精浆生化检测与男性不育课件.ppt

1、精浆生化检测与男性不育（优选）精浆生化检测与男性不育（优选）精浆生化检测与男性不育二、男性不育的病因二、男性不育的病因男性不育男性不育睾丸前因素睾丸前因素睾丸因素睾丸因素睾丸后因素睾丸后因素下丘脑疾病下丘脑疾病垂体疾病垂体疾病内源性或外源内源性或外源性激素异常性激素异常先天性异常先天性异常外源性损害外源性损害全身疾病全身疾病输精管道梗阻输精管道梗阻免疫因素免疫因素性功能障碍性功能障碍KallmannLH或或FSH缺乏缺乏垂体功能不足垂体功能不足高催乳素血症高催乳素血症雌、雄激素过多雌、雄激素过多糖皮质激素过多糖皮质激素过多甲状腺功能异常甲状腺功能异常染色体异常染色体异常隐睾隐睾雄激素抵抗雄激素

2、抵抗环境、药物环境、药物感染感染创伤和手术创伤和手术肝肾功能不全肝肾功能不全肿瘤肿瘤先天性梗阻先天性梗阻获得性梗阻获得性梗阻功能性梗阻功能性梗阻抗精子抗体抗精子抗体性欲减退性欲减退ED射精功能障碍射精功能障碍尿道下裂尿道下裂 三、男性不育的诊断三、男性不育的诊断（一）、病史（一）、病史v要全面了解家族史、婚育史、性生活史和其它对生要全面了解家族史、婚育史、性生活史和其它对生育可能造成影响的因素，还要简要了解女方病史。育可能造成影响的因素，还要简要了解女方病史。（二）、体格检查（二）、体格检查v体型及第二性征体型及第二性征v生殖器官的检查生殖器官的检查v其它检查：直肠指诊、神经反射其它检查：直肠

3、指诊、神经反射非常重要！许多不育患者可通过病非常重要！许多不育患者可通过病史和体检大体判断其生育能力史和体检大体判断其生育能力（三）、精液检查（三）、精液检查v 精液检查是诊断男性不育最基础和最重要的检查项目精液检查是诊断男性不育最基础和最重要的检查项目v 正常精液标准（WHO 第五版）v 体积体积2.0ml PH 7.2 精子密度精子密度15106/ml 精子总数精子总数40106/一次射精一次射精 活力活力 前向运动精子前向运动精子32%精子形态严格标准下正常形态的精子精子形态严格标准下正常形态的精子4%精子活率精子活率50%的精子存活的精子存活 白细胞白细胞1106/ml 免疫珠实验（免

4、疫珠实验（IBT）活动精子结合免疫珠活动精子结合免疫珠20%混合抗球蛋白反应（混合抗球蛋白反应（MAR）50%精子有凝集精子有凝集 v 根据根据Kruger和和menkfeld标准。标准。（四）精液生化检查（四）精液生化检查项目项目参数参数枸橼酸枸橼酸每份精液每份精液 52mol果糖果糖13mol/每份精液或者定性试验阳性每份精液或者定性试验阳性锌锌 每份精液每份精液2.4mol肉毒碱肉毒碱(DTNB法法)0.319mmol/L中性中性-葡糖苷酶葡糖苷酶20U/每份精液每份精液 酸性磷酸酶酸性磷酸酶 200U/每份精液每份精液白细胞数白细胞数 1106/ml（五）抗精子抗体（五）抗精子抗体v大

5、量研究资料表明大量研究资料表明10%-30%的不育不孕患者血的不育不孕患者血清或精浆中可检到清或精浆中可检到AsAb。v为排除免疫性因素，为排除免疫性因素，AsAb检测已是男性不育症的检测已是男性不育症的重要检查项目之一重要检查项目之一v目前目前WHO推荐的推荐的AsAb检测方法为免疫珠法检测方法为免疫珠法(IBT)和混合抗球蛋白反应试验和混合抗球蛋白反应试验(MAR)。MAR操作简单、操作简单、快速，可以和精液的常规化验同时进行，国内比较快速，可以和精液的常规化验同时进行，国内比较常用。常用。（六）其它检查（六）其它检查v 内分泌检查:LH、FSH、T、PRL、E2v 抑制素B(Inhibi

