浙科版生物选修3克隆技术课件.ppt

1、植物克隆的植物克隆的技术技术基础：植物组织培养基础：植物组织培养植物细胞植物细胞全能性全能性：植物体的每个生活细胞都具有遗：植物体的每个生活细胞都具有遗传上的全能性，因而传上的全能性，因而具有发育成完整植株的潜能具有发育成完整植株的潜能。细胞全能性的比较：细胞全能性的比较：受精卵受精卵 生殖细胞生殖细胞 体细胞体细胞植物细胞植物细胞 动物细胞动物细胞分化程度低的细胞分化程度低的细胞 分化程度高的细胞分化程度高的细胞为什么植物细胞具有全能性？为什么植物细胞具有全能性？细胞具有发育成完整个体所需要的全套基因细胞具有发育成完整个体所需要的全套基因植物组织培养的理论基础（原理）：细胞的全能性植物组织培

2、养的理论基础（原理）：细胞的全能性 以下不能说明细胞全能性的实验是以下不能说明细胞全能性的实验是:A、胡萝卜韧皮部细胞培育出植株、胡萝卜韧皮部细胞培育出植株B、紫色糯性玉米种子培育出植株、紫色糯性玉米种子培育出植株C、转入抗虫基因的棉花细胞培育出植株、转入抗虫基因的棉花细胞培育出植株D、番茄与马铃薯体细胞杂交后培育出的植株、番茄与马铃薯体细胞杂交后培育出的植株在生物体内，细胞没有表现出全能性，而在生物体内，细胞没有表现出全能性，而是分化为不同的组织、器官，是因为：是分化为不同的组织、器官，是因为：A、细胞丧失了全能性、细胞丧失了全能性 B、基因的表达有选择性、基因的表达有选择性 C、不同的细胞

3、内基因不完全相同、不同的细胞内基因不完全相同 D、在个体发育的不同时期，细胞内的基因发生、在个体发育的不同时期，细胞内的基因发生了变化了变化 细胞离体、细胞离体、一定的营养物质、生长调节剂、一定的营养物质、生长调节剂、无菌等其他外界条件无菌等其他外界条件必要条件：必要条件：、配置半固体培养基、配置半固体培养基、获取植物组织、获取植物组织、获得愈伤组织、获得愈伤组织、培育新植株、培育新植株 成分？植物组织培养的一般程序：植物组织培养的一般程序：脱分化脱分化愈伤组织：相对愈伤组织：相对没有没有分化分化的活的薄壁细胞的活的薄壁细胞团组成的新生组织团组成的新生组织再再分分化化调节营养物质和调节营养物质

4、和生长调节剂的适生长调节剂的适当配比（当配比（P24）诱导根、芽顶诱导根、芽顶端分生组织端分生组织离体的植物器官、组织或细胞离体的植物器官、组织或细胞愈伤组织愈伤组织根、芽根、芽小植株小植株外植体外植体脱分化脱分化植物激素：植物激素：细胞分裂素、生长素等细胞分裂素、生长素等再分化再分化植物组织培养植物组织培养植物组织培养条件植物组织培养条件：一定的营养物质和植物一定的营养物质和植物生长调节剂、一定的温度、生长调节剂、一定的温度、空气、无菌环境、适合的空气、无菌环境、适合的PHPH、适时光照等。适时光照等。获得产物获得产物如：紫草素如：紫草素植物组织培养的一般程序：植物组织培养的一般程序：脱分化

5、脱分化通过悬浮培养通过悬浮培养分散成分散成单细胞单细胞细胞质丰富、液泡细胞质丰富、液泡小而细胞核大（小而细胞核大（胚胚性细胞性细胞的特征）的特征）再再分分化化调节营养物质和调节营养物质和生长调节剂的适生长调节剂的适当配比（当配比（P24）包裹人工种皮，包裹人工种皮，形成人工种子形成人工种子胚状体胚状体人工种皮相当于什么？人工种皮相当于什么？离体的植物器官、组织或细胞离体的植物器官、组织或细胞愈伤组织愈伤组织胚状体胚状体小植株小植株外植体外植体脱分化脱分化植物激素：植物激素：细胞分裂素、生长素等细胞分裂素、生长素等再分化再分化植物组织培养植物组织培养单细胞单细胞通过悬浮培养分散成通过悬浮培养分散

