食源性疾实验室检测技术要点课件.pptx

1、前言前言食物中毒应急处理与现场调查食物中毒应急处理与现场调查现场调查中的实验室支持现场调查中的实验室支持概念与分类概念与分类前言食品安全事故流行病学调查工作规范 卫监督发201186号 本规范自2012年1月1日起施行 食品安全事故流行病学调查工作规范主要内容包括1、总则2、调查机构管理3、调查内容和程序 5部分主要内容和总共23条4、调查结论和报告5、附则 第三条第三条 事故流行病学调查包括人群流行病学调查、危害因素调查和实验室检验，具体调查技术应当遵循流行病学调查相关技术指南。第六条第六条 事故流行病学调查实行调查员制度。各级调查机构应当根据工作需要配备事故流行病学调查员。调查员应当由具有

2、1年以上流行病学调查工作经验的卫生相关专业人员担任。经专业培训考核合格后，由同级卫生行政部门聘任。食品安全事故流行病学调查工作规范食品安全事故流行病学调查工作规范第九条第九条 事故流行病学调查由调查机构成立的事故流行病学调查组（以下简称调查组）具体实施。调查组应当由3名以上调查员组成，并指定1名负责人。第十一条第十一条 开展人群流行病学调查应当包括以下内容：（一）制订病例定义，开展病例搜索；（二）统一个案调查方法，开展个案调查；（三）采集有关标本和样品；（四）描述发病人群、发病时间和发病地区分布特征；（五）初步判断事故可疑致病因素、可疑餐次和可疑食品；（六）根据调查需要，开展病例对照研究或队列

3、研究。食品安全事故流行病学调查工作规范第十二条第十二条 开展危害因素调查应当包括以下内容：（一）访谈相关人员，查阅有关资料，获取就餐环境、可疑食品、配方、加工工艺流程、生产经营过程危害因素控制、生产经营记录、从业人员健康状况等信息（二）现场调查可疑食品的原料、生产加工、储存、运输、销售、食用等过程中的相关危害因素；（三）采集可疑食品、原料、半成品、环境样品等，以及相关从业人员生物标本。食品安全事故流行病学调查工作规范第十三条第十三条 送检标本和样品应当由调查员提供检验项目和样品相关信息，由具备检验能力的技术机构检验。标本和样品应当尽可能在采集后24小时内进行检验。实验室应当妥善保存标本和样品，

4、并按照规定期限留样。对每项症状和体征进行仔细询问和记录。食物中毒应急处理组织与职责氰化物中毒主要表现为闪电样击倒，迅速死亡；确定采取防治措施的时间范围，并考核防治措施效果。5%，特异性达100%。可采样手、鼻、咽和有感染灶的皮肤等涂抹样、便样。C、为防止污染，采集标本时应将装有增菌液的试管口在酒精灯火焰上灭菌。样品编号取优势菌株进行系统鉴定食物中毒应急处理与现场调查样品的保存容器、介质、温度方法是取样品的各个稀释液（包括1:10）0.检验和卫生学评价后认为可解封的应尽快解封。7）采集肛拭人数，中毒事件规模较小，患者人数10人以下的，全部采样；食物中毒现场调查处理使用卫生部统一制定的采样记录文书

5、，经有关责任人员签字后送检；4）样品必须有牢固的标签，包装严密封闭。不仅要调查是否出现发热、恶心、呕吐、腹痛、腹泻等症状，还应注意其程度、频率、部位、出现的先后顺序等，这些情况对鉴别诊断均有重要意义。由于食源性疾病多是突发性的，如细菌性食物中毒都有特定的潜伏期，最短1h 3h，一般5h 10h，但当相关部门接到疫情到达现场后，往往时间周期间隔较长，可疑食物已清理，即使采到几份剩余食物，也可能不是当日餐桌上剩余菜肴，因此，常常出现食品中检出的细菌与病人排泄物中检出的细菌不相符，影响了结果的分析。40-2010 食品微生物学检验 阪崎肠杆菌检验(一)概念食源性疾病食源性疾病 指通过摄食而进入人体的

6、指通过摄食而进入人体的有毒有害物质有毒有害物质（包括生（包括生物性病原体）等致病因子所造成的疾病。一般可分为物性病原体）等致病因子所造成的疾病。一般可分为感染性和中毒性感染性和中毒性，包括常见的食物中毒、肠道传染病、，包括常见的食物中毒、肠道传染病、人畜共患传染病人畜共患传染病、寄生虫病以及化学性有毒有害物质、寄生虫病以及化学性有毒有害物质所引起的疾病。所引起的疾病。（WHOWHO）食物中毒食物中毒 指食用了被有毒有害物质污染或含有有毒有害物质的食品后出现的急性、亚急性疾病；食源性疾病有暴发和散发两种形式，食源性疾病有暴发和散发两种形式，食物中毒是食源性疾病的暴发形式食物中毒是食源性疾病的暴发

7、形式食品安全事故 指食物中毒、食源性疾病、食品污染等源于食品，对人体健康有危害或者可能有危害的事故。食源性疾病的分类 食物中毒（急性）食物中毒（急性）食源性肠道传染病食源性肠道传染病 食源性寄生虫病食源性寄生虫病 变态反应性疾病（食物过敏）变态反应性疾病（食物过敏）暴饮暴食引起的急性胃肠炎等暴饮暴食引起的急性胃肠炎等 一次大量或长期低剂量摄入某些有毒、有一次大量或长期低剂量摄入某些有毒、有害物质引起的以慢性毒害为主要特征的疾害物质引起的以慢性毒害为主要特征的疾病，病，食物营养不平衡所造成的某些慢性疾病等食物营养不平衡所造成的某些慢性疾病等 概述食物中毒应急处理与现场调查 为了及时准确掌握食物中

