急诊自身抗体的临床应用实用课件.ppt
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1、急诊课件自身抗体的临床应用急诊课件自身抗体的临床应用风湿病的诊断临床特征 症状:发热、关节炎、雷诺现象等 体征:关节肿胀、皮疹、肌无力等辅助检查 自身抗体(ANA、dsDNA、RF)免疫球蛋白、补体及常规化验 影像学等概述4 抗核抗体抗核抗体(Antinuclear Antibody,ANA)传统定义:将针对细胞核内成分的抗体称为传统定义:将针对细胞核内成分的抗体称为ANA。现在对现在对ANA靶抗原的理解已从细胞核扩大到整个细胞。靶抗原的理解已从细胞核扩大到整个细胞。是指抗核酸(是指抗核酸(nucleic acid)和核蛋白()和核蛋白(nucleoprotein)抗体的总称。抗体的总称。抗核
2、抗体的分类 1.抗DNA抗体抗双链DNA(dsDNA)抗体抗单链DNA(ssDNA)抗体2.抗组蛋白抗体 3.抗非组 蛋白抗体 抗可溶性核抗原(ENA)抗体:Sm、U1RNP rRNP、SSA、SSB、Scl-70、Jo-1、pM-1、PCNA、Mi-2抗体、DNP。抗着丝点抗体 4.抗核仁抗体:抗核小体抗体。5.抗其它细胞成分:线粒体抗体。抗核抗体2酶联免疫吸附法(ELISA)1间接免疫荧光法(IFA Indirect Fluorescent Assay)3免疫印迹法(IB)WesternblotLIA4其它:放射免疫法(RIA)等项目项目检验方法检验方法SLE四项四项ANA间接免疫荧光抗d
3、sDNA抗体间接免疫荧光抗组蛋白抗体ELISA抗核小体抗体ELISAENA系列系列抗RNP免疫印迹、ELISA抗SM免疫印迹、ELISA抗SSA免疫印迹、ELISA抗SSB免疫印迹、ELISA抗JO-1免疫印迹、ELISA抗SCL-70免疫印迹、ELISA抗核糖体P蛋白免疫印迹、ELISARA谱谱AKA(抗角蛋白抗体)间接免疫荧光抗GPI(抗葡萄糖-磷酸异构酶)抗体ELISA抗CCP(抗环瓜氨酸肽抗体)ELISAANCAP-ANCA(荧光模型为核周模型)间接免疫荧光C-ANCA(荧光模型为细胞质模型)间接免疫荧光MPO-ANCA(髓过氧化酶抗体)ELISAPR3-ANCA(抗蛋白酶3抗体)EL
4、ISA常常见见的的自自身身抗抗体体及及其其检检测测方方法法(1)可持续1-2年后才转阴与抗ds-DNA有关,抗LSP(抗肝脏特异性蛋白抗体)原发性中枢神经血管炎抗Rib胞浆抗原核糖体位于胞浆内核膜型(3)抗组织细胞抗体抗RBC抗体髓过氧化物酶(MPO)风湿病(SLE、SSc、SS、RA)抗核抗体(Antinuclear Antibody,ANA)传统定义:将针对细胞核内成分的抗体称为ANA。2 Primary biliary cirrhosis.常见的自身抗体及其检测方法抗中性粒细胞胞浆抗体(ANCA)阳性在PSC高达87%。p-ANCA和MPO-ANCA抗CCP(抗环瓜氨酸肽抗体)RF含量与
5、病情的活动性和严重性成正比,持续高滴度的RF常提示RA病情活动,骨侵蚀发生率高,常可伴有皮下结节或血管炎等关节外表现,提示预后不良间接免疫荧光法(IF)特异肾脏保护性抗体?检测高亲合力的抗ds-DNA类风湿因子(RF)(2)自身免疫肝炎七项自身免疫肝炎七项ANA间接免疫荧光抗LMA抗(肝细胞膜抗体)间接免疫荧光ASMA(抗平滑肌抗体)间接免疫荧光抗LKM(抗肝肾微粒体抗体)间接免疫荧光抗SLA(抗可溶性肝抗原抗体)间接免疫荧光AMA(线粒体抗体)间接免疫荧光抗LSP(抗肝脏特异性蛋白抗体)间接免疫荧光RF三项三项RF-IgGELISARF-IgAELISARF-IgMELISA抗磷脂综合征四项