6、成包以人工种皮，包以人工种皮，形成人工种子形成人工种子下列有关植物组织培养过程中细胞脱分化的下列有关植物组织培养过程中细胞脱分化的说法，不正确的是说法，不正确的是A、已经分化的细胞失去特有的结构和功能、已经分化的细胞失去特有的结构和功能而转变成未分化的细胞的过程而转变成未分化的细胞的过程B、已经分化的细胞转变为具有分生能力的已经分化的细胞转变为具有分生能力的薄壁细胞，进而形成植物愈伤组织的过程薄壁细胞，进而形成植物愈伤组织的过程C、离体的植物组织在一定的条件下分化出、离体的植物组织在一定的条件下分化出根和芽的过程根和芽的过程D、离体的植物组织在脱分化形成愈伤组织离体的植物组织在脱分化形成愈伤组

7、织的过程中必须经过有关激素的诱导的过程中必须经过有关激素的诱导植物组织培养形成的愈伤组织进行培养，植物组织培养形成的愈伤组织进行培养，又又可以分化形成根、芽等器官，这一过程称为：可以分化形成根、芽等器官，这一过程称为：A A、脱分化、脱分化 B B、去分化、去分化 C C、再分化、再分化 D D、脱分化或去分化、脱分化或去分化下列不能作为植物组织培养的材料是：下列不能作为植物组织培养的材料是：A A、秋海棠的叶、秋海棠的叶 B B、马铃薯的块茎、马铃薯的块茎C C、成熟的花粉、成熟的花粉 D D、木质部中的导管细胞、木质部中的导管细胞C CD D有性生殖有性生殖离体的离体的花粉粒花粉粒单倍体单

8、倍体体细胞体细胞（根、茎、（根、茎、叶）叶）正常植株正常植株克隆克隆植物细胞全能性的体现：几乎所有植物细胞都可植物细胞全能性的体现：几乎所有植物细胞都可注：细胞全能性表达程度受植物种类和基注：细胞全能性表达程度受植物种类和基 因型的影响因型的影响植物克隆成功的条件：植物克隆成功的条件：1 1、深入探讨特定植物细胞全能性的表达条件、深入探讨特定植物细胞全能性的表达条件2 2、尽量选择、尽量选择性状优良性状优良、细胞全能性表达充分细胞全能性表达充分的的 基因型基因型细胞培养和器官培养：细胞培养和器官培养：愈伤组织细胞愈伤组织细胞芽和根的分生组织芽和根的分生组织完整植株完整植株 愈伤组织细胞愈伤组织

9、细胞单细胞单细胞细胞团细胞团球形球形胚胚心形胚心形胚胚状体胚状体完整植株完整植株 愈伤组织愈伤组织器官器官 器官发生和形态建成主要是通过平衡的器官发生和形态建成主要是通过平衡的植物植物激素配比激素配比进行调控。进行调控。植物细胞培养和器官培养的主要意义：植物细胞培养和器官培养的主要意义：（P25P25）激素调控：生长素含量高于细胞分裂素时，主要激素调控：生长素含量高于细胞分裂素时，主要诱导植物组织脱分化和根原基的形成；当细胞分诱导植物组织脱分化和根原基的形成；当细胞分裂素的效应高于生长素时，主要诱导植物组织再裂素的效应高于生长素时，主要诱导植物组织再分化和芽原基的形成。分化和芽原基的形成。、可

10、以在实验室环境进行植物受精过程和植物、可以在实验室环境进行植物受精过程和植物胚胎发育过程，以及调节控制这些过程的环境因胚胎发育过程，以及调节控制这些过程的环境因素、遗传基础和分子及生理生化机理研究；素、遗传基础和分子及生理生化机理研究；、可以进行遗传工程的操作，完成与植物生长、可以进行遗传工程的操作，完成与植物生长发育有关的重要基因或影响因素的研究；发育有关的重要基因或影响因素的研究；、可以通过实验手段培育植物新品种。、可以通过实验手段培育植物新品种。植物细胞培养和器官培养的意义植物细胞培养和器官培养的意义原生质体培养与植物细胞工程原生质体培养与植物细胞工程2、获得原生质体、获得原生质体 的方