8、毒发生原因，积极采取有效为了及时准确掌握食物中毒发生原因，积极采取有效防范措施，在食物防范措施，在食物 中毒调查时，要按照一定程序开展中毒调查时，要按照一定程序开展工作。工作。食物中毒事故处理办法食物中毒事故处理办法 卫生部卫生部1999 突发公共卫生事件应急条例突发公共卫生事件应急条例 国务院国务院2003年年5月月7日日 食品安全法食品安全法 2009年年2月月28日日中华人民共和国食品安全法实施条例中华人民共和国食品安全法实施条例 食品安全事故流行病学调查工作规范 2011年 相关法律法规相关法律法规食物中毒应急处理组织与职责 食物中毒应急处理涉及食物中毒应急处理涉及 卫生行政部门卫生行

9、政部门 卫生监督机构卫生监督机构 疾病预防控制机构疾病预防控制机构 医疗救治机构医疗救治机构 其他有关部门其他有关部门食物中毒报告、信息管理制度1.1.食物中毒一般报告制度食物中毒一般报告制度2.2.食物中毒紧急报告制度食物中毒紧急报告制度（1 1）中毒人数超过）中毒人数超过3030人的应当于人的应当于6 6小时内报告同级人小时内报告同级人民政府和上级人民政府卫生行政部门；民政府和上级人民政府卫生行政部门；（2 2）中毒人数超过）中毒人数超过100100人或者死亡人或者死亡1 1人以上的，应当于人以上的，应当于6 6小时内上报卫生部，并同时报告同级人民政府和上小时内上报卫生部，并同时报告同级人

10、民政府和上级人民政府卫生行政部门；级人民政府卫生行政部门；（3 3）中毒事故发生在学校、地区性或全国性重要活动）中毒事故发生在学校、地区性或全国性重要活动期间的应当于期间的应当于6 6小时内上报卫生部，并同时报告同级小时内上报卫生部，并同时报告同级人民政府和上级人民政府卫生行政部门；人民政府和上级人民政府卫生行政部门；（4 4）其它需要实施紧急报告制度的食物中毒事故。）其它需要实施紧急报告制度的食物中毒事故。1 样品采集 以无菌容器采集可疑样品及病人的排泄物。食源性疾病有暴发和散发两种形式，食物中毒是食源性疾病的暴发形式恶心、呕吐（频繁而剧烈）、腹痛、腹泻(4)河豚鱼中毒：病死率可达33%。由

11、于食源性疾病多是突发性的，如细菌性食物中毒都有特定的潜伏期，最短1h 3h，一般5h 10h，但当相关部门接到疫情到达现场后，往往时间周期间隔较长，可疑食物已清理，即使采到几份剩余食物，也可能不是当日餐桌上剩余菜肴，因此，常常出现食品中检出的细菌与病人排泄物中检出的细菌不相符，影响了结果的分析。5）注意无菌操作，防止污染，以免影响结果。应特别注意是否出现特殊临床表现生奶及奶制品、肉制品、水产品、果蔬B、采样者采样时嘱被检者放松，充分暴露其肛门，避开内外痔，将肛拭管轻轻插入肛门约5cm，儿童约-3cm,轻轻转动几圈，擦取直肠表面的粘液后取出，放入增菌液或C-B运送培养基中。(2)液体食物可将液体

12、食物直接接种培养基，或离心(每分钟3000转以上)半小时后，采取沉淀物进行细菌培养。而干燥型培养基是将培养基成分和胶体化物质涂布在培养基垫上，它便于携带，操作简便。技术、设备、试剂的原因样品的采集对食源性疾病的明确的诊断和对病人的急救治疗都有重要意义。新的病原微生物？未知毒物？对优势菌株进行涂片镜检，革兰染色，以形态特征、菌落特点做出意向性判断进行下步鉴定，接种克氏双糖含铁琼脂培养，然后做血清凝集，生化实验，毒性实验等，报结果呕吐物采集 呕吐物已被处理掉时，涂抹被呕吐物污染的物品,或采集洗胃液。需要做定量检验的细菌（食物中毒与摄入量有关）采样程序方法使用卫生部统一制定的采样记录文书，经有关责任

13、人员签字后送检；分离不到病原性微生物可能的原因有当周围群众表示不满时，应做出必要的解释，争取支持与协助食物中毒应急处理准备一、应急处理准备原则要求一、应急处理准备原则要求“预防为主、常备不懈”二、重大食物中毒应急处理准备与支援二、重大食物中毒应急处理准备与支援（一）食物中毒监测与预警（二）资金储备（三）食物中毒物资准备三、食物中毒应急处理演练三、食物中毒应急处理演练四、预防和控制食物中毒的宣传和公众教育四、预防和控制食物中毒的宣传和公众教育 食物中毒应急物资准备1.1.食物中毒事故应急处理专用车辆食物中毒事故应急处理专用车辆：配备救护顶灯、车载电话、储物小：配备救护顶灯、车载电话、储物小冰箱、

