梅毒的实验室诊断PPT课件.pptx
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1、梅毒的实验室诊断梅毒螺旋体的一般特性u梅毒螺旋体是梅毒的病原体,因其透明,梅毒螺旋体是梅毒的病原体,因其透明,不易着色,故又称苍白螺旋体。不易着色,故又称苍白螺旋体。u细长,形似细密的弹簧,螺旋弯曲规则。细长,形似细密的弹簧,螺旋弯曲规则。u有生活发育周期,分为颗粒期、球形体期有生活发育周期,分为颗粒期、球形体期 及螺旋体期及螺旋体期 梅毒螺旋体对外界的抵抗力极弱,离体后梅毒螺旋体对外界的抵抗力极弱,离体后1 12 2小时即死小时即死 亡,对热和干燥特别敏感,在体外干燥环境下亡,对热和干燥特别敏感,在体外干燥环境下1 12 2小时或小时或 5050加热加热5 5分钟即死亡。血液中分钟即死亡。血
2、液中44放置放置3 3天可死亡,因此天可死亡,因此 血库血库44存放存放3 3天以上的血液无传染梅毒的危险。对肥皂水天以上的血液无传染梅毒的危险。对肥皂水 和常用化学消毒剂亦敏感,和常用化学消毒剂亦敏感,1%1%2%2%石炭酸内数分钟就死石炭酸内数分钟就死 亡。亡。抗原分为三类:1.1.螺旋体表面特异性抗原螺旋体表面特异性抗原:刺激机体产生特异的凝集刺激机体产生特异的凝集抗体及密螺旋体制动或溶解抗体,后者加补体可溶解抗体及密螺旋体制动或溶解抗体,后者加补体可溶解螺旋体。螺旋体。2.2.螺旋体内类属抗原螺旋体内类属抗原:可产生补体结合抗体,与非病原可产生补体结合抗体,与非病原性螺旋体有交叉反应。
3、性螺旋体有交叉反应。3.3.螺旋体与宿主组织磷脂形成的复合抗原螺旋体与宿主组织磷脂形成的复合抗原:复合抗原可复合抗原可刺激机体产生抗磷脂的自身免疫抗体,称为反应素。刺激机体产生抗磷脂的自身免疫抗体,称为反应素。可与牛心肌或其他正常动物心肌提取的类脂质抗原起可与牛心肌或其他正常动物心肌提取的类脂质抗原起沉淀反应沉淀反应(康氏试验康氏试验)或补体结合反应或补体结合反应(华氏试验华氏试验)。梅毒的危害梅毒对人体的危害是很大的,不仅对患者的正常生活及身心影响都是梅毒对人体的危害是很大的,不仅对患者的正常生活及身心影响都是极大的,而梅毒的症状也较为复杂,若不了解典型症状,则很容易错极大的,而梅毒的症状也
4、较为复杂,若不了解典型症状,则很容易错过早期梅毒的最佳治疗时机。过早期梅毒的最佳治疗时机。1 1、传给伴侣或儿女,危害他人健康。造成早产、流产及死产,少数活、传给伴侣或儿女,危害他人健康。造成早产、流产及死产,少数活产的胎儿也很可能有胎传性梅毒。产的胎儿也很可能有胎传性梅毒。2 2、皮损不适症状,影响正常的生活。生殖器出现的溃疡、脓疱、斑疹、皮损不适症状,影响正常的生活。生殖器出现的溃疡、脓疱、斑疹等不适症状,造成分泌物多,形成恐惧心理,影响正常生活。等不适症状,造成分泌物多,形成恐惧心理,影响正常生活。3 3、引发功能丧失,导致残疾或死亡。由于螺旋体变异后毒性增强,对、引发功能丧失,导致残疾
5、或死亡。由于螺旋体变异后毒性增强,对身体器官的损伤程度加重,引起组织和器官破坏,功能丧失,导致残身体器官的损伤程度加重,引起组织和器官破坏,功能丧失,导致残疾或死亡。部分梅毒患者往往还并有泌尿生殖系统的其他感染疾或死亡。部分梅毒患者往往还并有泌尿生殖系统的其他感染。梅毒的研究难点u梅毒疫苗的研究梅毒疫苗的研究 近年来,尽管科学家们付出相当的努力近年来,尽管科学家们付出相当的努力,做出了做出了大量探索,但迄今为止大量探索,但迄今为止,国内外仍然没有切实有效的国内外仍然没有切实有效的疫苗能预防梅毒螺旋体感染。疫苗能预防梅毒螺旋体感染。阻碍疫苗研究进展的主要原因:阻碍疫苗研究进展的主要原因:u 无法
