人感染H7N9禽流感病毒病原学特点及实验室检测要求课件.ppt

1、人感染人感染H7N9H7N9禽流感病毒病原学特点禽流感病毒病原学特点及实验室检测要求及实验室检测要求河南省疾病预防控制中心河南省疾病预防控制中心2013年年4月月3日日病例病例1病例病例2病例病例3既往禽既往禽H7Nx病毒简介病毒简介HPAI H7N7、H7N3、H7N1LPAI H7Nx、H7N2、H7N3、H7N1、H7N9HPAI H7N7、H7N3、H7N4HPAI H7N3（Pakistan）HPAI H7N3LPAI H7N9HPAI H7N3LPAI H7N9禽中暴发的禽中暴发的H7H72006年前暴发的均为HPAI H7欧洲：意大利、英国、德国、比利时、荷兰、丹麦、挪威、捷克、

2、西班牙、瑞典LPAI H7N8、H7N9（Korea）LPAI H7N9病毒亚型病毒亚型病原来源病原来源时间时间/国家国家病例数病例数/临床表现临床表现A/H7N7鸥鸥1980/美国美国3/结膜炎结膜炎A/H7N7鸭鸭1996/英国英国1/结膜炎结膜炎A/H5N1禽禽1997/香港香港18/ILI，肺炎，肺炎A/H9N2鸡鸡1998/中国广东中国广东5/ILI，肺炎，肺炎A/H9N2禽禽1999/香港香港 2/ILIA/H7N2禽禽2002/北美（北美（Virginia）1/ILI，血清学诊断，血清学诊断A/H9N2禽禽2003/香港香港 1/ILIA/H5N1禽禽2003/香港香港2/ILI

3、，肺炎，肺炎A/H7N7禽禽2003/荷兰荷兰89/结膜炎结膜炎、ILI、肺炎肺炎;1名死亡病例名死亡病例A/H5N1禽禽2003至今至今,15个国家个国家602/ILI,肺炎肺炎A/H7N2(NY/107)来源不清来源不清2003/北美北美(New York)，1/肺炎肺炎A/H7N3禽禽2004/加拿大加拿大2/结膜炎结膜炎、ILI;1名名LPAI；1名名HPAIA/H5N2禽禽2005/日本日本(Ibaraki)13/无临床症状，血清学诊断无临床症状，血清学诊断A/H7N2禽禽2007/英国英国(Wales)1/结膜炎结膜炎、ILIA/H9N2来源不清来源不清2007/香港香港1/ILI

4、A/H10N7鸭鸭2004/埃及埃及(Ismaillia)2/ILIA/H10N7来源于疫区的鸟来源于疫区的鸟2010/悉尼悉尼(New South Wales)7/上呼吸道感染症状上呼吸道感染症状、结膜炎结膜炎近年来人感染禽流感病毒病例近年来人感染禽流感病毒病例血清学证据：人感染H4,H5,H6,H7,H9,H10,H11 AIVs.H7H7感染人（感染人（100人人）美国、英国、意大利、荷兰、加拿大HPAILPAI19591/USA H7N719771/USA H7N71979-19804/USAH7N719961/EnglandH7N720021/USAH7N220031/USAH7N2

5、7/ItalyH7N389/NetherlandsH7N71 died20041/CanadaH7N31/CanadaH7N320061/NorfolkH7N320074/WalesH7N22/MexicoH7N3美洲美洲,1313欧洲欧洲,5,5亚洲亚洲,7,7共25株均为LPAI无感染人病例亚洲：7株均来自野禽5株韩国2株蒙古LPAI H7N9Nose(white bars),lung(black bars)LPAI H7N9不需经过适应便可在小鼠体内有效复制，且能在雪貂上下呼吸道有效复制。HPAI H7N3LPAI H7N9LPAI H7N9HPAI H7N3LPAI H7N9在雪貂模型

6、中不传播。A/Baers pochard/HuNan/414/2010(H7N1)A/chicken/Hebei/1/2002(H7N2)A/duck/Guangdong/1/1996(H7N3)A/duck/Hubei/126/1985(H7N8)A/duck/Jiangxi/1742/03(H7N7)A/duck/Jiangxi/1760/03(H7N7)A/duck/Jiangxi/1786/03(H7N7)A/duck/Jiangxi/1814/03(H7N7)A/duck/Nanchang/1904/1992(H7N1)A/duck/Nanchang/1944/92(H7N1)A/d

7、uck/Zhejiang/10/2011(H7N3)A/duck/Zhejiang/12/2011(H7N3)A/duck/Zhejiang/2/2011(H7N3)A/magpie-robin/China/28710/93(H7)亚型：H7N1,H7N2,H7N3,H7N7,H7N8野禽居多LPAI核酸检测核酸检测从3个病例中分离到3株病毒o A/Shanghai/1/2013(H7N9)o A/Shanghai/2/2013(H7N9)o A/Anhui/1/2013(H7N9)病毒分离病毒分离三株H7N9病毒为同一基因类型PB2PB1HANPNAMPNSPA2个片段来源于H7N96个片段

