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1、医学免疫学医学免疫学广州中医药大学 免疫室 董 燕精选抗体抗体（antibody，Ab）：）：是是B细胞细胞识别抗原后增殖分化为识别抗原后增殖分化为浆细胞浆细胞所产生的一种所产生的一种蛋白质蛋白质，能与，能与相应抗原相应抗原特异性地特异性地结合结合，具有免疫功能。，具有免疫功能。主要主要存在存在于血清等体液中，是介导体液免疫的重要的于血清等体液中，是介导体液免疫的重要的免疫效应分子。免疫效应分子。概述概述精选图1 正常血清中免疫球蛋白电泳示意图蛋白量白蛋白+球 蛋 白IgAIgM血清蛋白通过电泳方法分为：血清蛋白通过电泳方法分为：白蛋白、白蛋白、11、22、及及球蛋白等组分。球蛋白等组分。抗体

2、活性主要在抗体活性主要在球蛋白组分（即丙种球蛋白）球蛋白组分（即丙种球蛋白）还存在于还存在于、球蛋白处。见图球蛋白处。见图1 1。精选v免疫球蛋白（免疫球蛋白（immunoglobulin，Ig）：）：将将具有抗体活性具有抗体活性或或化学结构化学结构与抗体相似的球蛋白与抗体相似的球蛋白统称为免疫球蛋白。统称为免疫球蛋白。免疫球蛋白免疫球蛋白抗体抗体概念概念所有抗体均是免疫球蛋白，所有抗体均是免疫球蛋白，但并非所有免疫球蛋白都但并非所有免疫球蛋白都具有抗体活性具有抗体活性精选 I 分类：分类：分泌型（分泌型（secreted ，sIg）主要存在于主要存在于体液体液中，中，具有抗体的各种功能；具有

3、抗体的各种功能；膜型（膜型（membrane mIg）是是 B 细胞膜上的细胞膜上的抗抗 原原受体受体（BCR)，识别抗原并启动识别抗原并启动B细胞的活化细胞的活化精选p 免疫球蛋白的结构免疫球蛋白的结构p 免疫球蛋白的类型免疫球蛋白的类型p 抗体的功能抗体的功能p 各类免疫球蛋白的特性和功能各类免疫球蛋白的特性和功能p 免疫球蛋白的基因结构及其表达免疫球蛋白的基因结构及其表达p 单克隆抗体和基因工程抗体单克隆抗体和基因工程抗体精选第一节第一节 免疫球蛋白的结构免疫球蛋白的结构一、一、免疫球蛋白的基本结构：免疫球蛋白的基本结构：1.四肽链结构：四肽链结构：2 2条条重链重链(Heavy chi

4、an,HHeavy chian,H链链)2 2条条轻链（轻链（Light chian,LLight chian,L链链）通过二硫键连接成通过二硫键连接成“Y Y”形结构形结构组成一个组成一个IgIg的单体分子。的单体分子。Ig为糖蛋白，糖基存在于重链上。为糖蛋白，糖基存在于重链上。精选v五种不同种类的重链：五种不同种类的重链：分别为分别为链、链、链、链、链、链、链链和和链，其氨基酸种类和排列顺序不同，抗原特异性不链，其氨基酸种类和排列顺序不同，抗原特异性不同。同。免疫球蛋白分为五类免疫球蛋白分为五类：IgM、IgD、IgG、IgA和和IgEv重链（重链（H链）：链）：分子量约分子量约 50-7

5、5 kD，由由450570个氨基酸残基组成个氨基酸残基组成精选v轻链（轻链（L链）：链）：v分子量约分子量约 25 kD，由由214个氨基个氨基酸残基构成酸残基构成v根据根据L链的抗原特异性的差异链的抗原特异性的差异:分为两种，即分为两种，即型和型和型。型。精选 2.可变区和恒定区：可变区和恒定区：可变区（可变区（variable region，V区区)：氨基酸的：氨基酸的组成和顺序组成和顺序多变多变。靠近靠近N端的端的轻链轻链的的1/2区段和区段和重重链链的的1/4或或1/5区段，约区段，约110个氨基酸，分为个氨基酸，分为VH、VL。恒定区（恒定区（constant region,C区区）

