最新二轮高三生物实验专题课件.ppt
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1、第一类:显微镜观察类实验(第一类:显微镜观察类实验(7个)个)用显微镜观察多种多样的细胞用显微镜观察多种多样的细胞(1-P71-P7)观察观察DNADNA、RNARNA在细胞中的分布在细胞中的分布(1-P26)1-P26)观察线粒体和叶绿体观察线粒体和叶绿体(1-P47)(1-P47)观察植物细胞的质壁分离和复原观察植物细胞的质壁分离和复原(1-P61)(1-P61)观察细胞的有丝分裂观察细胞的有丝分裂(1-P115)(1-P115)观察细胞的减数分裂观察细胞的减数分裂(2-P21)(2-P21)低温诱导染色体加倍低温诱导染色体加倍(2-P88)(2-P88)体验制备细胞膜的方法体验制备细胞膜
2、的方法(1-P40)(1-P40)染色染色10分钟分钟实验三、实验三、观察线粒体和叶绿体观察线粒体和叶绿体(1-p7)一、实验原理一、实验原理 1.高等绿色植物的叶绿体存在于细胞高等绿色植物的叶绿体存在于细胞质基质中,叶绿体一般是质基质中,叶绿体一般是 色的,扁平色的,扁平的的 形或形或 形,可以用高倍显微镜观形,可以用高倍显微镜观察它的形态和分布。察它的形态和分布。2.健那绿健那绿染液是专一性的染线粒体的染液是专一性的染线粒体的活细胞染料。可以使活细胞的活细胞染料。可以使活细胞的线粒体呈现线粒体呈现 色,而细胞质几乎为无色。色,而细胞质几乎为无色。绿绿蓝绿蓝绿球球椭球椭球二、方法步骤与注意事
3、项二、方法步骤与注意事项 观察叶绿体装片:观察叶绿体装片:取材:取材:(叶片薄且叶绿体大,数目少)(叶片薄且叶绿体大,数目少)制片:制片:载玻片中央滴一滴清水,将叶片放入,加上盖玻片,载玻片中央滴一滴清水,将叶片放入,加上盖玻片,制成临时装片(制成临时装片(临时装片随时保持有水状态临时装片随时保持有水状态)观察:观察:先先 倍镜找到叶片细胞后高倍镜观察叶绿体(形倍镜找到叶片细胞后高倍镜观察叶绿体(形态和分布)(态和分布)(光强度的变化与叶绿体的位置关系光强度的变化与叶绿体的位置关系)绘图:绘图:用铅笔画一个叶绿体形态和分布情况清楚的叶肉细胞用铅笔画一个叶绿体形态和分布情况清楚的叶肉细胞藓类小叶
4、藓类小叶或或黑藻叶黑藻叶或或波菜叶稍带叶肉的下表皮波菜叶稍带叶肉的下表皮 低低显微镜下的黑藻细胞显微镜下的黑藻细胞(20082008,广东)用高倍显微镜观察黑藻叶,广东)用高倍显微镜观察黑藻叶绿体时,可见叶绿体绿体时,可见叶绿体A A具有双层膜具有双层膜B B呈绿色带状呈绿色带状C C内部有许多基粒内部有许多基粒D D呈绿色椭球形呈绿色椭球形【线粒体的观察通常可选用易取材的【线粒体的观察通常可选用易取材的人的口腔上皮细胞】人的口腔上皮细胞】若是水绵细胞呢?若是水绵细胞呢?细胞细胞 清水清水蔗糖溶液蔗糖溶液(液泡)(液泡)渗入渗入渗出渗出(低浓度)(低浓度)(高浓度)(高浓度)细胞液细胞液(较高
5、浓度)(较高浓度)观察植物的质壁分离与复原观察植物的质壁分离与复原1 1实验四、观察植物细胞的质壁分离与复原实验四、观察植物细胞的质壁分离与复原(1-P61)(1-P61)细胞液浓度细胞液浓度 外界溶液浓度时外界溶液浓度时:细胞吸水,质壁分细胞吸水,质壁分离复原。离复原。原生质层原生质层伸缩性大于细胞壁伸缩性,因而收伸缩性大于细胞壁伸缩性,因而收缩幅度大,造成质壁分离。缩幅度大,造成质壁分离。1实验原理实验原理紫色洋葱磷片叶(液泡大且有颜色易观察)紫色洋葱磷片叶(液泡大且有颜色易观察)2、实验材料及试剂、实验材料及试剂0.3g/ml0.3g/ml的蔗糖溶液的蔗糖溶液正常细胞正常细胞初始质壁分离
