第七章-现代生物技术与环境污染治理课件.ppt
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- 第七 现代 生物技术 环境污染 治理 课件
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1、第七章第七章 现代生物技术与环境污染治理现代生物技术与环境污染治理 现代生物技术概况现代生物技术概况 基因工程与环境污染治理基因工程与环境污染治理 细胞工程与环境污染治理细胞工程与环境污染治理 酶学工程与环境污染治理酶学工程与环境污染治理 发酵工程与环境污染治理发酵工程与环境污染治理 生态工程与污水处理系统生态工程与污水处理系统第一节第一节 现代生物技术概况现代生物技术概况一、概念一、概念 指利用生物有机体或组成部分发展新产品或新指利用生物有机体或组成部分发展新产品或新工艺的一种技术体系。工艺的一种技术体系。二、内容二、内容 基因工程:主要涉及遗传物质核酸分离、提取、基因工程:主要涉及遗传物质
2、核酸分离、提取、体外剪切、重组以及扩增与表达等技术。体外剪切、重组以及扩增与表达等技术。细胞工程:细胞的离体培养、繁殖、再生、融细胞工程:细胞的离体培养、繁殖、再生、融合以及细胞核、细胞质乃至染色体与细胞器的合以及细胞核、细胞质乃至染色体与细胞器的移植改建等技术。移植改建等技术。酶学工程:利用酶,借助固定化技术、生物反酶学工程:利用酶,借助固定化技术、生物反应器和生物传感器等新技术、新装置,高效优应器和生物传感器等新技术、新装置,高效优质地生产特定产品的技术。质地生产特定产品的技术。发酵工程:为微生物提供最适宜的发酵条件生发酵工程:为微生物提供最适宜的发酵条件生产特定产品的一种技术。产特定产品
3、的一种技术。三、依据和出发点三、依据和出发点 生物技术的依据和出发点是生物有机体所具有生物技术的依据和出发点是生物有机体所具有的各种机能,即生物在生长、繁殖过程中进行的各种机能,即生物在生长、繁殖过程中进行物质合成、降解和转化的能力。物质合成、降解和转化的能力。生物技术的核心基础是基因工程和细胞工程。生物技术的核心基础是基因工程和细胞工程。四、特点四、特点 与传统技术相比,具有一系列优越性:不可取代,与传统技术相比,具有一系列优越性:不可取代,精确、快速,低耗、高效,副产物、副作用小,安精确、快速,低耗、高效,副产物、副作用小,安全性好。全性好。五、环境生物技术五、环境生物技术 应用于认识和解
4、决环境问题过程中的生物技术应用于认识和解决环境问题过程中的生物技术体系,包括对环境污染效应的认识、环境质量体系,包括对环境污染效应的认识、环境质量评价和环境污染的生物处理技术。评价和环境污染的生物处理技术。生物技术在环境污染生物处理中的应用基础是运用生物技术在环境污染生物处理中的应用基础是运用生物生命过程中的反应将污染物转化为无毒、无害、生物生命过程中的反应将污染物转化为无毒、无害、稳定的物质。稳定的物质。第二节第二节 基因工程与环境污染治理基因工程与环境污染治理一、基因工程的分子生物学基础一、基因工程的分子生物学基础 DNA 生物的遗传物质分子,是由大量的脱氧核糖核生物的遗传物质分子,是由大
5、量的脱氧核糖核苷酸组成的线状或环状大分子。苷酸组成的线状或环状大分子。DNA中有四种碱基:腺嘌呤(中有四种碱基:腺嘌呤(A)、鸟嘌呤)、鸟嘌呤(G)、胸腺嘧啶()、胸腺嘧啶(T)和胞嘧啶()和胞嘧啶(C)。)。DNA的可变部分是其碱基顺序。的可变部分是其碱基顺序。基因基因DNA分子上的一个特定片段,不同分子上的一个特定片段,不同基因的遗传信息由各自片段的碱基基因的遗传信息由各自片段的碱基顺序所决定。顺序所决定。基因的准确复制保证了遗传信息的基因的准确复制保证了遗传信息的代代相传。代代相传。二、基因工程的基本过程二、基因工程的基本过程 工具酶工具酶 工具酶是用来对基因片段进行剪切和拼接的,工具酶