6、(抗磷脂综合征四项(ASP)ELISAACA-IgG(抗心磷脂抗体)ELISAACA-IgMELISAACA-IgAELISA抗2-糖蛋白1抗体ELISA常常见见的的自自身身抗抗体体及及其其检检测测方方法法抗Ku抗体(Ku)抗Mi抗体(Mi-2)抗PM-Scl抗体抗JO-1抗体(JO-1)多发性肌炎、皮肌炎抗线粒体抗体M2型(AMA-M2)原发性胆汁性肝硬化抗nRNP抗体(U1-snRNP)混合性结缔组织病(MCTD)抗Scl-70抗体(Scl-70)抗着丝点B抗体(CENP-B)系统性硬化抗SSB/La抗体抗SSA/R052抗体抗SS-A/R060抗体干燥综合征/系统性红斑狼疮抗核糖体P蛋白
7、抗增殖细胞核抗原抗体(PCNA)抗Sm抗体抗组蛋白抗体抗核小体抗体抗双链DNA抗体系统性红斑狼疮项项 目目 名名 称称 疾疾 病病ANA谱(免疫印迹法)谱(免疫印迹法)(3)常常见见的的自自身身抗抗体体及及其其检检测测方方法法(一一)类风湿关节炎(类风湿关节炎(RARA)u 类风湿因子(RF)u 早期诊断的系列指标抗角蛋白抗体(AKA)抗GPI(抗葡萄糖-磷酸异构酶)抗体抗环瓜氨酸抗体(抗CCP)类风湿因子(类风湿因子(RFRF)u抗人IgG分子Fc片段上抗原决定簇的特异性抗体,分为IgM、G、A、E型uRF在RA中的阳性率为70%0,是诊断RA的重要标准之一uRF含量与病情的活动性和严重性成
8、正比,持续高滴度的RF常提示RA病情活动,骨侵蚀发生率高,常可伴有皮下结节或血管炎等关节外表现,提示预后不良类风湿因子(RF)uRF并非RA独有的特异性抗体,对RA的诊断不具特异性 SLE 30%SS 70%90%SSc 20%30%MCTD 50%60%非风湿性疾病 5%以下的正常人uRF阳性不等于一定就是RAuRF阴性也不等于一定就不是RARF常用检测方法uRF 1:40阳性 散射比浊法(测IgM-RF)uRF-IgG 110IU/ml-IgA 18IU/ml ELISA法-IgM 200IU/ml抗环瓜氨酸肽抗体(抗CCP)u瓜氨酸是RA血清抗聚角蛋白微丝蛋白相关 抗体的主要抗原决定簇u
9、对RA诊断具有高度特异性(98%)u可在RA早期出现u预测早期关节炎发展为RAuRA关节侵蚀破坏的早期识别及预测(二)系统性红斑狼疮(SLE)u是一种临床表现有多系统损害症状的慢性系统性自身免疫性疾病,其血清有以抗核抗体为主的大量不同的自身抗体u自身抗体(1)抗核抗体谱ANA、抗ds-DNA、抗ENA抗体(2)抗磷脂抗体(3)抗组织细胞抗体抗RBC抗体 抗血小板相关抗体 抗神经元抗体(4)其它RF、p-ANCA抗核抗体(抗核抗体(ANA)u临床意义SLE的筛查抗体:95%阳性,但滴度与SLE活动性无相关阳性并非SLE特异 阳性并非风湿病特异:风湿病(SLE、SSc、SS、RA)非风湿性疾病(感
10、染、慢肝、肺纤维化、肿瘤)服用某些药物(INH、苯妥英钠、肼苯达嗪、普鲁卡因酰胺)18SLE患者使用患者使用IIF法测定法测定ANA阴性的一些解释阴性的一些解释 技术方面技术方面 临床方面临床方面 经皮质激素或免疫抑制剂治疗。经皮质激素或免疫抑制剂治疗。终末期肾病。终末期肾病。隐蔽隐蔽ANA:与循环中免疫复合物结合,沉积于组:与循环中免疫复合物结合,沉积于组织。织。由于大量蛋白尿而从肾脏丢失。由于大量蛋白尿而从肾脏丢失。抗核抗体(抗核抗体(ANAANA)u方法间接免疫荧光法u结果判断:滴度1:100为阳性 常见核型5种 不同核型的临床意义不同 核膜型核膜型 与抗与抗ds-DNA有关,有关,多见
11、于多见于SLE,特别是有肾炎者,特别是有肾炎者 均质型均质型与与AHAAHA(抗组蛋白抗体(抗组蛋白抗体)、抗、抗DNADNA有关,有关,引起引起LELE形成主要见于形成主要见于SLESLE、药物性狼疮、药物性狼疮 斑点型斑点型 与抗与抗ENA有关,应进一步查特异性抗体有关,应进一步查特异性抗体核仁型核仁型多见于硬皮病多见于硬皮病血清中可发现ANA和SMA,但滴度都比较低,一般没有抗线粒体抗体,这一点与PBC相反。(Churg-Strauss 综合症)原发性中枢神经血管炎ACA-IgG(抗心磷脂抗体)抗体的主要抗原决定簇SSc 20%30%MCTD 50%60%PSC血清免疫球蛋白常增高,以I
