微生物标本采集规范课件.pptx
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1、Company Logo1、正确采集、处理与运送细菌培养的标本直接关系 到致病菌培养的正确性与阳性率的高低。是临床 细菌检验成功的关键。2、标本质量的好坏直接影响诊断结果的正误,不当 的标本可导致假阴性、假阳性结果的出现,因此 标本采集与处理的规范化是准确、及时地向临床 提供重要的临床感染信息的基础。3、好的微生物检验标本可提升实验室工作效率及病 患照顾质量,降低医疗成本。标本采集时机标本采集方法标本的质与量标本的运送与保存镜检筛选合格标本高质量、多种分离培养基培养环境合理的收费制度1.及时采集微生物标本作病原学检查2.在抗菌药物使用前采集标本3.采样时严格执行无菌操作4.采样后立即送检甚至床
2、旁接种尤其是厌氧培养5.棉拭子标本宜用运送培养基6.混有正常菌群污染标本,不可置肉汤培养7.标本容器须灭菌处理,但不得使用消毒剂8.送检标本应注明来源和检验目的临床常见微生物学检验标本通常有临床常见微生物学检验标本通常有血液血液、痰液、尿液、粪便、伤口的脓液、胸水、腹水痰液、尿液、粪便、伤口的脓液、胸水、腹水、脑脊液及泌尿生殖系统的分泌物脑脊液及泌尿生殖系统的分泌物等,下面分等,下面分别别 介绍各种标本的采集方法介绍各种标本的采集方法。一、呼吸道标本采集规一、呼吸道标本采集规范范病原体种类繁多而复病原体种类繁多而复杂杂使呼吸道感染病原诊断成为难使呼吸道感染病原诊断成为难题题细细菌菌真菌(包括肺
3、孢子菌真菌(包括肺孢子菌)病病毒毒支原体、衣原体与立克次支原体、衣原体与立克次体体原原虫虫寄生寄生虫虫(一)采集指(一)采集指征征凡是发热、咳嗽和咳痰,痰呈脓性、粘稠或血 性,并伴有胸痛、气急,肺部闻及湿罗音,外 周白细胞总数及中性粒细胞比例明显增高,X 线检查提示肺部有炎性浸润或胸腔积液,甚至 出现感染性休克和呼吸衰竭等患者,应采集痰 液或下呼吸道标本。对可疑烈性呼吸道传染病(如SARS、肺炭疽、肺鼠疫等)患者采集检验标本时必须注意生物 安全防护。(二)采集方(二)采集方法法1 1、咽拭子及鼻拭、咽拭子及鼻拭子子采集前患者应用冷开水反复漱口,拭子的选择:要求无菌、不含抑制剂;预先沾湿拭子(非
4、常重要);由检查者将舌向外拉,使腭垂尽可能向外牵引,将棉拭子通过舌根到咽后壁或腭垂的后侧,涂抹数次以取得标本。对化脓性扁桃体炎或口腔念珠菌病,直取病灶部位,拭子要避免接触口腔及舌粘膜。减少污染。立即送检。室温保存。接种同痰 2、下呼吸道标本(1)自然咳痰自然咳痰法法以晨痰为佳。用清水反复漱口,用力咳出呼吸道深部的痰,痰液直接吐入无菌容器中,尽快送检。否则有的细菌(如肺炎链球菌、流感嗜血杆菌)在外界可能死亡。不能及时送检 的标本,室温保存2h。要求采到肺深部的痰液,不要唾液。(2 2)诱导痰:)诱导痰:在医护人员指导下,用3 NaCL诱导咳 出痰液,用于结核分枝杆菌和肺孢子菌检测。(3 3)吸出
5、痰:)吸出痰:由医护人员操作经管道吸出的痰,置 于带螺纹盖的无菌容器内送检。(4)支气管肺泡灌洗液(BALF)支气管保护性毛刷(PBSB)肺穿刺组织或手术取出的肺组织的呼吸道 标本,均由临床医生经特殊操作获得。标本采集顺序为:支气管灌洗液(BW)、支气 管肺泡灌洗液(BALF)、支气管保护性毛刷(PBSB)(三)注意事(三)注意事项项1.痰液标本采集量应在1ml以上2、肺组织标本应在15分钟内送到实验室,上呼吸道 拭子和下呼吸道痰液应在2小时内送检,BALF和PBSB 不能及时送检者,可暂存4冰箱,但放置时间不可 超过24h。若呼吸道标本延迟处理,会降低苛养菌如 肺炎链球菌和流感嗜血杆菌的检出
6、率。3.在临床上咳痰仍是诊断肺部感染最常用的标本,但咳痰也最易被口咽部正常菌群污染。痰液标本的细 菌学检验,必须区分是病原菌还是来自上呼吸道的必须区分是病原菌还是来自上呼吸道的正正 常菌群常菌群。经过洗涤处理的痰液或自气管镜采集及气管 穿刺所获标本,结果比较可靠。4.4.痰标本必须经痰标本必须经涂片革兰染色镜检涂片革兰染色镜检后,来判断是后,来判断是否否 为合格痰标本为合格痰标本。合格标本的判断标合格标本的判断标准准外观:观察颜色、粘度、有无血丝 或脓。若标本为水状且很明显是唾 液,则应拒收。为了判定是否来自下呼吸道的痰,需检查是否为合格的痰标本。白细 胞25个/低倍镜视野、鳞状上皮 细胞10