6、是用来对基因片段进行剪切和拼接的,包括限制性内切酶和包括限制性内切酶和DNA连接酶。连接酶。基因工程的载体基因工程的载体 载体是将外源基因送入受体细胞的工具。载体是将外源基因送入受体细胞的工具。常用的载体有质粒、噬菌体以及动植物病毒。常用的载体有质粒、噬菌体以及动植物病毒。目的基因的分离目的基因的分离 可通过以下两条途径获得特定的目的基因:可通过以下两条途径获得特定的目的基因:一是从生物的基因组直接分离,二是人合成。一是从生物的基因组直接分离,二是人合成。目的基因与载体的重组目的基因与载体的重组 将目的基因导入受体将目的基因导入受体 常用的受体细胞是大肠杆菌、枯草杆菌、酵母常用的受体细胞是大肠
7、杆菌、枯草杆菌、酵母菌和动植物细胞。菌和动植物细胞。对目的对目的基因的筛选和检测基因的筛选和检测 目的基因在受体细胞中的表达目的基因在受体细胞中的表达三、在环境污染治理中的应用三、在环境污染治理中的应用 降解卤代芳烃的基因工程菌降解卤代芳烃的基因工程菌 分解尼龙寡聚物的基因工程菌分解尼龙寡聚物的基因工程菌 分解多糖的基因工程菌分解多糖的基因工程菌 抗金属基因工程菌抗金属基因工程菌 除草剂降解基因工程菌除草剂降解基因工程菌 杀虫剂降解基因工程菌杀虫剂降解基因工程菌第三节第三节 细胞工程与环境污染生物治理细胞工程与环境污染生物治理一、细胞工程一、细胞工程1、概念:细胞工程是利用细胞学技术,有计、概
8、念:细胞工程是利用细胞学技术,有计划地改造细胞遗传结构,从而培育出人们划地改造细胞遗传结构,从而培育出人们所需要的生物品种或具有某些新性状的所需要的生物品种或具有某些新性状的细细胞群体胞群体。2、内容、内容细胞培养:即使细胞在继续体外生长和细胞培养:即使细胞在继续体外生长和繁殖。繁殖。细胞融合:在一定条件下,将两个或多细胞融合:在一定条件下,将两个或多个细胞融合为一个细胞的过程,又称细个细胞融合为一个细胞的过程,又称细胞杂交。胞杂交。细胞重组:在体外条件下,运用试验技细胞重组:在体外条件下,运用试验技术从活细胞中分离出各种细胞的结构或术从活细胞中分离出各种细胞的结构或组件,再根据需要把它们在不
9、同的细胞组件,再根据需要把它们在不同的细胞之间重新进行装配,成为具有生物活性之间重新进行装配,成为具有生物活性的细胞。的细胞。遗传物质转移:基因在细胞水平上的转遗传物质转移:基因在细胞水平上的转移。移。3、细胞融合构建环境工程菌、细胞融合构建环境工程菌、概念、概念 原生质体(原生质体(Protoplast):细胞质壁分离后去):细胞质壁分离后去掉细胞壁所余下的那部分结构称为原生质体。掉细胞壁所余下的那部分结构称为原生质体。原生质体具有原有细胞全部的内部结构与生理原生质体具有原有细胞全部的内部结构与生理性能,但无细胞壁,细胞呈球形,对渗透压敏性能,但无细胞壁,细胞呈球形,对渗透压敏感,对外界理化
10、因子比较敏感。感,对外界理化因子比较敏感。原生质体融合:在外界理化融合因子的原生质体融合:在外界理化融合因子的诱导下,不同物种间的原生质体的质膜诱导下,不同物种间的原生质体的质膜相互融合杂交,并在适当的条件下,融相互融合杂交,并在适当的条件下,融合的原生质体再生出细胞壁并恢复原来合的原生质体再生出细胞壁并恢复原来完整的细胞形态与群落形态,构成具有完整的细胞形态与群落形态,构成具有多种遗传性状的新物种。故可利用原生多种遗传性状的新物种。故可利用原生质体融合来构建新物种。质体融合来构建新物种。、原生质体融合的步骤、原生质体融合的步骤 亲本的选择:选择适于重组的亲本菌株,选定亲本的选择:选择适于重组
11、的亲本菌株,选定适宜的遗传标记适宜的遗传标记 原生质体的制备:选用合适的酶系在等渗溶液原生质体的制备:选用合适的酶系在等渗溶液中溶解细胞壁中溶解细胞壁 原生质体的再生:酶解后得到的原生质体,在原生质体的再生:酶解后得到的原生质体,在等渗培养基中重建细胞壁,恢复细胞完整形态,等渗培养基中重建细胞壁,恢复细胞完整形态,并能生长、分裂并能生长、分裂、原生质体融合的方法、原生质体融合的方法 化学诱导法:促融剂为聚乙二醇(化学诱导法:促融剂为聚乙二醇(PEG),),PEG在相邻原生质体在相邻原生质体的流动镶嵌型质膜间的流动镶嵌型质膜间形成一种分子桥,沟通两亲本的质膜,形成一种分子桥,沟通两亲本的质膜,改