14、打印传真机等。冰箱、打印传真机等。2.2.采样用物品采样用物品（食品、现场涂抹样品、便样、患者呕吐物、血样等）（食品、现场涂抹样品、便样、患者呕吐物、血样等）3.3.音像取证工具音像取证工具：录音机（笔）、照相机、摄像机各录音机（笔）、照相机、摄像机各1 1部。部。4.4.现场快速检验、测量设备：现场快速检验、测量设备：食物中毒快速检样箱，食品温度测试计、消食物中毒快速检样箱，食品温度测试计、消毒剂浓度检测试纸等。毒剂浓度检测试纸等。5.5.法律文书：法律文书：食物中毒事故个案调查登记表、现场卫生监督笔录、现场检食物中毒事故个案调查登记表、现场卫生监督笔录、现场检查笔录、调查笔录、样品采集记录

15、表、采样记录、样品送检单、先行查笔录、调查笔录、样品采集记录表、采样记录、样品送检单、先行登记保存证物通知书及存根、卫生监督意见书、责令改正通知书、卫登记保存证物通知书及存根、卫生监督意见书、责令改正通知书、卫生行政控制决定书、封条、送达回执等。生行政控制决定书、封条、送达回执等。6.6.参考资料参考资料：食物中毒诊断标准、有关卫生部规章、参考书籍等。：食物中毒诊断标准、有关卫生部规章、参考书籍等。7.7.其它有关物品：其它有关物品：如便携式电脑、手机或对讲机等通讯设施以及用于保存如便携式电脑、手机或对讲机等通讯设施以及用于保存运送培养基的冰箱、冰块等运送培养基的冰箱、冰块等病因初步判断 症状

16、体征症状体征 微生物食物中毒大多为急性胃肠炎症状。如霍乱弧菌微生物食物中毒大多为急性胃肠炎症状。如霍乱弧菌中毒表现为呕吐、泻水、脱水、体温下降等；沙门菌、志中毒表现为呕吐、泻水、脱水、体温下降等；沙门菌、志贺菌中毒表现为腹痛、腹泻、发热等；变形杆菌中毒以上贺菌中毒表现为腹痛、腹泻、发热等；变形杆菌中毒以上腹部刀绞样疼痛及急性胃肠炎症状为主；葡萄球菌肠毒素腹部刀绞样疼痛及急性胃肠炎症状为主；葡萄球菌肠毒素引起胃肠炎，引起胃肠炎，神经系统症状（肉毒毒素、真菌毒素、化学神经系统症状（肉毒毒素、真菌毒素、化学毒物）毒物）；呼吸道症状（链球菌等）；呼吸道症状（链球菌等）；甲醇中毒主要表现为甲醇中毒主要表

17、现为视觉障碍、复视、失明；亚硝酸盐中毒主要表现为缺氧症视觉障碍、复视、失明；亚硝酸盐中毒主要表现为缺氧症状，呼吸浅表、窒息；毒鼠强、氟乙酰胺主要表现为恶心、状，呼吸浅表、窒息；毒鼠强、氟乙酰胺主要表现为恶心、头痛、痉挛、肌肉震颤、流涎、大小便失禁等；有机磷中头痛、痉挛、肌肉震颤、流涎、大小便失禁等；有机磷中毒主要表现为毒蕈碱样和烟碱样中毒症状；氰化物中毒主毒主要表现为毒蕈碱样和烟碱样中毒症状；氰化物中毒主要表现为闪电样击倒，迅速死亡；安眠镇静药、一氧化碳、要表现为闪电样击倒，迅速死亡；安眠镇静药、一氧化碳、吗啡中毒主要表现为昏睡，等等。吗啡中毒主要表现为昏睡，等等。病因初步判断n潜伏期潜伏期

18、平均潜伏期意义：是确诊标准之一；平均潜伏期意义：是确诊标准之一；用于估计事故发生发展态势；决定调查用于估计事故发生发展态势；决定调查起点餐次；确定采取防治措施的时间范起点餐次；确定采取防治措施的时间范围，并考核防治措施效果。围，并考核防治措施效果。病因初步判断病因初步判断4类食物中毒的潜伏期一般是：类食物中毒的潜伏期一般是：5ml恶心、呕吐（频繁而剧烈）、腹痛、腹泻在尸体周围不要喷洒农药灭蚊蝇，以免污染可能用于毒物分析的检材。有时毒物有定性结果即可说明问题，而对于那些有环境或内源性本底的毒物，或需用于现场评价、应急处理方法选择或用于患者治疗效果评价的要用定量分析。采样（流行病-实验室）腹痛、腹

19、泻为主、少数呕吐、不发热在调查水域污染状况时，需进行综合分析判断，抓住基本点（如水流入前、流入后充分混合的地点，用水地点，流出地点等），以取得代表性水样。需要做定量检验的细菌（食物中毒与摄入量有关）采采 样样 样品的采集对样品的采集对食源性疾病的明确的诊断和对的明确的诊断和对病人的急救治疗都有重要意义。病人的急救治疗都有重要意义。调查员调查员(经过培训经过培训)应认真准备好采样器材应认真准备好采样器材(灭灭菌采样容器，运送培养基、无菌棉签、采血针菌采样容器，运送培养基、无菌棉签、采血针筒、试管等筒、试管等)，与其他调查员与其他调查员共同深人现场，共同深人现场，分析中毒的原因。明确检验目的，突出

