采供血机构工作人员远程二类上岗1培训课件.ppt
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1、采供血机构工作人员远程二类上岗 病毒、细菌、原虫、真菌,只有病毒、细菌、原虫、真菌,只有前三种可经血传播,但最常见的经前三种可经血传播,但最常见的经血传播的病原体是病毒。血传播的病原体是病毒。病毒由核酸、核衣壳、包膜组成;病毒由核酸、核衣壳、包膜组成;但朊病毒不含核酸、仅由蛋白质组但朊病毒不含核酸、仅由蛋白质组成、此病毒侵袭神经系统和脑组织。成、此病毒侵袭神经系统和脑组织。病毒蛋白质存在于病毒包膜和核衣病毒蛋白质存在于病毒包膜和核衣壳上,可被机体免疫应答来识别。壳上,可被机体免疫应答来识别。细菌原核生物具有清晰的细胞细菌原核生物具有清晰的细胞 结结构、但缺乏真正的细胞核。许多细构、但缺乏真正的
2、细胞核。许多细菌包被有荚膜,能直接引起免疫应菌包被有荚膜,能直接引起免疫应答。答。原虫属真核生物、是单细胞有机体、原虫属真核生物、是单细胞有机体、大多数原虫生活在水里、仅少数寄大多数原虫生活在水里、仅少数寄生在其它动物的身上。生在其它动物的身上。真核生物有真正的细胞核(核膜、真核生物有真正的细胞核(核膜、核仁)。核仁)。真菌不同与细菌、大多数真菌能分真菌不同与细菌、大多数真菌能分解有解有 机物和废物、只有少数种类机物和废物、只有少数种类的真菌可引起人类疾病。真菌分霉的真菌可引起人类疾病。真菌分霉菌型和酵母型(酵母菌和类酵母菌)菌型和酵母型(酵母菌和类酵母菌)酵母型以单细胞形式通过出芽的方酵母型
3、以单细胞形式通过出芽的方式生长。霉菌可形成菌丝体,酵母式生长。霉菌可形成菌丝体,酵母菌不形成菌丝体。菌不形成菌丝体。近年,一种新的传染性病原体朊病近年,一种新的传染性病原体朊病毒被证实存在。朊病毒是唯一不含毒被证实存在。朊病毒是唯一不含任何核苷酸,仅由蛋白质组成的病任何核苷酸,仅由蛋白质组成的病原体。原体。传染性病原体是否可经血传播取决传染性病原体是否可经血传播取决于以下三个条件;于以下三个条件;1.病原体必须能够随血进入宿主病原体必须能够随血进入宿主或患者体内。或患者体内。2.被感染的献血者没有任何症状。被感染的献血者没有任何症状。3.病原体在血液中能存活一段时病原体在血液中能存活一段时间。
4、间。具备三个条件是否真的发生还取决具备三个条件是否真的发生还取决于多种因素,如患者的免疫状态和于多种因素,如患者的免疫状态和输入的传染性病原体的数量。输入的传染性病原体的数量。输血是传播传染性病原体的主要途输血是传播传染性病原体的主要途径但不是首要途径。径但不是首要途径。1、免疫系统的组成免疫系统的组成;免疫器官,免疫器官,免疫组织,免疫细胞,免疫分子组免疫组织,免疫细胞,免疫分子组成。成。五HIV抗体的筛检方法的选择HIV为逆转录病毒,其核心蛋白P24和包膜蛋白gp41最具免疫性,主要破坏免疫系统、感染CD4+细胞。六、血型鉴定和配血试验的原理许多细菌包被有荚膜,能直接引起免疫应答。三日疟原
5、虫IgG(73%)不完全抗体、能通过胎盘、与红细胞在盐水中不凝集、但可致敏红细胞、最适反应温度37、。真菌分霉菌型和酵母型(酵母菌和类酵母菌)酵母型以单细胞形式通过出芽的方式生长。一期损伤粘膜淋巴系统六抗HIV抗体筛检试验的应用3、病毒感染相应的宿主细胞后,可被机体免疫应答的物质是病毒核酸。2 (阴性对照的平均值)HIV抗原检测 HIV抗原检测采用夹心法(抗体抗原抗体)一个是抗血清污染和效价降低,污染导致假阳性、效价降低导致假阴性感染LAK非特异性的杀灭靶细胞过敏反应 免疫器官中枢免疫器官免疫器官中枢免疫器官骨髓、骨髓、胸腺、是免疫活性细胞的产生、增胸腺、是免疫活性细胞的产生、增殖和分化的场所