12、改变其性质,降低其表面势能,变其性质,降低其表面势能,使其上蛋白使其上蛋白质凝聚质凝聚,形成了容易融合的无蛋白颗粒的,形成了容易融合的无蛋白颗粒的磷脂双层区,磷脂双层区,导致原生质体进一步融合导致原生质体进一步融合电融合法:一阶段:电融合法:一阶段:将两亲本的原生质体将两亲本的原生质体混混合悬浮液置于两电极间,合悬浮液置于两电极间,加上交变电场加上交变电场,据双,据双向电泳原理,原生质体会向小电极方向泳动,向电泳原理,原生质体会向小电极方向泳动,另一方面原生质体在电场的作用下产生极化,另一方面原生质体在电场的作用下产生极化,具有一定的偶极距。由于偶极距间的相互作用,具有一定的偶极距。由于偶极距
13、间的相互作用,使原生质体沿电场方向粘结排列成串球使原生质体沿电场方向粘结排列成串球 二阶段:二阶段:用高压脉冲电场冲击已经粘接成串的用高压脉冲电场冲击已经粘接成串的原生质体,原生质体,扰乱了彼此紧靠的原生质体生物膜扰乱了彼此紧靠的原生质体生物膜的分子排列,这种干扰的分子排列,这种干扰使双层磷脂分子微团化,使双层磷脂分子微团化,从而使彼此邻近的生物膜自然的融合。从而使彼此邻近的生物膜自然的融合。4、原生质体融合来构建环境工程菌、原生质体融合来构建环境工程菌 原生质体融合构建苯环化合物降解菌原生质体融合构建苯环化合物降解菌 原生质体融合构建纤维素降解菌原生质体融合构建纤维素降解菌 聚已二醇诱导原生
14、质体融合制备细菌杀虫聚已二醇诱导原生质体融合制备细菌杀虫剂剂 电融合诱导选育电融合诱导选育利用木糖和纤维二糖利用木糖和纤维二糖产乙产乙醇的菌株醇的菌株第四节第四节 酶学工程与环境污染生物治理酶学工程与环境污染生物治理一、酶工程(一、酶工程(Enzymatic Engineering1、概念:指利用生物有机体内酶所具、概念:指利用生物有机体内酶所具有的特异催化功能,借助固定化生物有的特异催化功能,借助固定化生物反应器和生物传感器等技术、装置,反应器和生物传感器等技术、装置,高效优质高效优质地生产特定产品的技术。地生产特定产品的技术。2、研究内容:主要有酶的生产、纯化和固、研究内容:主要有酶的生产
15、、纯化和固定化技术以及在环境污染治理、工业、定化技术以及在环境污染治理、工业、医药、卫生和理论探索等方面的应用。医药、卫生和理论探索等方面的应用。3、研究历程:、研究历程:1 1)自然酶的开发与应用;)自然酶的开发与应用;2 2)固定化酶;)固定化酶;3 3)多酶反应器;)多酶反应器;4 4)仿生技术。)仿生技术。二、固定化酶二、固定化酶1、概念、概念 又称水不溶酶,是通过物理吸附法又称水不溶酶,是通过物理吸附法或化学键合法将水溶性酶和固态的不或化学键合法将水溶性酶和固态的不溶性载体相结合,使酶变成不溶于水溶性载体相结合,使酶变成不溶于水但仍保持催化活性的衍生物。但仍保持催化活性的衍生物。2、
16、特点、特点比较稳定,可长时间保持酶的活性;比较稳定,可长时间保持酶的活性;可回收、再生、重复使用,适合于连可回收、再生、重复使用,适合于连续化、自动化和管道化工艺;续化、自动化和管道化工艺;可制成酶布、酶片、酶柱等多种形式可制成酶布、酶片、酶柱等多种形式3、酶的分离提纯、酶的分离提纯利用微生物生产酶制品可分为菌种选利用微生物生产酶制品可分为菌种选育、发酵培养、分离提取和菌种保存育、发酵培养、分离提取和菌种保存四个步骤。四个步骤。4、酶的固定化方法、酶的固定化方法载体结合法:将酶结合在非水溶性载体结合法:将酶结合在非水溶性的载体上,根据与载体结合方式可的载体上,根据与载体结合方式可分为,共价结合
17、法、离子结合法、分为,共价结合法、离子结合法、物理吸附法、生物特异结合法四种。物理吸附法、生物特异结合法四种。常用载体有:活性炭、多孔玻珠、常用载体有:活性炭、多孔玻珠、高岭土、氧化铝等高岭土、氧化铝等 交联法:利用戊二醛等交联剂使酶与酶发生交联法:利用戊二醛等交联剂使酶与酶发生交联而进行固定。交联而进行固定。包埋法:将酶包裹在凝胶格子或由半透明膜包埋法:将酶包裹在凝胶格子或由半透明膜组成的胶囊中。组成的胶囊中。逆胶束酶法:逆胶束指表面活性剂等两性分逆胶束酶法:逆胶束指表面活性剂等两性分子在有机溶剂中自发形成的聚集体。逆胶束子在有机溶剂中自发形成的聚集体。逆胶束酶法指将酶以逆胶束的形式固定。酶
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