6、：氨基酸：氨基酸的组成和顺序的组成和顺序相对稳定相对稳定。抗原结合抗原结合 生物学活性生物学活性精选可变区：可变区：超变区超变区(hypervariable region,HVR)：氨基酸组成和顺序变化氨基酸组成和顺序变化大。大。又称为又称为互补性决定区互补性决定区（complementarity complementarity determining region,determining region,CDRCDR）。骨架区骨架区（framework region,FR）氨基酸组成和顺序变化小。氨基酸组成和顺序变化小。v恒定区（恒定区（C区区）：）：分为分为CH（CH 1、CH2 和和CH3

7、）、CL。精选图4 抗体的互补性决定区与抗原表位结合示意图VLVH立体图精选图5 Ig轻链 V 和 C 功能区结构示意图VLCL超变区N端C端精选4.铰链区铰链区:(hinge region)位于位于Y形分子两臂和主干之形分子两臂和主干之间的区域，即间的区域，即CH1与与CH2之间。之间。富含脯氨酸，易伸展弯曲，且易被蛋白酶等水解。不同的Ig其铰链区不同，IgM和IgE无铰链区。CH1CH2CH3精选二、免疫球蛋白的功能区二、免疫球蛋白的功能区v1.1.轻链轻链有有VL和和CL两个功能区两个功能区。v2.2.IgG、IgA和和IgD重链有重链有VH、CH1、CH2和和CH3四个四个 功能区。功

8、能区。IgM和和IgE重链多一个重链多一个功能区：功能区：CH4。功能区的作用：功能区的作用：VH 和和VL 是是结合抗原结合抗原的部位。的部位。CL 和和CH上具部分上具部分遗传标记遗传标记(同种异型）。同种异型）。补体结合位点补体结合位点（CH2 或或CH3）。）。CH3 或或CH4与免疫细胞表面相应受体结合与免疫细胞表面相应受体结合 CH2 和和CH3 介导介导IgG 通过胎盘通过胎盘。精选图3 免疫球蛋白（IgG）基本结构图VHCH1VLCLVCH2CH3VVHVL二硫键重链轻链补体结合部位Fc受体结合部位羧基端氨基端铰链区抗原结合部位抗原结合部位生物学活性区生物学活性区精选v2.2.

9、胃蛋白酶胃蛋白酶:（铰链区（铰链区近近C C端）可得两个片段：端）可得两个片段：一个F(ab)2 片段。Fc段被裂解为若干小分子片段，即pFc。三、免疫球蛋白的水解片段三、免疫球蛋白的水解片段1.1.木瓜蛋白酶木瓜蛋白酶:（铰链区近（铰链区近N N端处）可得三个片段端处）可得三个片段v 2个相同的Fab段，即抗原结合片段（fragment of antigen binding)v 1个Fc段,可结晶片段（fragment crystallizable)精选四、其他成分（四、其他成分（J J链和分泌片）链和分泌片）v1.1.连接链连接链（joinging chain,J链)：由浆细胞合成，一条富

10、含半胱氨酸的多肽链。将IgM连接成五聚体 将IgA连接成二聚体；v2.分泌片分泌片（secretory piece,SP):是一种含糖的肽链，由粘膜上皮细胞合成和分泌。结合到IgA二聚体上，是分泌型IgA分子上的一个辅助成分，有保护和转运作用。精选IgM和分泌型IgA结构示意图分泌型IgAIgMSP精选分泌型IgA的生成和分泌过程示意图浆细胞血清型IgA入血分泌型IgA分泌型IgA二聚体精选第二节第二节 免疫球蛋白的类型免疫球蛋白的类型免疫球蛋白免疫球蛋白可具有可具有抗体活性，抗体活性，与相应抗原决定簇特异性结合。抗原物质，抗原物质，本身作为大分子糖蛋白，对异种动物或同种异体，甚至体内其他B细

11、胞来说又是一种抗原。根据其抗原特异性，根据其抗原特异性，IgIg分为三类分为三类:1.1.同种型同种型 2.2.同种异型同种异型 3.3.独特型独特型精选1.1.同种型（同种型（isotypeisotype）：）：是指是指同一种属同一种属每个个体都具有的免疫球蛋白的每个个体都具有的免疫球蛋白的抗原抗原特异性特异性。即同一物种内所有。即同一物种内所有IgIg共同具有的抗原性。共同具有的抗原性。其抗原决定簇主要位于其抗原决定簇主要位于C C区区。同种型同种型分类：分类：根据根据重链重链C C区的不同区的不同，将抗体分为，将抗体分为IgGIgG、IgAIgA、IgMIgM、IgDIgD、IgEIgE