6、初始质壁分离显著质壁分离显著质壁分离观察植物的质壁分离与复原观察植物的质壁分离与复原2 2 某同学在做某同学在做“观察植物细胞的质壁分离和复原观察植物细胞的质壁分离和复原”实验过程中,实验过程中,分别采用质量分数为分别采用质量分数为30%30%和和50%50%的蔗糖溶液,的蔗糖溶液,1mol/L KNO1mol/L KNO3 3溶液和溶液和lmol/Llmol/L的盐酸溶液制作了的盐酸溶液制作了4 4组临时装片,并用显微镜随时观察。组临时装片,并用显微镜随时观察。发现前发现前3 3组在组在23min23min后发生部分质壁分离,后发生部分质壁分离,5min5min后质壁分离现象后质壁分离现象明
7、显,而第明显,而第4 4组无质壁分离现象。组无质壁分离现象。观察到前观察到前3 3组出现明显的质壁分离现象后,再过组出现明显的质壁分离现象后,再过5min5min观察,观察,发现发现1 1、2 2组无变化,而第组无变化,而第3 3组自动发生了质壁分离复原现象。然组自动发生了质壁分离复原现象。然后对前后对前2 2组装片滴加清水,用显微镜观察,发现第组装片滴加清水,用显微镜观察,发现第1 1组组45min45min后后恢复原状,而第恢复原状,而第2 2组无变化,不能发生复原。组无变化,不能发生复原。请分析各组实验装片发生变化的原因。请分析各组实验装片发生变化的原因。思考题思考题 如果使用的是一定浓
8、度的尿素或者如果使用的是一定浓度的尿素或者甘油溶液,其结果呢?为什么?甘油溶液,其结果呢?为什么?、实验原理、实验原理 、方法步骤、方法步骤实验五:观察植物细胞的有丝分裂(实验五:观察植物细胞的有丝分裂(1-p115)1-p115)(1)(1)根尖根尖、茎尖的分生区、茎形成层、愈伤、茎尖的分生区、茎形成层、愈伤组织可观察到有丝分裂。组织可观察到有丝分裂。(2)(2)细胞核细胞核内的染色体容易被内的染色体容易被碱性染料碱性染料着色着色(1 1)根尖培养(材料)根尖培养(材料)(2 2)装片制作装片制作:解离:解离漂洗漂洗染色染色制片制片(顺序不能交换)(顺序不能交换)(3 3)观察观察:低倍镜观
9、察:低倍镜观察 高倍镜观察高倍镜观察 (4 4)绘图绘图:、注意事项注意事项培养根尖:培养根尖:应每天应每天换水换水 (防止水中缺氧烂根防止水中缺氧烂根)取材取材:取生长旺盛、带有取生长旺盛、带有分生区的根尖分生区的根尖,长度,长度 为根尖的为根尖的2-3mm(2-3mm(时间:上午时间:上午1010时至下午时至下午2 2时最佳)时最佳)解离解离:目的:目的:使组织细胞分离开,杀死并固定细胞;使组织细胞分离开,杀死并固定细胞;解离液:解离液:15%15%盐酸盐酸95%95%酒精溶液酒精溶液1111;时间:时间:室温室温3-53-5分钟,至根尖酥软(分钟,至根尖酥软(时间短则细时间短则细胞没有完
10、全分离,长则可能使根尖烂掉)胞没有完全分离,长则可能使根尖烂掉)漂洗漂洗:用用清水清水漂洗漂洗10min10min,目的目的是洗去组织中的解是洗去组织中的解 离液,便于染色离液,便于染色(防止酸碱中和防止酸碱中和)。压片压片:目的目的是使细胞分散开。是使细胞分散开。方法方法(用镊子弄碎(用镊子弄碎根尖,盖上盖玻片,再放上一块根尖,盖上盖玻片,再放上一块载玻片载玻片,压片),压片)(压片过重过猛可能将组织压碎、压烂;过轻则细(压片过重过猛可能将组织压碎、压烂;过轻则细胞未充分分散开而重叠。)胞未充分分散开而重叠。)低倍镜观察:低倍镜观察:找到找到分生区分生区细胞(特点:细胞呈正细胞(特点:细胞呈
