中药化学实验课件.ppt

1、 实验室注意事项实验室注意事项：1.1.安全安全2.2.纪律纪律3.3.实验目的实验目的 自身安全：酸、碱及有毒试剂自身安全：酸、碱及有毒试剂实验室安全：火、水、电及仪器使用实验室安全：火、水、电及仪器使用按时上课，有事请假按时上课，有事请假,私自旷课私自旷课,无无实验成绩课堂纪律：坚决不允许实验成绩课堂纪律：坚决不允许打闹，噪音要小打闹，噪音要小完成课程，取得学分完成课程，取得学分.训练实训练实验技能养成良好的实验习惯：验技能养成良好的实验习惯：正确操作正确操作 ，仔细观察，仔细观察实验一 苦参中苦参总碱的提取、纯化和鉴定苦参中苦参总碱的提取、纯化和鉴定 实验目的实验目的 1.四个原理：四个

2、原理：渗漉提取法的使用原理渗漉提取法的使用原理离子交换法提取生物碱的原理离子交换法提取生物碱的原理索式提取器连续回流提取的原理索式提取器连续回流提取的原理利用溶解性差异分离氧化苦参碱方法。利用溶解性差异分离氧化苦参碱方法。2.三个操作方法：三个操作方法：渗漉提取法方法渗漉提取法方法离子交换法提取生物碱的方法离子交换法提取生物碱的方法索式提取器连续回流提取的方法索式提取器连续回流提取的方法3.一个检识方法：一个检识方法：掌握生物碱的常规定性检识方法。掌握生物碱的常规定性检识方法。实验原理实验原理提取原理：苦参生物碱有一定碱性，可与提取原理：苦参生物碱有一定碱性，可与酸结合成盐，因此采用酸水提取法

3、。酸结合成盐，因此采用酸水提取法。纯化原理：总生物碱呈阳离子状态而被阳纯化原理：总生物碱呈阳离子状态而被阳离子交换树脂所交换，再用氨水碱化后生物离子交换树脂所交换，再用氨水碱化后生物碱游离以有机溶剂回流提取。碱游离以有机溶剂回流提取。分离原理：利用总生物碱中氧化苦参碱在分离原理：利用总生物碱中氧化苦参碱在乙醚中难溶而与其它生物碱分离乙醚中难溶而与其它生物碱分离（二）离子交换树脂法（二）离子交换树脂法BH+Cl-BH+Cl-生物碱盐酸盐生物碱盐酸盐 生物碱阳离子生物碱阳离子 R H+BH+RBH+H+注：注：R代表型阳离子交换树脂，代表型阳离子交换树脂，B代表游离生物碱。代表游离生物碱。原理：原

4、理：RBH+NH3H2ORNH4+B+H2O 实验流程实验流程 苦参粗粉苦参粗粉100g100g以以0.1%0.1%盐酸约盐酸约100ml100ml湿润半湿润半小时装入渗漉中，以小时装入渗漉中，以0.1%0.1%盐酸盐酸1200ml1200ml渗漉，速度渗漉，速度12d/s12d/s渗漉液渗漉液通过装湿重通过装湿重60g60g（60ml60ml）树脂的阳离）树脂的阳离子交换树脂柱交换，交换速度子交换树脂柱交换，交换速度12d/s12d/s。注意测定不同交换时间注意测定不同交换时间pHpH值的变化。值的变化。（每隔（每隔1515分钟）分钟）吸碱树脂吸碱树脂1.1.提取提取取取3.2ml36%3.

5、2ml36%浓盐酸（密度为浓盐酸（密度为1.191.19）配置配置1200ml0.1%1200ml0.1%稀盐酸稀盐酸将树脂倒入烧杯中，以蒸馏水洗至洗液无将树脂倒入烧杯中，以蒸馏水洗至洗液无色抽色抽+滤后室温晾干。将树脂置烧杯中，加滤后室温晾干。将树脂置烧杯中，加入浓氨水，拌匀（加氨水量以手握成团但入浓氨水，拌匀（加氨水量以手握成团但不粘手为度），密闭放置不粘手为度），密闭放置20min20min。吸碱树脂吸碱树脂碱化树脂碱化树脂 吸碱树脂吸碱树脂装入滤纸袋置索氏提取器装入滤纸袋置索氏提取器中以氯仿连续回流提取中以氯仿连续回流提取610610小时，小时，回收氯仿至尽，蒸去水分。回收氯仿至尽，蒸

6、去水分。残留物残留物残留物残留物以以20ml20ml丙酮回流残留物，过滤，溶丙酮回流残留物，过滤，溶液回收部分丙酮，加盖放置，结晶，液回收部分丙酮，加盖放置，结晶，抽滤，干燥。抽滤，干燥。粗品总碱结晶粗品总碱结晶1.1.回收溶剂；回收溶剂；2.2.用少量（多次）丙酮转移至蒸发皿中，用少量（多次）丙酮转移至蒸发皿中，将其蒸干；将其蒸干；3.3.用丙酮约用丙酮约20ml20ml将残留物转移至小烧瓶将残留物转移至小烧瓶中，空气回流至完全溶解；中，空气回流至完全溶解；4.4.将丙酮溶液过滤至锥形瓶中；将丙酮溶液过滤至锥形瓶中；5.5.略加浓缩，加塞放置析晶。略加浓缩，加塞放置析晶。步骤：步骤：注意事项

