乳制品中三聚氰胺的样品处理以及液相-液质的分析方法-update-课件.ppt

1、2007 Waters Corporation2007 Waters Corporation 2NNNNH2NH2NH2Molecular Formula =C3H6N6Formula Weight =126.11994Monoisotopic Mass =126.065394 Dan 三聚氰胺，英文名为三聚氰胺，英文名为Melamine，分子式是，分子式是C3H6N6。又称蜜。又称蜜胺、胺、2，4，6-三氨基三氨基-1，3，5-三嗪。白色单斜棱晶。三嗪。白色单斜棱晶。n 三聚氰胺是一种重要的有机化工中间产品，主要用来制作三聚氰三聚氰胺是一种重要的有机化工中间产品，主要用来制作三聚氰胺树脂，具

2、有优良的耐水性、耐热性、耐电弧性、优良阻燃性。用胺树脂，具有优良的耐水性、耐热性、耐电弧性、优良阻燃性。用途途:可用于装饰板的制作，用于氨基塑料、粘合剂、涂料、币纸增强可用于装饰板的制作，用于氨基塑料、粘合剂、涂料、币纸增强剂、纺织助剂等。剂、纺织助剂等。2007 Waters Corporation 3 奶粉样品前处理步骤(Oasis MCX固相提取柱固相提取柱）液相色谱(HPLC/UPLC)的检测方法 HPLC 检测条件 液相色谱质谱联用法（UPLC-MS/MS）检测方法UPLC-MS/MS检测条件2007 Waters Corporation 4奶粉样品溶解提取奶粉样品溶解提取奶粉样品高

3、氯酸溶液奶粉样品高氯酸溶液漩涡振荡漩涡振荡 2 分钟，分钟，10000转转/分钟分钟 离心离心5分钟分钟小柱激活小柱激活/平衡平衡2mL 甲醇甲醇/2 mL H2O上样上样取取2mL蜗旋振荡离心后的上清液蜗旋振荡离心后的上清液 清洗步清洗步 3mL 水，水，3 mL 甲醇甲醇三聚氰胺淋出：将目标化合物调至电中性三聚氰胺淋出：将目标化合物调至电中性3 mL 5%氨水甲醇氨水甲醇在复合模式下的强烈清洗在复合模式下的强烈清洗(去除酸性和中性物质去除酸性和中性物质)目标化合物洗脱目标化合物洗脱Oasis MCX 3cc(60mg）186000254奶粉样品前处理步骤（奶粉样品前处理步骤（Oasis M

4、CX）液态奶样品溶解提取液态奶样品溶解提取2g液态奶样品高氯酸溶液液态奶样品高氯酸溶液2007 Waters Corporation 5收集洗脱液收集洗脱液将上述洗脱液氮气吹干后，用流动相定容，将上述洗脱液氮气吹干后，用流动相定容，过滤后待上机测试过滤后待上机测试奶粉样品前处理步骤（奶粉样品前处理步骤（Oasis MCX）2007 Waters Corporation 6HPLC仪器条件仪器条件仪器配置：液相色谱仪仪器配置：液相色谱仪HPLC（Alliance 2695系统）,配置配置2489 检检测器测器流动相：流动相：85%乙腈，乙腈，15%10mM甲酸铵水溶液甲酸铵水溶液流速流速柱温：柱

5、温：35进样量：进样量：10ul检测波长检测波长：210nm 色谱柱：色谱柱：Atlantis HILIC Silica色谱柱，色谱柱，5m,4.6 x150mm,(186002032)2007 Waters Corporation 72007 Waters Corporation 82007 Waters Corporation 9UPLC仪器条件：仪器配置：液相色谱仪UPLC（Waters Acquity UPLC系统系统,176015000）流动相：A 乙腈 B 10mM 甲酸铵溶液 时间（min)流速（mL/min）A B curve 初始 0.3 97 3 3 0.3 88 12 6

6、 4 0.3 97 3 1柱温：30进样量：10ul色谱柱：Acquity UPLC BEH HILIC色谱柱，50mm,1.7m (186003460)2007 Waters Corporation 10质谱仪器条件：仪器配置：Waters Acquity TQD系统系统（176001263）操作软件：操作软件：电离模式：ESI positiveCapillary Voltage:3kVDesolvation gas:氮气，600L/HrCone gas：氮气，50L/HrSource temp.:120 CDesolvation temp.:400C采集模式：Multiple Reacti

7、on Monitoring(MRM)三聚氰胺质荷比：2007 Waters Corporation 1122-Sep-2008std 1ppb22-Sep-200814:23:32Time0.501.001.502.002.503.003.50%-5950.501.001.502.002.503.003.50%-595Mel_080922_20MRM of 2 Channels ES+127 852.23e42.683.82Mel_080922_12MRM of 2 Channels ES+127 852.88e4S/N:PtP=35.843.893.672007 Waters Corpora

8、tion 12奶粉的样品前处理步骤中，奶粉的样品前处理步骤中，Oasis MCX固相提取柱可以去除奶粉基质中的固相提取柱可以去除奶粉基质中的酸性和中性物质，对仪器检测的灵敏度和去除基质干扰有非常好的帮助。和酸性和中性物质，对仪器检测的灵敏度和去除基质干扰有非常好的帮助。和没有经过没有经过Oasis MCX固相提取柱处理的样品相比较，灵敏度有着固相提取柱处理的样品相比较，灵敏度有着10倍以上倍以上的提高。的提高。三聚氰胺作为一种极性非常强的组分，在反相色谱柱填料上的保留很弱。故三聚氰胺作为一种极性非常强的组分，在反相色谱柱填料上的保留很弱。故在上述在上述HPLC,UPLC-MS/MS方法中，我们

9、分别采用了方法中，我们分别采用了专用分析极性化合专用分析极性化合物物的的HPLC Atlantis HILIC Silica柱和柱和UPLC Acquity BEH HILIC 色色谱柱来对三聚氰胺进行分析。并在两种色谱柱中三聚氰胺有着非常好的保留谱柱来对三聚氰胺进行分析。并在两种色谱柱中三聚氰胺有着非常好的保留行为。行为。UPLC-TQD对三聚氰胺的分析可以达到对三聚氰胺的分析可以达到ppb的检测水平，无论在检测速度的检测水平，无论在检测速度和检测灵敏度上都有着极佳的效果。并且和检测灵敏度上都有着极佳的效果。并且UPLC-MS/MS的的MRM分析可极分析可极大限度的排除了大限度的排除了HPLC方法中可能出现的假阳性可能。方法中可能出现的假阳性可能。