2011高考一轮复习课件:植物的组织培养技术及DNA和蛋白质技术.ppt
- 【下载声明】
1. 本站全部试题类文档,若标题没写含答案,则无答案;标题注明含答案的文档,主观题也可能无答案。请谨慎下单,一旦售出,不予退换。
2. 本站全部PPT文档均不含视频和音频,PPT中出现的音频或视频标识(或文字)仅表示流程,实际无音频或视频文件。请谨慎下单,一旦售出,不予退换。
3. 本页资料《2011高考一轮复习课件:植物的组织培养技术及DNA和蛋白质技术.ppt》由用户(晟晟文业)主动上传,其收益全归该用户。163文库仅提供信息存储空间,仅对该用户上传内容的表现方式做保护处理,对上传内容本身不做任何修改或编辑。 若此文所含内容侵犯了您的版权或隐私,请立即通知163文库(点击联系客服),我们立即给予删除!
4. 请根据预览情况,自愿下载本文。本站不保证下载资源的准确性、安全性和完整性, 同时也不承担用户因使用这些下载资源对自己和他人造成任何形式的伤害或损失。
5. 本站所有资源如无特殊说明,都需要本地电脑安装OFFICE2007及以上版本和PDF阅读器,压缩文件请下载最新的WinRAR软件解压。
- 配套讲稿:
如PPT文件的首页显示word图标,表示该PPT已包含配套word讲稿。双击word图标可打开word文档。
- 特殊限制:
部分文档作品中含有的国旗、国徽等图片,仅作为作品整体效果示例展示,禁止商用。设计者仅对作品中独创性部分享有著作权。
- 关 键 词:
- 2011 高考 一轮 复习 课件 植物 组织培养 技术 DNA 蛋白质
- 资源描述:
-
1、XXX(姓名)(姓名)金太阳教育金太阳教育标题标题:XXXXXX2第第5050课时课时 植物的组织培养技术及植物的组织培养技术及 DNADNA和蛋白质技术和蛋白质技术考点一考点一 植物的组织培养植物的组织培养1.1.实验操作流程实验操作流程 (1 1)配制培养基:加琼脂)配制培养基:加琼脂 溶化加蔗糖、各种溶化加蔗糖、各种 母液母液调调pHpH分装。常用的植物组织培养基为分装。常用的植物组织培养基为MSMS 培养基,培养基配制好后要进行高压蒸汽灭菌。培养基,培养基配制好后要进行高压蒸汽灭菌。高频考点突破高频考点突破3(2 2)外植体消毒:外植体通常先用体积分数为)外植体消毒:外植体通常先用体积
2、分数为70%70%的酒的酒精消毒,再用质量分数为精消毒,再用质量分数为0.1%0.1%的氯化汞溶液消毒,最后的氯化汞溶液消毒,最后无菌水清洗。无菌水清洗。(3 3)接种)接种:要在超净工作台上并且要在酒精灯火焰要在超净工作台上并且要在酒精灯火焰附近操作。附近操作。(4 4)培养)培养。(5 5)移栽。)移栽。(6 6)栽培。)栽培。42.2.菊花茎的组织培养和月季的花药培养比较菊花茎的组织培养和月季的花药培养比较(1 1)相同点)相同点 理论基础:植物细胞的全能性。理论基础:植物细胞的全能性。基本过程:脱分化基本过程:脱分化再分化再分化试管苗。试管苗。影响因素:营养、激素、影响因素:营养、激素
3、、pHpH、温度、光照等。、温度、光照等。(2 2)不同点)不同点菊花茎的组织培养月季的花药培养材料选取未开花植株的茎上部新萌生的侧枝通常选择完全未开放的花蕾光照状况每日用日光灯照12 h开始不需光照,幼小植株形成后才需光照5材料的选取:菊花的组织培养实验中,应选材料的选取:菊花的组织培养实验中,应选择未开花植株的茎上部新萌生的侧枝,该部分不仅分择未开花植株的茎上部新萌生的侧枝,该部分不仅分生能力强,而且无病毒侵染。月季花药的培养实验中,生能力强,而且无病毒侵染。月季花药的培养实验中,应选择花粉发育过程中的单核靠边期的花药进行培养,应选择花粉发育过程中的单核靠边期的花药进行培养,且在花蕾期,因