6、体外培养。无法体外培养。u 尚无法对其进行基因敲出和敲入。尚无法对其进行基因敲出和敲入。u 细菌外膜结构不稳定,实验中易被破坏细菌外膜结构不稳定,实验中易被破坏 梅毒的传播u梅毒螺旋体只感染人类。因而梅毒患者是唯一传染源。梅毒螺旋体只感染人类。因而梅毒患者是唯一传染源。u先天性梅毒先天性梅毒:也称胎传梅毒。螺旋体通过患病孕妇经胎盘进入胎儿血循也称胎传梅毒。螺旋体通过患病孕妇经胎盘进入胎儿血循环,引起胎儿的全身性感染。梅毒螺旋体在胎儿的肝、脾、肾上腺等环,引起胎儿的全身性感染。梅毒螺旋体在胎儿的肝、脾、肾上腺等器官大量繁殖导致流产、早产、死胎或出生活的梅毒儿。早期病变有器官大量繁殖导致流产、早产
7、、死胎或出生活的梅毒儿。早期病变有梅毒性鼻炎,梅毒性天疱疮和斑丘疹梅毒性鼻炎,梅毒性天疱疮和斑丘疹:晚期呈现锯状形牙、先天性耳聋晚期呈现锯状形牙、先天性耳聋和间质性角膜炎等。和间质性角膜炎等。u获得性梅毒获得性梅毒:又称后天梅毒。主要经性接触传染,少数也可通过接吻、又称后天梅毒。主要经性接触传染,少数也可通过接吻、哺乳和接触有传染性损害的病人带菌的日常用品而传染。此外,输带哺乳和接触有传染性损害的病人带菌的日常用品而传染。此外,输带病原体的新鲜血也可传染病原体的新鲜血也可传染(血源性传播)。血源性传播)。梅毒的诊断u病史病史u临床表现、体征临床表现、体征u实验室检查(对确诊有决定性意义)实验室
8、检查(对确诊有决定性意义)1、梅毒螺旋体特异性抗原试验,梅毒螺旋体非特异、梅毒螺旋体特异性抗原试验,梅毒螺旋体非特异性抗原试验性抗原试验 2、生物学假阳性、生物学假阳性 3、复查、定期检测、复查、定期检测 病史:有感染史,可有一期梅毒史,病期2年以内。不加热血清反应素实验(USR)获得性梅毒:又称后天梅毒。有感染史,可有一期、二期、或三期梅毒史。常用实验方法有:荧光密螺旋体抗体吸收试验(FTA-ABS),梅毒螺旋体血球凝集试验(TPHA),梅毒螺旋体颗粒凝集试验(TPPA)酶联免疫吸附实验(ELISA),免疫层析法-快速检测(RT),化学发光法(CLIA),梅毒PCR法。给予两个疗程的规范治疗
9、;梅毒TRUST试验震荡器 水平旋转仪阳性反应(+-+):可见中等或较大的粉红色凝块。无任何梅毒性的临床症状和体征。3、活体组织检查梅毒螺旋体,阴性反应:可见粉红色均匀沉淀物无凝集物。意义:螺旋体抗原血清试验的敏感性及特异性均高。病史:有感染史,可有一期或二期梅毒史。随访中出现“非梅”实验由阴转阳性螺旋体表面特异性抗原:刺激机体产生特异的凝集抗体及密螺旋体制动或溶解抗体,后者加补体可溶解螺旋体。立即给予孕妇一个疗程的治疗采取一期及二期梅毒硬性下疳、梅毒疹的渗出物等有螺旋结构,位于真皮毛细血采取一期及二期梅毒硬性下疳、梅毒疹的渗出物等5、先天梅毒(胎传梅毒)梅毒的诊断与分期u一期梅毒一期梅毒(1