11、法：的方法：纤维素酶纤维素酶和和果胶酶果胶酶溶液处理溶液处理3、原理：细胞壁主要成分纤维素和果胶、原理：细胞壁主要成分纤维素和果胶1、原生质体：细胞中有代谢活性的部分，、原生质体：细胞中有代谢活性的部分，包括质膜、细胞质、细胞核包括质膜、细胞质、细胞核3、植物细胞工程：、植物细胞工程：植物细胞植物细胞个体个体植物细胞植物细胞原生质体原生质体个体个体转基因细胞转基因细胞个体个体重组细胞重组细胞个体个体花粉细胞花粉细胞单倍体个体单倍体个体酶解法酶解法（纤维素酶、果胶酶）（纤维素酶、果胶酶）意义：克服远意义：克服远缘杂交不亲和缘杂交不亲和的障碍，培育的障碍，培育出作物新品种。出作物新品种。杂种细胞形

12、成的标志杂种细胞形成的标志杂种细胞的类型？杂种细胞的类型？植物组织培养植物组织培养杂种植株是几杂种植株是几倍体？倍体？融合方融合方法？法？多途径的植物克隆实践：多途径的植物克隆实践：P25植物克隆的发展：植物克隆的发展：1、探索阶段、探索阶段2、奠基阶段、奠基阶段3、成熟发展阶段、成熟发展阶段动物细胞与组织培养动物细胞与组织培养细胞克隆细胞克隆单克隆抗体单克隆抗体细胞核移植细胞核移植动物动物的克的克隆常隆常用技用技术术动物细胞融合动物细胞融合动物细胞与组织培养动物细胞与组织培养是动物克隆是动物克隆的技术基础的技术基础动物克隆的动物克隆的技术技术基础：动物细胞和组织培养基础：动物细胞和组织培养细

13、胞生物学的主要细胞生物学的主要技术技术基础：细胞培养基础：细胞培养动物细胞培养的原理：细胞增殖动物细胞培养的原理：细胞增殖细胞工程（细胞生物学）的主要细胞工程（细胞生物学）的主要技术技术手段：细胞培手段：细胞培养和细胞融合养和细胞融合细胞工程：细胞水平上的生物工程（细胞工程：细胞水平上的生物工程（P31P31）当一个人烧伤需要皮肤移植的时候当一个人烧伤需要皮肤移植的时候,最好移最好移植谁的植谁的?1 1、自己、自己2 2、同卵双胞胎兄弟或姐妹、同卵双胞胎兄弟或姐妹3 3、父母、父母4 4、一般兄弟或姐妹、一般兄弟或姐妹5 5、其他人、其他人动物细胞培养过程：动物细胞培养过程：动物胚胎或幼龄动动

14、物胚胎或幼龄动物的组织、器官物的组织、器官细胞悬浮液细胞悬浮液机械消化胰蛋白酶消化机械消化胰蛋白酶消化10代细胞代细胞原代培养原代培养50代细胞代细胞传代培养传代培养无限传代无限传代单个细胞单个细胞加培养液加培养液（分解弹性纤维）（分解弹性纤维）分装成多个分装成多个培养瓶培养瓶接触抑制接触抑制成分？成分？为什么？为什么？细胞系：细胞系：可连续传代是细胞可连续传代是细胞细胞系种类：细胞系种类：1 1、连续连续细胞系：原代培养物在细胞系：原代培养物在首次首次传代时传代时就成为细胞系，能就成为细胞系，能连续培养连续培养下去的细胞系下去的细胞系2 2、有限有限细胞系：原代培养物在细胞系：原代培养物在首

15、次首次传代时传代时就成为细胞系，就成为细胞系，不能连续培养不能连续培养下去的细胞系下去的细胞系原因：发生转化，大多数具有异倍体核型原因：发生转化，大多数具有异倍体核型如：恶性细胞系（具有异体致瘤性）如：恶性细胞系（具有异体致瘤性）获得不死性（保留接触抑制，不致癌）获得不死性（保留接触抑制，不致癌）细胞株：细胞株：通过一定的选择或纯化方法，从通过一定的选择或纯化方法，从原代原代培养物培养物或或细胞系细胞系中获得的具有中获得的具有特殊性质特殊性质的细胞的细胞细胞株的特点：具有恒定的细胞株的特点：具有恒定的染色体组型染色体组型、同功同功酶类型酶类型、病毒敏感性病毒敏感性和和生化特性生化特性等等细胞株