4、为此时质地幼嫩,花瓣未开,微生物且在花蕾期,因为此时质地幼嫩,花瓣未开,微生物不易侵入,容易消毒。不易侵入,容易消毒。操作流程制备培养基外植体消毒接种培养移栽栽培选材材料消毒接种和培养筛选和诱导移栽栽培选育结果正常植株单倍体植株提醒提醒6剥离花药时,尽量不要损伤花药,同时还要彻底剥离花药时,尽量不要损伤花药,同时还要彻底去除花丝,防止对实验产生干扰。去除花丝,防止对实验产生干扰。外植体消毒:所用消毒剂为体外植体消毒:所用消毒剂为体积分数为积分数为70%70%的酒精的酒精和质量分数为和质量分数为0.1%0.1%的氯化汞溶液,所使用的清洗液的氯化汞溶液,所使用的清洗液是无菌水。是无菌水。培养过程:
5、在初期,菊花的组织培养需光照,月培养过程:在初期,菊花的组织培养需光照,月季的花药培养不需光照,而在后期均需光照。季的花药培养不需光照,而在后期均需光照。73.3.影响植物组织培养的因素影响植物组织培养的因素(1 1)材料:植物的种类、材料的年龄和保存时间的)材料:植物的种类、材料的年龄和保存时间的长短等都会影响实验结果。一般来说,容易进行无长短等都会影响实验结果。一般来说,容易进行无性繁殖的植物容易进行组织培养。嫩枝生理状态好,性繁殖的植物容易进行组织培养。嫩枝生理状态好,容易诱导脱分化和再分化。容易诱导脱分化和再分化。(2 2)营养:常用的培养基是)营养:常用的培养基是MSMS培养基,其中
6、含有的培养基,其中含有的大量元素是大量元素是N N、P P、S S、K K、CaCa、MgMg,微量元素是微量元素是 FeFe、MnMn、B B、ZnZn、CuCu、MoMo、ClCl、NiNi、I I、CoCo,有机,有机 物有甘氨酸、烟酸、肌醇、维生素、蔗糖等。物有甘氨酸、烟酸、肌醇、维生素、蔗糖等。(3 3)激素:在培养基中需要添加生长素和细胞分裂)激素:在培养基中需要添加生长素和细胞分裂素等植物激素,其浓度、使用的先后顺序、用量的素等植物激素,其浓度、使用的先后顺序、用量的比例等都影响结果。比例等都影响结果。8激素使用的先后顺序及其用量比例对细胞分裂和分激素使用的先后顺序及其用量比例对
7、细胞分裂和分化的影响如下表:化的影响如下表:使用顺序实验结果先生长素,后细胞分裂素有利于分裂但不分化先细胞分裂素,后生长素细胞既分裂也分化同时使用分化频率提高9(4 4)环境条件:环境条件:pHpH、温、温度、度、光等环境条件。如菊花光等环境条件。如菊花组培所需组培所需pHpH为为5.85.8,温度为,温度为18221822,光照条件为每,光照条件为每日用日光灯照射日用日光灯照射1212小时。小时。生长素/细胞分裂素比值与结果比值高时促根分化,抑芽形成比值低时促芽分化,抑根形成比值适中促进愈伤组织生长10对位训练对位训练1.1.植物细胞表现出全能性的必要条件是植物细胞表现出全能性的必要条件是
8、()A.A.导入其他植物细胞的基因导入其他植物细胞的基因 B.B.将成熟筛管的细胞核移植到去核的卵细胞内将成熟筛管的细胞核移植到去核的卵细胞内 C.C.用适当浓度的秋水仙素处理用适当浓度的秋水仙素处理 D.D.脱离母体后,给予适宜的营养和外界条件脱离母体后,给予适宜的营养和外界条件D112.2.影响植物组织培养的因素包括影响植物组织培养的因素包括()培养基的配制培养基的配制 外植体的选取外植体的选取 激素的应激素的应 用用 消毒消毒温度、温度、pHpH、光照、光照 A.A.B.B.C.C.D.D.A12考点二考点二 DNADNA的粗提取与鉴定的粗提取与鉴定1.1.原理、方法和目的原理、方法和目
9、的基本原理方法目的DNA在不同浓度的NaCl溶液中的溶解度不同,在0.14 mol/L的NaCl溶液中的溶解度最低溶于NaCl溶液中并稀释NaCl溶液为2 mol/L时,DNA溶解,而部分蛋白质发生盐析而生成沉淀,通过过滤可除去部分蛋白质及不溶于NaCl溶液的杂质当NaCl溶液稀释至0.14 mol/L时,DNA析出,过滤可除去溶于NaCl中的部分蛋白质和其他杂质13DNA不被蛋白酶所水解加入嫩肉粉嫩肉粉中含木瓜蛋白酶,水解蛋白质DNA不溶于酒精溶液加入冷却酒精(95%)DNA析出,除去溶于酒精的蛋白质DNA可被二苯胺染成蓝色加入二苯胺,并沸水浴鉴定DNA142.2.实验材料实验材料(1 1)
