沙门氏菌培训[1]课件.ppt
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1、2023-1-16沙门氏菌培训1沙门氏菌培训沙门氏菌培训沙门氏菌培训1简介简介 沙门氏菌病是公共卫生学上具有重要意义沙门氏菌病是公共卫生学上具有重要意义的人畜共患病之一。的人畜共患病之一。其病原沙门氏菌属肠道细菌科,包括引起其病原沙门氏菌属肠道细菌科,包括引起食物中毒,导致胃肠炎、伤寒和副伤寒的细菌。食物中毒,导致胃肠炎、伤寒和副伤寒的细菌。除可感染人外,还可感染很多动物包括哺除可感染人外,还可感染很多动物包括哺乳类、鸟、爬行类、鱼、两栖类及昆虫。乳类、鸟、爬行类、鱼、两栖类及昆虫。沙门氏菌培训1特性 沙门氏菌革兰氏阴性、两端钝圆的短杆菌沙门氏菌革兰氏阴性、两端钝圆的短杆菌(比大肠杆菌细)。(
2、比大肠杆菌细)。(0.70.71.5m1.5m)(2 25m5m)散在。散在。无荚膜和芽孢,都具有周身鞭毛(除鸡白无荚膜和芽孢,都具有周身鞭毛(除鸡白痢沙门氏菌、鸡伤寒沙门氏菌外),能运动,大痢沙门氏菌、鸡伤寒沙门氏菌外),能运动,大多数具有菌毛,能吸附于宿主细胞表面或凝集豚多数具有菌毛,能吸附于宿主细胞表面或凝集豚鼠红细胞。鼠红细胞。沙门氏菌培训1培养特性 A A 需氧及兼性厌氧菌。需氧及兼性厌氧菌。B B 在普通琼脂培养基上生长良好,培养在普通琼脂培养基上生长良好,培养24h24h后,后,形成中等大小、圆形、表面光滑、无色半透明、边形成中等大小、圆形、表面光滑、无色半透明、边缘整齐的菌落,
3、其菌落特征亦与大肠杆菌相似(无缘整齐的菌落,其菌落特征亦与大肠杆菌相似(无粪臭味)。粪臭味)。C C 鉴别培养基(麦康凯、鉴别培养基(麦康凯、SSSS、伊红美蓝):一、伊红美蓝):一般无色菌落。般无色菌落。D D 三糖铁琼脂斜面:斜面为红色,底部变黑并三糖铁琼脂斜面:斜面为红色,底部变黑并产气。产气。沙门氏菌培训1生化特性1 1)发酵葡萄糖,麦芽糖,甘露醇和山梨醇产气。)发酵葡萄糖,麦芽糖,甘露醇和山梨醇产气。2 2)不发酵乳糖、蔗糖和侧金盏花醇。)不发酵乳糖、蔗糖和侧金盏花醇。3 3)不产吲哚、)不产吲哚、V-PV-P反应阴性。反应阴性。4 4)不水解尿素和对苯丙氨酸不脱氨。)不水解尿素和对
4、苯丙氨酸不脱氨。伤寒沙门氏菌、鸡伤寒沙门氏菌及一部分鸡白痢伤寒沙门氏菌、鸡伤寒沙门氏菌及一部分鸡白痢沙门氏菌发酵糖不产气,大多数鸡白痢沙门氏菌不沙门氏菌发酵糖不产气,大多数鸡白痢沙门氏菌不发酵麦芽糖。发酵麦芽糖。沙门氏菌培训1血清学特性 沙门氏菌具有复杂的抗原结构。沙门氏菌具有复杂的抗原结构。一般沙门氏菌具有菌体一般沙门氏菌具有菌体(O)(O)抗原、鞭毛抗原、鞭毛(H)(H)抗原抗原和表面抗原和表面抗原(Vi(Vi荚膜或包膜抗原荚膜或包膜抗原)三种抗原。三种抗原。沙门氏菌培训1传播途径传播途径 肉的污染肉的污染 肉及其制品的沙门氏菌检出率美国为肉及其制品的沙门氏菌检出率美国为20%25%20%