20、重点。分析中毒的原因。明确检验目的，突出重点。采样应做到及时、正确、有代表性并注意无菌采样应做到及时、正确、有代表性并注意无菌操作。操作。样 品 采 集 1.1.食品样品采集食品样品采集 可疑食品是食物中毒检验最重要的样品，由于食物中毒是群发性可疑食品是食物中毒检验最重要的样品，由于食物中毒是群发性的，所以患者共同食用，且在加工、储藏过程中，最有可能受到的，所以患者共同食用，且在加工、储藏过程中，最有可能受到细菌污染的食物是首选的采集样品。包括细菌污染的食物是首选的采集样品。包括成品、半成品、调料、成品、半成品、调料、生鲜原料、蘑菇等。生鲜原料、蘑菇等。（1 1）调查人员应对食品加工场所进行认

21、真全面搜查，以客观结）调查人员应对食品加工场所进行认真全面搜查，以客观结果判断是否还存在剩余食品或者原料。果判断是否还存在剩余食品或者原料。（2 2）餐桌上的剩余食物为最好的样品，应及时采取；）餐桌上的剩余食物为最好的样品，应及时采取；残余食物残余食物将残余食物用灭菌镊子或勺采取，置入灭菌之容器内将残余食物用灭菌镊子或勺采取，置入灭菌之容器内.（3 3）如无剩余食物时，可用灭菌棉拭涂擦盛可疑食物的容器表）如无剩余食物时，可用灭菌棉拭涂擦盛可疑食物的容器表面或采取容器的灭菌生理盐水洗液作为样品。面或采取容器的灭菌生理盐水洗液作为样品。（4 4）体积较大的肉食与鱼类等，应将表面消毒后，取内部样品）

22、体积较大的肉食与鱼类等，应将表面消毒后，取内部样品置于无菌容器内；置于无菌容器内；（5 5）采集同一加工场所加工的其它直接入口食品；）采集同一加工场所加工的其它直接入口食品；（6 6）必要时也可采取半成品或原料。若是化学性、有毒动植物）必要时也可采取半成品或原料。若是化学性、有毒动植物食物中毒采集食品原料尤为重要。食物中毒采集食品原料尤为重要。（7 7）罐头检样直接采取，若仅剩空盒，可将空盒送检。罐头检样直接采取，若仅剩空盒，可将空盒送检。样样 品品 采采 集集2.2.炊具、食具、容器：炊具、食具、容器：对于刀、墩、容器、冰箱、对于刀、墩、容器、冰箱、水池、下水道口、设备、工具等可能直接或间接

23、接触可疑中毒食水池、下水道口、设备、工具等可能直接或间接接触可疑中毒食品的物品表面，可用灭菌棉拭蘸取灭菌盐水反复涂檫后，将棉拭品的物品表面，可用灭菌棉拭蘸取灭菌盐水反复涂檫后，将棉拭置于灭菌容器内。菜墩表面用灭菌刀刮取木屑置于灭菌容器内。置于灭菌容器内。菜墩表面用灭菌刀刮取木屑置于灭菌容器内。抹布可用灭菌剪刀剪取一块置于灭菌容器内。这类采样主要针对抹布可用灭菌剪刀剪取一块置于灭菌容器内。这类采样主要针对细菌性细菌性食源性疾病食源性疾病；3.3.大便样品采集大便样品采集 （1 1）最好用便盒或采便管采集腹泻病人大便；）最好用便盒或采便管采集腹泻病人大便；（2 2）无论中毒病人是否已经服药，均应进

24、行大便采集。）无论中毒病人是否已经服药，均应进行大便采集。（3 3）应选择发病初期具有同样症状且较严重病例应选择发病初期具有同样症状且较严重病例的大便。的大便。（4 4）采集时应避免混入其他物质。）采集时应避免混入其他物质。样样 品品 采采 集集肛拭采样肛拭采样 A、采样人员采样前检查肛拭管表面是否光滑、有无破损及裂痕以防意外；B、采样者采样时嘱被检者放松，充分暴露其肛门，避开内外痔，将肛拭管轻轻插入肛门约5cm，儿童约-3cm,轻轻转动几圈，擦取直肠表面的粘液后取出，放入增菌液或C-B运送培养基中。C、为防止污染，采集标本时应将装有增菌液的试管口在酒精灯火焰上灭菌。4.4.呕吐物采集呕吐物采

25、集 呕吐物已被处理掉时，涂抹被呕吐物污染的物品,或采集洗胃液。5.5.血液采集血液采集如怀疑是沙门菌、变形杆菌、致泻大肠艾希菌食物中毒时，应分别在患者急性期（3天以内）和恢复期（2周左右）各采取血液2-3毫升，待凝固时分离血清，做抗体滴度测定。同时采集正常人正常人静脉血作为对照。6.6.食品加工人员带菌情况食品加工人员带菌情况在细菌性食物中毒的调查、检验过程中，除必须确定致病菌外，还必须追踪这些致病菌的来源，应根据食物中毒情况，采集售货员或制做食品的工作人员及直接或间接接触食品的有关人员的检样，特别是那些在中毒发生前或正在患有肠炎、发烧、化脓及可疑带菌者进行采样。可采样采样手、鼻、咽和有感染灶

