食品安全快速检测技术农药残留检测专题全面课件.pptx

1、4食品安全快速检测技术及应用食品安全快速检测技术及应用项目二项目二 农药残留快速检测农药残留快速检测l回顾上节课内容回顾上节课内容l1.1.样品制备样品制备l2.2.农药、农药残留的概念农药、农药残留的概念1/18/20231/18/20231/18/20231/18/20231/18/2023项目二项目二 农药残留快速检测农药残留快速检测实验二、蔬菜中有机磷和氨基甲酸酯类农药残留量的快速检实验二、蔬菜中有机磷和氨基甲酸酯类农药残留量的快速检测测GB/T 5009.199-2003 蔬菜中有机磷和氨基甲酸酯类农药残留量的快速检测一、实验目的一、实验目的：学习快速卡法测定有机磷农残快速检验 法及

2、熟悉检验结果评定1/18/2023项目二项目二 农药残留快速检测农药残留快速检测可催化（）水解为乙酸与靛酚（），有机磷或氨基甲酸脂类农药对有抑制作用，使催化、水解、变色的过程发生改变，由此可判断出样品中是否有高剂量有机磷或氨基甲酸脂类农药的存在实验原理1/18/2023项目二项目二 农药残留快速检测农药残留快速检测实验试剂 固化有胆碱脂酶和靛酚乙酸脂试纸卡片 磷酸盐缓冲液 快速检测仪1/18/20231/18/2023项目二项目二 农药残留快速检测农药残留快速检测l四、速测卡测定农药残留的主要步骤四、速测卡测定农药残留的主要步骤l1 1）整体测定法）整体测定法剪成1cm碎片，取5g放入带盖瓶，

3、加入10ml缓冲液，振摇50次，静置2min。取1片速测片，用白色药品蘸取提取液，放置10min以上进行预反应速测卡对折，用手捏3min或用恒温3min，使红色药片与白色药片叠合反应，每批设定一个空白1/18/2023项目二项目二 农药残留快速检测农药残留快速检测l四四.速测卡测定农药残留的主要步骤速测卡测定农药残留的主要步骤l2 2）表面测定法（粗筛法）表面测定法（粗筛法）滴2-3滴缓冲液溶液在蔬菜表面，用另一片蔬菜在滴液处轻轻摩擦取1片速测卡，将蔬菜上的液滴滴在白色药片上放置10min以上，进行预反应将速测卡对折，用手捏3min或用恒温装置恒温3min，使红色药片与白色药片叠合反应。每批测

4、定设一个空白对照1/18/20231/18/20231/18/2023项目二项目二 农药残留快速检测农药残留快速检测l五、速测卡测定农药残留的注意事项五、速测卡测定农药残留的注意事项l1 1）空白对照）空白对照l2 2）次生物质）次生物质l3 3）预反应温度）预反应温度l4 4）反应时间）反应时间l5 5）滴加溶液的数量）滴加溶液的数量l6 6）预反应时间一致）预反应时间一致l7 7）观察结果时间）观察结果时间1min1min1/18/2023项目二项目二 农药残留快速检测农药残留快速检测l六、检测结果判断六、检测结果判断l 1 1、结果判断、结果判断 结果以酶被有机磷或氨基甲酸脂类农药抑结果

5、以酶被有机磷或氨基甲酸脂类农药抑制制（为阳性）、未抑制（阴性）表示。（为阳性）、未抑制（阴性）表示。l 与空白对照卡比较：白色药片不变色或略有浅蓝色均为阳与空白对照卡比较：白色药片不变色或略有浅蓝色均为阳性结果。白色药片变为天蓝色或与空白对照卡相同为阴性性结果。白色药片变为天蓝色或与空白对照卡相同为阴性结果。结果。l 对阳性结果的样品可用其他方法进一步确定具体农药品种和含量。l 2 2、样品检测结果记录并对检测结果进行评价。、样品检测结果记录并对检测结果进行评价。1/18/20231/18/2023知识扩展知识扩展1 11/18/20231/18/20231/18/20231/18/20231

6、/18/20231、结果判断 结果以酶被有机磷或氨基甲酸脂类农药抑制（为阳性）、未抑制（阴性）表示。食品安全快速检测技术及应用1、结果判断 结果以酶被有机磷或氨基甲酸脂类农药抑制（为阳性）、未抑制（阴性）表示。剪成1cm碎片，取5g放入带盖瓶，加入10ml缓冲液，振摇50次，静置2min。开机：插上电源，打开仪器背面绿色电源开关，仪器显示开机画面，按画面提示操作，按下回车键，仪器开始自检，时间约1min5mL待测液加入100L酶液和显色剂，混匀静置10min加入100L（或20L）底物，摇匀并立即倒入比色杯中。自检完毕后，仪器进入待机检测状态按B键，显示屏下方延迟10s后，测量时间开始倒计时，