16、的种类：细胞株的种类：1 1、连续细胞株：、连续细胞株：可连续多次传代可连续多次传代2 2、有限细胞株：、有限细胞株：可连续次数有限可连续次数有限细胞系泛指细胞系泛指可传代的细胞，细胞株是具有特殊可传代的细胞，细胞株是具有特殊性质的细胞系性质的细胞系动物组织培养：（动物组织培养：（P28）动物组织在体外及人工条件下维持生活状态或动物组织在体外及人工条件下维持生活状态或生长特性。生长特性。动物细胞培养和动物组织培养：动物细胞培养和动物组织培养：可以统称为可以统称为组织培养组织培养获得细胞获得细胞细胞的全能性细胞的全能性细胞株、细胞系细胞株、细胞系植物体植物体培养结果培养结果或细胞分泌蛋白或细胞分

17、泌蛋白快速繁殖、培育快速繁殖、培育无病毒植株等无病毒植株等培养目的培养目的葡萄糖、葡萄糖、动物血清动物血清蔗糖、植物蔗糖、植物激素激素培养基特有成分培养基特有成分液体培养基液体培养基固体培养基固体培养基培养基性质培养基性质细胞增殖细胞增殖原理原理动物细胞培养动物细胞培养植物组织培养植物组织培养比较项目比较项目植物组织培养和动物细胞培养的比较植物组织培养和动物细胞培养的比较具具 体应用体应用得得到到胚胎或幼龄动物的脏器胚胎或幼龄动物的脏器单单 个个 细细 胞胞机械消化、胰蛋白酶消化机械消化、胰蛋白酶消化原原 代代 培养培养培养液培养液葡萄糖、氨基酸、无机盐、葡萄糖、氨基酸、无机盐、维生素、动物血

18、清等维生素、动物血清等传代培养传代培养大量的组大量的组织细胞织细胞(构成组构成组织或器官织或器官)修复受损皮修复受损皮肤、器官等肤、器官等细胞株或细胞系细胞株或细胞系胚胎或幼龄动物的脏器胚胎或幼龄动物的脏器单单 个个 细细 胞胞机械消化、胰蛋白酶消化机械消化、胰蛋白酶消化原原 代代 培养培养培养液培养液葡萄糖、氨基酸、无机盐、葡萄糖、氨基酸、无机盐、维生素、动物血清等维生素、动物血清等传代培养传代培养药物药物研究治疗癌症的药物研究治疗癌症的药物及其疗效及其疗效某物质某物质检测有毒物质、检测有毒物质、致癌物质等致癌物质等细胞株或细胞系细胞株或细胞系B许多致畸物质加入动物细胞培养液后，培养细胞会发

19、生染色许多致畸物质加入动物细胞培养液后，培养细胞会发生染色体结构或数目的变异。根据变异细胞占观察培养细胞的百分体结构或数目的变异。根据变异细胞占观察培养细胞的百分数，可以判断某种物质的毒性数，可以判断某种物质的毒性将上述组织用剪刀剪碎，再用胰蛋将上述组织用剪刀剪碎，再用胰蛋白酶使其分散成单个细胞，然后利白酶使其分散成单个细胞，然后利用培养液配置成一定浓度的细胞悬用培养液配置成一定浓度的细胞悬浮液浮液分别往其中加入等量的配置好的培养液，再往分别往其中加入等量的配置好的培养液，再往1号瓶中滴加号瓶中滴加几滴几滴0.09%的的“三氯生三氯生”试剂，摇匀试剂，摇匀把一个把一个单细胞单细胞从群体中分离出