8、来源于H9N2序列测定序列测定序列特点序列特点l耐药耐药性分析性分析 对烷胺类药物是耐药的，即M2蛋白25-42位氨基酸发生S31N突变。lHAHA连接肽分析连接肽分析 HA蛋白339位连接肽由单个（PKGPKGR RGLFGGLFG）碱性氨基酸组成，根据既往研究，具有这种序列特点的病毒对禽类呈低致病性。l受体结合位点及其它受体结合位点及其它重要位点分析重要位点分析 Shanghai/1/2013的HA蛋白 226-228位氨基酸属于禽源受体结合位点（为Q QSG G）。Shanghai/2/2013和Anhui/1/2013的HA蛋白 226-228位氨基酸受体结合位点（为L LSG G）l

9、PB2蛋白627位氨基酸为K K，提示致病性增强。lNS1蛋白92位氨基酸为D D，与禽流感病毒一致，而与人流感病毒不同。标本采集、保存、运送与实验室检测标本采集、保存、运送与实验室检测p 做好人员安排以及试剂、耗材准备；o 参照参照近期将下发近期将下发的的全国不明原因肺炎病例监测、全国不明原因肺炎病例监测、排查和管理方案（排查和管理方案（20132013年）年）和和人感染人感染H7N9H7N9禽流禽流感标本采集及实验室检测策略感标本采集及实验室检测策略进行。进行。o 依托市级、省级流感监测网络实验室，开展核酸检依托市级、省级流感监测网络实验室，开展核酸检测和病毒分离工作。测和病毒分离工作。标

10、本采集标本采集 病例：采集鼻咽拭子、下呼吸道标本（如气管病例：采集鼻咽拭子、下呼吸道标本（如气管分泌物、气管吸取物）和血清标本等；分泌物、气管吸取物）和血清标本等；密切接触者：采集双份血清标本（开始实施医密切接触者：采集双份血清标本（开始实施医学观察时和间隔三周后）；学观察时和间隔三周后）；出现急性呼吸道感染的密切接触者：采集咽拭出现急性呼吸道感染的密切接触者：采集咽拭子标本；子标本；检测试剂和方法检测试剂和方法2010年及之前下发的年及之前下发的H7引物不再用于检测。引物不再用于检测。2013年年4月月2日，国家流感中心下发新的日，国家流感中心下发新的H7和和 N9检测引物（检测引物（rea

11、l-time PCR）。）。H7N9核酸检测方法与核酸检测方法与甲型甲型H1N1 流感病毒实流感病毒实验室检测技术方案验室检测技术方案相同。相同。人感染人感染H7N9H7N9禽流感标本实验室检测策略禽流感标本实验室检测策略(1)(1)o 地市级流感监测网络实验室：地市级流感监测网络实验室：l 收到标本后，将原始标本分为收到标本后，将原始标本分为3 3管；管；l 24 24 小时小时内立即开展甲、乙型流感病毒通用内立即开展甲、乙型流感病毒通用引物、季节性流感病毒亚型分型的检测。引物、季节性流感病毒亚型分型的检测。检测结果情况一：乙型流感通用引物阳性、或甲型检测结果情况一：乙型流感通用引物阳性、或

12、甲型流感通用引物阳性且季节性流感亚型分型阳性流感通用引物阳性且季节性流感亚型分型阳性市级网络实验室参照全国流感监测方案（2010 年版），开展后续实验室病毒分离和鉴定工作。人感染人感染H7N9H7N9禽流感标本实验室检测策略禽流感标本实验室检测策略(2)(2)人感染人感染H7N9H7N9禽流感标本实验室检测策略禽流感标本实验室检测策略(3)(3)o 检测结果情况二：甲型流感通用引物阳性，但季节性流感病检测结果情况二：甲型流感通用引物阳性，但季节性流感病毒亚型分型阴性或无法分型（毒亚型分型阴性或无法分型（A A未分型）未分型）应立即将两管呼吸道原始标本送省级流感监测网络实验室；省级流感监测网络实

13、验室立即开展季节性流感的复核与分型，如季节性流感病毒亚型分型阴性或无法分型，则进一步开展禽流感H5H7H9 核酸检测；人人感染感染H7N9H7N9禽流感标本实验室检测策略禽流感标本实验室检测策略(4)(4)o 检测结果情况三：甲型流感和乙型流感通用引物均阴性检测结果情况三：甲型流感和乙型流感通用引物均阴性应立即将2两管原始呼吸道标本送省级流感监测网络实验室；省级实验室收到标本后，立即进行流感病毒、SARS 和新型冠状病毒等相关病原体的检测。人人感染感染H7N9H7N9禽流感标本采集及实验室检测策略禽流感标本采集及实验室检测策略(5(5）o 地市级流感监测网络实验室不检测血清标本，直接将原始标本送省级流感监测网络实验室。检测时限要求（检测时限要求（1）o 不明原因肺炎病例不明原因肺炎病例 收到标本后，要在24小时内进行标本处理和核酸检测；检测结果如果为A未分型或阴性，应立即将原始标本送省CDC。检测时限要求（检测时限要求（2）o 流感样病例暴发疫情流感样病例暴发疫情 按照流感样病例暴发疫情处置指南要求，在24小时内进行标本处理和核酸检测，检测结果如果为A未分型，应24小时内将原始标本送省CDC。o 流感样病例监测流感样病例监测 按照全国流感监测方案开展。ILI病例检测结果为A未分型的标本需复检，确认为A未分型后24小时内送省CDC。谢谢 谢！谢！26