5、25%、英国为、英国为9.9%9.9%、日本、日本检查进口家禽的污染率为检查进口家禽的污染率为10.3%10.3%,国内肉类沙门氏菌检出率在,国内肉类沙门氏菌检出率在1.1%1.1%39.5%39.5%。蛋的污染蛋的污染 蛋及其制品沙门氏菌检出率为蛋及其制品沙门氏菌检出率为3.9%-43.7%3.9%-43.7%,由于吃蛋引起鼠伤寒病的,由于吃蛋引起鼠伤寒病的病例报告逐渐有增加的趋势。病例报告逐渐有增加的趋势。环境污染环境污染 食品在加工、运输、出售过程中往往被沙门氏菌污染。沙门氏菌在食品在加工、运输、出售过程中往往被沙门氏菌污染。沙门氏菌在粪便、土壤、食品、水中可生存粪便、土壤、食品、水中可
6、生存5 5个月至个月至2 2年之久。年之久。传播问题传播问题 恢复期患者和无症状的带菌者也是常见的传染源。恢复期患者和无症状的带菌者也是常见的传染源。沙门氏菌培训1沙门氏菌检测标准 GB 4789.4-2010沙门氏菌培训1增菌和选择性培养增菌和选择性培养沙门氏菌培训125g样品225ml BPW36 818h培养1ml BPW增菌液+10ml SCTTB增菌液在42、SC增菌液在36各培养1824小时1ml BPW增菌液+10ml TTB分别从TTBTTB和SCSC增菌液中取1环,接种到BS和HE琼脂上培养BS琼脂在36培养4048小时HE琼脂在36培养1824小时分别从BS和HE琼脂上挑选
7、可以菌落进行TSI初步生化鉴定沙门氏菌培训1可疑菌落判可疑菌落判定定HE琼脂琼脂BS琼脂琼脂XLD琼脂琼脂科玛嘉显色琼脂阴科玛嘉显色琼脂阴性性科玛嘉显色琼脂阳科玛嘉显色琼脂阳性性沙门氏菌培训1生化试验生化试验1、先从BS、HE或XLD或显色培养基上挑取可疑菌落。2、接种至TSI,先在斜面上划线,然后再底层穿刺。4、将TSI和NA至于 36,1824h培养3、将接种TSI完毕的接种针不要灭菌,直接在营养琼脂平板上划线。沙门氏菌培训1根据上表中可理解为只有在斜面和底层产碱、不产H2S、不产气的情况下可不进行生化鉴定,直接判定为非沙门氏菌,其余任何情况均需进行生化鉴定。TSI鉴定沙门氏菌培训1三糖铁
8、生化试三糖铁生化试验验底层产H2S底层产酸斜面产碱斜面底层产酸产碱底层产酸斜面产碱底层产H2S产酸产气产酸产气产H2S只在只在TSITSI产碱的产碱的情况下可判定情况下可判定无沙门氏菌,无沙门氏菌,其余任何情况其余任何情况均需进行生化均需进行生化鉴定鉴定沙门氏菌培训1生化试验生化试验1、准备一只、准备一只2ml无菌生理盐水试管、酒精灯、接种环、生化鉴定套装无菌生理盐水试管、酒精灯、接种环、生化鉴定套装。2、从营养琼脂平板上挑取可疑菌落,接种至生理盐水中,制成、从营养琼脂平板上挑取可疑菌落,接种至生理盐水中,制成0.5个个麦氏浊度。麦氏浊度。3、依次在各个安瓿(、依次在各个安瓿(bu)瓶中滴加菌