10、动物)动物(2 2)植物:新鲜菜花、蒜黄、菠菜等。)植物:新鲜菜花、蒜黄、菠菜等。人和哺乳动物成熟的红细胞中不含细胞核人和哺乳动物成熟的红细胞中不含细胞核,也没有也没有DNADNA,不适于作,不适于作DNADNA提取的材料,但却是提取的材料,但却是提取血红蛋白的理想材料。提取血红蛋白的理想材料。鸡血红细胞、白细胞中都有细胞核,鸡血红细胞、白细胞中都有细胞核,含大量的含大量的DNADNA既经济又易取既经济又易取鸡血细胞鸡血细胞液的优点液的优点提醒提醒153.3.实验步骤及注意事项实验步骤及注意事项(1 1)步骤:提取血细胞核物质(蒸馏水涨破)步骤:提取血细胞核物质(蒸馏水涨破)溶解(溶解(2 2
11、 mol/Lmol/L的的NaClNaCl)过滤(除杂质)过滤(除杂质)析出析出 (滴蒸馏水,降(滴蒸馏水,降NaClNaCl浓度至浓度至0.14 0.14 mol/Lmol/L)过滤过滤 再溶解(再溶解(2 2 mol/Lmol/L的的NaClNaCl)过滤过滤进一步提纯进一步提纯 (体积分数为(体积分数为95%95%的冷却酒精)的冷却酒精)鉴定。鉴定。16(2 2)鉴定)鉴定比较加入物质结果图示实验组均加入:4 mL二苯胺试剂2 mol/LNaCl溶液5 mL丝状物(DNA)溶液逐渐变蓝对照组不变蓝17(3 3)注意事项)注意事项制备鸡血细胞液时,要在取鸡血的同时加入柠檬制备鸡血细胞液时,
12、要在取鸡血的同时加入柠檬酸钠,静置后上层是血清,下层为所需要的血细胞。酸钠,静置后上层是血清,下层为所需要的血细胞。两次加蒸馏水的目的不同。两次加蒸馏水的目的不同。鉴定鉴定DNADNA时需沸水浴加热。时需沸水浴加热。18对位训练对位训练3.3.相对于细菌分离,而相对于细菌分离,而DNADNA分子的分离和提取操作分子的分离和提取操作 要复杂的多。要复杂的多。(1 1)在)在DNADNA提取中两次用到蒸馏水,其目的分别是提取中两次用到蒸馏水,其目的分别是 。(2 2)实验中能否以哺乳动物成熟的红细胞为实验材)实验中能否以哺乳动物成熟的红细胞为实验材 料?为什么?料?为什么?。使血细胞破裂,释放出使
13、血细胞破裂,释放出DNADNA分子、稀释分子、稀释NaClNaCl溶液,溶液,使使DNADNA分子析出分子析出不能,哺乳动物成熟的红细胞中无不能,哺乳动物成熟的红细胞中无DNADNA分子分子19考点三考点三 PCRPCR扩增技术与体内扩增技术与体内DNADNA复制复制1.1.PCRPCR的反应过程的反应过程(1 1)变性:当温度上升到)变性:当温度上升到9090以上时,双链以上时,双链DNADNA 解旋为单链,如下图:解旋为单链,如下图:(2 2)复性:温度下降到)复性:温度下降到5050左右,两种引物通过碱左右,两种引物通过碱基互补配对与两条单链基互补配对与两条单链DNADNA结合,如下图:
14、结合,如下图:20(3 3)延伸:温度上升到)延伸:温度上升到7272左右,溶液中的四种左右,溶液中的四种脱氧核苷酸在脱氧核苷酸在DNADNA聚合聚合酶的作用下,根据碱基互补酶的作用下,根据碱基互补配对原则合成新的配对原则合成新的DNADNA链,如下图:链,如下图:212.2.PCRPCR扩增技术和扩增技术和DNADNA复制的比较复制的比较DNA复制PCR扩增技术场所细胞核内生物体外原理碱基互补配对碱基互补配对酶DNA聚合酶、解旋酶耐热的DNA聚合酶(Taq酶)条件模板、ATP、引物链(RNA)、常温模板、ATP、引物链(DNA及RNA片段)、温度变化(909555607075)原料四种脱氧核
