实验五中毒性肾病课件.ppt

1、12实验目的实验目的 复制家兔升汞中毒性肾功能不复制家兔升汞中毒性肾功能不全功能模型。并观察升汞中毒家兔全功能模型。并观察升汞中毒家兔的一般状态（症状），尿的变化，的一般状态（症状），尿的变化，及肾脏大体形态改变。及肾脏大体形态改变。3实验原理实验原理 氯化汞氯化汞(HgCL2)(HgCL2)主要有肾脏排泄并选择主要有肾脏排泄并选择性地使近区小管变性坏死，从而形成急性地使近区小管变性坏死，从而形成急性肾功能不全。本实验用氯化汞造成家性肾功能不全。本实验用氯化汞造成家兔的中毒性肾病，通过观察动物尿质、兔的中毒性肾病，通过观察动物尿质、尿量及肾脏形态学变化，测定酚红排泄尿量及肾脏形态学变化，测定酚

2、红排泄率的异常改变，了解急性肾功能衰竭少率的异常改变，了解急性肾功能衰竭少尿期的主要症状及发生机理。尿期的主要症状及发生机理。4实验动物及试材实验动物及试材 家兔，体重家兔，体重2.5kg2.5kg以上。以上。兔实验台，手术器械一套，木试管兔实验台，手术器械一套，木试管夹，试管，滴管，酒精灯，输尿管夹，试管，滴管，酒精灯，输尿管塑料插管，载玻片，纱布，棉球，塑料插管，载玻片，纱布，棉球，比色标准管比色标准管1 1套，烧杯。套，烧杯。1%HgCL21%HgCL2，1%1%普鲁卡因，生理盐普鲁卡因，生理盐水，水，5%5%醋酸。醋酸。5实验方法与步骤实验方法与步骤 模型复制模型复制 手术操作手术操作

3、-收集尿液收集尿液 肾脏功能检查肾脏功能检查 酚红排泄试验酚红排泄试验 尿液检查尿液检查:蛋白蛋白、细胞、管型细胞、管型 肾脏形态肾脏形态6试验结果试验结果中毒兔中毒兔对照兔对照兔尿蛋白定尿蛋白定性性尿中细胞尿中细胞尿中管型尿中管型酚红排泄酚红排泄率率解剖所见解剖所见7思考题思考题结合实验，讨论蛋白尿，管型尿的结合实验，讨论蛋白尿，管型尿的发生机制。发生机制。8模型复制模型复制 实验前实验前2d2d，取健康雄性兔，取健康雄性兔2 2只，称只，称重后一只皮下注射重后一只皮下注射1%HgCL21%HgCL2，（按，（按1.51.7mL/kg1.51.7mL/kg，一次注射），造成，一次注射），造成

4、急性肾功能不全；另一只则在相同急性肾功能不全；另一只则在相同部位注射等量生理盐水作为对照备部位注射等量生理盐水作为对照备用，于实验前用，于实验前12h12h禁食。禁食。9手术操作手术操作实验时将两兔称重后仰卧位固定于实验时将两兔称重后仰卧位固定于兔实验台上，下腹部剪毛，局麻兔实验台上，下腹部剪毛，局麻.在耻骨联合上在耻骨联合上1.5cm1.5cm处正中切开长处正中切开长约约4cm4cm，暴露膀胱，并将膀胱翻向，暴露膀胱，并将膀胱翻向体外，在膀胱底部找到并分离两侧体外，在膀胱底部找到并分离两侧输尿管，在输尿管靠近膀胱处用线输尿管，在输尿管靠近膀胱处用线结扎。结扎。10手术操作手术操作 待输尿管充

5、盈后，用眼科待输尿管充盈后，用眼科剪剪一小口，剪剪一小口，向肾盂方向向肾盂方向插入一细塑料管，结扎固插入一细塑料管，结扎固定，以便收集尿液。定，以便收集尿液。自耳缘静脉缓慢注入生理盐水自耳缘静脉缓慢注入生理盐水30mL30mL，以保证有足够的尿量。以保证有足够的尿量。11酚红排泄试验酚红排泄试验 待两侧插管滴尿无出血时，从家兔耳缘静待两侧插管滴尿无出血时，从家兔耳缘静脉准确快速注入酚红溶液脉准确快速注入酚红溶液(0.6%)1mL(0.6%)1mL，同，同时计时。时计时。记录酚红最早排除时间（即滴入瓶内的尿记录酚红最早排除时间（即滴入瓶内的尿液变红的时间）。记录液变红的时间）。记录60 min6

6、0 min尿量。尿量。测定和计算测定和计算:将收集的全部尿倒入将收集的全部尿倒入500mL500mL量量筒内，加入水至筒内，加入水至500mL500mL处，搅拌均匀，从处，搅拌均匀，从中吸取中吸取10mL10mL尿液置于试管中，与标准管比尿液置于试管中，与标准管比色，算出色，算出1h1h内酚红排出量。内酚红排出量。12尿蛋白测定检查尿蛋白测定检查取正常及中毒家兔尿液各取正常及中毒家兔尿液各3mL3mL分别放入试管分别放入试管中，以试管夹夹试管在酒精灯上加热至沸中，以试管夹夹试管在酒精灯上加热至沸腾（切勿使尿液溢出）。腾（切勿使尿液溢出）。加入加入5%5%醋酸醋酸3 35 5滴，再煮沸。若尿变清

7、，滴，再煮沸。若尿变清，是尿酸盐所致；若变浊，则表示尿中含有是尿酸盐所致；若变浊，则表示尿中含有蛋白，以浊度程度不同判断尿蛋白含量标蛋白，以浊度程度不同判断尿蛋白含量标准如下：准如下：13蛋白浊度判断标准蛋白浊度判断标准 清晰清晰轻度轻度浑浊浑浊稀薄乳稀薄乳样浑浊样浑浊乳浊少乳浊少量碎片量碎片絮状絮状浑浊浑浊程度程度-+含蛋白含蛋白量量g%g%0 00.01-0.01-0.050.050.05-0.05-0.20.20.2-0.2-0.50.50.50.514尿液镜检尿液镜检 取取1212滴的尿液涂片滴的尿液涂片,先高倍后先高倍后低倍观察。计算低倍观察。计算1010个不同高倍视野个不同高倍视野

8、细胞的近似平均数，低倍视野观察细胞的近似平均数，低倍视野观察管型并计算。管型并计算。15形态学观察形态学观察 将对照及中毒家兔一并杀死，将对照及中毒家兔一并杀死，解剖取出肾脏，观察并比较二者的解剖取出肾脏，观察并比较二者的肉眼变化如体积，皮质条纹，色泽肉眼变化如体积，皮质条纹，色泽等。等。16不同稀释倍数酚红不同稀释倍数酚红(0.6%)对对应的吸光度应的吸光度%500ml0.10.10.20.20.30.30.40.40.50.50.60.60.70.70.80.80.90.91 1A0.00.08 88 80.10.17 78 80.20.26 68 80.30.33 37 70.40.44 42 20.50.51 10.50.54 40.50.59 95 50.60.66 60.70.71718思考题 结合试验结果，讨论尿蛋白和结合试验结果，讨论尿蛋白和管型发生的机制。管型发生的机制。