6、n B)v 影像学检查：超声、造影、CT、MRIv 染色体及Y染色体微缺失检查v 睾丸活检术：TESA、TESE、PESA、MESA、micro-TESE如何合理诊断及治疗如何合理诊断及治疗v虽然诊断手段众多，但仍虽然诊断手段众多，但仍然有然有75%的患者无法明的患者无法明确诊断。确诊断。v合理利用目前的手段诊断合理利用目前的手段诊断男性不育是一个难题。男性不育是一个难题。v重点：精浆生化分析重点：精浆生化分析MAR操作简单、快速，可以和精液的常规化验同时进行，国内比较常用。中性-葡糖苷酶是附睾分泌功能的指标。离心速度增加时精浆果糖浓度有升高趋势。精囊分泌的果糖是精子能量的主要来源。附睾：中性

7、-葡糖苷酶、左旋肉毒碱为排除免疫性因素，AsAb检测已是男性不育症的重要检查项目之一精浆果糖的测定几乎被在世界上所有男科学实验室进行，WHO 也推荐以精浆果糖浓度的测定作为评价精囊腺功能的指标。WHO 手册推荐了中性-葡糖苷酶的检测方法。染色体及Y染色体微缺失检查离心速度增加时精浆果糖浓度有升高趋势。中性-葡糖苷酶是附睾分泌功能的指标。附睾：中性-葡糖苷酶、左旋肉毒碱精浆果糖与-葡糖苷酶结合可用于鉴别单纯性输精管阻塞所致的无精症（果糖含量正常）和输精管、精囊发育不良引起的无精症。先天性精囊缺如患者果糖测定为阴性；免疫性因素 3.精浆果糖的测定几乎被在世界上所有男科学实验室进行，WHO 也推荐以

8、精浆果糖浓度的测定作为评价精囊腺功能的指标。性功能及射精功能性功能及射精功能异常异常正常正常抗体包裹的精子抗体包裹的精子阳性阳性免疫因素不育免疫因素不育阴性阴性精子的各参数精子的各参数精浆检查精浆检查不明原因不育不明原因不育单纯精浆异常不育单纯精浆异常不育异常异常正常正常正常正常性功能和射精功能障碍性功能和射精功能障碍导致不育的因素导致不育的因素异常异常是是激素检查（激素检查（T低低+FSH不升高或不升高或PRL升高）升高）内分泌因素不育内分泌因素不育是是感染指标检查感染指标检查附属性腺感染不育附属性腺感染不育是是精索静脉曲张精索静脉曲张精索静脉曲张不育精索静脉曲张不育是是获得性睾丸因素获得性

9、睾丸因素继发性睾丸损伤不育继发性睾丸损伤不育是是先天性因素先天性因素先天性因素不育先天性因素不育是是全身性疾病或环境因素全身性疾病或环境因素全身性疾病因素不育全身性疾病因素不育是是医源性因素医源性因素医源性因素不育医源性因素不育是是无无致致病病因因素素精子精子有有精子密度精子密度特发性少精症特发性少精症/隐匿精子症隐匿精子症异常异常精子活力精子活力特发性弱精子症特发性弱精子症异常异常正常正常精子形态精子形态特发性畸形精子症特发性畸形精子症异常异常正常正常未未发发现现睾丸体积及睾丸体积及FSH特发性无精子症特发性无精子症异常异常睾丸活检睾丸活检/生精发生生精发生不全不全梗阻性无精子症梗阻性无精子

10、症完全完全四、精浆生化分析方法及临床意义四、精浆生化分析方法及临床意义v精液分析：精子的数量、活力和形态（少精、弱精液分析：精子的数量、活力和形态（少精、弱精、畸形精子、无精子、液化不良）精、畸形精子、无精子、液化不良）v局限性：受许多内外因素干扰、波动大、不能反局限性：受许多内外因素干扰、波动大、不能反映病因（疾病在精子上的反映）映病因（疾病在精子上的反映）v精浆生化：精液分析的补充，可反映男性附属性精浆生化：精液分析的补充，可反映男性附属性腺功能。腺功能。精浆生化指标与附属性腺的关系精浆生化指标与附属性腺的关系v人类精浆的组成几乎都来自于附属性腺，其中约人类精浆的组成几乎都来自于附属性腺，