7、注意事项 渗漉提取前，湿润药材的重要性渗漉提取前，湿润药材的重要性注意渗漉速度和离子交换速度（以离子注意渗漉速度和离子交换速度（以离子交换液不穿为准）交换液不穿为准）确定提取终点确定提取终点树脂柱内液面不能低于树脂面树脂柱内液面不能低于树脂面浓盐酸密度：浓盐酸密度：1.18g/ml1.18g/ml 层析鉴定层析鉴定 层析板：层析板：自制硅胶自制硅胶CMC硬板硬板 样样 品：品：精品总碱氯仿溶液精品总碱氯仿溶液 对照品：对照品：氧化苦参碱的氯仿溶液氧化苦参碱的氯仿溶液 展开剂：展开剂：氯仿：甲醇（氯仿：甲醇（15：4）10ml中加中加2 滴氨水摇匀使用滴氨水摇匀使用 显色剂：显色剂：改良碘化铋钾

8、试剂改良碘化铋钾试剂 结结 果：果：样品斑点与对照品斑点比较位置并样品斑点与对照品斑点比较位置并计算计算Rf值值理化鉴识理化鉴识 取样品加少量乙醇，滴碘化铋钾，观察取样品加少量乙醇，滴碘化铋钾，观察颜色变化。颜色变化。实验二 槐米中芦丁的提取、分离、鉴定及槲皮素的制备槐米中芦丁的提取、分离、鉴定及槲皮素的制备 实验目的实验目的 1.1.掌握黄酮类成分的主要性质及黄酮苷、掌握黄酮类成分的主要性质及黄酮苷、苷元的结构研究的一般方法；苷元的结构研究的一般方法；2.2.熟悉根据溶解性差异来提取分离芦丁的熟悉根据溶解性差异来提取分离芦丁的方法；方法；3.3.了解芦丁紫外光谱的测定方法。了解芦丁紫外光谱的

9、测定方法。实验原理实验原理提取原理：芦丁在冷热水中的溶解度差异提取原理：芦丁在冷热水中的溶解度差异纯化原理：芦丁在冷热甲醇中的溶解度差异纯化原理：芦丁在冷热甲醇中的溶解度差异制备原理：槲皮素为芦丁的苷元，因此可进制备原理：槲皮素为芦丁的苷元，因此可进 行酸水解得到槲皮素行酸水解得到槲皮素 实验流程实验流程 加水煎煮两次，趁热过滤合并煎煮液加水煎煮两次，趁热过滤合并煎煮液槐米（槐米（20g）药渣药渣煎煮液煎煮液放置放置45h，抽滤抽滤沉淀沉淀粗品芦丁粗品芦丁自然干燥自然干燥1、提取粗品芦丁粗品芦丁 沉沉 淀淀 滤滤 液液精品芦丁精品芦丁2、精制沉沉 淀淀干燥干燥放置，待结晶析出，抽滤至干。放置，

10、待结晶析出，抽滤至干。加甲醇加甲醇1520ml1520ml，水浴加热（空，水浴加热（空气冷凝）溶解，气冷凝）溶解，至无黄色物，至无黄色物，趁趁热热过滤。过滤。1 1、甲醇量可以适当增加。、甲醇量可以适当增加。2 2、注意控制回流温度。、注意控制回流温度。3 3、回流时间以芦丁完全溶解为准。、回流时间以芦丁完全溶解为准。注意：注意：精品芦丁精品芦丁(0.2g)(0.2g)放入放入150ml150ml圆底烧瓶中，加入圆底烧瓶中，加入2%2%稀硫酸稀硫酸50ml,50ml,空气冷凝直火加热（电炉上放石棉空气冷凝直火加热（电炉上放石棉网）网）4040分钟，分钟，放冷抽滤放冷抽滤。沉沉 淀淀 滤滤 液液

11、 水洗至中性抽滤、水洗至中性抽滤、干燥。干燥。取取10ml，加，加Ba(OH)2约约1g,调调PH7.5,过滤过滤沉沉 淀淀 滤滤 液液 水浴浓缩至水浴浓缩至12ml 12ml 浓缩液（备检查糖用）浓缩液（备检查糖用）3.3.槲皮素的制备槲皮素的制备槲皮素槲皮素4、芦丁、槲皮素的鉴定、芦丁、槲皮素的鉴定（1）试管定性反应：）试管定性反应：HCl-Mg粉反应粉反应 取样品的乙醇溶液取样品的乙醇溶液1ml加少许镁粉，再加浓加少许镁粉，再加浓HCl 12滴，观察颜色。滴，观察颜色。FeCl3反应反应 取样品的乙醇溶液取样品的乙醇溶液1ml加加1%的的FeCl3乙醇溶乙醇溶液液23滴，观察颜色。滴，观