10、 1)病史:有感染史,潜伏期一般为)病史:有感染史,潜伏期一般为2 23 3周。周。(2 2)临床表现:一期梅毒感染部位的溃疡或硬下疳)临床表现:一期梅毒感染部位的溃疡或硬下疳 ,病损附近淋巴结,病损附近淋巴结肿大。肿大。(3 3)实验室检查:暗视野显微镜检查:皮肤粘膜损害或淋巴结穿刺液)实验室检查:暗视野显微镜检查:皮肤粘膜损害或淋巴结穿刺液可查见梅毒螺旋体。梅毒血清学试验:梅毒血清学试验阳性。如感可查见梅毒螺旋体。梅毒血清学试验:梅毒血清学试验阳性。如感染不足染不足2 23 3周,梅毒血清学试验可为阴性。应于感染周,梅毒血清学试验可为阴性。应于感染4 4周后复查。周后复查。u疑似病例:具备
11、及为疑似病例。疑似病例:具备及为疑似病例。u确诊病例:疑似病例加任何一项为确诊病例。确诊病例:疑似病例加任何一项为确诊病例。梅毒的诊断与分期u2 2、二期梅毒、二期梅毒 病史:有感染史,可有一期梅毒史,病期病史:有感染史,可有一期梅毒史,病期2 2年以内。年以内。临床表现:皮肤黏膜损害及淋巴结肿大。临床表现:皮肤黏膜损害及淋巴结肿大。实验室检查:暗视野显微镜检查:二期皮疹尤其扁平湿实验室检查:暗视野显微镜检查:二期皮疹尤其扁平湿疣、湿丘疹及粘膜斑,易查见梅毒螺旋体。梅毒血清学疣、湿丘疹及粘膜斑,易查见梅毒螺旋体。梅毒血清学试验(非梅毒螺旋体抗原试验及梅毒螺旋体抗原试验)为试验(非梅毒螺旋体抗原
12、试验及梅毒螺旋体抗原试验)为强阳性。强阳性。u疑似病例:具备及为疑似病例。疑似病例:具备及为疑似病例。u确诊病例:疑似病例加任何一项为确诊病例确诊病例:疑似病例加任何一项为确诊病例。梅毒的诊断与分期u3 3、三期梅毒(晚期梅毒)、三期梅毒(晚期梅毒)病史:有感染史,可有一期或二期梅毒史。病期病史:有感染史,可有一期或二期梅毒史。病期2 2年以上。年以上。临床表现:心脏、神经、胃、眼、耳受累及树胶肿损害等。临床表现:心脏、神经、胃、眼、耳受累及树胶肿损害等。实验室检查:梅毒血清学试验:非梅毒螺旋体抗原试验大实验室检查:梅毒血清学试验:非梅毒螺旋体抗原试验大多阳性,亦可阴性,梅毒螺旋体抗原试验为阳
13、性。组织病多阳性,亦可阴性,梅毒螺旋体抗原试验为阳性。组织病理检查:有三期梅毒的组织病理变化。脑脊液检查:神经理检查:有三期梅毒的组织病理变化。脑脊液检查:神经梅毒:淋巴细胞、蛋白量升高。梅毒:淋巴细胞、蛋白量升高。u疑似病例:具备及为疑似病例。疑似病例:具备及为疑似病例。u确诊病例:疑似病例加任何一项为确诊病例。确诊病例:疑似病例加任何一项为确诊病例。梅毒的诊断与分期u4 4、潜伏梅毒(隐性梅毒)、潜伏梅毒(隐性梅毒)有感染史,可有一期、二期、或三期梅毒史。有感染史,可有一期、二期、或三期梅毒史。无任何梅毒性的临床症状和体征。无任何梅毒性的临床症状和体征。非梅毒螺旋体抗原试验非梅毒螺旋体抗原
14、试验2 2次以上阳性或梅毒螺旋体抗原试次以上阳性或梅毒螺旋体抗原试验阳性(需排除生物学假阳性)。脑脊液检查阴性。验阳性(需排除生物学假阳性)。脑脊液检查阴性。病期病期2 2年内为早期潜伏梅毒,年内为早期潜伏梅毒,2 2年以上为晚期潜伏梅毒年以上为晚期潜伏梅毒。梅毒的诊断与分期u5 5、先天梅毒(胎传梅毒)、先天梅毒(胎传梅毒)生母为梅毒患者。生母为梅毒患者。临床表现:早期先天梅毒(临床表现:早期先天梅毒(2 2岁以内):相似获得性二岁以内):相似获得性二期梅毒,可有梅毒性鼻炎及喉炎、淋巴结肿大、肝脾肿大、期梅毒,可有梅毒性鼻炎及喉炎、淋巴结肿大、肝脾肿大、贫血等。晚期先天梅毒(贫血等。晚期先天