6、殖和分化的场所 周围免疫器官周围免疫器官脾、脾、淋巴结、何粘膜相关淋巴组织、是淋巴结、何粘膜相关淋巴组织、是免疫细胞和应答的场所。免疫细胞和应答的场所。免疫细胞免疫细胞 1.T淋巴细胞淋巴细胞 2.B淋巴细胞淋巴细胞 3.第三类淋巴细胞第三类淋巴细胞 4.辅助细胞辅助细胞 T淋巴细胞辅助淋巴细胞辅助T淋巴细胞(淋巴细胞(Th)CD4 分分Th1和和Th2 细胞毒淋巴细胞(细胞毒淋巴细胞(Tc)CD8 2.B淋巴细胞是产生抗体的细胞 3.第三类淋巴细胞(大颗粒淋巴细胞)NKc Kc LAK细胞(5%10%)NKc杀伤肿瘤细胞和病毒感染细胞 Kc 识别IgG包被的细胞 LAK非特异性的杀灭靶细胞
7、4.辅助细胞单核吞噬细胞系统、树突状细胞和棘细胞 免疫分子;主要是免疫球蛋白、既免疫分子;主要是免疫球蛋白、既抗体、它属于抗体、它属于r球蛋白。球蛋白。1.抗体是由蛋白质和碳水化合物组成、是抗体是由蛋白质和碳水化合物组成、是r球蛋白、也称作免疫球蛋白球蛋白、也称作免疫球蛋白 2.抗体分子的基本结构是由一条重链(分子抗体分子的基本结构是由一条重链(分子量约量约50000)和一条轻链(分子量约)和一条轻链(分子量约25000)组成,共有五种免疫球蛋白组成,共有五种免疫球蛋白IgG IgM IgA IgE IgD,其区别在于重链成分和结构的不其区别在于重链成分和结构的不同。同。丙肝实验室诊断及临床意
8、义1、免疫系统的组成;免疫器官,免疫组织,免疫细胞,免疫分子组成。六抗HIV抗体筛检试验的应用2、细菌感染人体后产生的病变通常是由细菌产生并释放病毒而导致的。1、朊病毒是唯一的不含任何核苷酸仅由蛋白质组成的病原体。三、ABO血型系统的正反定型,对献血者和患者鉴定分Th1和Th2 K识别IgG包被的感染细胞康复低或间歇病毒血症、慢性感染、抗-HCV假阳性结果、“被动”输入抗体HIV和HBV 感染后,抗体的产生对机体免受再次感染有保护作用,ABO新生儿溶血病患儿换血、则用低效价O型血;这种现象用37孵育。病原体在血液中能存活一段时间。Cutoff值的计算Cutoff值=Ncm+0.HIV抗原检测
9、HIV抗原检测采用夹心法(抗体抗原抗体)(其功能是抵御炎症感染)不完全D和RhDu型不同、不完全D是部分抗原丢失、可产生针对丢失部分抗原的抗D抗体;能引起疟疾的疟原虫有四种筛检结果处理初试阳性标本用特异性快速法一般只重做一份,而颗粒法和EIA均做双份。3.IgG 占人体免疫球蛋白总量占人体免疫球蛋白总量73%、4.IgM占人体免疫球蛋白总量占人体免疫球蛋白总量8%、由五个、由五个基本单位组成、是初次免疫应答的主要抗基本单位组成、是初次免疫应答的主要抗体。体。5.IgA占人体免疫球蛋白总量占人体免疫球蛋白总量18%、由二个、由二个基本单位组成、是分泌物和粘膜中的主要基本单位组成、是分泌物和粘膜中
10、的主要抗体抗体 6.IgE 和和 IgD共占共占1%、IgD位于淋位于淋巴细胞表面为表面受体;巴细胞表面为表面受体;IgE与过与过敏反应有关、位于肥大细胞和嗜碱敏反应有关、位于肥大细胞和嗜碱性细胞表面性细胞表面 免疫系统的组成免疫器官、免疫组免疫系统的组成免疫器官、免疫组织、免疫细胞织、免疫细胞 免疫分子组成。但免疫分子组成。但根据其作用,免疫系统是由两部分根据其作用,免疫系统是由两部分组成、即外来蛋白的体内识别和阻组成、即外来蛋白的体内识别和阻止体内传染性病原体繁殖生长这两止体内传染性病原体繁殖生长这两部分组成,这种免疫应答是特异性部分组成,这种免疫应答是特异性的。的。免疫反应分体液免疫和细