11、正方形,排列紧密,有的细胞正在分裂)方形,排列紧密,有的细胞正在分裂)高倍镜观察:高倍镜观察:找各时期细胞。可见找各时期细胞。可见处于间期的细处于间期的细胞最多胞最多,中期最少。不能看到某个细胞连续分裂的过,中期最少。不能看到某个细胞连续分裂的过程,因细胞在解离时已被杀死。程,因细胞在解离时已被杀死。染色染色:染液染液(0.01g/mL0.01g/mL的龙胆紫或的龙胆紫或0.02g/mL0.02g/mL的醋的醋酸洋红)酸洋红);时间时间为为3 35 5分钟;分钟;目的目的是使染色体或染色是使染色体或染色质被碱性染料染成深色,便于观察。质被碱性染料染成深色,便于观察。回顾:回顾:(1)(1)解离
12、的目的是什么?如果解离时间过短会造成什解离的目的是什么?如果解离时间过短会造成什么后果?么后果?(2)(2)如果漂洗不干净会有什么结果?如果漂洗不干净会有什么结果?(4)(4)在分生区能不能看到细胞正在分裂?有何特点在分生区能不能看到细胞正在分裂?有何特点?(5)(5)观察有丝分裂,视野中处于什么时期的细胞最多?观察有丝分裂,视野中处于什么时期的细胞最多?为什么?为什么?不能不能 ,细胞排列整齐细胞排列整齐、呈正方形、呈正方形 如果解离时间过短,就不能使细胞之间的连接分开,如果解离时间过短,就不能使细胞之间的连接分开,造成压片失败,细胞不能均匀地在装片上铺成一层。造成压片失败,细胞不能均匀地在
13、装片上铺成一层。如果漂洗不干净,沾在洋葱根尖上的盐酸与酒精就如果漂洗不干净,沾在洋葱根尖上的盐酸与酒精就会和龙胆紫反应,造成根尖细胞染色体不能染上颜色会和龙胆紫反应,造成根尖细胞染色体不能染上颜色A A染色体未着上颜色,无法看清染色体未着上颜色,无法看清 B B细胞重叠,看不到染色体细胞重叠,看不到染色体C C染色体着上颜色,清晰可见染色体着上颜色,清晰可见 D D染色体着色很浅,模糊不清染色体着色很浅,模糊不清 甲观察到的实验结果是甲观察到的实验结果是 乙观察到的实验结果是乙观察到的实验结果是 丙观察到的实验结果是丙观察到的实验结果是 BDA实验六实验六:观察细胞的减数分裂观察细胞的减数分裂
14、(2-p21)(2-p21)一、实验材料一、实验材料蝗虫精巢蝗虫精巢精母细胞(染色体数目少,体精母细胞(染色体数目少,体积大,易观察)积大,易观察)减数分裂固定装片等减数分裂固定装片等三、实验原三、实验原理理 减数分裂是生物在性母细胞成熟时配子形成过减数分裂是生物在性母细胞成熟时配子形成过程中发生的一种特殊的细胞分裂,它包括连续两次程中发生的一种特殊的细胞分裂,它包括连续两次的细胞分裂阶段:第一次分裂为染色体数目的减数的细胞分裂阶段:第一次分裂为染色体数目的减数分裂,第二次为染色体数目的等数分裂。两次分裂分裂,第二次为染色体数目的等数分裂。两次分裂可根据可根据染色体变化特点染色体变化特点分为前