11、其中约 30%来自前列腺，来自前列腺，60%来自精囊腺，来自精囊腺，5%10%来自附睾及尿道球腺等。来自附睾及尿道球腺等。v精浆生化标志可反映附属性腺功能。这些特异性精浆生化标志可反映附属性腺功能。这些特异性标志总排出量的高低可用以评价男性附属性腺的标志总排出量的高低可用以评价男性附属性腺的功能状态，功能状态，也可用于综合评价不育的发病原因和也可用于综合评价不育的发病原因和机制。机制。（一）精浆（一）精浆-葡糖苷酶测定葡糖苷酶测定v精浆中存在两种精浆中存在两种-葡糖苷酶的异构体，其中中性葡糖苷酶的异构体，其中中性-葡糖苷酶占葡糖苷酶占 80%，仅来源于附睾；，仅来源于附睾；酸性酸性-葡糖苷酶占

12、葡糖苷酶占 20%，主要来源于前列腺。主要来源于前列腺。WHO 手册推荐了中性手册推荐了中性-葡糖苷酶的检测方法。葡糖苷酶的检测方法。v 酸性条件下，通过对精浆酸性酸性条件下，通过对精浆酸性-葡糖苷酶的抑制，葡糖苷酶的抑制，保留中性保留中性-葡糖苷酶活性，后者分解底物生成终葡糖苷酶活性，后者分解底物生成终产物对硝基酚，对硝基酚在产物对硝基酚，对硝基酚在405nm波长有最大波长有最大吸收波长，颜色深浅与单位时间内精浆中性吸收波长，颜色深浅与单位时间内精浆中性-葡葡糖苷酶活力成正比。糖苷酶活力成正比。v中性中性-葡糖苷酶是附睾分泌功能的指标。结合激葡糖苷酶是附睾分泌功能的指标。结合激素和睾丸其他指

13、标，对远端输精管阻塞有较好的素和睾丸其他指标，对远端输精管阻塞有较好的诊断价值。果糖结合中性诊断价值。果糖结合中性-葡糖苷酶检测，可大葡糖苷酶检测，可大大提高其诊断阻塞性无精子症的价值。大提高其诊断阻塞性无精子症的价值。v正常参考值：正常参考值：20U/每份精液每份精液 特发性少精症/隐匿精子症精浆果糖与-葡糖苷酶结合可用于鉴别单纯性输精管阻塞所致的无精症（果糖含量正常）和输精管、精囊发育不良引起的无精症。先天性畸形 2.内分泌紊乱 0.先天性精囊缺如患者果糖测定为阴性；精浆果糖与-葡糖苷酶结合可用于鉴别单纯性输精管阻塞所致的无精症（果糖含量正常）和输精管、精囊发育不良引起的无精症。睾丸活检术

14、：TESA、TESE、PESA、MESA、micro-TESE精液检查是诊断男性不育最基础和最重要的检查项目内分泌紊乱 0.禁欲 7 天以上的精浆-葡糖苷酶水平明显升高。其它检查：直肠指诊、神经反射精浆果糖与-葡糖苷酶结合可用于鉴别单纯性输精管阻塞所致的无精症（果糖含量正常）和输精管、精囊发育不良引起的无精症。精浆果糖的测定几乎被在世界上所有男科学实验室进行，WHO 也推荐以精浆果糖浓度的测定作为评价精囊腺功能的指标。许多不育患者可通过病史和体检大体判断其生育能力离心速度增加时精浆果糖浓度有升高趋势。根据Kruger和menkfeld标准。精液检查是诊断男性不育最基础和最重要的检查项目精浆生化

15、：精液分析的补充，可反映男性附属性腺功能。附睾：中性-葡糖苷酶、左旋肉毒碱v 离心速度不同，离心速度不同，精浆精浆-葡糖苷酶活性有所差葡糖苷酶活性有所差异。离心速度越高，精浆总异。离心速度越高，精浆总-葡糖苷酶水平越低。葡糖苷酶水平越低。因此，因此，在精浆在精浆-葡糖苷酶的检测中，葡糖苷酶的检测中，精液离心精液离心时的速度不得低于时的速度不得低于 3 000 g 离心离心 15 min。v精浆精浆-葡糖苷酶活性与禁欲时间的长短密切相葡糖苷酶活性与禁欲时间的长短密切相关。禁欲时间越长，关。禁欲时间越长，-葡糖苷酶水平越高。禁欲葡糖苷酶水平越高。禁欲 7 天以上的精浆天以上的精浆-葡糖苷酶水平明显

