枯草杆菌摇瓶发酵生产淀粉酶培训课件.ppt

1、枯草杆菌摇瓶发酵生产淀粉酶枯草杆菌摇瓶发酵生产淀粉酶发酵液发酵液预处理（细菌絮凝）预处理（细菌絮凝）固液分离（离心、过滤）固液分离（离心、过滤）菌体（胞内酶）菌体（胞内酶）动植物源酶动植物源酶液体（胞外酶）液体（胞外酶）细胞破碎细胞破碎提取提取固液分离固液分离液体液体酶的比活力是酶纯度的一个指标，是指在特定条件下，单位重量（mg）蛋白质或RNA所具有的酶活力单位数。001 g)可溶性淀粉(以绝干计)于烧杯中，用少量水调成浆状物，边搅拌边缓缓加入70 mL沸水中，然后用水分次冲洗装淀粉的烧杯，洗液倒人其中，搅拌加热至完全透明，冷却定容至100 mL。外观：棕褐色液体 溶解性：易溶于水在喷射液化工

2、艺中瞬间温度达 105-110，仍能有效水解淀粉。发酵结束时，显微镜检查每个发酵瓶是否污染，若无污染合并发酵液并测定发酵酶活力。00 mL，用少量磷酸缓冲液充分溶解，将上清液小心倾入容量瓶中，若有剩余残渣，再加少量磷酸缓冲液充分研磨，最终样品全部移入容量瓶中，用磷酸缓冲液定容至刻度，摇匀。4)初筛：选出产酶菌种，以多为主。液体剂型酶制剂和固体剂型酶制剂。称取1 g 2 g酶粉(精确至0.0条件下，1小时液化可溶性淀粉的克数。本产品适用于酒精、啤酒、味精、发酵工业的液化以及纺织退浆等。固液分离（离心、过滤）中温-液化型淀粉酶系用枯草芽孢杆菌（Bacillus Subtilis)经发酵提炼精制而成

3、。酶活力测定的基本步骤：3、工艺条件：查资料，自行设计（摇瓶发酵生产-淀粉酶）(2)根据酶的动力学性质，确定酶催化反应的温度、pH值、底物浓度、激活剂浓度等反应条件。0 g碘化钾，用少量水使碘完全溶解，定容至500 mL，贮存于棕色瓶中。2、仪器耗材：恒温培养箱、冰箱、高压灭菌锅、无菌操作台、摇床、托盘天平、分析天平、电炉、白色搪瓷杯、三角瓶、量筒、纱布、绳子、pH 试纸、玻棒等。按产品的适用温度分为:工业、食品、饲料工业、食品、饲料浓缩浓缩（蒸发、超滤、沉淀）（蒸发、超滤、沉淀）浓缩液浓缩液配方配方干燥干燥医药、分析、科研医药、分析、科研液体酶液体酶固体酶固体酶浓缩浓缩分离纯化分离纯化（离心

4、、沉淀、膜分离、（离心、沉淀、膜分离、层析、电泳、萃取、结晶）层析、电泳、萃取、结晶）配方、制剂配方、制剂干燥干燥液体酶液体酶固体酶固体酶v=-dS/dt=dP/dt中温-液化型淀粉酶系用枯草芽孢杆菌（Bacillus Subtilis)经发酵提炼精制而成。大规模液体深层发酵之前，首先在实验室对保藏的目的菌种进行活化和扩大培养，制得生产种子。大规模液体深层发酵之前，首先在实验室对保藏的目的菌种进行活化和扩大培养，制得生产种子。3、工艺条件：查资料，自行设计酶活力测定的基本步骤：5 mL，摇匀后，置于600.2)富集培养:投其所好，取其所抗。外观：棕褐色液体 溶解性：易溶于水枯草杆菌摇瓶发酵生产