7、个/低倍镜视野为合格标 本。采集合格标本对细菌的诊断极 为重要。合格痰液标合格痰液标本本不合格痰液标不合格痰液标本本5.由于口腔和咽部存在大量的革兰阳性和革兰阴性厌氧细 菌,而且缺乏可靠的方法区分它们究竟是致病菌还是定 植菌,因此不主张对咳痰标本进行厌氧菌培养不主张对咳痰标本进行厌氧菌培养。6.约有1/41/2肺部感染患者可能发生菌血症,应同时 做血培养。二、尿液标本的采集规二、尿液标本的采集规范范(一)尿培养标本送检指征1.1.有典型的尿路感染症状有典型的尿路感染症状;2.2.有肉眼脓尿或血尿有肉眼脓尿或血尿;3.3.尿常规检查白细胞或亚硝酸盐阳性尿常规检查白细胞或亚硝酸盐阳性;4.4.有不
8、明原因的发热,无其他局部症状有不明原因的发热,无其他局部症状;5.5.留置导尿管的患者出现发热留置导尿管的患者出现发热;6.6.膀胱排空功能受损膀胱排空功能受损;7.7.泌尿系统疾病手术前泌尿系统疾病手术前;8.8.有尿路感染症状者,前次培养结果阴性或抗菌治疗有尿路感染症状者,前次培养结果阴性或抗菌治疗48h48h后仍持续发热后仍持续发热。9.9.抗生素停药后,感染症状再次出现抗生素停药后,感染症状再次出现。正常人尿液是无菌的,而尿液细菌培养最大的问题是杂 菌污染。正常人外尿道有大肠埃希菌、葡萄球菌等存在。而这些细菌又是尿路感染中常见的病原菌。因此要作好 尿液细菌学检查,首先应注意标本收集标本
9、收集问题。尿液经尿道排出时会受到尿道内正常菌群的污染,但 定量培养时计数不会超过105CFU/m l,泌尿系感染时定 量培养在105CFU/m l。另外,由于绝大多数的泌尿系感染是由肠杆菌科细菌 引起,而此类细菌的硝酸盐还原实验为阳性,故可参考尿 检查常规中的硝酸盐还原实验来推断是否有细菌感染。(二)尿培养标本采集方法标本采集应在使用抗生素之前,避免消毒剂污染标本标本采集应在使用抗生素之前,避免消毒剂污染标本。1 1、清洁中段、清洁中段尿尿嘱患者睡前尽量少喝水或不喝水,留嘱患者睡前尽量少喝水或不喝水,留取取清晨清洁中段尿标本,先用肥皂水清晨清洁中段尿标本,先用肥皂水仔细仔细清洗会阴部清洗会阴部
10、,再用清水冲洗尿道口周围;将前段尿排去,留取中再用清水冲洗尿道口周围;将前段尿排去,留取中段段 尿尿10ml10ml左右于无菌容器内,立即加盖送检,左右于无菌容器内,立即加盖送检,2h2h内接种内接种。该方法简单、易行,是最常用的尿标本收集方法,该方法简单、易行,是最常用的尿标本收集方法,但但 是容易受到会阴部细菌污染是容易受到会阴部细菌污染。2 2耻骨弓上膀胱穿刺采集耻骨弓上膀胱穿刺采集尿尿使用无菌注射器使用无菌注射器直直 接从耻骨上经皮肤消毒穿入膀胱吸取尿液,接从耻骨上经皮肤消毒穿入膀胱吸取尿液,是评是评估估 膀胱内细菌感染的膀胱内细菌感染的“金标准金标准”方法,方法,但患者不易但患者不易
11、接接 受,主要用于厌氧菌培养或留取标本困难的婴儿受,主要用于厌氧菌培养或留取标本困难的婴儿尿尿 标本的采集标本的采集。3 3.直接膀胱导直接膀胱导尿尿按常规方法对会阴局部进行消毒后按常规方法对会阴局部进行消毒后,用导尿管直接经尿道插入膀胱获取尿液,严格采用用导尿管直接经尿道插入膀胱获取尿液,严格采用无无 菌技术插入导管,避免带入细菌,获取膀胱尿液,菌技术插入导管,避免带入细菌,获取膀胱尿液,弃弃 去最开始导出的去最开始导出的15-30ml15-30ml尿液后再收集培养的尿液尿液后再收集培养的尿液,可减少尿液标本污染,准确地反映膀胱感染情况。可减少尿液标本污染,准确地反映膀胱感染情况。但但 有可
