传染病病例标本采集和运输课件.ppt
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- 关 键 词:
- 传染病 病例 标本 采集 运输 课件
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1、病原微生物标本的采集、保存及运输方法病原微生物标本的采集 标本采集种类血液标本(抗凝血与非抗凝血)呼吸道标本上呼吸道标本(咽拭子、鼻拭子、鼻咽抽取物、咽漱液、痰液等)下呼吸道标本(呼吸道抽取物、支气管灌洗液、胸腔积液、肺组织活检标本等)。消化道标本(粪便和肛拭子)尿液标本其他人体标本(脑脊液、疱疹液、淋巴结穿刺液等)尸体解剖标本采集媒介和动物标本采集环境标本采集病原微生物标本的采集 标本采集中的注意事项采样时生物安全的考虑采样时生物安全的考虑采样时间采样时间及部位及部位采样容器采样容器采样标本的标识采样标本的标识各种标本的采样方法各种标本的采样方法病原微生物标本的采集 采样时生物安全的考虑采样
2、时生物安全的考虑 1)具有掌握相关专业知识和操作技能的工作人员;具有掌握相关专业知识和操作技能的工作人员;住院病例的标本由所在医院医护人员在当地疾控机构专业人员指导下采集。密切接触者标本由当地疾控机构负责采集。2具有与采集病原微生物样本所需要的生物安全防护水具有与采集病原微生物样本所需要的生物安全防护水 平相适应的设备,包括个人防护用品(隔离衣、帽、平相适应的设备,包括个人防护用品(隔离衣、帽、口罩、鞋套、手套、防护眼镜等)、防护材料、器材口罩、鞋套、手套、防护眼镜等)、防护材料、器材 和防护设施等;和防护设施等;3)具有有效的防止病原微生物扩散和感染的措施;具有有效的防止病原微生物扩散和感染
3、的措施;4)具有保证病原微生物样本质量的技术方法和手段。具有保证病原微生物样本质量的技术方法和手段。病原微生物标本的采集采样时间采样时间及部位及部位时间时间:一般在怀疑细菌感染时应尽量在急性发病期和使用抗生素之前一般在怀疑细菌感染时应尽量在急性发病期和使用抗生素之前采集标本,进行细菌的分离培养,否则这种标本在分离培养时要加采集标本,进行细菌的分离培养,否则这种标本在分离培养时要加药物拮抗剂。药物拮抗剂。作病毒分离和病毒抗原检测的标本,应在发病初期和急作病毒分离和病毒抗原检测的标本,应在发病初期和急性期采样,因为此时病毒在体内大量繁殖,检出率高,性期采样,因为此时病毒在体内大量繁殖,检出率高,病
4、毒分类标本最好在发病病毒分类标本最好在发病12天内采取。天内采取。部位:根据致病菌在患者不同病期的体内分布和排出部部位:根据致病菌在患者不同病期的体内分布和排出部位,采集不同的标本。位,采集不同的标本。例如伤寒病人应在发病早期未使用抗生素之前采血培养,例如伤寒病人应在发病早期未使用抗生素之前采血培养,在在23周时停用抗生素周时停用抗生素2天后采粪便培养。全病程可做骨天后采粪便培养。全病程可做骨髓培养。髓培养。病原微生物标本的采集 采样容器采样容器采集标本应使用无菌容器,一个标本一个采集标本应使用无菌容器,一个标本一个容器。容器。对容器基本要求是选耐用材料制成,容器对容器基本要求是选耐用材料制成
5、,容器包装好后可防渗漏。包装好后可防渗漏。能承受空中地面运送过程中可能发生的温能承受空中地面运送过程中可能发生的温度和压力变化。度和压力变化。病原微生物标本的采集 采样标本的标识采样标本的标识 包括种类、原始采样容器、标本性质、数量、运送人和包括种类、原始采样容器、标本性质、数量、运送人和接受人及其包装日期、运输日期、统一的识别编号及病接受人及其包装日期、运输日期、统一的识别编号及病人联系方式、姓名、检验目的、临床诊断等信息。人联系方式、姓名、检验目的、临床诊断等信息。其他信息如病人信息(年龄、性别、完整地址),临床其他信息如病人信息(年龄、性别、完整地址),临床资料(发病日期、临床症状、治疗
