植物染色体常规压片技术及核型分析课件.ppt

1、实验二植物染色体核型分析一、实验目的：了解什么是核型分析；知道核型分析的方法；了解染色体的形态结构；l学习染色体组分析的工艺，掌握染色体组分析的方法。l熟悉染色体组型分析中的各项指标。二、实验原理：各物种染色体的形态、数目和结构是相对稳定的。核型分析就是研究一个物种细胞核内染色体的数目及各染色体的形态特征，如：对染色体的长度、着丝点位置、臂比和随体有无进行观察，从而描述和阐明该生物的染色体组成，为细胞遗传学、分类学和进化遗传学等研究提供实验依据。细胞有丝分裂中期的染色体具有较典型的特征且易于计数，因而核型分析大多以这一时期进行观察二、实验原理：l染色体组通常是指生物体细胞染色体所有可测定的表型

2、特征的总称，包括染色体的总数，染色体组的数目，组内染色体基数、每条染色体大小、形态等。它是物种特有的染色体信息之一，具有很高的稳定性和再现性。l染色组型分析是对染色体进行分组，对核型的各种特征进行定量和定性的描述，如对染色体长度、着丝点位置、臂比和随体有无等。为细胞遗传学、分类学和进化遗传学等研究提供实验依据。三、实验材料：l蚕豆、洋葱、蛙、小白鼠等有丝分裂中期标本和显微摄影所得放大照片。l要求染色体分散良好，无重叠或重叠很少，着丝粒、随体等形态清晰可辨。四、实验用具药品 1.仪器用具：显微镜（附摄影装置）、冰箱、恒温水浴锅、135胶卷、载玻片、盖玻片、剪刀、浆糊、镊子、白纸、解剖针、刀片及毫

3、米尺。2.药品试剂：无水酒精、70%酒精、冰乙酸、碱性品红、苯酚、甲醛、山梨醇、对二氯苯、1N盐酸、0.05%秋水仙碱。五、实验步骤：（以大麦2n=14为例）1.种子萌发和取材：大麦种子置于培养皿内湿滤纸上，25恒温箱中，根长23cm切取。2.预处理：a、幼根放在蒸馏水中，置04冰箱中处理20小时；b、幼根用0.05%秋水仙溶液处理7小时；3.固定：新配的材料用卡诺氏固定液固定24小时后，放入70%乙醇中置于冰箱中备用。4.解离：蒸馏水清洗后，放于1N盐酸中，60恒温水浴10分钟。5.染色和压片：6.镜检：五、实验步骤：染色体照片的测量和对比：1.测量：依次测量染色体相对长度，长臂和短臂的长度

4、和臂比（长臂/短臂）2.配对：剪下染色体，根据随体有无及大小、臂比是否相等、染色体长度是否相等来配对；3.排列：染色体长的在前，带随体的染色体排在最后（大随体在前，小随体在后）五、实验步骤：染色体照片的测量和对比：4.剪贴：将上述染色体按顺序粘贴在实验报告上，粘贴时，应使着丝点处于同一水平线上，一律短臂在上，长臂在下，构成核型图。要求：染色体从大到小，短臂向上，长臂向下，各染色体着丝粒排在同一直线上。有特殊标记的染色体（如含有随体的）及性染色体可单独排列。编号123456绝对长度(m)相对长度短臂(m)长臂(m)臂比着丝粒指数随体有无染色体类型Total length:mP217染色体类型由臂比值确定。Total length:mP217染色体类型由臂比值确定。臂比（长臂/短臂）形态特征1-1.7m 中着丝粒染色体1.71-3.0sm 近中着丝粒染色体3.01-7.0st 近端着丝粒染色体7.01t 端着丝粒染色体核型分析之染色体自动核型分析系统核型分析之染色体自动核型分析系统核型分析之染色体自动核型分析系统核型分析之染色体自动核型分析系统核型分析之染色体自动核型分析系统核型分析之染色体自动核型分析系统核型分析之教师用图片 1-13 2-9 3-7 4-14 5-6 8-1110-12核型分析之学生用图片1234567891410111213核型分析之学生用图片