12、察颜色。中性醋酸铅反应中性醋酸铅反应 取样品的乙醇溶液取样品的乙醇溶液1ml加加5%的中性醋酸铅溶的中性醋酸铅溶液液12滴，观察现象。滴，观察现象。-萘酚、浓萘酚、浓H2SO4反应反应 取样品的乙醇溶液取样品的乙醇溶液1ml1ml加加-萘酚试液萘酚试液1 21 2滴滴后振摇，然后沿管壁加适量浓后振摇，然后沿管壁加适量浓H2SO4，观察两界，观察两界面处的颜色。面处的颜色。（2 2）AlCl3纸斑反应纸斑反应 取样品的乙醇溶液，在滤纸上各滴一个点，取样品的乙醇溶液，在滤纸上各滴一个点，干燥后置紫外灯下观察荧光。然后在原斑点上干燥后置紫外灯下观察荧光。然后在原斑点上喷喷AlCl3，干燥后重新置紫外

13、光灯下观察荧光。，干燥后重新置紫外光灯下观察荧光。5 5、糖的检识（径向纸层析）、糖的检识（径向纸层析）展开剂：正丁醇：冰醋酸：水（展开剂：正丁醇：冰醋酸：水（4 4：1 1：5 5）上层）上层显色剂：邻苯二甲酸显色剂：邻苯二甲酸-苯胺试剂（苯胺试剂（9595烘干）烘干）样样 品：水解浓缩液品：水解浓缩液对照品：葡萄糖、鼠李糖的水溶液对照品：葡萄糖、鼠李糖的水溶液展开方式：径向展开方式：径向结结 果：对照样品斑点及对照品斑点位置并计果：对照样品斑点及对照品斑点位置并计 算算R Rf f值。值。一、目的要求1、掌握亲脂性中性成分（薯蓣皂苷元）的提取方法。2、掌握薯蓣皂苷及薯蓣皂苷元的性质和检识方

14、法。二、实验原理 薯蓣皂苷在植物体内与糖结合成苷，但经过水解可得薯蓣皂苷元和单糖，利用薯蓣皂苷元不溶于水，易溶于有机溶剂的性质，利用石油醚连续回流将其提取出来。实验三 穿山龙中薯蓣皂苷元的提取、分离、鉴定OHHOOHOCH3OOOOOOHOHOOHOCH3OHHO薯蓣皂苷薯蓣皂苷穿山龙粗粉（穿山龙粗粉（50g）/组组 三、实验内容置圆底烧瓶中，加水置圆底烧瓶中，加水250ml、浓硫酸、浓硫酸20ml，室温浸泡，室温浸泡24小时，文火加热小时，文火加热回流回流46小时，放冷，倾出酸水液。小时，放冷，倾出酸水液。酸性药渣酸性药渣用清水漂洗用清水漂洗3次次，然后将药渣倒入，然后将药渣倒入乳钵中，加乳

15、钵中，加Na2CO3粉末，反复研粉末，反复研磨，调磨，调pH至中性，水洗，抽干。至中性，水洗，抽干。中性药渣中性药渣自然晾干自然晾干 干燥药渣干燥药渣置乳钵中研成细粉，置索氏提取器置乳钵中研成细粉，置索氏提取器中，以石油醚（中，以石油醚（6090沸程）为沸程）为溶剂，连续回流提取溶剂，连续回流提取45小时小时.干燥药渣干燥药渣石油醚提取液石油醚提取液回收石油醚至剩回收石油醚至剩1015ml时，时，迅速倾入小三角烧瓶中，放置迅速倾入小三角烧瓶中，放置使充分冷却，过滤。使充分冷却，过滤。沉沉 淀淀滤滤 液液用少量冷石油用少量冷石油醚洗二次抽干醚洗二次抽干.薯蓣皂苷元粗品薯蓣皂苷元粗品四、薯蓣皂苷元的鉴定（1）化学检识：醋酐-浓硫酸反应（Libermann-Burchard反应）取样品少许，置白瓷皿中，加冰醋酸0.5ml使溶解，续加醋酐0.5ml搅匀，再于溶液的边沿滴加1滴浓硫酸，液体则呈现紫红色，最后变成乌绿色。氯仿-浓硫酸反应（Salkowski反应）取样品少许，用1ml氯仿溶解，加入1ml浓硫酸后，在硫酸层出现红或蓝色，氯仿层有绿色荧光出现。吸附剂：硅胶-CMC薄层板 样 品：5%自制薯蓣皂苷元的乙醇液对照品：5%薯蓣皂苷元对照品的乙醇液 展开剂：苯：乙酸乙酯（8：2）显色剂：25%磷钼酸的乙醇溶液（喷洒后110加热5分钟）（2）薄层色谱检识