5、淀粉酶5 mL盐酸溶液和5.n样品的稀释倍数（可通过反应时间和加入固定化酶的量来控制）。溶解性：易溶于水2(耐高温-淀粉酶制剂置于700.液体剂型酶制剂和固体剂型酶制剂。国际上另一个常用的酶活力单位是卡特（Kat）。按产品的适用温度分为:2、测定反应液中底物或产物的变化量。2、培养基的准备：查资料，自行设计热稳定性：需Ca 2+150ppm，最适作用温度 60-70，在70-90之间，随着温度升高，其反应速度加快，但失活也加快，适用于最高达90的液化过程。000 g(精确至0.固液分离（离心、过滤）其中化学滴定、紫外、可见光比色法最为常用。2、测定反应液中底物或产物的变化量。3、工艺条件：查资

6、料，自行设计0 g碘化钾，用少量水使碘完全溶解，定容至500 mL，贮存于棕色瓶中。其中化学滴定、紫外、可见光比色法最为常用。中温a一淀粉酶活力：酶比活力酶活力（单位）/mg（蛋白或RNA）外观：棕褐色液体 溶解性：易溶于水本产品适用于酒精、啤酒、味精、发酵工业的液化以及纺织退浆等。碘、碘化钾、-淀粉酶制剂、磷酸氢二钠、柠檬酸、盐酸、可溶性淀粉（湖州展望化学药业有限公司）。X1=c n2、测定反应液中底物或产物的变化量。5 mL，摇匀后，置于600.1，中温-淀粉酶分为固体和液体两种剂型。要准确地测定酶的活力，必须满足这些前提条件。国际上另一个常用的酶活力单位是卡特（Kat）。外观：棕褐色液体

7、 溶解性：易溶于水001 g)可溶性淀粉(以绝干计)于烧杯中，用少量水调成浆状物，边搅拌边缓缓加入70 mL沸水中，然后用水分次冲洗装淀粉的烧杯，洗液倒人其中，搅拌加热至完全透明，冷却定容至100 mL。3、工艺条件：查资料，自行设计0 g碘化钾，用少量水使碘完全溶解，定容至500 mL，贮存于棕色瓶中。n样品的稀释倍数（可通过反应时间和加入固定化酶的量来控制）。大规模液体深层发酵之前，首先在实验室对保藏的目的菌种进行活化和扩大培养，制得生产种子。原理：-淀粉酶制剂能将淀粉分子链中的-1,4-葡萄糖苷键随机切断成长短不一的短链糊精、少量麦芽糖和葡萄糖，而使淀粉对碘呈篮紫色的特性反应逐渐消失，呈

8、现棕红色，其颜色消失的速度与酶活性有关，据此可通过反应后的吸光度计算酶活力。（摇瓶发酵生产-淀粉酶）0 mL可溶性淀粉溶液于试管中，加入磷酸缓冲液2.中温-液化型淀粉酶系用枯草芽孢杆菌（Bacillus Subtilis)经发酵提炼精制而成。2、测定反应液中底物或产物的变化量。发酵结束时，显微镜检查每个发酵瓶是否污染，若无污染合并发酵液并测定发酵酶活力。要准确地测定酶的活力，必须满足这些前提条件。大规模液体深层发酵之前，首先在实验室对保藏的目的菌种进行活化和扩大培养，制得生产种子。酶活力测定的要求：快速、简便、准确。5 mL，摇匀后，置于600.2)富集培养:投其所好，取其所抗。凡是能催化淀粉

9、（或糖元）分子及其分子片段中的-葡萄糖苷键水解的酶，统称为淀粉酶，包括-淀粉酶，糖化酶，-淀粉酶，异淀粉酶，环状糊精生成酶，麦芽寡糖生成酶等。5、发酵：将摇床培养好的种子培养液接入发酵培养基中，接种量为5 mL，共接3 瓶（100ml/250ml瓶），做好标记。发酵生产中多用液体深层发酵法制备酶。微生物发酵法是酶制剂生产的主要方法。5 mL盐酸溶液和5.中温-液化型淀粉酶系用枯草芽孢杆菌（Bacillus Subtilis)经发酵提炼精制而成。耐高温-淀粉酶采用地衣芽孢杆菌经深层培养，提取等工序精制而成，能随机水解淀粉、糖原及其降解物内部的-1，4葡萄糖苷健使得胶状淀粉溶液的粘度迅速下降，产生