6、史、可疑的发病原因、资料(发病日期、临床症状、治疗史、可疑的发病原因、采样前是否用抗生素),急性或恢复期标本,症状类似采样前是否用抗生素),急性或恢复期标本,症状类似病人的其他标本。病人的其他标本。接收标本的实验室也应记录接收日期和时间、接受标本者的姓名、接收标本的实验室也应记录接收日期和时间、接受标本者的姓名、标本性质和状态等。标本性质和状态等。这些信息都是解释检验结果所必需的。这些信息都是解释检验结果所必需的。病原微生物标本的采集各种标本的采样方法各种标本的采样方法(1)血液采集血液采集全血:全血:作血液病原培养时,严格用无菌穿刺法采静脉血,移入无菌的有螺口的抗凝的作血液病原培养时,严格用
7、无菌穿刺法采静脉血,移入无菌的有螺口的抗凝的容器或培养瓶中送检。采集量为容器或培养瓶中送检。采集量为3-5毫升。毫升。做核酸检测时,抗凝剂一般使用做核酸检测时,抗凝剂一般使用EDTA-K3或枸橼酸钠,不可用肝素。或枸橼酸钠,不可用肝素。血清:用于检测用于检测IgM的血清一般采于发病的血清一般采于发病1个月内;用于检测个月内;用于检测IgG的血液应收集两次,的血液应收集两次,第一次于发病初期(第一次于发病初期(13天),越早越好,第二次血样一般在恢复期(第一次采血后天),越早越好,第二次血样一般在恢复期(第一次采血后34周)。双份血清同时检测,如抗体滴度有周)。双份血清同时检测,如抗体滴度有4倍
8、以上升高才有意义。倍以上升高才有意义。(2)粪便采集:)粪便采集:应在急性腹泻期及用药前采集自然排出的粪便。采集时应用灭菌棉拭子应在急性腹泻期及用药前采集自然排出的粪便。采集时应用灭菌棉拭子多点蘸取患者新鲜排出粪便的脓血、粘液、水样便或稀便部分,采样量一般多点蘸取患者新鲜排出粪便的脓血、粘液、水样便或稀便部分,采样量一般3-5克。克。(3)咽拭子:)咽拭子:令患者仰头张口,用压舌板压舌,将无菌棉拭子伸入口腔,适度用力拭涂令患者仰头张口,用压舌板压舌,将无菌棉拭子伸入口腔,适度用力拭涂抹咽后壁和两侧扁桃体部位,放入盛有抹咽后壁和两侧扁桃体部位,放入盛有3-5mlHanks液的采样管中,在靠近顶端
9、处折液的采样管中,在靠近顶端处折断棉签杆,旋紧管盖并密封。断棉签杆,旋紧管盖并密封。病原微生物标本的采集 各种标本的采样方法各种标本的采样方法(4)肛拭子:用棉花拭子在)肛拭子:用棉花拭子在3-5mlHanks液中浸湿,插入液中浸湿,插入肛门肛门2-3cm处,自肛门周围皱襞处拭取,或在肛门口内轻处,自肛门周围皱襞处拭取,或在肛门口内轻轻旋转涂擦,然后插入盛有轻旋转涂擦,然后插入盛有3-5mlHanks液采样管内。液采样管内。(6)疱疹液:可同时采集多个疱疹作为一份标本。先用)疱疹液:可同时采集多个疱疹作为一份标本。先用75%酒精对疱疹周围的皮肤进行消毒,然后用消毒针将酒精对疱疹周围的皮肤进行消
10、毒,然后用消毒针将疱疹挑破用棉签蘸取疱疹液,迅速将棉签放入盛有疱疹挑破用棉签蘸取疱疹液,迅速将棉签放入盛有3-5mlHanks液中液中、在靠近顶端处折断棉签杆,旋紧管盖在靠近顶端处折断棉签杆,旋紧管盖并密封。并密封。如如用于核酸检测的标本采集用于核酸检测的标本采集采集咽拭子或肛拭子等用于采集咽拭子或肛拭子等用于检测核酸时不能使用棉拭子和木质拭子棒,因为这类材检测核酸时不能使用棉拭子和木质拭子棒,因为这类材料中含有核酸扩增抑制剂,而要使用灭菌人造纤维拭子料中含有核酸扩增抑制剂,而要使用灭菌人造纤维拭子和塑料棒。和塑料棒。病原微生物标本的采集 各种标本的采样方法各种标本的采样方法(5)脑脊液:)脑
11、脊液:在无菌条件下由腰椎穿刺,用无在无菌条件下由腰椎穿刺,用无菌试管收集菌试管收集35ml,(作厌氧培养时标本应注入,(作厌氧培养时标本应注入厌氧瓶内),操作最好在医院内由有经验的医生厌氧瓶内),操作最好在医院内由有经验的医生按腰椎穿刺术进行。按腰椎穿刺术进行。(6)疱疹液:可同时采集多个疱疹作为一份标)疱疹液:可同时采集多个疱疹作为一份标本。先用本。先用75%酒精对疱疹周围的皮肤进行消毒,酒精对疱疹周围的皮肤进行消毒,然后用消毒针将疱疹挑破用棉签蘸取疱疹液,迅然后用消毒针将疱疹挑破用棉签蘸取疱疹液,迅速将棉签放入盛有速将棉签放入盛有3-5mlHanks液中液中、在靠近顶在靠近顶端处折断棉签杆