26、的皮肤等涂抹样、便样。7.7.尿液采集尿液采集 样样 品品 采采 集集 8.8.水样采集水样采集 在调查水域污染状况时，需进行综合分析判断，抓住基本点（如水流入前、流入后充分混合的地点，用水地点，流出地点等），以取得代表性水样。对江河、湖泊、泉水、井水等水源采样时，将容器浸入水体中，待水至容器23处时取出。在采集管网系统水样前，先消毒，再放水5分钟，以保证样品具有代表性。严格按无菌采样规范要求采样。采什么样9.9.组织器官组织器官标本标本：组织器官采集包括尸解或手术后采取的胃、肝、肾、肺等重要器官标本,尸解最好在病人死亡后48 h内进行,要注意防止所用器械带来污染。每一采集部位应更换消毒器械,

27、每种组织应多部位采集,每份标本应采集50100 g 于无菌洁净容器中,分别保存冷藏送检。10.10.其它采样其它采样 对厨房、仓库、储藏室中发现的鼠及粪便、猫、狗等亦需采样。在肉毒中性毒素中毒时，对做食品的原料和周围的土壤亦需采样。样样 品品 采采 集集 食物中毒采样数量食物中毒采样数量 样品种类样品种类 检验目的检验目的 样品量样品量 饮用水饮用水 全分析及致病菌全分析及致病菌 5 L 液体食品液体食品 致病菌或毒物分析致病菌或毒物分析 可疑食物可疑食物200ml 固体食品固体食品 致病菌或毒物分析致病菌或毒物分析 可疑食物可疑食物200g 呕吐物呕吐物 致病菌或毒物分析致病菌或毒物分析 5

28、0g(ml)洗胃液洗胃液 致病菌或毒物分析致病菌或毒物分析 200ml 腹泻物腹泻物 致病菌或毒物分析致病菌或毒物分析 50g(ml)血液血液 病原分离、抗体分析病原分离、抗体分析 5ml 脑脊液脑脊液 病原分离病原分离 2ml 皮损分泌物皮损分泌物 病原分析病原分析 灭菌生理盐水浸泡棉签涂取灭菌生理盐水浸泡棉签涂取采多少所有标本在采集时立即分装，一所有标本在采集时立即分装，一式式 N N 份份(不同检验项目、不同检验项目、重复实重复实验、其它实验室复核、留样验、其它实验室复核、留样)采什么样 对对 照照内对照内对照外对照外对照暴发性食源性疾病暴发性食源性疾病n多途径传播疾病（大肠杆菌多途径传

29、播疾病（大肠杆菌O157:H7）n潜伏期长的疾病（伤寒、李斯特菌等）潜伏期长的疾病（伤寒、李斯特菌等）n非消化道症状的疾病非消化道症状的疾病n水源性传播疾病水源性传播疾病需注意需注意什么时间采 采样时间采样时间氟乙酰胺在体内数小时后就开始转化为氟乙酸，血中在十余小时氟乙酰胺在体内数小时后就开始转化为氟乙酸，血中在十余小时或数天后就检不出了氟乙酰胺，这个阶段体内氟乙酸浓度仍较高，或数天后就检不出了氟乙酰胺，这个阶段体内氟乙酸浓度仍较高，所以应该采集患者的血样或尿样来检测氟乙酸；毒鼠强在体内代所以应该采集患者的血样或尿样来检测氟乙酸；毒鼠强在体内代谢缓慢，中毒后数月后采集的血样对病因确定仍有重要价

30、值。谢缓慢，中毒后数月后采集的血样对病因确定仍有重要价值。血清：如怀疑是沙门菌、变形杆菌、致泻大肠艾希菌食物中毒时，血清：如怀疑是沙门菌、变形杆菌、致泻大肠艾希菌食物中毒时，应分别在患者急性期（应分别在患者急性期（3天以内）和恢复期（天以内）和恢复期（2周左右）各采取周左右）各采取血液血液23毫升，待凝固时分离血清，做抗体滴度测定。如做血液毫升，待凝固时分离血清，做抗体滴度测定。如做血液细菌培养时，应将采取的血液直接注入含有玻璃株的无菌小烧瓶细菌培养时，应将采取的血液直接注入含有玻璃株的无菌小烧瓶中进行振摇，然后加入相应培养基或直接将血液注入培养基中。中进行振摇，然后加入相应培养基或直接将血液

31、注入培养基中。如怀疑副溶血性弧菌食物中毒时，应分别在患者中毒如怀疑副溶血性弧菌食物中毒时，应分别在患者中毒12天和天和1周时采取血液做抗体滴度测定。（因周时采取血液做抗体滴度测定。（因1周后抗体就降低或消失）。周后抗体就降低或消失）。病毒分离标本最好在发病初期（病毒分离标本最好在发病初期（1-2天）采天）采样样 品品 采采 集集怎么采 不同检验目的的样品不同检验目的的样品1.细菌分离细菌分离 2.病毒分离病毒分离3.抗原抗原-抗体检测抗体检测4.化学毒物检测化学毒物检测5.无菌部位无菌部位6.基因检测基因检测木制的棉拭子木制的棉拭子？食物中毒事件怎么采 粪便可直接采取或采便管插入直肠采集；呕吐