15、苷酸四种脱氧核苷酸特点形成的是整个DNA分子,一个细胞周期只复制一次短时间内形成大量目的基因DNA片段,呈指数增长2n22对位训练对位训练4.4.标准的标准的PCRPCR过程一般分为变性、复性、延伸三大过程一般分为变性、复性、延伸三大 步,这三大步需要的温度依次是步,这三大步需要的温度依次是()A.92A.92、5050、7272 B.72 B.72、5050、9292 C.50 C.50、9292、7272 D.80 D.80、5050、7272A235.5.引物的作用是引物的作用是()A.A.打开打开DNADNA双链双链 B.B.催化合成催化合成DNADNA子链子链 C.C.使使DNADN
16、A聚合酶能够从引物的聚合酶能够从引物的33端开始复制端开始复制 D.D.提供模板提供模板C24考点四考点四 血红蛋白的提取和分离血红蛋白的提取和分离1.1.蛋白质分离的依据蛋白质分离的依据 蛋白质各种特性的差异,如分子的形状和大小、所蛋白质各种特性的差异,如分子的形状和大小、所 带电荷的性质和多少、溶解度、吸附性质和对其他带电荷的性质和多少、溶解度、吸附性质和对其他 分子的亲和力等,可以用来提取和分离不同种类的分子的亲和力等,可以用来提取和分离不同种类的 蛋白质。蛋白质。252.2.方法及原理方法及原理(1 1)凝胶色谱法原理)凝胶色谱法原理 蛋白质比较相对分子质量大相对分子质量小凝胶内部不能
17、进入能进入运动方式垂直向下垂直向下和无规则扩散运动经过路程较短较长洗脱次序先流出后流出26提醒提醒 凝胶色谱柱的直径大小不影响分离效果,但凝胶色谱柱的直径大小不影响分离效果,但直径过大造成洗脱液体积大,样品稀释度大;凝胶直径过大造成洗脱液体积大,样品稀释度大;凝胶色谱柱的高度与分离度有关。色谱柱的高度与分离度有关。(2 2)凝胶电泳法原理)凝胶电泳法原理凝胶电泳法的原理是不同蛋白质的带电性质、电量、凝胶电泳法的原理是不同蛋白质的带电性质、电量、形状和大小不同,在电场中受到的作用力大小、方形状和大小不同,在电场中受到的作用力大小、方向、阻力不同,导致不同蛋白质在电场中的运动方向、阻力不同,导致不
18、同蛋白质在电场中的运动方向和运动速度不同。如下表:向和运动速度不同。如下表:27决定运动方向形成库仑力形成阻力决定运动速率电荷性质电荷量分子形状分子大小283.3.实验操作流程实验操作流程样品的处理样品的处理红细胞洗涤红细胞洗涤离心去除血清离心去除血清释放血红蛋白释放血红蛋白蒸馏水涨破蒸馏水涨破分离血红蛋白分离血红蛋白离心处理离心处理粗分离粗分离透析(去除小分子杂质)透析(去除小分子杂质)纯化纯化凝胶色谱法进行分离和纯化凝胶色谱法进行分离和纯化纯度鉴定纯度鉴定SDS-SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳法测聚丙烯酰胺凝胶电泳法测定相对分子量定相对分子量29提醒提醒 红细胞洗涤过程中,洗涤三次后,上清液红
19、细胞洗涤过程中,洗涤三次后,上清液仍有黄色,可增加洗涤次数,否则无法除去血浆蛋仍有黄色,可增加洗涤次数,否则无法除去血浆蛋白;离心时转速要低,时间要短,否则白细胞等会白;离心时转速要低,时间要短,否则白细胞等会一同沉淀,达不到分离效果。一同沉淀,达不到分离效果。血红蛋白释放过程中,蒸馏水的作用是涨破红细血红蛋白释放过程中,蒸馏水的作用是涨破红细胞,甲苯的作用主要是溶解细胞膜。胞,甲苯的作用主要是溶解细胞膜。为了加快干凝胶的膨胀,可将加入洗脱液的湿凝为了加快干凝胶的膨胀,可将加入洗脱液的湿凝胶用沸水浴加热,逐渐升温至接近沸腾,通常只需胶用沸水浴加热,逐渐升温至接近沸腾,通常只需1 12 h2 h
20、。这种方法不但节约时间,而且可以除去凝。这种方法不但节约时间,而且可以除去凝胶中可能带有的微生物,排除胶粒内的空气。胶中可能带有的微生物,排除胶粒内的空气。滴加样品时,吸管管口要贴着管壁环绕移动,滴加样品时,吸管管口要贴着管壁环绕移动,防止破坏凝胶面。防止破坏凝胶面。30对位训练对位训练6.6.为了提取血红蛋白,从学校附近的屠宰场索取新为了提取血红蛋白,从学校附近的屠宰场索取新 鲜的猪血,对猪血处理的正确操作是鲜的猪血,对猪血处理的正确操作是()A.A.要在采血容器中预先加入抗凝血剂柠檬酸钠要在采血容器中预先加入抗凝血剂柠檬酸钠 B.B.取血回来后,马上进行高速长时间离心取血回来后,马上进行高