12、 五类五类。精选分型：分型：型：型：根据免疫球蛋白根据免疫球蛋白轻链轻链C C区区抗原特异性的不同，抗原特异性的不同，可分为可分为型和型和型。型。亚类：亚类：同一类抗体，其同一类抗体，其重链重链C C区区抗原特异性仍有差异。抗原特异性仍有差异。IgGIgG可分为可分为4 4个亚类：个亚类：IgG1,IgG2,IgG3,IgG4IgG1,IgG2,IgG3,IgG4。IgAIgA可分为可分为2 2个亚类：个亚类：IgA1IgA1，IgA2 IgA2。IgMIgM可分为可分为2 2个亚类：个亚类：IgM1IgM1，IgM2 IgM2。人人L链的链的型：型：型约为型约为2：1（小鼠则为（小鼠则为20

13、：1）亚型：亚型：链链 可分为可分为1，2，3，4四个亚型。四个亚型。精选v2.2.同种异型（同种异型（allotypeallotype）：）：是指是指同一种属不同个体之间同一种属不同个体之间其免疫球蛋白分子所其免疫球蛋白分子所具有的不同抗原特异性。具有的不同抗原特异性。v主要反映在主要反映在IgIg分子的分子的C CH H和和C CL上的一个或数个氨基上的一个或数个氨基酸的差异。是由不同个体的遗传基因决定，又称酸的差异。是由不同个体的遗传基因决定，又称同种异型遗传标志。同种异型遗传标志。同种异型同种异型精选3.3.独特型（独特型（idiotypeidiotype）：）：是指在是指在同一个体内

14、同一个体内，不同不同B B细胞克隆细胞克隆所产生的免疫所产生的免疫球蛋白分子球蛋白分子V V区区以及以及T T、B B细胞表面抗原受体细胞表面抗原受体V V区区所具所具有的有的抗原特异性标志抗原特异性标志。v独特型抗原决定簇独特型抗原决定簇由由IgIg超变区超变区特有的氨基酸序列和特有的氨基酸序列和构型决定。构型决定。v人体体内具有数目庞大的不同的独特型决定簇。在人体体内具有数目庞大的不同的独特型决定簇。在一定条件下，可刺激机体产生一定条件下，可刺激机体产生抗独特型抗体抗独特型抗体。独特型精选v独特型网络学说：Jerne 等抗原X Ab to X(D)IR to D(E)IR to E(F)I

15、R to F抑制抑制抑制抑制抑制抑制增强增强增强增强IR:immune response 免疫应答免疫应答部分地担负免部分地担负免疫应答的调节疫应答的调节精选同种型同种异型独特型精选 一、识别并特异性结合抗原一、识别并特异性结合抗原v免疫球蛋白的免疫球蛋白的V V区的功能区的功能（尤其是（尤其是HVR/CDR的空间构的空间构型）。型）。vIgIg单体可结合单体可结合2 2个抗原表位，为双价；个抗原表位，为双价；v分泌型分泌型IgAIgA为为4 4价；价；IgMIgM为为5-105-10价。价。第三节第三节 抗体的功能抗体的功能CH3CH2CH1VHVLCL精选vIgIg通过通过V V区区与相应

16、抗原特异性结合与相应抗原特异性结合 v可从空间上阻止病原体对机体细胞的粘附和感可从空间上阻止病原体对机体细胞的粘附和感染。染。v中和效应，如抗毒素与毒素结合。中和效应，如抗毒素与毒素结合。v产生的凝集和沉淀现象，有利于提高吞噬细胞产生的凝集和沉淀现象，有利于提高吞噬细胞的吞噬功能。的吞噬功能。精选二、激活补体（二、激活补体（C C区功能）区功能）v抗原与抗体结合，通过抗原与抗体结合，通过经典途径激活经典途径激活v凝聚的凝聚的IgAIgA、IgG4IgG4通过通过旁路途径激活补体系统。旁路途径激活补体系统。CH2CH3CH1VHVLCL精选三、结合三、结合FcFc受体受体介导免疫细胞活性介导免疫