32、物可注入灭菌试管内，由于胃酸能使样品为酸性，不利于细菌的存活，所以应在采集的呕吐物内加入10苏打予以中和，以保持细菌的活性。咽喉涂抹样可用棉签涂擦咽喉部采取洗胃液直接抽取注入灭菌容器内。血液血样的采集应尽早抽取患者的血液，在中毒患者急性期必要时可作血样培养，但主要是用来检测患者血液中的抗体。一般需采血二次以上，第一次在发病初期(3天以内)，第二次是在恢复期(2周左右)，若患者血中抗体呈明显上升趋势，即可证实其受到过相应致病菌的感染。方法是从肘静脉采取血液23ml，注入干热灭菌试管内，使成斜面，待凝固后，分出血清送检。如做血液细菌培养，可直接注入灭菌并带有玻璃珠的三角瓶中，立即振摇数分钟，以防凝

33、固，然后送检。食物中毒事件怎么采(3)对可疑中毒患者在解剖前不要将尸体用福尔马林、酒精等化对可疑中毒患者在解剖前不要将尸体用福尔马林、酒精等化学物处理，解剖台要冲洗干净，所用的解剖器具、手套要预先冲学物处理，解剖台要冲洗干净，所用的解剖器具、手套要预先冲洗干净、晾干备用，不要沾染消毒药液（如来苏、酒精、升汞溶洗干净、晾干备用，不要沾染消毒药液（如来苏、酒精、升汞溶液等）以免污染了检材。例如在解剖时使用了升汞溶液浸泡过的液等）以免污染了检材。例如在解剖时使用了升汞溶液浸泡过的手套，手套上的升汞就可能对样本污染，会干扰了病因的判定。手套，手套上的升汞就可能对样本污染，会干扰了病因的判定。在尸体周围

34、不要喷洒农药灭蚊蝇，以免污染可能用于毒物分析的在尸体周围不要喷洒农药灭蚊蝇，以免污染可能用于毒物分析的检材。检材。尸体解剖检样可采取胃肠内容物、脏器、肠系膜淋巴结及血液等。尸体解剖检样可采取胃肠内容物、脏器、肠系膜淋巴结及血液等。内容物用灭菌注射器或灭菌器械采取，置入灭菌瓶内；脏器应先内容物用灭菌注射器或灭菌器械采取，置入灭菌瓶内；脏器应先用烙铁烧灼消毒表面，再用解剖刀剪和镊子取内部检样用烙铁烧灼消毒表面，再用解剖刀剪和镊子取内部检样10102020克，克，置于灭菌容器内送检。血液及体液用灭菌注射器直接抽取或用灭置于灭菌容器内送检。血液及体液用灭菌注射器直接抽取或用灭菌棉签蘸取。菌棉签蘸取。对

35、死亡患者一般从心腔内采集血液，也可采集腋下静脉、颈静脉、对死亡患者一般从心腔内采集血液，也可采集腋下静脉、颈静脉、股静脉血液，心腔内血液和周围血中毒物浓度不同。股静脉血液，心腔内血液和周围血中毒物浓度不同。食物中毒事件怎么采疑为百草枯中毒患者的血液不能用玻璃试管，因为玻璃可以使百疑为百草枯中毒患者的血液不能用玻璃试管，因为玻璃可以使百草枯钝化，钝化后的百草枯实验室是不能检出的。草枯钝化，钝化后的百草枯实验室是不能检出的。疑为一氧化碳中毒者应尽早抽血疑为一氧化碳中毒者应尽早抽血5-15毫升注入玻璃试管内，量毫升注入玻璃试管内，量要直装至瓶口，必须用密封玻璃塞塞紧，避免瓶中残留空气，血要直装至瓶口

36、，必须用密封玻璃塞塞紧，避免瓶中残留空气，血液是分析一氧化碳中毒的唯一检体。其他易挥发毒物样本也要尽液是分析一氧化碳中毒的唯一检体。其他易挥发毒物样本也要尽量密封保存，尽快检测。如氰化物。量密封保存，尽快检测。如氰化物。怎么采 样品采集程序样品采集程序 采样用物品准备采样用物品准备 采样程序方法采样程序方法 采样纪录采样纪录 样品编号样品编号 样品保存样品保存 使用卫生部统一制定的采样记录文书，经有关责任人员签字后送检；注意注意样样 品品 采采 集集影响采样的主要因素缺乏及时性：缺乏及时性：由于一些消费者对食品安全法观念淡薄，缺乏自我保护意由于一些消费者对食品安全法观念淡薄，缺乏自我保护意识，

37、识，食源性疾病发生后他们不是首先及时向相关部门报告疫情，发生后他们不是首先及时向相关部门报告疫情，而是自己先与经营者交涉，在不能如愿的情况下才向卫生监督部而是自己先与经营者交涉，在不能如愿的情况下才向卫生监督部门举报，因此造成一是经营者在得知发生门举报，因此造成一是经营者在得知发生食源性疾病的情况后，的情况后，首先处理掉一切可疑剩余食品，对加工经营现场、工具、容器作首先处理掉一切可疑剩余食品，对加工经营现场、工具、容器作了相应的处理；二是延误了报告的时间，从而影响了对可疑食品了相应的处理；二是延误了报告的时间，从而影响了对可疑食品和病人排泄物的采集。和病人排泄物的采集。采样缺乏代表性：采样缺乏

