人教选修3《动物细胞培养和核移植技术》课件.ppt
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- 关 键 词:
- 动物细胞培养和核移植技术 选修 动物 细胞培养 移植 技术 课件
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1、2.2 动物细胞工程2.2.1 动物细胞培养和核移植技术一、动物细胞培养n动物细胞培养(animal cell culture)就是从动物机体中取出相关的组织,将它分散成单个细胞,然后,放在适宜的培养基中让这些细胞生长和增值。那么,动物细胞培养的过程是怎样的呢?培养时又需要哪些条件呢?一、动物细胞培养n动物细胞培养的过程取组织块剪碎组织用酶,处理组织细胞悬浮液原代培养传代培养胰蛋白酶或胶原蛋白酶,使之分散成单个细胞用培养液稀释制成细胞悬浮液一、动物细胞培养n动物细胞培养的过程取样组织剪碎组织酶处理组织制成悬浮液原代培养n定义:动物组织经酶解消化后的初次培养。n细胞贴壁:悬液中分散的细胞贴附在瓶
2、壁上。n接触抑制:当贴壁细胞分裂生长到表面相互接触时,细胞就会停止分裂增殖,这种现象一、动物细胞培养n动物细胞培养的过程取样组织剪碎组织酶处理组织制成悬浮液原代培养传代培养n贴壁细胞重新用胰蛋白酶处理,然后分瓶培养,让细胞继续增殖。1.一般传至10代后就不易传下去了。2.一般来说,10-50代时增殖逐渐减慢,以至于完全停止,这部分细胞核型可能会发生变化。3.目前使用的或冷冻保存的正常细胞通常为10代以内,以保持细胞正常的二倍体核型。4.如若继续传代培养,少数细胞由于发生突变获得不死性,朝着癌细胞的方向发展。一、动物细胞培养n动物细胞培养的条件无菌无毒的环境营养温度和pH气体环境一、动物细胞培养
3、n动物细胞培养的条件无菌无毒的环境n首先,保证被培养的细胞处于无菌、无毒的环境,即对培养液、培养用具进行无菌处理。n通常在培养液中添加一定量的抗生素,防止污染。n此外,定期更换培养液,清除代谢产物,防止有害代谢产物积累对细胞自身造成危害。一、动物细胞培养n动物细胞培养的条件无菌无毒的环境营养n细胞体外培养所需营养物质与体内基本相同n合成培养基(糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素等)按所需种类和数量严格配置,并加血清、血浆等天然成分。一、动物细胞培养n动物细胞培养的条件无菌无毒的环境营养温度和pHn一般与动物体温相近36.5 0.5为宜n多数细胞生存的pH为7.2-7.4一、动物细胞培养n
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