11、胞免疫免疫反应分体液免疫和细胞免疫 细胞免疫由细胞免疫由T淋巴细胞介导、包括辅助性淋巴细胞介导、包括辅助性T细胞和杀伤性细胞和杀伤性T细胞,辅助性细胞,辅助性T细胞表达细胞表达CD4、杀伤性、杀伤性T细胞表达细胞表达CD8,体液免疫(体液免疫(Bc):是是B细胞介导的抗原抗体细胞介导的抗原抗体反应,和免疫学检测方法有关反应,和免疫学检测方法有关 细胞免疫(Th)Th1 Th2 NK破坏被微生物感染的细胞和组织 Tc:LAK非特异性的杀灭靶细胞 K识别IgG包被的感染细胞 减少输血传染传染性病原体的方法减少输血传染传染性病原体的方法 仔细选择献血员仔细选择献血员 筛检捐献的血液筛检捐献的血液 去
12、除血液中被感染的特殊成分去除血液中被感染的特殊成分 用物理方法灭活感染性病原体用物理方法灭活感染性病原体 血液筛查就是检查传染性标志物血液筛查就是检查传染性标志物 传染性标志物可以是病原体本身、传染性标志物可以是病原体本身、也可以是特异性抗体也可以是特异性抗体.HIV和和HBV 感染后,抗体的产生感染后,抗体的产生对机体免受再次感染有保护作用,对机体免受再次感染有保护作用,对献血员筛查而言,检测病原体自对献血员筛查而言,检测病原体自身比检测抗体要好。抗体的出现仅身比检测抗体要好。抗体的出现仅提示了一种免疫力,而非感染状态。提示了一种免疫力,而非感染状态。对乙型肝炎,检测对乙型肝炎,检测HBsA
13、g是用于是用于HBV 感染的筛查;而对于感染的筛查;而对于HIV,检,检测测HIV抗体用于献血者抗体用于献血者HIV感染的感染的筛查筛查1986年西非发现HIV2,两者的包膜蛋白不同。免疫系统的组成免疫器官、免疫组织、免疫细胞 免疫分子组成。不完全D和RhDu型不同、不完全D是部分抗原丢失、可产生针对丢失部分抗原的抗D抗体;新生儿ABO血型只作正定三期损伤神经系统合心血管系统细胞免疫由T淋巴细胞介导、包括辅助性T细胞和杀伤性T细胞,辅助性T细胞表达CD4、杀伤性T细胞表达CD8,但根据其作用,免疫系统是由两部分组成、即外来蛋白的体内识别和阻止体内传染性病原体繁殖生长这两部分组成,这种免疫应答是
14、特异性的。筛检结果处理初试阳性标本用特异性快速法一般只重做一份,而颗粒法和EIA均做双份。免疫反应分体液免疫和细胞免疫活动性HCV感染(急性或慢性感染)去除血液中被感染的特殊成分细胞免疫由T淋巴细胞介导、包括辅助性T细胞和杀伤性T细胞,辅助性T细胞表达CD4、杀伤性T细胞表达CD8,早期HCV感染免疫障碍患者慢性HCV感染真核生物有真正的细胞核(核膜、核仁)。疟原虫有二个宿主人和按蚊1986年西非发现HIV2,两者的包膜蛋白不同。(其功能是抵御炎症感染)一、血液中主要成分的功能及其在数学中的意义 Th2血型鉴定方面注意两个问题,生 20%40%1.1983年发现的年发现的HIV1;1986年西
15、非发现年西非发现HIV2,两者的包膜蛋白不同。,两者的包膜蛋白不同。2.与与HIVRNA相关的两种蛋白质分别是相关的两种蛋白质分别是7KDa和和9KDa(7P和和9P),逆转录酶是),逆转录酶是P66。糖蛋白的缩写是。糖蛋白的缩写是gp.3.HIV1的包膜蛋白的包膜蛋白P17/gp41/gp120 HIV2的包膜蛋白的包膜蛋白:P17/gp36/gp110130.4.当病毒开始复制时、感染进入最后阶段、当病毒开始复制时、感染进入最后阶段、产生大量病毒粒子,以出芽的方式脱离细产生大量病毒粒子,以出芽的方式脱离细胞时,外面包裹一层细胞膜、形成病毒颗胞时,外面包裹一层细胞膜、形成病毒颗粒。粒。5.H
16、IV为逆转录病毒,其核心蛋白为逆转录病毒,其核心蛋白P24和包和包膜蛋白膜蛋白gp41最具免疫性,主要破坏免疫系最具免疫性,主要破坏免疫系统、感染统、感染CD4+细胞。(细胞。(CD4+细胞帮助刺细胞帮助刺激免疫应答的激免疫应答的Tc、Thc、吞噬细胞)、吞噬细胞)6.AIDS相关综合征的缩写是相关综合征的缩写是ARC 7.ARC恶性发展的预兆是既可检恶性发展的预兆是既可检测到测到gp41抗体又能检测到抗体又能检测到P24抗抗原。原。8.输血是输血是HIV传播的重要途径、但传播的重要途径、但不是主要途径。不是主要途径。1.HIV抗体检测的基本方法抗体检测的基本方法 EIA(抗人球法(抗人球法I
