高通量RNA测序技术课件.ppt
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- 关 键 词:
- 通量 RNA 技术 课件
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1、RNA-Seq技术背景多种高通量RNA-Seq技术方法高通量RNA-Seq技术应用及前景测序方法的发展RNA-Seq原理RNA-Seq技术优势454测序技术SOLiD技术HeliScope测序技术Solexa测序技术第一代测序技术 1954年,首次利用多聚核糖核苷酸链的降解法实现DNA测序 第一代测序技术主要代表为:sanger法:由于ddNTP的2和3都不含羟基,在DNA合成反应中不能形成磷酸二酯键,因此可以被用来中断DNA合成反应。在4个DNA合成反应体系中分别加入一定比例的带有放射性同位素标记的某种ddNTP,通过凝胶电泳和放射自显影后,可以根据电泳带的位置确定待测分子的DNA序列。Gi
2、lbert法:与sanger法原理相类似,区别在于Gilbert法是先用特定的化学试剂标记碱基再用化学方法打断待测序列,而Sanger法是通过ddNTP随机中断合成待测序列。此外还有焦磷酸测序法、连接酶测序法、杂交测序法等。第一代测序法存在的弊病:成本高、速度慢、通量低成本高、速度慢、通量低。第二代测序技术高通量测序技术 Roche公司的454测序技术焦磷酸测序法 Illumina公司的Solexa技术 ABI公司的SOLiD技术连接酶测序法 与第一代技术相比第二代测序技术不仅保持了高准确度,而且大大降低了测序成本并极大地提高了测序速度。使用使用第一代第一代SangerSanger的测序技术的
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