12、gM多见。与抗ds-DNA有关,抗CCP(抗环瓜氨酸肽抗体)抗环瓜氨酸抗体(抗CCP)RF含量与病情的活动性和严重性成正比,持续高滴度的RF常提示RA病情活动,骨侵蚀发生率高,常可伴有皮下结节或血管炎等关节外表现,提示预后不良5 Characterization and clinical impact of antinuclear antibodies in primary biliary cirrhosis.抗角蛋白抗体(AKA)RF并非RA独有的特异性抗体,对RA的诊断不具特异性ACA-IgG(抗心磷脂抗体)自身免疫性胆管炎(AIC)抗单链DNA(ssDNA)抗体可持续1-2年后才转阴II
13、I型:SLA(可溶性肝抗原)LP(肝胰抗原)是指抗核酸(nucleic acid)和核蛋白(nucleoprotein)抗体的总称。抗心磷脂抗体(ACA)IgG、IgM、IgA 着丝点型着丝点型多见于多见于CREST综合征综合征抗抗ds-DNA抗体抗体u临床意义临床意义 对SLE的诊断有较高特异性 滴度与SLE活动相关,可作为病情监测及疗效观察指标 与SLE肾损害有关u检测方法检测方法 放免法(Farr)敏感,有利于早期预测 检测高亲合力的抗ds-DNA 间接免疫荧光法(IF)特异 ELISA可检测低亲合力的抗ds-DNA 有助于中枢狼疮的病情监测 金标免疫斑点法抗抗ENAENA (Extra
14、ctable Nuclear Antigen,ENA)抗体抗体u 抗RNP MCTD100%阳性,且滴度高双手肿胀,雷诺现象,肌炎,指(趾)端硬化肾脏保护性抗体?u 抗Sm SLE的标记性抗体,阳性率30%有助于早期、不典型及治疗缓解后SLE的回顾性诊断抗Sm阳性一定伴抗RNP阳性,但抗RNP阳性可单独存在u 抗SSA 原发性SS:60-75%SLE:40-50%与皮损、光过敏、白细胞减少、淋巴结肿大、血管炎、紫癜相关 可造成新生儿狼疮、婴儿心脏传导阻滞u 抗SSB原发性SS:40%,较抗SSA更特异其它CTD伴抗SSB者常伴继发性SS抗抗ENAENA抗体抗体u抗Scl-70 硬皮病标记性抗体
15、u抗Jo-1 多肌炎/皮肌炎标记性抗体u抗Rib胞浆抗原核糖体位于胞浆内临床意义 是SLE的又一特异性抗体,阳性率10-20%多见于SLE活动期 与抗ds-DNA抗体的消长相平行 但不会随病情缓解立即消失 可持续1-2年后才转阴抗核小体抗体(AnuA)u核小体是细胞染色质中的一种成分,它是由DNA和组蛋白以特殊的方式相连而组成u对SLE的早期诊断有重要意义比抗ds-DNA、抗组蛋白抗体更早出现阳性率:50%90%特异性98%(三)皮肌炎/多发性肌炎(PM/DM)u免疫学检查免疫学检查 ANA ENA抗抗Jo-1阳性阳性u其它检查其它检查肌酶谱肌酶谱 肌酸磷酸激酶(肌酸磷酸激酶(CPK):MM-
16、心肌和骨骼肌心肌和骨骼肌 MB-心肌心肌 BB-平滑肌和脑内平滑肌和脑内 乳酸脱氢酶(乳酸脱氢酶(LDH)谷草转氨酶(谷草转氨酶(AST)谷丙转氨酶(谷丙转氨酶(ALT)碱性磷酸酶(碱性磷酸酶(ALP)(四)干燥综合征(SS)uANA阳性率40%70%uENA抗SSA抗体阳性率70%96%抗SSB抗体阳性率50%87%uRF阳性率75%100%u高球蛋白血症uWBC、RBC、PLT下降但不会随病情缓解立即消失(Churg-Strauss 综合症)RF阳性率75%100%阳性者血管炎程度较高,其滴度也与病情活动相关与皮损、光过敏、白细胞减少、淋巴结肿大、抗血小板相关抗体I型:最常见,约占80%抗
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