9、悬液)瓶中滴加菌悬液3滴。滴。4、在赖氨酸脱羧酶肉汤及对照和氰化钾及对照中个滴加无菌石蜡覆、在赖氨酸脱羧酶肉汤及对照和氰化钾及对照中个滴加无菌石蜡覆盖。盖。5、在、在36培养培养1824h。沙门氏菌培训1菌悬液制备菌悬液制备ORORO.5个麦氏浊个麦氏浊度的菌悬液度的菌悬液依次在每个安瓿依次在每个安瓿瓶中滴加菌悬液瓶中滴加菌悬液23滴。滴。第一步第一步第二步第二步第三步第三步沙门氏菌培训1生化试验准备生化试验准备色色氨氨酸酸肉肉汤汤赖赖氨氨酸酸脱脱羧羧酶酶肉肉汤汤氨氨基基酸酸脱脱羧羧酶酶肉肉汤汤尿尿素素酶酶氰氰化化钾钾培培养养基基氰氰化化钾钾培培养养基基对对照照甘甘露露醇醇山山梨梨醇醇半半乳乳
10、糖糖苷苷沙门氏菌培训1色氨酸肉色氨酸肉汤经汤经36,1824h培培养后滴加养后滴加靛基质试靛基质试剂,片刻剂,片刻观察结果观察结果阳性为玫阳性为玫瑰红色。瑰红色。色氨酸脱色氨酸脱羧酶及对羧酶及对照和氰化照和氰化钾及对照钾及对照转种结束转种结束后需滴加后需滴加液体石蜡液体石蜡覆盖试验覆盖试验管方可进管方可进行培养。行培养。靛基质靛基质试验试验+时补做时补做甘露醇甘露醇山梨醇山梨醇试验,试验,试验阳试验阳性后进性后进行血清行血清学鉴定学鉴定TSI-时,时,进行进行ONPG试验,试验,ONPG阴性阴性时进时进行血行血清学清学鉴定。鉴定。H2S+、靛基质、靛基质-、尿素、尿素-、KCN-、赖氨酸、赖氨
11、酸+后进行血清学鉴定。后进行血清学鉴定。生化试验沙门氏菌培训1色氨酸色氨酸吲哚试吲哚试验阴性验阴性符合符合赖氨赖氨酸酸阳性阳性对照对照阴性阴性0NPG阴性阴性尿素尿素酶酶阴性阴性KCN及及对照对照阴性阴性甘露醇甘露醇山梨醇山梨醇阳性阳性符合符合符合符合符合符合符合符合符合符合血清学鉴定血清学鉴定沙门氏菌培训1沙门氏菌的分类沙门氏菌属分为两个种:肠道沙门氏菌(种)肠道亚种、萨拉姆亚种、亚利桑那亚种、双相亚利桑那沙门氏菌、豪顿沙门氏菌及因迪卡沙门氏菌(6个亚种)邦戈尔沙门氏菌(种)沙门氏菌培训1沙门氏菌的分类及命名 -沙门氏菌的分类、命名沙门氏菌培训1沙门氏菌 抗原沙门氏菌培训1O抗原抗原 也称菌
12、体抗原,是细胞壁的组成成分Vi抗原抗原 是一种特殊的菌体抗原,属于K抗原群(如伤寒沙门氏菌、丙型副伤寒沙门氏菌和都柏林沙门氏菌都含有Vi抗原)H抗原(即鞭毛抗原)抗原(即鞭毛抗原)H抗原与抗血清的反应成絮状或绒状。大部分沙门氏菌H抗原都具有两相。第一相被称为特异性相,第二相为非特异性相。O、H、Vi抗原抗原沙门氏菌培训1vi抗原抗原 因与毒力有关而命名为因与毒力有关而命名为vi vi抗原。抗原。由聚由聚-n-n-乙酰乙酰-d-d-半乳糖胺糖醛酸组成。半乳糖胺糖醛酸组成。不稳定,经不稳定,经6060加热、石碳酸处理或人工传加热、石碳酸处理或人工传代培养易破坏或丢失。代培养易破坏或丢失。ViVi抗
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