17、细胞活性v通过结合细胞表面的通过结合细胞表面的FcFc受体，介导调理和受体，介导调理和细胞毒作用细胞毒作用,介导介导，型超敏反应型超敏反应。精选1.调理作用：是指抗体、补体促进巨噬细胞吞噬细菌等颗粒性抗原的作用。细菌巨噬细胞抗体Fc受体精选2.抗体依赖、细胞介导的细胞毒作用(antibody-dependent cell-mediated cytotoxicity,ADCCADCC）：是指表达Fc受体（FcR)的细胞通过识别抗体的Fc段直接杀伤抗体包被的靶细胞。NK细胞、巨噬细胞、中性粒细胞。靶细胞靶细胞靶细胞靶细胞死亡NK细胞活化的NK细胞IgG释放穿孔素、释放穿孔素、颗粒酶等颗粒酶等精选v

18、型超敏反应型超敏反应 IgEIgE通过通过F Fc c段与肥大细胞相应的段与肥大细胞相应的IgEIgE FcRFcR结合，使其处于结合，使其处于致敏致敏状态，状态，致敏细胞通过表面致敏细胞通过表面IgEIgE的的FabFab段与相应抗原特异性结合后，释放段与相应抗原特异性结合后，释放生物活性介质。生物活性介质。3.介导超敏反应（由抗体介导、型超敏反应）：超敏反应会对机体造成损害型超敏反应型超敏反应IgGIgG和和IgMIgM的的FabFab段与细胞膜上的相应抗原或半抗原结合，形成抗段与细胞膜上的相应抗原或半抗原结合，形成抗原原抗体复合物抗体复合物 促进吞噬，促进吞噬，ADCCADCC作用杀伤靶

19、细胞作用杀伤靶细胞型超敏反应：型超敏反应：IgGIgG和和IgMIgM与可溶性抗原结合形成抗原与可溶性抗原结合形成抗原-抗体复合物可在局部沉积抗体复合物可在局部沉积激活补体，引起组织损伤。激活补体，引起组织损伤。精选v四、穿过胎盘和粘膜：四、穿过胎盘和粘膜：vIgGIgG以主动转运方式通过胎盘以主动转运方式通过胎盘vIgAIgA可通过呼吸道和消化道粘膜，粘膜局部免可通过呼吸道和消化道粘膜，粘膜局部免疫。疫。精选第四节第四节 五类免疫球蛋白的特性和功能五类免疫球蛋白的特性和功能 1.IgG.IgG：含量最多含量最多，占血清总，占血清总IgIg的的75%75%80%80%。半衰期最长（。半衰期最长

20、（2323天）主要由脾脏和淋巴结中的浆细胞合成。天）主要由脾脏和淋巴结中的浆细胞合成。是唯一能通过胎盘的抗体是唯一能通过胎盘的抗体。是机体主要抗菌、抗病毒和抗毒素抗体，是是机体主要抗菌、抗病毒和抗毒素抗体，是再次免疫应答的再次免疫应答的主要抗体主要抗体。激活补体、调理作用、激活补体、调理作用、ADCCADCC效应效应精选3.IgA3.IgA：有血清型和分泌型二种。分泌型有血清型和分泌型二种。分泌型IgAIgA是二聚体。是二聚体。(IgA)(IgA)2 2-J J SP SP 粘膜表面粘膜表面粘膜局部免疫粘膜局部免疫的主要抗体。阻止病原微生物对粘膜上皮细胞的的主要抗体。阻止病原微生物对粘膜上皮细

21、胞的粘附，有抗菌、抗病毒、中和毒素等作用。粘附，有抗菌、抗病毒、中和毒素等作用。新生儿可从母乳中获得分泌型新生儿可从母乳中获得分泌型IgAIgA。2.IgM2.IgM：分子量最大分子量最大，是个体发育过程中，是个体发育过程中最早合成最早合成和分泌的和分泌的抗体，在体液免疫应答中抗体，在体液免疫应答中最先最先出现。出现。激活补体能力强。激活补体能力强。不能通过胎盘，用于检测胎儿宫内感染。不能通过胎盘，用于检测胎儿宫内感染。单体单体IgMIgM也是也是B B细胞膜表面的主要标志细胞膜表面的主要标志抗原受体抗原受体精选4.4.IgDIgD：量少，易水解，半衰期很量少，易水解，半衰期很短短（3 3天）