20、来单独培养，从群体中分离出来单独培养，使之繁衍成一个使之繁衍成一个细胞群体细胞群体的技术。的技术。细胞克隆的细胞克隆的最基本要求最基本要求：克隆来源于：克隆来源于单个单个细胞细胞细胞克隆细胞克隆较易成功的细胞较易成功的细胞：无限细胞系、转化细胞系、肿瘤细胞无限细胞系、转化细胞系、肿瘤细胞提高细胞克隆形成率的措施：提高细胞克隆形成率的措施：P30P30选择适宜的培养基、添加血清、以滋养细胞支选择适宜的培养基、添加血清、以滋养细胞支持生长、激素刺激、使用持生长、激素刺激、使用CO2CO2培养箱调节培养箱调节pHpH细胞克隆的最主要用途之一：细胞克隆的最主要用途之一：分离缺乏特殊基因的突变细胞系分离

21、缺乏特殊基因的突变细胞系细胞融合是将不同种类的两种细细胞融合是将不同种类的两种细胞经过特殊处理后放在一起，在胞经过特殊处理后放在一起，在某些促融因子作用下发生融合，某些促融因子作用下发生融合，形成杂种细胞。形成杂种细胞。细胞细胞A A细胞细胞B B融合细胞融合细胞灭活的仙台病毒、灭活的仙台病毒、PEG等等促融剂促融剂电融合电融合基因型不同的细胞融合就基因型不同的细胞融合就是是细胞杂交细胞杂交基因定位基因定位一、动物细胞融合的原理一、动物细胞融合的原理：与与植物细胞植物细胞原生质体融合的基本原理相同原生质体融合的基本原理相同利用利用:细胞膜的流动性细胞膜的流动性单克隆抗体单克隆抗体传统方法获取抗

22、体，传统方法获取抗体，产量低产量低，而且抗体的，而且抗体的特异性特异性差差，纯度低，反应不够灵敏，纯度低，反应不够灵敏。1、起因：抗体的作用很大、起因：抗体的作用很大传统获取抗体的方法传统获取抗体的方法：某种抗原某种抗原注射注射到动物体内到动物体内（需要反复注（需要反复注射）射）动物体内动物体内产生抗体产生抗体从动物的从动物的 血血清中分离出清中分离出所需要的所需要的抗抗体体科学家分析、探索过程科学家分析、探索过程：1、体内、体内B淋巴细胞可以产生多达百万种以上的特异淋巴细胞可以产生多达百万种以上的特异性抗体；性抗体；2、每一个淋巴细胞只分泌一种特异性抗体、每一个淋巴细胞只分泌一种特异性抗体3

23、、临床医学、临床医学目的目的：获得大量的单一抗体：获得大量的单一抗体理论方法理论方法：用单个：用单个B淋巴细胞进行无性繁殖，也就是淋巴细胞进行无性繁殖，也就是通过克隆，形成细胞群，由该细胞群就能产生出单克通过克隆，形成细胞群，由该细胞群就能产生出单克隆抗体（化学性质单一、特异性强的抗体）隆抗体（化学性质单一、特异性强的抗体）4、遇到的难题：体外培养时，一个、遇到的难题：体外培养时，一个B淋巴细胞不可淋巴细胞不可能无限繁殖，无法得到大细胞群能无限繁殖，无法得到大细胞群大胆设想：大胆设想：小鼠骨髓瘤细胞：能在体外培养下大量增殖小鼠骨髓瘤细胞：能在体外培养下大量增殖 小鼠骨髓瘤细胞小鼠骨髓瘤细胞+某

24、一种淋巴细胞某一种淋巴细胞某一种淋巴细胞：能产生特异性抗体某一种淋巴细胞：能产生特异性抗体过程：过程：抗原抗原注注 射入小射入小鼠鼠 体内体内B淋巴细胞淋巴细胞骨髓瘤细胞骨髓瘤细胞细胞融合细胞融合 筛筛选选杂交瘤细胞杂交瘤细胞细胞细胞 培养培养选出选出能产能产 生特定生特定抗体的细胞抗体的细胞 群，继群，继续培养续培养A细胞细胞B细胞细胞（B淋巴细胞）淋巴细胞）（骨髓瘤细胞）（骨髓瘤细胞）问：这问：这2种细胞经过融合过程可产生多少种细胞？种细胞经过融合过程可产生多少种细胞？A B AA BB AB 淋巴细胞：淋巴细胞：S，D途径合成途径合成DNA，但一般不分裂，但一般不分裂骨髓瘤细胞：骨髓瘤细