15、梅毒(2 2岁以上):相似获得性三期岁以上):相似获得性三期梅毒,但以间质性角膜炎、赫秦生齿、马鞍鼻、神经性耳梅毒,但以间质性角膜炎、赫秦生齿、马鞍鼻、神经性耳聋等为较常见的特征,还可出现皮肤、粘膜树胶肿及骨膜聋等为较常见的特征,还可出现皮肤、粘膜树胶肿及骨膜炎等。炎等。实验室检查:早期先天梅毒皮肤及粘膜损害中可查到梅实验室检查:早期先天梅毒皮肤及粘膜损害中可查到梅毒螺旋体。梅毒血清学试验阳性。毒螺旋体。梅毒血清学试验阳性。梅毒的诊断与分期u6 6、妊娠梅毒、妊娠梅毒 孕期发生或发现的活动性梅毒或潜伏梅毒称为孕期发生或发现的活动性梅毒或潜伏梅毒称为妊娠梅毒。妊娠梅毒。梅毒的实验室诊断技术u显微
16、镜检查显微镜检查采取采取一期及二期梅毒硬性下疳、梅毒疹的渗出物等一期及二期梅毒硬性下疳、梅毒疹的渗出物等1 1、暗视野显微镜检查:在皮损处,、暗视野显微镜检查:在皮损处,用玻片刮取组织渗出液或淋巴结穿用玻片刮取组织渗出液或淋巴结穿刺液,见有活动的梅毒螺旋体。刺液,见有活动的梅毒螺旋体。(诊断早期梅毒唯一快速,可靠的(诊断早期梅毒唯一快速,可靠的方法)方法)2 2、免疫荧光染色:在荧光显、免疫荧光染色:在荧光显微镜下可见绿色的梅毒螺旋体。微镜下可见绿色的梅毒螺旋体。3 3、活体组织检查梅毒螺旋体,、活体组织检查梅毒螺旋体,如用银染色法或荧光抗体染色,如用银染色法或荧光抗体染色,可查见梅毒螺旋体,
17、呈黑褐色,可查见梅毒螺旋体,呈黑褐色,有螺旋结构,位于真皮毛细血有螺旋结构,位于真皮毛细血管周围。管周围。梅毒的实验室诊断技术u血清学实验血清学实验u梅毒螺旋体非特异性抗原实验梅毒螺旋体非特异性抗原实验u VDRL,RPR,USR,TRUST VDRL,RPR,USR,TRUST等等.u 梅毒螺旋体特异性抗原实验梅毒螺旋体特异性抗原实验u ELISA,CLIA,RT,WBELISA,CLIA,RT,WB等等.u TPPA/TPHA,FTA-ABSTPPA/TPHA,FTA-ABS.梅毒的实验室诊断技术梅毒螺旋体非特异性抗原血清实验梅毒螺旋体非特异性抗原血清实验反应原理反应原理 :抗原抗体结合形
18、成复合物的絮状反应:抗原抗体结合形成复合物的絮状反应试验试验抗原基本成分抗原基本成分 :心磷脂(来自牛心肌)、卵磷脂:心磷脂(来自牛心肌)、卵磷脂和胆固醇(来自鸡蛋黄)和胆固醇(来自鸡蛋黄)梅毒的实验室诊断技术u 性病研究实验室试验性病研究实验室试验(VDRL)(VDRL)试剂现配现用,血清需加热灭活,显微镜下观察结果试剂现配现用,血清需加热灭活,显微镜下观察结果 用用于检测脑脊液,是诊断神经性梅毒最特异的方法。于检测脑脊液,是诊断神经性梅毒最特异的方法。u 快速血浆反应素环状卡片试验快速血浆反应素环状卡片试验(RPR)(RPR)加入活性炭颗粒,肉眼可观察结果加入活性炭颗粒,肉眼可观察结果 u
19、 不加热血清反应素实验不加热血清反应素实验(USR)(USR)需现配现用,血清无需加热灭活,显微镜下观察结果需现配现用,血清无需加热灭活,显微镜下观察结果 u 甲苯胺红不加热血清试验(甲苯胺红不加热血清试验(TRUSTTRUST)加入甲苯胺红颗粒,肉眼可观察结果加入甲苯胺红颗粒,肉眼可观察结果梅毒的实验室诊断技术梅毒梅毒TRUSTTRUST试剂试剂梅毒梅毒TRUSTTRUST试验震荡器试验震荡器 水平旋转仪水平旋转仪(旧)(新)甲苯胺红不加热血清试验甲苯胺红不加热血清试验(TRUSTTRUST):):2、免疫荧光染色:在荧光显梅毒螺旋体对外界的抵抗力极弱,离体后12小时即死 亡,对热和干燥特别
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