15、期、中期、后期和末分为前期、中期、后期和末期。期。实验七:低温诱导染色体加倍(2-p88)进行正常有丝分裂的植物分生组织细胞,进行正常有丝分裂的植物分生组织细胞,在有丝分裂在有丝分裂_ 期,染色体的期,染色体的_分裂,子染色体在分裂,子染色体在_的作用下,的作用下,分别移向两极,最终被平均分配到两个子细分别移向两极,最终被平均分配到两个子细胞中去。胞中去。用低温处理植物分生组织细胞,能够抑用低温处理植物分生组织细胞,能够抑制制_形成,以至影响形成,以至影响_被拉向两极,细胞也不能分裂成两个子细胞,被拉向两极,细胞也不能分裂成两个子细胞,于是植物细胞染色体数目发生变化。(秋水于是植物细胞染色体数
16、目发生变化。(秋水仙素类似)仙素类似)一、实验原理一、实验原理后后着丝点着丝点纺锤体纺锤体纺锤体纺锤体染色体染色体二、实验过程二、实验过程 1 1、材料用具、材料用具 洋葱或大葱、蒜(均为二倍体,体细洋葱或大葱、蒜(均为二倍体,体细胞中染色体数为胞中染色体数为1616),培养皿、滤纸、纱布、),培养皿、滤纸、纱布、烧杯、镊子、剪刀、显微镜、载玻片、盖玻片、烧杯、镊子、剪刀、显微镜、载玻片、盖玻片、冰箱、冰箱、卡诺氏液卡诺氏液、改良苯酚品红染液改良苯酚品红染液、体积分、体积分数为数为15%15%的盐酸溶液,体积分数为的盐酸溶液,体积分数为95%95%的酒精的酒精溶液溶液。2 2、方法步骤、方法步
17、骤低温诱导:低温诱导:固定形态:固定形态:制作装片:制作装片:观察:观察:培养洋葱根尖,待根长出约培养洋葱根尖,待根长出约1cm左左右将整个装置放入冰箱低温室内右将整个装置放入冰箱低温室内(4),诱导培养诱导培养36小时小时剪取诱导处理的根尖约剪取诱导处理的根尖约0.5-1cm,放入放入卡诺氏卡诺氏液浸泡液浸泡0.5-1小时,以小时,以固定形态,然后用体积分数固定形态,然后用体积分数95%酒精冲洗酒精冲洗2次次解离解离漂洗漂洗染色染色制片(同有丝分制片(同有丝分裂)裂)3 3、注意事项、注意事项 1)低温处理必须在培养出低温处理必须在培养出1cm左右不定根之后左右不定根之后。如若生根前就送进冰
18、箱,低温抑制新陈代谢也就抑制如若生根前就送进冰箱,低温抑制新陈代谢也就抑制了根尖分生区的形成,不会发生根尖分生区的有丝分了根尖分生区的形成,不会发生根尖分生区的有丝分裂受低温影响的过程。裂受低温影响的过程。2)剪取根尖时间一般在)剪取根尖时间一般在中午中午10点点左右,此时分裂左右,此时分裂旺盛,受低温影响较大,实验效果明显。旺盛,受低温影响较大,实验效果明显。3)染色时间染色时间要严格控制,不足时染色体看不清,要严格控制,不足时染色体看不清,染色过度,染色体一团糟,无法分辨。染色过度,染色体一团糟,无法分辨。第二类:验证性实验第二类:验证性实验(2(2个)个)检测检测生物组织中还原糖、脂肪和
19、蛋白质生物组织中还原糖、脂肪和蛋白质(1-(1-p18)p18)叶绿体色素的提取和分离叶绿体色素的提取和分离(1-p97)(1-p97)实验八:检测实验八:检测生物组织中的糖类、脂肪和蛋生物组织中的糖类、脂肪和蛋白质(白质(1-p18)1、实验原理:、实验原理:蛋白质蛋白质+双缩脲试剂双缩脲试剂 紫色反应紫色反应脂脂 肪肪+苏丹苏丹IV 红色红色脂脂 肪肪+苏丹苏丹III 橘黄色橘黄色还原糖还原糖+斐林试剂斐林试剂 砖红色沉淀砖红色沉淀实验项实验项目目实验材实验材料料试剂试剂实验现象实验现象可溶性可溶性还原糖还原糖鉴定鉴定苹果或苹果或梨组织梨组织样液样液斐林试剂斐林试剂水浴加热水浴加热浅蓝浅蓝
