与速度时间与速度2.水温箱的温度水温箱的温度373.水质水质，离子影响离子影响4.用新鲜的标本用新鲜的标本5.做抗人球实验时最好用血清做抗人球实验时最好用血清6.注意输血史，妊娠史注意输血史，妊娠史7.注意溶血的结果，被检血清中含有溶血性注意溶血的结果，被检血清中含有溶血性抗体，红细胞抗原抗体，红细胞抗原+2023-1-1810 我们何其幸运我们何其幸运 无法确知无法确知 自己生活在什么

6、样的世界自己生活在什么样的世界 were extremely fortunate not to know precisely the kind of world we live in.辛波丝卡辛波丝卡 were extremely fortunate 我们何其幸运我们何其幸运2023-1-18112023-1-18122023-1-18132023-1-1814Chromosome 6DPDQDRBCAClass IIClass I存在存在HLA-AHLA-A和和B B位点的抗原位点的抗原HLA-CHLA-C位点的抗原位点的抗原未发现未发现HLA-DPHLA-DP、DQDQ和和DRDR等位点抗

7、原等位点抗原2023-1-1815 人类血小板抗原人类血小板抗原（human platelet antigen，）血小板特有的血小板特有的,其他组织细胞没有其他组织细胞没有 表现血小板独特的遗传多态性表现血小板独特的遗传多态性 均存在于血小板膜糖蛋白（均存在于血小板膜糖蛋白（GP）上）上122023-1-1816 在系统前冠以在系统前冠以HPA，即人类血小板抗原（，即人类血小板抗原（human platelet antigen）英文缩写）英文缩写 按发现顺序用数字编号按发现顺序用数字编号 只有在共显性双等位基因全被检测出来后，才能被称为只有在共显性双等位基因全被检测出来后，才能被称为系统，对偶

8、抗原按其在人群中频率由高到低，用字母命系统，对偶抗原按其在人群中频率由高到低，用字母命名，高的为名，高的为a，低的为，低的为b 尚未发现对偶抗原的，给予暂时命名，在等位基因数字尚未发现对偶抗原的，给予暂时命名，在等位基因数字后加后缀后加后缀w表示表示2023-1-18172023-1-1818 产生机理：机体对血小板表面或相关抗原免疫产生机理：机体对血小板表面或相关抗原免疫 临床分类：血循环中的游离抗体临床分类：血循环中的游离抗体 结合于血小板上的抗结合于血小板上的抗体体(PAIgG)血型学分类：血型学分类：血小板同种抗体血小板同种抗体：抗体不是针对自身抗原，而是与同种异基因的红抗体不是针对自

9、身抗原，而是与同种异基因的红细胞发生反应细胞发生反应 自身抗体自身抗体：受血者体内产生的抗体，针对自己本身的红细胞抗原。受血者体内产生的抗体，针对自己本身的红细胞抗原。见于见于：血小板输注治疗无效；同种免疫血小板：血小板输注治疗无效；同种免疫血小板 减少症；自身免疫减少症；自身免疫血小板减少症；药物、病毒、细菌引起的血小板减少症血小板减少症；药物、病毒、细菌引起的血小板减少症2023-1-1819 血小板表面存在众多复杂抗原，因此反复大量输注血小血小板表面存在众多复杂抗原，因此反复大量输注血小板的患者约板的患者约50%以上产生血小板同种抗体以上产生血小板同种抗体 据报道据报道HLA抗体占多数，

10、约抗体占多数，约80%左右左右 HPA抗体单独存在频率较低（抗体单独存在频率较低（2%-3%）HPA抗体与抗体与HLA抗体共存（抗体共存（18%左右）左右）必须首先识别并去除血清中存在的必须首先识别并去除血清中存在的HLA抗体，才能分析抗体，才能分析血小板抗体的特异性血小板抗体的特异性2023-1-1820鉴别有无鉴别有无HLAHLA抗体存在的方法抗体存在的方法 淋巴细胞毒试验淋巴细胞毒试验:抗原抗体抗原抗体反应在反应在补体补体参与下破坏参与下破坏LCLC，活活OROR死细胞死细胞染色鉴别染色鉴别 混合淋巴细胞培养混合淋巴细胞培养：两个无关两个无关LCLC体外培养，体外培养，MHCMHC不同，

11、不同，刺激增殖刺激增殖。计数转化后的母细胞或者被摄取的。计数转化后的母细胞或者被摄取的DNADNA量判定量判定除去血小板表面除去血小板表面HLAHLA抗原方法抗原方法 00氯喹或酸溶液处理血小板氯喹或酸溶液处理血小板2023-1-1821 血小板输注无效血小板输注无效 输血后紫癜输血后紫癜 新生儿同种免疫性血小板减少性紫癜新生儿同种免疫性血小板减少性紫癜 血小板的自身免疫作用血小板的自身免疫作用2023-1-1822（，2023-1-18232023-1-1824 HLAHLADICDIC2023-1-18252023-1-1826临床临床:出血趋势不减轻，或出现输血性紫癜，出血加重。出血趋势

