HPV的检测及其临床应用课件.pptx

1、HPVHPV与宫颈癌的相关性与宫颈癌的相关性 年轻性活跃的女性HPV感染率最高，感染高峰年龄为1828岁 多属于一过性感染，通过自身免疫将HPV消灭 只有持续感染HPV的妇女,才成为子宫颈癌高发人群 HPV感染到发展成为子宫颈癌需要925 年时间 30%发展成为CIN1,10%发展成为CIN2,10%进一步发展成为CIN3，1%发展成为子宫颈癌HPVHPV结构与亚型结构与亚型 共价双链环状DNA 病毒,电镜下观察外形呈20 面体对称型 3个部分组成:早期区(E区),晚期区(L区)及上游调控区(非编码区)按HPV在诱发生殖道恶性肿瘤中的危险性不同分为高危型和低危型两组。高危型:呈持续性,不易自然

2、缓解,CIN2、CIN3及宫颈癌;低危型:自然缓解率较高,湿疣病变和CIN1 国外：16 和18 型感染为主 我国：16,58型为主临床常用的临床常用的HPVHPV检测方法检测方法 病理学检查 细胞学检查 免疫组化检测 聚合酶链反应(PCR)技术 DNA芯片分型检测 杂交捕获DNA分析病理学检查病理学检查 鳞状上皮疣状乳头状增生 表皮角化不全 棘层不规则增厚 基底层增生 上皮脚延长 中表层出现灶状分布的挖空细胞等。细胞学检查细胞学检查 挖空细胞、角化不良及湿疣外底层细胞 细胞学诊断HPV感染敏感性较差免疫组化检测免疫组化检测 检测HPV的衣壳抗原来进一步明确HPV感染 所得阳性反应定位明确,判

3、断可靠 必须在HPV-DNA 复制成熟后才有衣壳装备 敏感性较低聚合酶链反应聚合酶链反应(PCR)(PCR)技术技术 设计与HPV-DNA互补的一对特异性核苷酸引物,以HPV-DNA为模板以指数增长的速率进行体外扩增 敏感性最高,可对HPV进行分型,测定病毒载量,发现新基因型,对基因进行序列分析 缺点为样品间易交叉污染导致假阳性DNADNA芯片分型检测芯片分型检测 一种微量分析技术,以玻片作为DNA载体,固定了22型HPV-DNA探针(包括15种高危型HPV及7种低危型HPV)及一个球蛋白的对照探针 可同时对HPV进行检测及分型 可对多个型别的混合感染同时进行监控杂交捕获杂交捕获DNADNA分

4、析分析 标本中的HPV-DNA 与液相中的RNA探针结合,形成特异性的RNA-DNA杂交体,被微孔板内的特异抗体所捕获,然后被所加的发光底物检测,其发光的强度与标本中的DNA 量成比例,因而可对HPV进行半定量检测 效率高,适于大量人群检测,临床上操作简便高危型高危型HPVHPV检测的临床应用检测的临床应用 宫颈癌及癌前病变筛查 ASC-US的分流管理 宫颈病变治疗后的随访宫颈癌及癌前病变筛查宫颈癌及癌前病变筛查 高危型HPV-DNA 检测可用于30岁以上妇女的宫颈癌筛查。若细胞学和高危型HPV-DNA均阴性,进展为C IN3 的危险性极低,可延长筛查时间的间隔。ASC-USASC-US的分流管理的分流管理 对于意义不明的非典型鳞状细胞(ASC-US)美国ASCCP推荐以下3种进一步评估的方法:立即阴道镜检查;重复细胞学检查;高危型HPV-DNA(hc22)分流管理宫颈病变治疗后的随访宫颈病变治疗后的随访 在行锥切术前及子宫切除术时均应用hc-2系统进行高危型HPV-DNA检测小结小结 持续性高危型HPV感染是C IN进展的必要条件 HPV-DNA的病毒载量与HPV的持续感染及宫颈病变进展也密切相关 高危型HPV-DNA以及病毒载量的检测对宫颈癌的筛查和防治都有着非常重要的意义