25、胞：D途径合成途径合成DNA，能不断分裂，能不断分裂注：注：D途径可被途径可被氨基嘌呤氨基嘌呤阻断阻断筛选筛选杂交瘤细胞：加氨基嘌呤，收集杂交瘤细胞：加氨基嘌呤，收集连续分裂的细胞连续分裂的细胞选择培养基选择培养基 B淋巴细胞淋巴细胞 一般不一般不分裂分裂 骨髓瘤细胞骨髓瘤细胞 能不断能不断分裂分裂合成合成DNA分子分子的途的途径径特点特点S途径途径D途径途径D途径可途径可被氨基嘌被氨基嘌呤阻断呤阻断（添加氨（添加氨基嘌呤后）基嘌呤后）D途径途径AA A B BB AB 能不断能不断分裂分裂S途径途径D途径途径死亡死亡存存活活存存活活继继续续培培养养死亡死亡存存活活筛筛选选出出的的细细胞胞 杂

26、交瘤细胞杂交瘤细胞 返回返回乙肝病毒乙肝病毒B淋巴淋巴细胞细胞 浆细胞浆细胞抗抗 体体Y抗原抗原1 抗原抗原2 抗原抗原3YY抗乙肝抗体抗乙肝抗体抗抗 体体2抗抗 体体3B淋巴淋巴细胞细胞1 B淋巴淋巴细胞细胞2 B淋巴淋巴细胞细胞3骨髓瘤骨髓瘤细胞细胞杂交瘤杂交瘤细胞细胞1 杂交瘤杂交瘤细胞细胞2杂交瘤杂交瘤细胞细胞3抗体抗体1 抗体抗体2 抗体抗体3YYY选出符合要求的杂交瘤细胞选出符合要求的杂交瘤细胞(能产生特定抗体能产生特定抗体)YY能发生特异性结合能发生特异性结合不能发生特异性结合不能发生特异性结合抗原抗原1 1Y1Y1Y1Y1Y1Y1Y1Y1Y1Y1Y1Y1Y1Y1Y1Y1Y1Y1

27、Y1Y1Y1Y1Y1Y1Y1Y1Y1Y1克隆克隆杂交瘤细胞增杂交瘤细胞增殖产生的殖产生的 细细胞群胞群杂交瘤细胞杂交瘤细胞增殖增殖产生产生YYYYYYY抗体抗体单克隆抗体单克隆抗体称称做做概念概念:单个杂交瘤细胞增殖形成单个杂交瘤细胞增殖形成的细胞群所产生的抗体的细胞群所产生的抗体.返回返回体外培体外培养养体内体内培养培养从培养从培养瓶中提瓶中提取取注射入小鼠的腹腔注射入小鼠的腹腔中中从小鼠从小鼠的腹水的腹水中提取中提取放入培养瓶中培放入培养瓶中培养养单克隆抗体单克隆抗体动物细胞培养动物细胞培养杂杂交交瘤瘤细细胞胞用抗原免疫小鼠用抗原免疫小鼠免疫免疫B细胞细胞骨髓瘤细胞骨髓瘤细胞在在PEG作用

28、下融合作用下融合成杂交瘤细胞成杂交瘤细胞HAT培养基筛选培养基筛选杂交瘤细胞增殖杂交瘤细胞增殖,未未增殖细胞死亡增殖细胞死亡筛选产生特异性抗体筛选产生特异性抗体的杂交瘤细胞的杂交瘤细胞克隆化克隆化,制备单克隆制备单克隆抗体抗体单克隆抗体的应用：单克隆抗体的应用：*疾病的诊断、治疗和预防疾病的诊断、治疗和预防优点：特异性强，灵敏度高，优越性强优点：特异性强，灵敏度高，优越性强临床应用：临床应用：1.单抗探针单抗探针2.生物导弹生物导弹 单克隆抗体具有高度专一性，能够识别细胞表面单克隆抗体具有高度专一性，能够识别细胞表面抗原、各种受体、各种体液成分及抗原、各种受体、各种体液成分及细胞细胞内和组织内