38、代表性：由于由于食源性疾病多是突发性是突发性的，如细菌性食物中毒都有特定的，如细菌性食物中毒都有特定的潜伏期，最短潜伏期，最短1 1h h 3 3h h，一般一般5 5h h 10h 10h，但当相关部门接到疫但当相关部门接到疫情到达现场后，往往时间周期间隔较长，可疑食物已清理，即使情到达现场后，往往时间周期间隔较长，可疑食物已清理，即使采到几份剩余食物，也可能不是当日餐桌上剩余菜肴，因此，常采到几份剩余食物，也可能不是当日餐桌上剩余菜肴，因此，常常出现食品中检出的细菌与病人排泄物中检出的细菌不相符，影常出现食品中检出的细菌与病人排泄物中检出的细菌不相符，影响了结果的分析。响了结果的分析。影响

39、采样的主要因素影响采样的主要因素食品加工制作现场各环节的采样往往能提供一些线索，但常常见食品加工制作现场各环节的采样往往能提供一些线索，但常常见到现场已被清扫，食具和用具已清洗干净，同样也影响了食品加到现场已被清扫，食具和用具已清洗干净，同样也影响了食品加工工具、容器、场所的采样和检验。工工具、容器、场所的采样和检验。采样缺乏典型性：采样缺乏典型性：中毒病人发病后，患者一般开始时自行用抗菌毒，严重时才去当中毒病人发病后，患者一般开始时自行用抗菌毒，严重时才去当地医院治疗，由于一些医务人员对地医院治疗，由于一些医务人员对食源性疾病报告制度意识不强，报告制度意识不强，导致了只管用药治疗，忽视了对病

40、人呕吐物和排泄物的留取，大导致了只管用药治疗，忽视了对病人呕吐物和排泄物的留取，大量的抗菌素抑制了致病菌繁殖，从而影响了致病菌的检出率。量的抗菌素抑制了致病菌繁殖，从而影响了致病菌的检出率。采样缺乏完整性采样缺乏完整性：一般中毒病人发病期的血液能采集到，但是采集恢复期的血液，一般中毒病人发病期的血液能采集到，但是采集恢复期的血液，由于病人的不配合或外出经常采不全也影响了检验结果的全面由于病人的不配合或外出经常采不全也影响了检验结果的全面分析。分析。样品的处理(1)固体食物如系大块鱼肉、组织脏器等，先用烙铁烧灼表面，或在沸水中烫35秒钟，然后再取内部检样510克，按无菌要求，剪碎后置无菌乳钵内，

41、加人适量灭菌海沙研细，再加人无菌生理盐水作1：5稀释，混匀沉淀后，取上清液进行接种和涂片染色镜检。(2)液体食物可将液体食物直接接种培养基，或离心(每分钟3000转以上)半小时后，采取沉淀物进行细菌培养。(3)罐头食品如罐头尚未打开，先用温水洗净表面，并以95酒精燃烧消毒，然后用灭菌开口刀将罐头打开，以无菌操作将检样取出进行细菌检验。如罐头为空盒，可用肉汤培养基冲洗盒内壁，以洗液做细菌培养。恶心、呕吐（频繁而剧烈）、腹痛、腹泻调查时应注意了解是否存在食物之外的其它可能与发病有关的暴露因素，以排除或确定非食源性疾病。有机磷中毒主要表现为毒蕈碱样和烟碱样中毒症状；有一次食物中毒检验中我们同时用GB

42、的方法和法国梅里埃公司生产的血浆凝固酶平板的方法，结果GB的方法没有检出，而血浆凝固酶平板的方法却检出了金黄色葡萄球菌，看来多种检验方法并用能提高致病菌的检出率。生奶及奶制品、肉制品、水产品、果蔬如难辨梭菌在正常肠道中也可出现，故对抗生素相关性肠炎的诊断，检出其毒素比细菌培养更有意义。现场快速检验、简易动物实验对定量检测，如样本中毒物浓度超过检出限值，应标注出实际测出的数值；动物试验将可疑食物制备浸出液，或分离所得的上清液，皮下或腹腔注射动物(小白鼠)体内，观察数日，看有无中毒。每批样本后要附上一个样本清单，详细列出此批样本的名称、状态和注意事项。采样纪录病原侵入与发病的时间顺序；(7)炊事用

43、具擦洗水等可直接接种培养基。沙门氏菌、O157大肠菌、李斯特菌等食物中毒致病菌如用培养法检测，由于菌量少，需进行前培养和增菌培养，故费时较多，且需熟练的检测技术。食物中毒现场调查处理为了及时准确掌握食物中毒发生原因，积极采取有效防范措施，在食物 中毒调查时，要按照一定程序开展工作。食物中毒报告、信息管理制度内容物用灭菌注射器或灭菌器械采取，置入灭菌瓶内；血液 病原分离、抗体分析 5ml恶心、呕吐、发热、黄疸、昏迷、谵语、四肢抽搐、少尿、血尿、尿闭、休克、样品的处理(4)(4)粪便和呕吐物以无菌生理盐水，充分搅拌混匀、静粪便和呕吐物以无菌生理盐水，充分搅拌混匀、静置，待其中粗块下沉后，取上清液进

44、行接种及涂片染置，待其中粗块下沉后，取上清液进行接种及涂片染色镜检。色镜检。(5)(5)洗胃液用无菌试管低速离心后，取沉淀物进行检验。洗胃液用无菌试管低速离心后，取沉淀物进行检验。(6)(6)血液检样用做细菌培养的抗凝血，以灭菌吸管吸取，血液检样用做细菌培养的抗凝血，以灭菌吸管吸取，注人肉汤或其他培养基内增菌。用于测定患者血清效注人肉汤或其他培养基内增菌。用于测定患者血清效价的血样，可用离心沉淀法或自然析出法将血清分出，价的血样，可用离心沉淀法或自然析出法将血清分出，与可疑中毒菌株作试管凝集试验。与可疑中毒菌株作试管凝集试验。(7)(7)炊事用具擦洗水等可直接接种培养基。炊事用具擦洗水等可直接