16、升高。因此，葡糖苷酶水平明显升高。因此，精浆精浆-葡糖苷酶水平检测的最佳禁欲时间最好为葡糖苷酶水平检测的最佳禁欲时间最好为 4 7天。天。（二）精浆果糖测定（二）精浆果糖测定v精浆果糖的测定几乎被在世界上所有男科学实验精浆果糖的测定几乎被在世界上所有男科学实验室进行，室进行，WHO 也推荐以精浆果糖浓度的测定作也推荐以精浆果糖浓度的测定作为评价精囊腺功能的指标。为评价精囊腺功能的指标。v目前，目前，用于检测精浆果糖的方法有间苯二酚显色用于检测精浆果糖的方法有间苯二酚显色法、气相层析法、吲哚显色法等多种方法。法、气相层析法、吲哚显色法等多种方法。v精囊分泌的果糖是精子能量的主要来源。睾酮的精囊分

17、泌的果糖是精子能量的主要来源。睾酮的水平影响精囊果糖的分泌，雄激素不足可造成果水平影响精囊果糖的分泌，雄激素不足可造成果糖含量降低，因此果糖含量间接反映睾丸间质细糖含量降低，因此果糖含量间接反映睾丸间质细胞分泌睾酮的功能。胞分泌睾酮的功能。v果糖可为精子的运动提供能量。果糖可为精子的运动提供能量。精囊腺功能紊乱精囊腺功能紊乱时，时，精液总量减少，精液总量减少，精浆果糖含量降低，精浆果糖含量降低，进而进而引起精子活力不足，引起精子活力不足，导致不育。导致不育。v先天性精囊缺如患者果糖测定为阴性；精囊炎时，先天性精囊缺如患者果糖测定为阴性；精囊炎时，果糖含量降低。不完全射精或射精过频，果糖含果糖含

18、量降低。不完全射精或射精过频，果糖含量亦降低。量亦降低。v精浆果糖与精浆果糖与-葡糖苷酶葡糖苷酶结合可用于鉴别单纯性输结合可用于鉴别单纯性输精管阻塞所致的无精症（果糖含量正常）和输精精管阻塞所致的无精症（果糖含量正常）和输精管、精囊发育不良引起的无精症。管、精囊发育不良引起的无精症。v精浆果糖正常参考值精浆果糖正常参考值：0.873.95g/L。禁欲 7 天以上的精浆-葡糖苷酶水平明显升高。禁欲时间越长，-葡糖苷酶水平越高。附睾：中性-葡糖苷酶、左旋肉毒碱先天性畸形 2.精浆果糖与-葡糖苷酶结合可用于鉴别单纯性输精管阻塞所致的无精症（果糖含量正常）和输精管、精囊发育不良引起的无精症。染色体及Y

19、染色体微缺失检查精浆生化：精液分析的补充，可反映男性附属性腺功能。根据Kruger和menkfeld标准。离心速度不同，精浆-葡糖苷酶活性有所差异。精囊腺功能紊乱时，精液总量减少，精浆果糖含量降低，进而引起精子活力不足，导致不育。睾酮的水平影响精囊果糖的分泌，雄激素不足可造成果糖含量降低，因此果糖含量间接反映睾丸间质细胞分泌睾酮的功能。WHO 手册推荐了中性-葡糖苷酶的检测方法。精索静脉曲张 12.精浆生化：精液分析的补充，可反映男性附属性腺功能。精液分析：精子的数量、活力和形态（少精、弱精、畸形精子、无精子、液化不良）离心速度增加时精浆果糖浓度有升高趋势。虽然诊断手段众多，但仍然有75%的患

20、者无法明确诊断。离心速度增加时精浆果糖浓度有升高趋势。精浆果糖的测定几乎被在世界上所有男科学实验室进行，WHO 也推荐以精浆果糖浓度的测定作为评价精囊腺功能的指标。正常参考值：20U/每份精液离心速度增加时精浆果糖浓度有升高趋势。精浆果糖与-葡糖苷酶结合可用于鉴别单纯性输精管阻塞所致的无精症（果糖含量正常）和输精管、精囊发育不良引起的无精症。特发性少精症/隐匿精子症染色体及Y染色体微缺失检查先天性精囊缺如患者果糖测定为阴性；内分泌紊乱 0.根据Kruger和menkfeld标准。抑制素B(Inhibin B)特发性少精症/隐匿精子症内分泌紊乱 0.精浆生化：精液分析的补充，可反映男性附属性腺功