22、。功能不清楚。天）。功能不清楚。作为作为B B细胞表面抗原受体，是细胞表面抗原受体，是B B细胞成熟的重要标志细胞成熟的重要标志。5.5.IgEIgE：含量最少含量最少，呼吸道和胃肠道等处的粘膜固有层的浆细胞产生。，呼吸道和胃肠道等处的粘膜固有层的浆细胞产生。引起引起型型超敏反应。是种系进化中最晚出现的超敏反应。是种系进化中最晚出现的Ig Ig 精选表表3 3 人类人类IgIg主要理化特性和生物学活性主要理化特性和生物学活性 IgG IgM IgA/SIgA IgD IgE 开 始 合 成 时 间 3 个 月 胚 胎 期 4 6 个 月 较 晚 较 晚 分 子 量（103）149 970 16

23、0/389 184 189 存 在 形 式 单 体 五 聚 体 单 体/双 体 单 体 单 体 抗 原 结 合 价 2 5 10 2 4 2 2 占 Ig 总 量%75 80 5 10 5 15 1 0.002 血 清 含 量m g/m l 8 17 0.60.9 1.4 4.2 3 10-2 9 10-5 半 衰 期（d）23 5 6 3 3 通 过 胎 盘 精选表表4 4 人类免疫球蛋白的主要生物学活性人类免疫球蛋白的主要生物学活性精选第五节第五节 免疫球蛋白的基因结构及其表达免疫球蛋白的基因结构及其表达vB B细胞具有细胞具有“一个细胞（克隆），一种受体（抗体）一个细胞（克隆），一种受体

24、（抗体）”的特的特点。点。v人体内人体内B B细胞克隆总数在细胞克隆总数在10101111以上，可表达百亿种独具识别以上，可表达百亿种独具识别 特性的抗体分子。特性的抗体分子。vB B细胞内编码细胞内编码IgIg的基因结构特点是产生抗体多样性的基础。的基因结构特点是产生抗体多样性的基础。v一一.免疫球蛋白的基因库：免疫球蛋白的基因库：v编码免疫球蛋白的三个基因库为：编码免疫球蛋白的三个基因库为：重链基因连锁群（重链基因连锁群（H H基因库），基因库），链基因连锁群（链基因连锁群（基因库）和基因库）和链基因连锁群（链基因连锁群（基因库）。分别位于基因库）。分别位于第第1414、2 2、2222号

25、染色体上。号染色体上。v编码一条编码一条IgIg多肽链的基因是由各个分隔开的多肽链的基因是由各个分隔开的DNADNA片段片段经剪接重排而形成。经剪接重排而形成。精选表表2 2 免疫球蛋白的基因库组成免疫球蛋白的基因库组成Ddiversity gene 多样性基因多样性基因Jjoining gene 连接基因连接基因精选3.3.H H链：链：人人Ig HIg H链基因由链基因由V V、D D、J J、C C四种不同的基因片段组四种不同的基因片段组成。其中，约成。其中，约9595个个V V基因片段、基因片段、2727个个D D基因片段、基因片段、6 6个个J J基因片基因片段和段和9 9个个C C

26、基因片段。基因片段。二二.免疫球蛋白的基因结构及其重排和表达免疫球蛋白的基因结构及其重排和表达1.1.链：链：编码人编码人IgIg链的基因由链的基因由V V 、J J 、C C三种不同三种不同的基因片段组成。包括约的基因片段组成。包括约100100个个V V基因片段、基因片段、5 5个个J J基因基因片段和片段和1 1个个C C基因片段。基因片段。2.2.链链：编码人编码人IgIg链的基因也由链的基因也由V V、J J、C C三种不同三种不同的基因片段组成。包括约的基因片段组成。包括约3030个个VV基因片段和基因片段和4 4个连接在一起个连接在一起的的J-CJ-C基因对。基因对。精选Vk1

27、Vk2 Vk3 VknVk1 Vk2 Vk3 VknJ1J2 J3 J4 J5J1J2 J3 J4 J5CkCk胚系胚系DNADNAV/JV/J连接连接V/J3V/J3转录和转录和RNARNA剪接剪接重排的重排的基因基因mRNAmRNA：VJ3CkVJ3Ck翻译翻译CkCkCOOHCOOHNHNH2 2L L链链图8 Ig轻链的基因组成与重排示意图精选v1.1.胚系胚系IgIg基因库中有数以百计的基因库中有数以百计的V V基因、以及众多的基因、以及众多的D D基因、基因、J J基因和基因和C C基因。基因。v2.2.在重排过程中，这些基因存在极端多样性的组合在重排过程中，这些基因存在极端多样性