45、接种培养基。样本标签内容样本标签内容样本编号样本编号唯一性唯一性样本来源样本来源从什么物质、材料中采集的，如病理采集的肝脏就可从什么物质、材料中采集的，如病理采集的肝脏就可标标 注为某某患者肝脏；注为某某患者肝脏；样本数量样本数量包装中样本的数量，如此包装中同时采集了包装中样本的数量，如此包装中同时采集了2块肝脏块肝脏样本样本 就要标注为就要标注为2 采样时间：采样时间：采样地点：采样地点：采样人：采样人：样本处理情况：样本处理情况：抗凝剂抗凝剂、运送培养基、标本状况（开封食品）、运送培养基、标本状况（开封食品）样本标签内容样本标签内容 最小包装（每个标本）最小包装（每个标本）每个包装箱每个包

46、装箱 每批样本后要附上一个样本清单，详细每批样本后要附上一个样本清单，详细列出此批样本的名称、状态和注意事项。列出此批样本的名称、状态和注意事项。样品的包装 感染性样本感染性样本 放射性样本放射性样本 易腐性样本易腐性样本 挥发性样本挥发性样本样品的运送 除患者检测血浆外，其他样本不宜通过邮寄方式转运。检测血浆用带盖的小塑料管盛装，外衬缓冲包装和吸附材料，通过EMS邮寄。在送邮件时要明确向邮局说明邮寄物品的成分及安全性。在运送过程中，要保证条件能够持续保障。样品的保存容器、介质、温度介质、温度 检测目的检测目的 细菌细菌 病毒病毒 寄生虫寄生虫 抗原抗体抗原抗体 核酸核酸 化学毒物化学毒物 预

47、期保存时间预期保存时间样品的保存运送样品的保存运送n安全性安全性 样品的安全样品的安全 环境的安全（不泄漏、不污染）环境的安全（不泄漏、不污染）n交接手续交接手续样品送检注意事项 1 1）采集的样品一般应在）采集的样品一般应在4 4小时内接种完毕，故必须及时送检。小时内接种完毕，故必须及时送检。2 2）夏季送检样品时，应注意冷藏。不得加入任何防腐剂。）夏季送检样品时，应注意冷藏。不得加入任何防腐剂。3 3）应附详细送检单，应填明样品名称、份数、重量、来源、中毒）应附详细送检单，应填明样品名称、份数、重量、来源、中毒表现、送检时间、有范围的检验项目、采样条件（容器是否灭菌、表现、送检时间、有范围

48、的检验项目、采样条件（容器是否灭菌、有无封条）、送样人。有无封条）、送样人。4 4）样品必须有牢固的标签，包装严密封闭。）样品必须有牢固的标签，包装严密封闭。5 5）注意无菌操作，防止污染，以免影响结果。）注意无菌操作，防止污染，以免影响结果。6 6）采样过程中履行必要的采样手术。（发生中毒单位负责人签封）采样过程中履行必要的采样手术。（发生中毒单位负责人签封与开具收据等）与开具收据等）7 7）采集肛拭人数，中毒事件规模较小，患者人数10人以下的，全部采样；中毒事件规模较大，患者人数较多，至少应对30%-50%临床症状典型的患者进行采集。检检 验验检什么确定实验项目应同时考虑以下几点确定实验项

49、目应同时考虑以下几点:早期早期IgMIgM和双份和双份IgGIgG血清学检验；血清学检验；血清学和核酸分型鉴定。血清学和核酸分型鉴定。人体外环境病原鉴定结果与人体内抗原、抗体的吻合、匹配；人体外环境病原鉴定结果与人体内抗原、抗体的吻合、匹配；毒力分析和动物实验模型佐证；毒力分析和动物实验模型佐证；病原侵入与发病的时间顺序；病原侵入与发病的时间顺序；主导病原与主导病原与併併发病原的甄别发病原的甄别;安排检验项目要有几套预备方案安排检验项目要有几套预备方案,实验的无果和失败实验的无果和失败。检什么病原分离病原分离 细菌细菌需氧菌、厌氧菌、兼性厌氧菌、需氧菌、厌氧菌、兼性厌氧菌、L L型菌型菌 病毒

50、病毒 寄生虫寄生虫血清学检查：血清学检查：抗原抗原 抗体抗体 急性期急性期IgMIgM抗体抗体 急性期和恢复期双份静脉血测定特异性急性期和恢复期双份静脉血测定特异性IgGIgG抗体。抗体。核酸检测核酸检测 特征基因、毒力基因、溯源比较特征基因、毒力基因、溯源比较定性定性/定量定量细菌性食物中毒的实验室诊断致病菌的定量检验致病菌的定量检验n对细菌性食物中毒的调查 需要做定量检验的细菌（食物中毒与摄入量有关）产气荚膜梭菌、蜡样芽胞杆菌、变形杆菌 样品：中毒相关食品、粪便、呕吐物n收集致病菌对人的最低感染剂量的资料n危险性分析中对暴露量的评估摄入的菌量与产生有害健康作用的概率和程度成正相关，但通常不