21、速长时间离心 C.C.将离心后的血细胞加入清水缓慢搅拌将离心后的血细胞加入清水缓慢搅拌 D.D.重复洗涤直到上清液呈红色为止重复洗涤直到上清液呈红色为止A317.7.洗涤红细胞时,离心所用方法为洗涤红细胞时,离心所用方法为()A.A.低速长时间离心低速长时间离心 B.B.低速短时间离心低速短时间离心 C.C.高速长时间离心高速长时间离心 D.D.高速短时间离心高速短时间离心B32思维误区警示思维误区警示易错分析易错分析 对对DNADNA和蛋白质提取与分离的原理不清楚和蛋白质提取与分离的原理不清楚 (1 1)DNADNA溶解度与溶解度与NaClNaCl浓度的关系浓度的关系 (2 2)两次蒸馏水的
22、目的不同:第)两次蒸馏水的目的不同:第1 1次是使红细胞次是使红细胞吸水涨破;第吸水涨破;第2 2次是降低次是降低NaClNaCl浓度,析出浓度,析出DNADNA。解题思路探究解题思路探究33(3 3)血红蛋白的分离方法及相关原理)血红蛋白的分离方法及相关原理方法原理凝胶色谱法根据相对分子质量的大小分离蛋白质电泳法根据各种分子带电性质的差异以及分子本身大小、形状的不同进行分离341.1.(20082008江苏卷,江苏卷,1818)下列叙述中错误的是下列叙述中错误的是 ()()A.A.改变改变NaClNaCl溶液的浓度只能使溶液的浓度只能使DNADNA溶解而不能使其溶解而不能使其 析出析出B.B
23、.在沸水浴中,在沸水浴中,DNADNA遇二苯胺试剂会呈现蓝色遇二苯胺试剂会呈现蓝色C.C.用电泳法可分离带电性质、分子大小和形状不用电泳法可分离带电性质、分子大小和形状不 同的蛋白质同的蛋白质D.D.用透析法可去除蛋白质样品中的小分子物质用透析法可去除蛋白质样品中的小分子物质纠正训练纠正训练35解析解析 在不同浓度的氯化钠溶液中在不同浓度的氯化钠溶液中DNADNA的溶解度不的溶解度不同,在同,在0.14 mol/L0.14 mol/L的氯化钠溶液中溶解度最小的氯化钠溶液中溶解度最小,DNA,DNA析出析出,呈丝状物呈丝状物,过滤后存在于黏稠物中过滤后存在于黏稠物中;在在2 mol/L2 mol
24、/L的的氯化钠溶液中溶解度最大,所以氯化钠溶液中溶解度最大,所以DNADNA呈溶解状态,呈溶解状态,过滤后存在于滤液中。过滤后存在于滤液中。答案答案 A362.2.使用凝胶色谱法分离蛋白质实验中,相对分子质量不使用凝胶色谱法分离蛋白质实验中,相对分子质量不 同的蛋白质在凝胶中的行进过程,可表示为图中同的蛋白质在凝胶中的行进过程,可表示为图中 ()B37知识综合应用知识综合应用重点提示重点提示 通过通过“植物组织培养及题干中信息的分析推植物组织培养及题干中信息的分析推断断”的考查,提升的考查,提升“鉴别选择试题给出的相关生鉴别选择试题给出的相关生物信息,并能运用这些信息,结合所学知识解决物信息,
25、并能运用这些信息,结合所学知识解决相关生物学问题相关生物学问题”的能力。的能力。38典例分析典例分析 (20092009上海卷,上海卷,3636)回答下列有关植物组织培养回答下列有关植物组织培养 的问题。的问题。(1 1)用于植物组织培养的植物材料称为)用于植物组织培养的植物材料称为 。(2 2)组织培养中的细胞,从分化状态转变为未分)组织培养中的细胞,从分化状态转变为未分 化状态的过程称为化状态的过程称为 。39(3 3)在再分化阶段所用培养基中,含有植物激素)在再分化阶段所用培养基中,含有植物激素X X和和植物激素植物激素Y Y。逐渐改变培养基中这两种植物激素的浓。逐渐改变培养基中这两种植
展开阅读全文