12、不减轻，或出现输血性紫癜，出血加重。血小板计数较输注前不仅不增高，有时还会下降。血小板计数较输注前不仅不增高，有时还会下降。判定血小板输注效果可通过判定血小板输注效果可通过1.校正血小板计数增加值（校正血小板计数增加值（CCI）:CCI=(输注后血小板计数输注后血小板计数-输注前血小板计数输注前血小板计数)体表面积体表面积(m2)输入血小板总数（输入血小板总数（1011）PTR判定标准判定标准:1小时小时CCI 7.5109L 20-24小时小时CCI 4.5 109L 2，血小板回收率血小板回收率（percentage platelet recovery,PPR）:PPR=(输注后血小板数输

13、注前血小板数输注后血小板数输注前血小板数)血容量血容量(L)输入血小板总数输入血小板总数2/3 PTR判定标准：判定标准：1hPPR30%20-24hPPR 20%2023-1-1827 一个体表面积为1.5的患者接受了41011的的血小板后，其血小板后，其24h血小板上升了血小板上升了25109/L。计算计算CCI 一个体重一个体重80Kg的患者，输注了的患者，输注了41011的血的血小板后，其小板后，其24小时血小板上升了小时血小板上升了25109/L血容量按照血容量按照75ml/kg计算。计算计算。计算PPR。2023-1-1828 首先考虑首先考虑血小板质量血小板质量问题，可输注问题，

14、可输注ABO 同型的非库存血小板，以排除同型的非库存血小板，以排除ABO系统的抗体或血小板质量方面的影响因素系统的抗体或血小板质量方面的影响因素 若有发热、感染、若有发热、感染、DIC 等导致血小板等导致血小板消耗增加消耗增加的因素存在，积极治疗原发的因素存在，积极治疗原发病，并增加输注剂量病，并增加输注剂量 若有若有同种抗体同种抗体存在，则挑选存在，则挑选HLA、HPA 相合的供者血小板，或使用激素、相合的供者血小板，或使用激素、免疫抑制剂或静脉注射免疫球蛋白。免疫抑制剂或静脉注射免疫球蛋白。若病人持续输注血小板效果不佳而又找不到明确的原因，则应考虑若病人持续输注血小板效果不佳而又找不到明确

15、的原因，则应考虑药物性药物性抗体抗体的存在，停用或换用相关药物的存在，停用或换用相关药物2023-1-1829（posttransfusionposttransfusion purpurapurpura,PTP,PTP）指输注全血或血小板后引起的急性、暂时性的同种免疫性指输注全血或血小板后引起的急性、暂时性的同种免疫性血小板减少综合征血小板减少综合征.在输血后在输血后1 1周左右突然发生周左右突然发生瘀点、瘀斑和黏膜出血，严重者有内脏和颅内出血瘀点、瘀斑和黏膜出血，严重者有内脏和颅内出血大多数的患者是女性，有输血或妊娠史大多数的患者是女性，有输血或妊娠史定义：定义：2023-1-1830202

16、3-1-1831新生儿同种免疫血小板减少性紫癜新生儿同种免疫血小板减少性紫癜（neonatal alloimmune thrombocytopenia,NAITP）2023-1-1832胎儿和母亲的血小板血型不合，使母亲产生同种抗体，通过胎胎儿和母亲的血小板血型不合，使母亲产生同种抗体，通过胎盘进入胎儿体内，与胎儿血小板反应而导致胎儿和新生儿的血小板盘进入胎儿体内，与胎儿血小板反应而导致胎儿和新生儿的血小板减少减少病因病因：症状症状)有有时时正常正常诊断诊断预后预后2023-1-1833 治疗措施治疗措施 预防预防2023-1-1834 特发性血小板减少性紫癜特发性血小板减少性紫癜（idiop

17、athic thrombocytopenic idiopathic thrombocytopenic purpurapurpura，ITPITP）患患者体内存在抗血小板自身抗体，使血者体内存在抗血小板自身抗体，使血小板大量破坏，是一种自身免疫疾病小板大量破坏，是一种自身免疫疾病出血症状出血症状2023-1-1835血小板自身抗体可与自身和同种血小板结合，血小板自身抗体可与自身和同种血小板结合，破坏血小板破坏血小板血小板自身抗体与巨核细胞结合，血小板自身抗体与巨核细胞结合，影响血小板的生成影响血小板的生成血小板相关免疫球蛋白（血小板相关免疫球蛋白（PAIgGPAIgG）：）：与血小板上的相关抗原结合，与血小板上的相关抗原结合，PAIgGPAIgG升高的水平与血小板减少的程度有关升高的水平与血小板减少的程度有关游离抗体游离抗体2023-1-1836 血小板输注不仅没有疗效，还有可能因血小板表面各类血小血小板输注不仅没有疗效，还有可能因血小板表面各类血小板抗原的同种免疫作用，导致输血后紫癜等输血反应板抗原的同种免疫作用，导致输血后紫癜等输血反应 应用皮质激素等免疫抑制剂应用皮质激素等免疫抑制剂 脾切除术脾切除术 大量血浆置换大量血浆置换 大剂量静脉注射免疫球蛋白大剂量静脉注射免疫球蛋白