7、计时完毕，显示屏显示吸光度增量(C)及抑制率。开机：插上电源，打开仪器背面绿色电源开关，仪器显示开机画面，按画面提示操作，按下回车键，仪器开始自检，时间约1min7）观察结果时间1min3、底 物：取1瓶底物加12.取1片速测卡，将蔬菜上的液滴滴在白色药片上5mL待测液加入100L酶液和显色剂，混匀静置10min加入100L（或20L）底物，摇匀并立即倒入比色杯中。5mL蒸馏水或纯净水溶解，使用时取100L，4冰箱保存；剪成1cm碎片，取5g放入带盖瓶，加入10ml缓冲液，振摇50次，静置2min。1、缓冲液：取1包缓冲剂加入500mL蒸馏水或纯净水中，搅拌溶解制成磷酸缓冲液（pH7.自检完毕

8、后，仪器进入待机检测状态开机：插上电源，打开仪器背面绿色电源开关，仪器显示开机画面，按画面提示操作，按下回车键，仪器开始自检，时间约1min2、样品检测结果记录并对检测结果进行评价。项目二 农药残留快速检测开机：插上电源，打开仪器背面绿色电源开关，仪器显示开机画面，按画面提示操作，按下回车键，仪器开始自检，时间约1min5mL蒸馏水或纯净水溶解，使用时取20L，4冰箱保存。及时放入仪器的测量室通道，合上盖。5mL待测液加入100L酶液和显色剂，混匀静置10min加入100L（或20L）底物，摇匀并立即倒入比色杯中。对阳性结果的样品可用其他方法进一步确定具体农药品种和含量。5mL蒸馏水或纯净水溶

9、解，使用时取20L，4冰箱保存。放置10min以上，进行预反应与空白对照卡比较：白色药片不变色或略有浅蓝色均为阳性结果。取1片速测卡，将蔬菜上的液滴滴在白色药片上项目二 农药残留快速检测项目二 农药残留快速检测1/18/20231/18/2023项目二项目二 农药残留快速检测农药残留快速检测l第二法：第二法：l酶抑制率分光光度法酶抑制率分光光度法1/18/20231/18/20231/18/20231/18/20231/18/20231/18/20231/18/20231/18/20231/18/20231/18/20231/18/2023项目二项目二 农药残留快速检测农药残留快速检测1/18

10、/2023：插上电源，打开仪器背面绿色电源开关，仪器显示开机画面，按画面提示操作，按下回车键，仪器开始自检，时间约1minl自检完毕后，仪器进入待机检测状态项目二项目二 农药残留快速检测农药残留快速检测l2 2、试剂配制、试剂配制2.1、缓冲液缓冲液：取1包缓冲剂加入500mL蒸馏水或纯净水中，搅拌溶解制成磷酸缓冲液（pH7.6）,常温保存。2.2、显色剂显色剂：取1瓶显色剂加25mL缓冲液溶解，使用时取100L，4冰箱保存。2.3、底底 物物：取1瓶底物加12.5mL蒸馏水或纯净水溶解，使用时取100L，4冰箱保存；或取1瓶底物加2.5mL蒸馏水或纯净水溶解，使用时取20L，4冰箱保存。2.

11、4、胆碱酯酶胆碱酯酶：酶制剂无需配制，可直接取用，使用时取100L，4冰箱保存。1/18/2023项目二项目二 农药残留快速检测农药残留快速检测1/18/2023l3 3、样品提取、样品提取l取取2g2g果蔬样品（块茎类取果蔬样品（块茎类取4g)4g)，叶菜剪成，叶菜剪成25px25px左右见方的碎左右见方的碎片，块茎类取横截面样品或取其表皮，放入三角瓶中，加片，块茎类取横截面样品或取其表皮，放入三角瓶中，加入入10mL10mL缓冲液，振荡缓冲液，振荡1 12min 2min，倒出提取液，静置，倒出提取液，静置2min2min，待测待测项目二项目二 农药残留快速检测农药残留快速检测l1）对照测

12、试：2.5mL缓冲液加入100L酶液显色剂混匀，静置10min加入100L（或20L）底物摇匀，立即倒入比色杯中。l及时放入仪器的测量室第1通道，合上盖。按B键，显示屏下方延迟10s后，测量时间开始倒计时，计时完毕，显示屏显示吸光度增量(C)及抑制率。在进行对照测试时，28通道可同时进行样品测试。1/18/2023项目二项目二 农药残留快速检测农药残留快速检测l2）样品测试：2.5mL待测液加入100L酶液和显色剂，混匀静置10min加入100L（或20L）底物，摇匀并立即倒入比色杯中。l及时放入仪器的测量室通道，合上盖。按M键，显示屏下方延迟10s后，测量时间开始倒计时，计时完毕，显示屏显示吸光度增量（S)及抑制率。数据自动保存，如有需要按P键打印1/18/2023