第8章-细菌感染的检查方法与防治原则-课件.ppt

1、第八章第八章 细菌感染的检查方法与防治原则细菌感染的检查方法与防治原则 第一节第一节 细菌感染的诊断细菌感染的诊断包括；包括；细菌学诊断细菌学诊断检测病原菌及其抗原，产物或核酸检测病原菌及其抗原，产物或核酸血清学诊断血清学诊断检测患者血清中特异性抗体检测患者血清中特异性抗体一、病原菌检测一、病原菌检测v早期采集早期采集 应在使用抗菌药物前采集标本，应在使用抗菌药物前采集标本，否则注明药物种类。否则注明药物种类。v无菌采集无菌采集 尽量避免杂菌污染。尽量避免杂菌污染。v根据不同疾病以及疾病不同时期采取不根据不同疾病以及疾病不同时期采取不同标本同标本。v标本必须尽快送检标本必须尽快送检，或冷藏送检

2、。，或冷藏送检。v标本做好标记标本做好标记，详细填写化验单，保证，详细填写化验单，保证各环节的准确无误。各环节的准确无误。标本采集与送检原则标本采集与送检原则致病菌的检验程序致病菌的检验程序标本标本直接涂片染色镜检直接涂片染色镜检分离培养与鉴定分离培养与鉴定病原菌抗原检测病原菌抗原检测 其它检测其它检测涂片涂片镜检镜检菌落菌落特征特征生化生化反应反应药敏药敏试验试验血清学血清学反应反应免疫荧光免疫荧光酶联免疫测定酶联免疫测定免疫印迹免疫印迹细菌核酸细菌核酸（PCR）基因芯片基因芯片动物动物试验试验Hood and chamber for anaerobic cultureBlue indica

3、te oxygenMicroscopy and stains Simple and less sensitive(bacteria No.105/ml)Gram positive(Staphylococcus)Gram negative(E.coli)Acid fast stain Mycobacterium tuberculosis,From:CDC血平板上的血平板上的金黄色葡萄球菌菌落（黄色）及金黄色葡萄球菌菌落（黄色）及表皮葡萄球菌菌落（白色）表皮葡萄球菌菌落（白色）梅毒螺旋体梅毒螺旋体Treponema pallidum(pathogen of syphilis)直接荧光抗体检测直接荧

4、光抗体检测Direct fluorescent antibody test(From Morse S et al:Atlas of sexually transmitted diseases and AIDS,St Louis,2003,Mosby.)二二 血清学诊断血清学诊断 用已知的细菌或其特异性抗原检测患者血清或其它用已知的细菌或其特异性抗原检测患者血清或其它体液中特异抗体和其效价的动态变化，可作为某些体液中特异抗体和其效价的动态变化，可作为某些感染性疾病的辅助诊断。一般采取病人的血清进行感染性疾病的辅助诊断。一般采取病人的血清进行试验，故称为试验，故称为血清学诊断血清学诊断(serol

5、ogical diagnosis)。血清学诊断最好取患者急性期和恢复期双份血清标血清学诊断最好取患者急性期和恢复期双份血清标本，当后者的抗体效价比前者本，当后者的抗体效价比前者升高大于等于升高大于等于4倍倍时方时方有意义。有意义。恢复期恢复期 Convalescent phase急性期急性期Acute phase直接凝集试验直接凝集试验The Fab portions of the antibodies link microorganism together causing agglutination on the slide From:Dr.Gary E.Kaiser 常用方法：直接凝集试验

6、、乳胶凝集试验、常用方法：直接凝集试验、乳胶凝集试验、ELISA。 A microarray is a set of short Expressed Sequence Tags(ESTs)made from a cDNA library of a set of known gene loci.The ESTs are spotted onto a cover-slip-sized glass plate.mRNA are prepared from the tissue of a control organism and an experimental treatment.Complement

7、ary DNA(cDNA)are prepared and labelled with two different fluorescent dyes.The experimental and control libraries are hybridized to the microarray.Dual-channel laser excitation excites the corresponding dye,which fluoresces proportional to the degree of hybridization that has occurred.Relative gene

8、expression is measured as the ratio of the two fluorescences:“up-regulation”relative to the control will be visualized as a red“pseudo-colour,”“down-regulation”shows as green,and constitutive expression as a neutral black.Intensity of color is proportional to the expression differential.DNA chip基因芯片

9、基因芯片死疫苗死疫苗活疫苗活疫苗第二节第二节 细菌感染的特异性预防细菌感染的特异性预防一、一、人工主动免疫人工主动免疫(artificial active immunization)：将疫苗将疫苗(vaccine)或类毒素或类毒素接种于人体，刺激机体免疫系统接种于人体，刺激机体免疫系统,使机体使机体主主动动产生获得性免疫力的一种防治微生物感产生获得性免疫力的一种防治微生物感染的措施，主要用于特异性预防。染的措施，主要用于特异性预防。活疫苗活疫苗 死疫苗死疫苗 制品特点制品特点 减毒或无毒的疫苗减毒或无毒的疫苗 死菌死菌,有免疫原性有免疫原性接种次数接种次数 1次次 2-3次次免疫类型免疫类型

10、细胞和体液免疫细胞和体液免疫 体液免疫体液免疫免疫效果免疫效果 好好,长长(1-5年年)差差,短短(1年年)毒力回升毒力回升 可能可能 不可能不可能安全性安全性 对免疫缺陷者有危险对免疫缺陷者有危险 安全性高安全性高保存保存 不易不易 易易 抗毒素抗毒素丙种球蛋白丙种球蛋白抗菌血清抗菌血清二、二、人工被动免疫人工被动免疫人工被动免疫人工被动免疫(artificial passtive immunization)：注射含有特异性抗体的免注射含有特异性抗体的免疫血清、纯化免疫球蛋白抗体，或细胞因疫血清、纯化免疫球蛋白抗体，或细胞因子等免疫制剂，使机体立即获得特异性免子等免疫制剂，使机体立即获得特异

11、性免疫的过程。但这些免疫物质不是病人自己疫的过程。但这些免疫物质不是病人自己产生的，故维持时间短。主要用于紧急预产生的，故维持时间短。主要用于紧急预防或治疗。防或治疗。两种人工免疫的比较两种人工免疫的比较区别要点区别要点人工主动免疫人工主动免疫人工被动免疫人工被动免疫免疫物质免疫物质抗原抗原抗体或细胞因子等抗体或细胞因子等接种次数接种次数1-3次次1次次免疫出现时间免疫出现时间慢（注射后慢（注射后2-4W）快（注射后立刻出现）快（注射后立刻出现）免疫维持时间免疫维持时间长（数月长（数月数年）数年）短（短（2-3W）用途用途多用于预防多用于预防多用于治疗或应急预多用于治疗或应急预防防Future vaccines Synthetic peptides that correspond to antigenic determinants on a viral protein.Edible vaccines.transgenic plants synthesizing antigens from pathogenic viruses.From:www.niaid.nih.gov