12、,旋紧管盖并密封。端处折断棉签杆,旋紧管盖并密封。病原微生物标本的采集禽流感环境禽流感环境标本采集标本采集采样液:采样液:可使用可使用 Hanks或或Eagles等培养液加入以下抗菌素和等培养液加入以下抗菌素和0.5%BSA(也可以使用也可以使用MEM、EMEM、DMEM,价格相对较高,价格相对较高):采采样液最好现配现用样液最好现配现用氨苄青霉素氨苄青霉素(2 x 106 IU/L):主要对:主要对G+菌作用强菌作用强链霉素链霉素(200 mg/L):主要对:主要对G-菌,结核杆菌有抑制作用菌,结核杆菌有抑制作用两性菌素两性菌素 B(2 x 106 IU/L):主要为抗真菌主要为抗真菌作用作
13、用庆大霉素庆大霉素(250 mg/L):广谱抗生素广谱抗生素 制霉菌素制霉菌素(0.5 x 106 IU/L)盐酸氧氟沙星盐酸氧氟沙星(60 mg/L):广谱菌,对多数肠杆菌科细菌等:广谱菌,对多数肠杆菌科细菌等G-菌较菌较强的抗菌活性强的抗菌活性磺胺甲基异恶唑磺胺甲基异恶唑(0.2 g/L)病原微生物标本的采集 禽流感环境禽流感环境标本采集标本采集1、水标本、水标本在每个笼具旁的饮水槽采集一份饮用水标本,将水槽中的水样用无菌的、一次性的玻璃棒或棉签充分混匀后采集5-10ml置于15ml外螺旋盖的管内。水沟或水池水沟或水池:清洗禽类的污水清洗禽类的污水:病原微生物标本的采集 2、擦拭标本擦拭标
14、本 笼具表面笼具表面擦拭擦拭标本标本:用蘸有采样液的带有聚丙烯纤维头的拭子擦拭笼具表面禽类最常接触的3-5个不同部位(包括笼具底部),然后将擦拭过的拭子放入含5ml采样液的采样管中,尾部弃去。也可以用多个拭子充分擦拭笼具表面后放到一个采样管中 宰杀或摆放禽肉案板表面的擦拭标本宰杀或摆放禽肉案板表面的擦拭标本:如果宰杀或摆放禽肉使用不同的案板,可采集擦拭标本放到不同的采样管中。方法与采集笼具表面擦拭标本的方法相同,拭子要擦拭禽肉接触最多的部位病原微生物标本的采集3、粪便标本粪便标本 从禽舍或环境中采集从禽舍或环境中采集样品样品5g左右,放入含左右,放入含5ml采样液的采样管中,充分采样液的采样管
15、中,充分混匀。同一地点多份粪便标本可置于同一采样管中。混匀。同一地点多份粪便标本可置于同一采样管中。4、其它、其它标本标本笼具周围标本(笼具下地面,笼具垫草等)笼具周围标本(笼具下地面,笼具垫草等)内脏拭子内脏拭子皮毛拭子等皮毛拭子等。病原微生物标本的保存总原则:根据标本种类及检测内容确定标本的保存方式。用于细菌检测的标本:常需无菌、无抗生素保存,从而能确保目标细菌的存活并抑制其他微生物的能确保目标细菌的存活并抑制其他微生物的过度生长。过度生长。一般在4 C C或室温保存。或室温保存。用于病毒检测的标本:一般应放在保温容器一般应放在保温容器(0C4C)里,不可放置超过)里,不可放置超过2天,如
16、不能立天,如不能立即分离病毒时,应将标本冻存保存。即分离病毒时,应将标本冻存保存。若长期储存,若长期储存,最好在最好在7070C C冻存冻存。病原微生物标本的保存 如怀疑是寄生虫,所取粪便中加入如怀疑是寄生虫,所取粪便中加入10%福福尔马林和尔马林和PVA防腐剂(充分混合)。防腐剂(充分混合)。用于检测抗原或抗体的标本可在用于检测抗原或抗体的标本可在4 4C C8 8C C保保存存242428h28h,在,在2020C C保存时间更长。保存时间更长。检测抗体的血清可在检测抗体的血清可在4 4C C保存约一个星期,保存约一个星期,最长最长1010天;超过一周必须在天;超过一周必须在-20-20C
17、 C下冷冻。下冷冻。病原微生物标本的保存 实验室必须对所有标本建立追踪系统,此系统中必须严格注明标本基本信息,如标号,标本唯一识别码,采样日期,地点,采样人等;患者的基本信息、临床诊断检测结果,以及实验室检测信息,如检测项目、时间和结果。从而可随时了解标本涞源信息,追踪原始出处。病原微生物标本的包装任何感染性材料的包装和运输都必须遵循任何感染性材料的包装和运输都必须遵循WHOWHO对对传染性物质和诊断性标本的安全运送指南(传染性物质和诊断性标本的安全运送指南(WHOWHO,19971997)。标准的包装方法和材料应能确保即使在运送中包标准的包装方法和材料应能确保即使在运送中包装意外受损时也能保