29、的各种成分，内和组织内的各种成分，能精确地瞄准和捕获能精确地瞄准和捕获靶细胞靶细胞，特异性地与靶目标发生反应，因，特异性地与靶目标发生反应，因而有而有“生物导弹生物导弹”之称。之称。正在研究：用单克隆抗体治疗癌症正在研究：用单克隆抗体治疗癌症动物体细胞难以克隆的原因？动物体细胞难以克隆的原因？动物体细胞高度分化动物体细胞高度分化囊胚囊胚桑椹胚桑椹胚组织、器官组织、器官分化、形成分化、形成个体个体受精卵受精卵四分裂球四分裂球八分裂球八分裂球原肠胚原肠胚仍具有全能性仍具有全能性多能干细胞多能干细胞：具有分化出多种组织细胞的潜能：具有分化出多种组织细胞的潜能单能造血干细胞单能造血干细胞动物细胞的全能

30、性动物细胞的全能性全能性大小比较：全能性大小比较：受精卵受精卵 胚胎干细胞胚胎干细胞 组织干细胞组织干细胞 生殖生殖细胞细胞 高度分化的体细胞高度分化的体细胞去核的卵细胞去核的卵细胞乳腺细胞核乳腺细胞核 重组细胞重组细胞核移植：利用一个细胞的细胞核（供体核）核移植：利用一个细胞的细胞核（供体核）来取代另一细胞中的细胞核，形成一个来取代另一细胞中的细胞核，形成一个“合子合子”277277次乳腺细胞核移植实验次乳腺细胞核移植实验；获得获得2929个发育个发育为为8 8细胞的细胞的“胚胚”；1313头代孕母亲头代孕母亲；19961996年年7 7月月5 5日，羊羔日，羊羔6LL36LL3，被命名为，

31、被命名为“多多莉莉”。分裂分裂3次次卵细胞卵细胞母绵羊母绵羊母绵羊母绵羊乳腺细胞乳腺细胞细胞质细胞质细胞核细胞核细胞核移植细胞核移植早期胚胎早期胚胎卵裂卵裂3 3次次C母绵羊子宫母绵羊子宫胚胎移植胚胎移植多莉羊多莉羊分娩分娩妊娠妊娠多莉羊的培育过多莉羊的培育过程程融合后的卵细胞融合后的卵细胞为什么选择为什么选择卵细胞？卵细胞？多莉羊的克隆成功证明：多莉羊的克隆成功证明：1、高度分化细胞经一定技术处理，也可高度分化细胞经一定技术处理，也可回复到类似受精卵时期的功能。回复到类似受精卵时期的功能。2、在胚胎和个体发育中，、在胚胎和个体发育中，细胞质具有调细胞质具有调控细胞核（包括异源的细胞核）发育的

32、作控细胞核（包括异源的细胞核）发育的作用。用。胚胎克隆胚胎克隆 使用的核供体细胞如果来自多使用的核供体细胞如果来自多细胞阶段的胚胎，叫做细胞阶段的胚胎，叫做胚胎克隆胚胎克隆。体细胞克隆体细胞克隆 使用的核供体细胞来自动物使用的核供体细胞来自动物体细胞，叫做体细胞，叫做 体细胞克隆体细胞克隆。克隆技术的应用：克隆技术的应用：P371、遗传疾病的治疗、遗传疾病的治疗2、培育优良品种、培育优良品种3、濒危动物的保存、濒危动物的保存4、转基因动物的扩群、转基因动物的扩群5、生产克隆产品，如药物等、生产克隆产品，如药物等下图表示利用植物细胞工程对棉花进行改良的过程，据图分析错误的是A过程需在适宜条件下用纤维酶和果胶酶处理B过程定向改变原生质体的遗传特性C过程需要通过液体悬浮培养D过程需用适宜浓度的生长调节剂处理C下列有关克隆的叙述错误的是A二倍体细胞的传代培养次数通常是有限的B克隆培养法培养过程中多数细胞的基因型会发生改变C每个细胞中都携带整套遗传信息是植物克隆的物质基础D单倍体克隆过程能够发生基因突变B