28、的组合可能。可能。v3.V3.V、D D、J J连接过程中又有核苷酸的缺失和插入连接过程中又有核苷酸的缺失和插入v4.4.轻链、重链的随机编配轻链、重链的随机编配v5.5.体细胞突变体细胞突变三、抗体多样性的机制：三、抗体多样性的机制：精选vIgIg类别转换类别转换是在是在B B细胞细胞DNADNA发生重排的基础上，即形发生重排的基础上，即形成功能性成功能性V-D-JV-D-J基因片段后发生的。基因片段后发生的。v一个一个B B细胞克隆细胞克隆在分化过程中在分化过程中V-D-JV-D-J功能性基因片段功能性基因片段保持不变，保持不变，而发生而发生C C基因重排基因重排，使其表达的抗体分，使其表

29、达的抗体分子发生子发生H H链链类类的改变的改变，称为类别转换，称为类别转换四、免疫球蛋白的类别转换四、免疫球蛋白的类别转换通过类别转换，一个通过类别转换，一个B B细胞克隆可产生两种以上不同细胞克隆可产生两种以上不同类别的类别的IgIg，如产生两种特异性的如产生两种特异性的IgMIgM和和IgGIgG，但其抗原但其抗原结合特异性完全相同。结合特异性完全相同。不影响抗原识别特性不影响抗原识别特性需要细胞因子的帮助需要细胞因子的帮助精选五、免疫球蛋白超家族五、免疫球蛋白超家族p某些蛋白质分子某些蛋白质分子在在DNADNA水平上、氨基酸序列上与水平上、氨基酸序列上与IgIg有较高同源性有较高同源性

30、p空间构象上、多肽链折叠方式上与空间构象上、多肽链折叠方式上与IgIg相似相似p编码这些多肽链的基因称为编码这些多肽链的基因称为免疫球蛋白基因超家族免疫球蛋白基因超家族。p基因表达产物称为基因表达产物称为免疫球蛋白超家族免疫球蛋白超家族。p成员：成员：T T、B B细胞抗原识别受体，信号传导分子，细胞抗原识别受体，信号传导分子，MHCMHC及相关分子，及相关分子，IgIg受体，细胞因子受体等受体，细胞因子受体等精选第六节第六节 单克隆抗体和基因工程抗体单克隆抗体和基因工程抗体v一一.多克隆抗体多克隆抗体（polyclonal antibody,PcAbpolyclonal antibody,P

31、cAb）v抗原分子通常具有多个抗原决定簇，免疫动物后可刺激具有相应抗原分子通常具有多个抗原决定簇，免疫动物后可刺激具有相应抗原受体的抗原受体的B B细胞发生免疫应答，产生多种抗体。细胞发生免疫应答，产生多种抗体。v由不同由不同B B细胞克隆产生的抗体称细胞克隆产生的抗体称多克隆抗体多克隆抗体。v免疫血清实际上是含有多种抗体的混合物。免疫血清实际上是含有多种抗体的混合物。v具有不均一性。特异性差，易导致超敏反应。具有不均一性。特异性差，易导致超敏反应。精选v二二.单克隆抗体：单克隆抗体：v是由是由单一克隆单一克隆B B淋巴细胞杂交瘤产生淋巴细胞杂交瘤产生的，只识别抗原分的，只识别抗原分子上某一特

32、定抗原决定簇的子上某一特定抗原决定簇的具有高度特异性具有高度特异性的抗体。的抗体。v具纯度具纯度高高、特异性、特异性强强、效价、效价高高、少或无血清交叉反应、少或无血清交叉反应等特点。等特点。v目前单克隆抗体多为鼠源性。目前单克隆抗体多为鼠源性。精选v杂交瘤技术的原理杂交瘤技术的原理氨基喋呤氨基喋呤(A)阻断阻断DNA合成，可经旁路途径利合成，可经旁路途径利用次黄嘌呤（用次黄嘌呤（H）合成合成核酸。而缺少核酸。而缺少鸟嘌呤磷鸟嘌呤磷酸核糖转移酶酸核糖转移酶，则不能，则不能利用培养基中的次黄嘌利用培养基中的次黄嘌呤合成呤合成DNA精选多克隆抗体和单克隆抗体骨髓瘤细胞淋巴细胞抗原抗体淋巴细胞HAT