17、型、竞争法型、竞争法 II型、型、夹心法夹心法 III型)、型)、颗粒凝集试验、颗粒凝集试验、特异性快速试验(颗粒凝集试验、特异性快速试验(颗粒凝集试验、特异性快速试验只能检测抗体)。特异性快速试验只能检测抗体)。抗人球蛋白抗人球蛋白EIA法中的标记酶通常法中的标记酶通常是辣根过氧化物酶(使底物氧化)是辣根过氧化物酶(使底物氧化)和碱性磷酸酶(使底物去磷酸化)。和碱性磷酸酶(使底物去磷酸化)。竞争型竞争型EIA法的酶结合物是酶标法的酶结合物是酶标HIV抗体抗体,其浓度应低于标本中的,其浓度应低于标本中的HIV抗体最小浓度。抗体最小浓度。HIV抗原检测 HIV抗原检测采用夹心法(抗体抗原抗体)结
18、果判读 I型与夹心法 III型中、高OD值、产生颜色、表明有反应;竞争法 II型中、高OD值、产生颜色、表明无反应;Cutoff值的计算Cutoff值=Ncm+0.2 (阴性对照的平均值)标准比率标准比率=OD值值/Cutoff值,数值值,数值小于小于1为无反应结果;为无反应结果;数值大于数值大于1为有反应结果;但在竞争型为有反应结果;但在竞争型EIA法中、比率法中、比率=Cutoff值值/OD值。值。特异性快速法蛋白A由金黄色葡萄球菌产生,能与IgG的Fc段结合(补体结合部位)。灵敏度检测出最弱阳性标本的能力(真阳灵敏度检测出最弱阳性标本的能力(真阳性性/真阳性真阳性+假阴性假阴性100%)
19、特异性避免假阳性或非特异性阳性结果的特异性避免假阳性或非特异性阳性结果的能力(真阴性能力(真阴性/真阴性真阴性+假阳性假阳性100%)。)。质控品质控品中不能含有那些可能干扰实质控品质控品中不能含有那些可能干扰实验的防腐剂,叠氮钠可能验的防腐剂,叠氮钠可能EIA法中的辣根过法中的辣根过氧化物酶时候失活。氧化物酶时候失活。筛检结果处理初试阳性标本用特异性快速法一般只重做一份,而颗粒法和EIA均做双份。1.对质量体系而言,最本质的是各种对质量体系而言,最本质的是各种程序文件化。程序文件化。2.SOP初稿由各岗位工作人员起草,初稿由各岗位工作人员起草,负责人审核。负责人审核。3.质量审核的目的在于质
20、量控制工作质量审核的目的在于质量控制工作的完整性和质量体系得有效性。的完整性和质量体系得有效性。(一)(一)HBV(二)(二)HCV(三)(三)梅毒梅毒(四)疟疾(四)疟疾(五)恰加斯病(又称为南美洲锥虫(五)恰加斯病(又称为南美洲锥虫病)病)(一)、(一)、HBV 27nm的的HBV壳体核心含有壳体核心含有病毒核酸和病毒核酸和DNA聚合酶、其具有聚合酶、其具有传染性;而传染性;而22nm的球形颗粒或管的球形颗粒或管状小颗粒只含有病毒蛋白、其没有状小颗粒只含有病毒蛋白、其没有传染性。传染性。HBsAg HBV感染确认感染确认 Anti-HBs 自然痊愈、疫苗注射自然痊愈、疫苗注射 HBeAg
21、传染标志传染标志 anti-HBe 复制水平低复制水平低 anti-HBc IgM:HBV 复制,多见于乙型肝炎急复制,多见于乙型肝炎急性期性期 IgG:感染:感染 HCV1 病毒结构至今尚未培养成功,三维病毒结构至今尚未培养成功,三维结构不清,使用反义病毒学推出。结构不清,使用反义病毒学推出。IgE与过敏反应有关、位于肥大细胞和嗜碱性细胞表面分Th1和Th2华通胶也会引起假凝集(钱串状凝集),可用37盐水洗涤就可以。4原核细胞微生物仅有原始核,无核膜和核仁,仅为单个裸露的DNA分子。华通胶也会引起假凝集(钱串状凝集),可用37盐水洗涤就可以。锥鞭体在昆虫中的肠内以短膜型鞭毛虫形式增殖病毒蛋白
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