10、可溶性糊精和寡聚糖，过度的水解可产生少量葡萄糖和麦芽糖。外观：棕褐色液体 溶解性：易溶于水5 mL，摇匀后，置于600.中温a一淀粉酶活力：1、菌种：枯草芽孢杆菌液体为2000 u/ml要准确地测定酶的活力，必须满足这些前提条件。如化学滴定、比色法、紫外光吸收、荧光测定、同位素标记底物或称放射性化学法、酶偶联法等。酶的比活力是酶纯度的一个指标，是指在特定条件下，单位重量（mg）蛋白质或RNA所具有的酶活力单位数。按产品的适用温度分为:能水解淀粉分子链中的-1,4-葡萄糖苷键，将淀粉链切断成为短链糊精和少量麦芽糖和葡萄糖，使淀粉粘度迅速下降的酶制剂。在喷射液化工艺中瞬间温度达 105-110，仍

11、能有效水解淀粉。磷酸缓冲液(pH=6.2、培养基的准备：查资料，自行设计1，耐高温-淀粉酶为液体酶制剂。酶比活力酶活力（单位）/mg（蛋白或RNA）固液分离（离心、过滤）固液分离（离心、过滤）可用以比较每单位质量酶蛋白的催化能力。酶制剂的发酵生产过程图解如化学滴定、比色法、紫外光吸收、荧光测定、同位素标记底物或称放射性化学法、酶偶联法等。3、工艺条件：查资料，自行设计c测试酶样浓度，u/mL或u/g能水解淀粉分子链中的-1,4-葡萄糖苷键，将淀粉链切断成为短链糊精和少量麦芽糖和葡萄糖，使淀粉粘度迅速下降的酶制剂。2、仪器耗材：恒温培养箱、冰箱、高压灭菌锅、无菌操作台、摇床、托盘天平、分析天平、

12、电炉、白色搪瓷杯、三角瓶、量筒、纱布、绳子、pH 试纸、玻棒等。液体为2000 u/ml2、测定反应液中底物或产物的变化量。要准确地测定酶的活力，必须满足这些前提条件。(2)根据酶的动力学性质，确定酶催化反应的温度、pH值、底物浓度、激活剂浓度等反应条件。本产品适用于酒精、啤酒、味精、发酵工业的液化以及纺织退浆等。4)初筛：选出产酶菌种，以多为主。0 g碘化钾，用少量水使碘完全溶解，定容至500 mL，贮存于棕色瓶中。广泛应用于淀粉糖工业、酒精、啤酒、味精、酿造、烘焙、饲料、纺织退浆、医药等领域。酶制剂的发酵生产过程图解液体剂型酶制剂和固体剂型酶制剂。5 mL盐酸溶液和5.按产品的适用温度分为

13、:中温-淀粉酶制剂的酶活力按下式计算:固体分为 2000、4000u/g,6000u/g 三种。1，中温-淀粉酶分为固体和液体两种剂型。发酵生产中多用液体深层发酵法制备酶。发酵结束时，显微镜检查每个发酵瓶是否污染，若无污染合并发酵液并测定发酵酶活力。外观：棕褐色液体酶比活力酶活力（单位）/mg（蛋白或RNA）广泛应用于淀粉糖工业、酒精、啤酒、味精、酿造、烘焙、饲料、纺织退浆、医药等领域。0条件下，1小时液化可溶性淀粉的克数。按产品的适用温度分为:微生物发酵法是酶制剂生产的主要方法。产酶微生物的分离筛选方法要准确地测定酶的活力，必须满足这些前提条件。摇瓶培养也是实验室模拟生产上进行发酵产酶的一种模拟实验。溶解性：易溶于水1，中温-淀粉酶分为固体和液体两种剂型。5 mL，摇匀后，置于600.（摇瓶发酵生产-淀粉酶）产品特性:(物理特性)（蒸发、超滤、沉淀）比活力：每mg蛋白质中有多少个酶单位。碘、碘化钾、-淀粉酶制剂、磷酸氢二钠、柠檬酸、盐酸、可溶性淀粉（湖州展望化学药业有限公司）。中温-液化型淀粉酶系用枯草芽孢杆菌（Bacillus Subtilis)经发酵提炼精制而成。2、测定反应液中底物或产物的变化量。2、测定反应液中底物或产物的变化量。酶活力测定的要求：快速、简便、准确。