临床血液学检验17造血检验基本方法2细胞化学染色检验课件.ppt

1、普通染色普通染色免疫细胞化学染色免疫细胞化学染色细胞形态学检验技术细胞形态学检验技术细胞化学染色细胞化学染色细胞形态学细胞形态学 化学化学 （化学反应）（化学反应）酶类、脂类、糖类、酶类、脂类、糖类、铁、蛋白、核酸等铁、蛋白、核酸等细胞化学染色细胞化学染色物物 理理 法法 化化 学学 法法 干燥固定干燥固定 火焰固定火焰固定 蒸汽固定蒸汽固定 液体固定液体固定 偶偶 氮氮偶偶 联联 法法 雪雪 夫夫反反 应应 联联 苯苯胺胺 法法 普普 鲁鲁士士 蓝蓝反反 应应 金金 属属沉沉 淀淀法法 显显 色色 复复 染染 4Fe3+3K4Fe(CN)6 Fe4Fe(CN)6312K+亚铁氰化钾亚铁氰化钾

2、亚铁氰化铁亚铁氰化铁（普鲁士蓝色）（普鲁士蓝色）酸性酸性贮存铁贮存铁l 铁蛋白铁蛋白l 含铁血黄素含铁血黄素作用液作用液30min流水冲洗流水冲洗5min，待干待干1藏红花染藏红花染1min，水洗待干水洗待干骨髓片骨髓片12234病理情况病理情况细胞外铁（）细胞外铁（）细胞外铁（）细胞外铁（）细胞外铁（）细胞外铁（）细胞外铁（）细胞外铁（）细胞外铁（）细胞外铁（）细胞外铁（）细胞外铁（）细胞外铁（）细胞外铁（）铁粒幼细胞铁粒幼细胞铁粒幼细胞铁粒幼细胞幼红细胞幼红细胞环形铁粒幼细胞、铁粒红细胞环形铁粒幼细胞、铁粒红细胞细细胞胞内内铁铁细细胞胞外外铁铁细细胞胞外外铁铁细细胞胞内内铁铁细细胞胞内内铁

3、铁细细胞胞外外铁铁细细胞胞内内铁铁细细胞胞外外铁铁细细胞胞内内铁铁隐性缺铁隐性缺铁缺铁性贫血早期缺铁性贫血早期缺铁缺铁缺铁性贫血缺铁性贫血铁转运或利用异常铁转运或利用异常继发性贫血继发性贫血铁负荷铁负荷铁粒幼细胞贫血铁粒幼细胞贫血巨幼细胞贫血巨幼细胞贫血再障再障MDS红白血病红白血病图图 贫血时铁染色常见的四种情形贫血时铁染色常见的四种情形-磷酸萘酚钠磷酸萘酚钠H2O -萘酚磷酸钠萘酚磷酸钠坚牢蓝坚牢蓝RR不溶性棕黑色沉淀不溶性棕黑色沉淀pH9.6碱性磷酸酶碱性磷酸酶成熟中性粒细胞成熟中性粒细胞胞质中胞质中固定液固定液30s，水洗待干水洗待干作用液作用液515min，水洗，待干水洗，待干1藏红

4、花藏红花3min，水洗，待干水洗，待干新鲜血片新鲜血片12334NAP（）（）NAP（）（）NAP（）（）NAP（）（）NAP（）（）NAP（）（）NAP（）（）嗜酸性粒细胞（）嗜酸性粒细胞（）原始细胞原始细胞原粒细胞原粒细胞2，原红，原红1，其他原始细胞罕见，其他原始细胞罕见急性白血病急性白血病骨髓中原始细胞骨髓中原始细胞20MDS（RAEB）骨髓中原始细胞骨髓中原始细胞520细胞化学染色细胞化学染色（一组）（一组）过氧化氢过氧化氢四甲基联苯胺四甲基联苯胺亚硝基铁氰化钠亚硝基铁氰化钠蓝色颗粒蓝色颗粒棕色颗粒棕色颗粒图图 POX染色原理（四甲基联苯胺法）染色原理（四甲基联苯胺法）水水联苯胺蓝联

5、苯胺蓝过氧化物酶过氧化物酶试剂试剂试剂试剂（1）原理及方法）原理及方法图图 氯乙酸氯乙酸AS-D萘酚酯酶染色法原理萘酚酯酶染色法原理氯乙酸氯乙酸AS-D萘酚萘酚重氮盐（坚牢紫酱重氮盐（坚牢紫酱GBC）红色沉淀红色沉淀特异性酯酶特异性酯酶（氯乙酸（氯乙酸AS-D萘酚酯酶）萘酚酯酶）AS-D萘酚萘酚试剂试剂试剂试剂根据根据酯酶酯酶特异特异性高性高低低特异性酯酶特异性酯酶(氯乙酸氯乙酸AS-D萘酚酯酶萘酚酯酶)非特异性酯酶非特异性酯酶 pH值不同值不同 酸性酯酶酸性酯酶(酸性酸性-醋酸萘酚酯酶醋酸萘酚酯酶)碱性酯酶碱性酯酶(-丁酸萘酚酯酶丁酸萘酚酯酶)中性酯酶中性酯酶-醋酸萘酚酯酶醋酸萘酚酯酶 醋酸

6、醋酸AS-D萘酚酯酶萘酚酯酶 白血病白血病慢性白血病慢性白血病急性白血病急性白血病慢性淋巴细胞白血病慢性淋巴细胞白血病慢性粒细胞白血病慢性粒细胞白血病急性淋巴细胞白血病急性淋巴细胞白血病急性髓细胞白血病急性髓细胞白血病M0（微分化）（微分化）M7（巨核细胞）（巨核细胞）M3（早幼粒细胞）（早幼粒细胞）M2（粒细胞部分成熟型）（粒细胞部分成熟型）M6（红、白细胞）（红、白细胞）M5（单核细胞）（单核细胞）M4（粒、单核细胞）（粒、单核细胞）M1（粒细胞未成熟型）（粒细胞未成熟型）原淋原淋原原粒粒原粒原粒+原单原单原单原单骨髓中白血病性骨髓中白血病性原始细胞原始细胞20%早幼早幼粒粒细胞化学染色细胞化学染色ALL原淋原淋M1原粒原粒M4原粒原粒+原单原单M5原单原单细胞化学染色细胞化学染色原始细胞：原淋原始细胞：原淋原始细胞：原单原始细胞：原单+原粒原粒