21、能。目前WHO推荐的AsAb检测方法为免疫珠法(IBT)和混合抗球蛋白反应试验(MAR)。泌尿生殖道感染 6.精浆果糖与-葡糖苷酶结合可用于鉴别单纯性输精管阻塞所致的无精症（果糖含量正常）和输精管、精囊发育不良引起的无精症。精浆果糖的测定几乎被在世界上所有男科学实验室进行，WHO 也推荐以精浆果糖浓度的测定作为评价精囊腺功能的指标。果糖可为精子的运动提供能量。虽然诊断手段众多，但仍然有75%的患者无法明确诊断。睾丸活检术：TESA、TESE、PESA、MESA、micro-TESE禁欲 7 天以上的精浆-葡糖苷酶水平明显升高。精浆生化：精液分析的补充，可反映男性附属性腺功能。为排除免疫性因素，

22、AsAb检测已是男性不育症的重要检查项目之一离心速度越高，精浆总-葡糖苷酶水平越低。FSH不升高或PRL升高）精液分析：精子的数量、活力和形态（少精、弱精、畸形精子、无精子、液化不良）其他异常 3.精液检查是诊断男性不育最基础和最重要的检查项目特发性少精症/隐匿精子症根据Kruger和menkfeld标准。睾酮的水平影响精囊果糖的分泌，雄激素不足可造成果糖含量降低，因此果糖含量间接反映睾丸间质细胞分泌睾酮的功能。离心速度增加时精浆果糖浓度有升高趋势。因此，精浆-葡糖苷酶水平检测的最佳禁欲时间最好为 4 7天。结合激素和睾丸其他指标，对远端输精管阻塞有较好的诊断价值。目前，用于检测精浆果糖的方法

23、有间苯二酚显色法、气相层析法、吲哚显色法等多种方法。精浆生化：精液分析的补充，可反映男性附属性腺功能。正常参考值：20U/每份精液局限性：受许多内外因素干扰、波动大、不能反映病因（疾病在精子上的反映）睾酮的水平影响精囊果糖的分泌，雄激素不足可造成果糖含量降低，因此果糖含量间接反映睾丸间质细胞分泌睾酮的功能。泌尿生殖道感染 6.大量研究资料表明10%-30%的不育不孕患者血清或精浆中可检到AsAb。果糖标准液配制后应放置 2 周后使用，使用 2 周后出现吸光度降低时应立即更换新的果糖标准液。WHO 手册推荐了中性-葡糖苷酶的检测方法。虽然诊断手段众多，但仍然有75%的患者无法明确诊断。睾丸活检术

24、：TESA、TESE、PESA、MESA、micro-TESE目前WHO推荐的AsAb检测方法为免疫珠法(IBT)和混合抗球蛋白反应试验(MAR)。体积2.前列腺：酸性磷酸酶、柠檬酸、锌要全面了解家族史、婚育史、性生活史和其它对生育可能造成影响的因素，还要简要了解女方病史。精浆果糖与-葡糖苷酶结合可用于鉴别单纯性输精管阻塞所致的无精症（果糖含量正常）和输精管、精囊发育不良引起的无精症。禁欲 7 天以上的精浆-葡糖苷酶水平明显升高。中性-葡糖苷酶是附睾分泌功能的指标。（优选）精浆生化检测与男性不育内分泌紊乱 0.离心速度增加时精浆果糖浓度有升高趋势。特发性少精症/隐匿精子症虽然诊断手段众多，但仍

25、然有75%的患者无法明确诊断。肉毒碱(DTNB法)免疫性因素 3.目前，用于检测精浆果糖的方法有间苯二酚显色法、气相层析法、吲哚显色法等多种方法。精液检查是诊断男性不育最基础和最重要的检查项目精液分析：精子的数量、活力和形态（少精、弱精、畸形精子、无精子、液化不良）先天性精囊缺如患者果糖测定为阴性；v 果糖标准液配制后应放置果糖标准液配制后应放置 2 周后使用，周后使用，使用使用 2 周后出现吸光度降低时应立即更换新的果糖标周后出现吸光度降低时应立即更换新的果糖标准液。准液。v离心速度不同精浆果糖浓度稍有差异。离心速度不同精浆果糖浓度稍有差异。离心速离心速度增加时精浆果糖浓度有升高趋势。度增加时精浆果糖浓度有升高趋势。因此，离心因此，离心速度不得低于速度不得低于 3 000 g 离心离心 15 min。v精液液化后应立即离心将精子和精浆分离，精液液化后应立即离心将精子和精浆分离，否否则会影响精浆果糖检测结果则会影响精浆果糖检测结果。