FISH技术检测子宫颈上皮细胞hTERC基因扩增的临床应用研究课件.ppt

1、编辑课件12编辑课件3编辑课件4编辑课件5编辑课件卫生部卫生部20072007年课题年课题（WKJ2007-3-001WKJ2007-3-001）6编辑课件7编辑课件宫颈癌仍居女性生殖道恶性肿瘤之首宫颈癌仍居女性生殖道恶性肿瘤之首致病元凶是高危型人乳头瘤病毒致病元凶是高危型人乳头瘤病毒（HPVHPV）从感染高危型从感染高危型HPVHPV至宫颈癌的发生通常至宫颈癌的发生通常需要一个相对较长的时间需要一个相对较长的时间8编辑课件持续性持续性HPVHPV感染感染细胞分化细胞分化失调控失调控宫颈上皮宫颈上皮内瘤变内瘤变CINCIN宫颈癌宫颈癌宫颈癌筛查和预宫颈癌筛查和预防的前提和基础防的前提和基础9编

2、辑课件65%65%自行消退自行消退20%20%持续存在持续存在15%15%进展进展？10编辑课件1宫颈癌前宫颈癌前病变和早病变和早期宫颈癌期宫颈癌的有效筛的有效筛查查2寻找能预测寻找能预测CIN“CIN“逆转逆转”或持续进展或持续进展为宫颈癌的为宫颈癌的可可靠指标靠指标本领域的研究热点本领域的研究热点11编辑课件液基细胞液基细胞学检查（学检查（TCT）宫颈病变宫颈病变筛查方案筛查方案高危型高危型HPV-DNAHPV-DNA检检测测12编辑课件TCT敏感性低敏感性低（55%-75%55%-75%）重复性差重复性差HPV敏感度高敏感度高阳性预测阳性预测值低，大值低，大多多HPVHPV阳性阳性患者自

3、然患者自然转阴转阴需要寻找新的有效检测指标或手段需要寻找新的有效检测指标或手段13编辑课件14编辑课件 15编辑课件资料与方法资料与方法16编辑课件慢性宫颈炎慢性宫颈炎3333例例 CIN 70CIN 70例例cin.ppt宫颈癌宫颈癌1717例例 年龄年龄18185656岁，岁，平均年龄平均年龄37.437.47.37.3岁岁 17编辑课件荧光原位杂交荧光原位杂交（fluorescence in situ hybridization，FISH）GLP TERC/CSP3 探针由北京金菩嘉探针由北京金菩嘉医疗科技有限公司提供，按探针试医疗科技有限公司提供，按探针试剂盒说明剂盒说明进行进行操作操

4、作 18编辑课件hTERChTERC探针：探针：GLPGLP探针，标记探针，标记红色荧光红色荧光对照探针：对照探针：CSP3CSP3探针，标记探针，标记绿色荧光绿色荧光正常细胞判断：正常细胞判断：单个间期细胞红色及绿色信号各单个间期细胞红色及绿色信号各2 2个个异常细胞判断：异常细胞判断：红色信号大于红色信号大于2 2个，且绿色信号不少于个，且绿色信号不少于2 2个为个为hTERChTERC基因扩增异常细胞基因扩增异常细胞 19编辑课件n阈值建立：阈值建立：采集采集2020例正常宫颈细胞，使用上述方法进例正常宫颈细胞，使用上述方法进行行FISHFISH实验，每例至少分析实验，每例至少分析100

5、100个细胞，统计出现个细胞，统计出现hTERChTERC基基因异常扩增细胞数目的百分比。因异常扩增细胞数目的百分比。阈值阈值=平均数（平均数（M M）+3+3标准差（标准差（SDSD）本研究阈值为）本研究阈值为7.1%7.1%n阳性结果判定阳性结果判定每例样本随机计数每例样本随机计数100100个细胞，计算其中个细胞，计算其中hTERChTERC基因异常扩基因异常扩增细胞的百分比，如果百分比大于阈值，判定为阳性结果；增细胞的百分比，如果百分比大于阈值，判定为阳性结果；如果小于阈值，判定为阴性结果；如果等于阈值，加大观如果小于阈值，判定为阴性结果；如果等于阈值，加大观测样本细胞数目。测样本细胞

6、数目。20编辑课件21编辑课件结结 果果22编辑课件一、各组宫颈病变中一、各组宫颈病变中hTERChTERC基因扩增基因扩增阳性率比较阳性率比较23编辑课件表表1 1 各组宫颈病变患者宫颈脱落细胞中各组宫颈病变患者宫颈脱落细胞中hTERChTERC基因扩增阳性率比较基因扩增阳性率比较24编辑课件25编辑课件TCT26编辑课件hTERChTERC基因扩增基因扩增 27编辑课件三、高危型三、高危型HPV-DNAHPV-DNA检测和检测和hTERChTERC基基因扩增诊断宫颈高度病变的比较因扩增诊断宫颈高度病变的比较 28编辑课件图图1 1：慢性宫颈炎细胞慢性宫颈炎细胞hTERChTERC基因的表达

7、基因的表达，可见，可见2 2个红色信号个红色信号红色信号：红色信号：GLP hTERCGLP hTERC；绿色信号：；绿色信号：CSP3(FISHCSP3(FISH法法 100100倍倍)图图3 3宫颈癌细胞宫颈癌细胞hTERChTERC基因的异常扩增基因的异常扩增 可见可见4 4个红色信号个红色信号红色信号：红色信号：GLP hTERCGLP hTERC；绿色信号：；绿色信号：CSP3(FISHCSP3(FISH法法 100100倍倍)31编辑课件1232编辑课件国内外学者也取得了相似的结论国内外学者也取得了相似的结论33编辑课件Am J Pathol,2003,34编辑课件(AJP Apr

8、il 2005,Vol.166,No.4)35编辑课件IGCS2008IGCS2008会议报告，中国医学论坛报报道会议报告，中国医学论坛报报道1宫颈癌筛宫颈癌筛查、早期查、早期诊断的新诊断的新途径和手途径和手段段2探索预测探索预测CINCIN发展到发展到宫颈癌的宫颈癌的新手段新手段3迎来宫颈迎来宫颈癌防治领癌防治领域的又一域的又一次飞跃次飞跃37编辑课件38编辑课件随访（涂片、随访（涂片、HPV）Asc-usAsc-us或或HPVHPV（+）连续二次涂片（连续二次涂片（-）HPVHPV（-）合并宫颈糜烂等合并宫颈糜烂等阴道镜检阴道镜检每年随诊每年随诊物理治疗物理治疗 LEEPLEEPCIN1持续持续CIN1消退消退进展进展CIN2/3TERC（）（）TERC（）（）阴道镜检查阴道镜检查不满意不满意诊断性切除诊断性切除孕期，青春期孕期，青春期随诊动态观察随诊动态观察TERC（）（）TERC（）（）阴道镜不满意的阴道镜不满意的CIN2CIN2患者的处理患者的处理阴道镜检查阴道镜检查不满意不满意诊断性切除诊断性切除阴道镜满意阴道镜满意物理治疗物理治疗病变局部切除病变局部切除TERC（）（）TERC（）（）42编辑课件