18、护人员的安全及标本的完整。装意外受损时也能保护人员的安全及标本的完整。因此运送标本时要进行三层包装。因此运送标本时要进行三层包装。病原微生物标本的包装原始的原始的容器容器应该是防漏的应该是防漏的,可盛容量不大,可盛容量不大于于500ml。在原始容器与第二层包装之间在原始容器与第二层包装之间应放置有吸应放置有吸附作用的材料附作用的材料。并辅以第二层防漏包装。并辅以第二层防漏包装。运输标本的外包装必须有明确的标签,标运输标本的外包装必须有明确的标签,标明寄送人和接收人的详细联系方式、包装明寄送人和接收人的详细联系方式、包装日期和运输日期等。日期和运输日期等。病原微生物标本的包装 国际民航组织危险品
19、航空安全运输技术细则中将感染性物质分为A和B两类。A A类指人感染后发病的可能性大,传染性强,对人群危害类指人感染后发病的可能性大,传染性强,对人群危害性大的烈性感染性物质感染性物质。高度怀疑具有严重性大的烈性感染性物质感染性物质。高度怀疑具有严重危害性的感染性物质感染性物质也属于危害性的感染性物质感染性物质也属于A A类。类。A A类感染性类感染性物质感染性物质物质感染性物质 联合国编号联合国编号UN2814UN2814和和UN2900UN2900(只导致动(只导致动物致病)物致病)采用采用P620P620包装要求。包装要求。A A类之外,仅具有一般危险性,引起感染的机会较少的类之外,仅具有
20、一般危险性,引起感染的机会较少的感染性物质感染性物质为感染性物质感染性物质为B B类(联合国编号类(联合国编号UN3373UN3373),采),采用用P650P650包装要求。包装要求。A类包装和B类包装区别1A类包装B类包装定义对人或动物致死或永久性致残不符合列入A类标准的感染性物质运输专用名称感染性物质,可感染人的诊断标本或临床标本或生命物质B类英文运输专用名Infectious substance affecing humansBiological substane,category BUN编号UN2814UN3373运输对象名录中规定的第一类、第二类病原微生物及其样本;第三类中包装分类
21、为A类的病原微生物名录中规定的第三类、第四类病原微生物及其样本UN专用标记需要不需要A类包装和B类包装区别2 A类包装B类包装主容器防水、防穿刺、防泄漏防破损、防泄漏次级容器防水、防穿刺、防泄漏防破损、防泄漏外包装最小边长100mm至少有一个表面100mm 100mm危险申报单需要不需要标识客机单包装主容器最大运输量液体50mL,固体50g液体1L,固体4KgUN3373A类感染性物质的包装材料类感染性物质的包装材料B类感染性物质的包装材料类感染性物质的包装材料A类感染物质的标识B类感染物质的标识 UN3373Biological substance,Biological substance,
22、Category BCategory B(生物物质,(生物物质,B B类)类)病原微生物标本的实验室间传递 应制定对危险材料运输的政应制定对危险材料运输的政策和程序,包括危险材料在策和程序,包括危险材料在实验室内、实验室所在机构实验室内、实验室所在机构内及机构外部的运输,应符内及机构外部的运输,应符合国家和国际规定的要求。合国家和国际规定的要求。应以防止污染人员或环境的应以防止污染人员或环境的方式运输危险材料,并有可方式运输危险材料,并有可靠的安保措施。靠的安保措施。危险材料应置于被批准的本危险材料应置于被批准的本质安全的防漏容器中运输。质安全的防漏容器中运输。病原微生物标本的运输地面运送标本
23、时注意将装有标本的箱子紧地面运送标本时注意将装有标本的箱子紧紧固定在交通工具上紧固定在交通工具上,车上还应备有吸水材料、消毒剂、手套、口罩、车上还应备有吸水材料、消毒剂、手套、口罩、护目镜、密封防水的废弃物容器等防护用品。护目镜、密封防水的废弃物容器等防护用品。为避免路途颠簸引起标本溶血,可在运送前分为避免路途颠簸引起标本溶血,可在运送前分离血清。离血清。在国际、国家、商业的有关规定允许下,在国际、国家、商业的有关规定允许下,诊断标本也可空运,应注意规范包装。诊断标本也可空运,应注意规范包装。病原微生物标本的运输分离培养细菌、病毒的标本大多数要求冷藏运送。分离培养细菌、病毒的标本大多数要求冷藏
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