12、能下尿道细菌进入膀胱,导致继发感染,一般有可能下尿道细菌进入膀胱,导致继发感染,一般不不 提倡使用提倡使用。4.4.小儿尿液收集小儿尿液收集袋袋由于儿童不能自主控制膀胱由于儿童不能自主控制膀胱收收 缩,需要用采集袋,这种装置由于很难避免会阴部菌缩,需要用采集袋,这种装置由于很难避免会阴部菌群群 污染产生假阳性,所以污染产生假阳性,所以只有在检验结果为阴性时才有只有在检验结果为阴性时才有意意 义义。如果检验结果为阳性,应结合临床进行分析,必。如果检验结果为阳性,应结合临床进行分析,必要要 时可使用耻骨弓上穿刺或膀胱导尿法留取尿液标本来时可使用耻骨弓上穿刺或膀胱导尿法留取尿液标本来确确 证有无尿路
13、感染证有无尿路感染。5.5.留置导尿管收集尿留置导尿管收集尿液液采用无菌技术用注射器采用无菌技术用注射器经经 导尿管吸取尿液,为了避免微生物进入采集系统,采导尿管吸取尿液,为了避免微生物进入采集系统,采集集 管必须为连续的密闭系统,应先消毒导尿管外壁,按管必须为连续的密闭系统,应先消毒导尿管外壁,按无无 菌操作方法用注射器穿刺导尿管吸取尿液,导尿管无菌操作方法用注射器穿刺导尿管吸取尿液,导尿管无污污 染或患者无尿路感染,但尿液经收集袋自身的引流管染或患者无尿路感染,但尿液经收集袋自身的引流管口口 流出可能会引起污染,长期留置导尿管者,应在更换流出可能会引起污染,长期留置导尿管者,应在更换新新
14、导尿管后留取尿标本,注意防止混入消毒剂,导尿管后留取尿标本,注意防止混入消毒剂,不能从不能从尿尿 液收集袋中采集尿液液收集袋中采集尿液。(三)采集时间和标本运送1.1.应选择在抗菌药物应用前或停用抗菌药物应选择在抗菌药物应用前或停用抗菌药物5 5天后采天后采集集 尿液尿液。2.2.通常采集清晨第通常采集清晨第1 1次尿液送检,确保次尿液送检,确保尿液在膀胱内尿液在膀胱内停停 留留4h4h以上,使细菌有足够时间繁殖以上,使细菌有足够时间繁殖。嘱患者睡前少。嘱患者睡前少饮饮 水以免尿液稀释水以免尿液稀释。3.3.怀疑沙门菌感染时应在发病怀疑沙门菌感染时应在发病2 2周左右采集尿液培养周左右采集尿液
15、培养。4.4.对无症状的患者应连续采集对无症状的患者应连续采集3 3天晨尿送检天晨尿送检。5.5.标本采集后应立即送检、及时接种,标本采集后应立即送检、及时接种,室温下保存室温下保存时时间不得超过间不得超过2h2h(夏季保存时间应适当缩短或冷藏保存)(夏季保存时间应适当缩短或冷藏保存),冷藏保存标本必须在冷藏保存标本必须在6h6h内进行接种,内进行接种,但冷藏保存的标但冷藏保存的标本本 不能用于淋病奈瑟菌培养不能用于淋病奈瑟菌培养。(四)注意事(四)注意事项项1.1.由于自然排尿收集的标本很难避免会阴部及下尿由于自然排尿收集的标本很难避免会阴部及下尿道道 细菌污染,所以需要细菌污染,所以需要定
16、量接种定量接种、合理评价才能判断培、合理评价才能判断培养养 的细菌是否与尿路感染有关。的细菌是否与尿路感染有关。尿标本菌落计数中菌落尿标本菌落计数中菌落数数10105 5CFU/mlCFU/ml 时有临床诊断意义时有临床诊断意义。(不是绝对的,(不是绝对的,受受 多因素影响,综合判断多因素影响,综合判断)2.2.尿液标本的采集和培养中的问题是污染杂菌,故尿液标本的采集和培养中的问题是污染杂菌,故应应 严格进行严格进行无菌操作无菌操作。3.3.尿标本采集后应立即送检,以免污染,尿液中尿标本采集后应立即送检,以免污染,尿液中不不得得 加防腐剂和消毒剂加防腐剂和消毒剂。4.4.除非是流行病学调查,除
17、非是流行病学调查,长期留置导尿管患者常规长期留置导尿管患者常规尿尿 培养没有临床意义培养没有临床意义,大量病原菌常可在这类患者中检出,大量病原菌常可在这类患者中检出,导尿管留置时间延长易导致与引起患者尿道感染不一导尿管留置时间延长易导致与引起患者尿道感染不一致致 的微生物定植生长的微生物定植生长。5 5.不可从集尿袋的下端管口留取标本不可从集尿袋的下端管口留取标本,集尿袋内的,集尿袋内的尿尿 液也不能用于培养,可能会引起污染液也不能用于培养,可能会引起污染。6.6.临床常让患者留取清洁中段尿,临床常让患者留取清洁中段尿,应该在医护人员监应该在医护人员监督督 指导下让患者正确的留取清洁中段尿指导
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