33、培养基杂交瘤细胞精选单克隆抗体的应用：单克隆抗体的应用：已广泛应用于生命科学的各个领域：细已广泛应用于生命科学的各个领域：细胞发生、功能分析，临床疾病的诊断，预防和肿瘤的治疗等。胞发生、功能分析，临床疾病的诊断，预防和肿瘤的治疗等。精选v三三.基因工程抗体基因工程抗体v基因工程抗体基因工程抗体又称重组抗体又称重组抗体。是在充分认识。是在充分认识基因基因结构与功能的基础上，应用结构与功能的基础上，应用DNADNA重组技术和蛋白质重组技术和蛋白质工程技术，在基因水平上对免疫球蛋白分子进行工程技术，在基因水平上对免疫球蛋白分子进行改造，获得的新型抗体分子。改造，获得的新型抗体分子。v保留了天然抗体的

34、特异性和主要生物学活性，保留了天然抗体的特异性和主要生物学活性，去去除或减少了无关和不利结构，因而具有更广泛的除或减少了无关和不利结构，因而具有更广泛的应用前景。应用前景。精选基因工程抗体主要经历了三个发展阶段：基因工程抗体主要经历了三个发展阶段：v人人-鼠嵌合抗体鼠嵌合抗体v鼠单克隆抗体鼠单克隆抗体C C区可作为异源蛋白诱发免疫反应，产生人区可作为异源蛋白诱发免疫反应，产生人抗小鼠抗体，抗小鼠抗体，嵌合抗体是将小鼠单克隆抗体嵌合抗体是将小鼠单克隆抗体C C区用人抗体区用人抗体C C区代替拼接而成，使区代替拼接而成，使FcFc段人源化。但段人源化。但V V区保留的鼠源性区保留的鼠源性骨架区序列

35、及其立体结构，仍能诱发人抗小鼠抗体骨架区序列及其立体结构，仍能诱发人抗小鼠抗体HAMAHAMA。v人改型抗体人改型抗体v利用互补决定区的技术利用互补决定区的技术将鼠单克隆抗体将鼠单克隆抗体CDRCDR移植到人单克移植到人单克隆抗体的隆抗体的V V区框架上，区框架上，使人单克隆抗体获得鼠单克隆抗体使人单克隆抗体获得鼠单克隆抗体抗原结合特异性，抗原结合特异性，可进一步减少异源性可进一步减少异源性,即为人改型抗体。即为人改型抗体。精选鼠源抗体人鼠嵌合抗体人改型抗体基因工程抗体的几种形式示意图精选v小分子抗体以及双特异性抗体小分子抗体以及双特异性抗体v通过通过重组重组DNADNA技术可以合成任何所需抗

36、体的特定片段技术可以合成任何所需抗体的特定片段，包括，包括FabFab片段、片段、FcFc片段、片段、FvFv片段。这些小分子片段分子量小、免片段。这些小分子片段分子量小、免疫原性弱、渗透力强，并可有药物导向和中和毒素等用途。疫原性弱、渗透力强，并可有药物导向和中和毒素等用途。v进一步构建分别针对靶抗原和效应分子或效应细胞的双特异进一步构建分别针对靶抗原和效应分子或效应细胞的双特异抗体。抗体。v在基因水平将目的蛋白基因同在基因水平将目的蛋白基因同IgIg部分片段基因相连，并在真部分片段基因相连，并在真核或原核细胞中表达具有上述结构域的核或原核细胞中表达具有上述结构域的Ig-Ig-融合蛋白。融合蛋白。v利用抗体作为载体，携带前药的抗体导向酶等其他抗体衍生利用抗体作为载体，携带前药的抗体导向酶等其他抗体衍生形式。形式。精选要求：v1.掌握抗体和免疫球蛋白的概念。v2.掌握免疫球蛋白的结构及分类。v3.掌握抗体的生物学活性。v4.了解免疫球蛋白的抗原特异性和抗体多样性的产生机制。v5.了解免疫球蛋白的水解片段。v6.了解单克隆抗体制备原理及应用。精选