20、 棕色棕色 砖红色砖红色脂肪的脂肪的鉴定鉴定花生子花生子叶薄片叶薄片苏丹苏丹高倍镜下:细胞中脂高倍镜下:细胞中脂肪微粒被染成橘黄色肪微粒被染成橘黄色蛋白质蛋白质的鉴定的鉴定蛋白质蛋白质稀释液稀释液双缩脲试双缩脲试剂剂蛋白质稀释液成紫色蛋白质稀释液成紫色2 2、实验材料、实验材料 还原糖还原糖:应选含糖高,颜色为应选含糖高,颜色为白色白色的植物组织,的植物组织,如苹果、梨等如苹果、梨等 脂肪:脂肪:选择富含脂肪的种子,如花生、蓖麻种子选择富含脂肪的种子,如花生、蓖麻种子(实验前一般需浸泡(实验前一般需浸泡3-43-4小时)小时)蛋白质(二肽、多肽):蛋白质(二肽、多肽):可选富含蛋白质的可选富含
21、蛋白质的黄豆或鸡蛋清等黄豆或鸡蛋清等 葡萄糖、葡萄糖、果糖果糖、麦芽糖、乳糖麦芽糖、乳糖都是还原性都是还原性糖;淀粉、蔗糖、纤维素都是非还原性糖。糖;淀粉、蔗糖、纤维素都是非还原性糖。3 3、实验步骤、实验步骤1 1)可溶性还原糖的鉴定)可溶性还原糖的鉴定原理:原理:-CHO+Cu(HO)2 加热加热 -COOH+Cu2O 砖红砖红色色 制备组织样液:制备组织样液:检测样液:检测样液:加入加入2ml2ml组织样液组织样液 加入加入1ml1ml新配制新配制斐斐林试剂(淡蓝色)林试剂(淡蓝色)水浴煮沸水浴煮沸2min2min左右左右观察颜色变化:观察颜色变化:(淡蓝色(淡蓝色 棕色棕色 砖红色)砖
22、红色)空白对照问题空白对照问题3 3)蛋白质鉴定)蛋白质鉴定 原理:原理:-CO-NH-CO-NH-(类似双缩脲(类似双缩脲H H2 2NOC-NH-CONHNOC-NH-CONH2 2结构)结构)与与CuCu2+2+作用形成紫色络合物作用形成紫色络合物双缩脲反应双缩脲反应 制备样液:制备样液:检测与观察:检测与观察:取取2ml2ml样液样液 加入双缩脲试剂加入双缩脲试剂A A液液1ml1ml(0.1g/ml0.1g/ml的的NaOHNaOH溶液,溶液,创设碱性创设碱性环境环境)摇匀)摇匀 加入双缩脲试剂加入双缩脲试剂B B液液(0.010.01g/mlg/ml的的CuSOCuSO4 4溶液,
23、溶液,提供提供CuCu2+2+)4 4滴滴,摇匀摇匀 观察(紫色)观察(紫色)(NH2-CO-NH-CO-NH2)(双缩脲)(双缩脲)NHHCONHCONHHNHHCONHH+NHHCONHH(NH3)斐林试剂斐林试剂 双缩脲试剂双缩脲试剂 用途用途 鉴定可溶性还原糖的鉴定可溶性还原糖的存在;存在;鉴定蛋白质、二肽及多肽鉴定蛋白质、二肽及多肽 成分成分 0.1g/mL氢氧化钠溶液氢氧化钠溶液0.05g/mL硫酸铜溶液硫酸铜溶液 0.1g/mL的氢氧化钠溶液(的氢氧化钠溶液(A液)液)0.01g/mL的硫酸铜溶液(的硫酸铜溶液(B液)液)发生发生的反的反应应 Cu(OH)2被还原为砖红被还原为砖
24、红色的色的Cu2O 双缩脲(双缩脲(H2NOC-NH-CONH2)能与铜离子作用,形成紫色或紫能与铜离子作用,形成紫色或紫红色的络合物,这个反应叫做双红色的络合物,这个反应叫做双缩脲反应缩脲反应 使用使用方法方法 现配现用;混合均匀;现配现用;混合均匀;隔水加热;隔水加热;先加先加A液,与样液混匀后滴加液,与样液混匀后滴加B液液 颜色颜色反应反应 呈砖红色呈砖红色 呈紫色呈紫色 斐林试剂与双缩脲试剂有何区别?斐林试剂与双缩脲试剂有何区别?2 2)脂肪检测与鉴定)脂肪检测与鉴定染色:染色:滴苏丹滴苏丹染液染液2-32-3滴与花生子叶切片上滴与花生子叶切片上 染染色色2-3min2-3min后吸去
25、染液后吸去染液 滴体积分数滴体积分数50%50%的的酒精洗去浮色酒精洗去浮色 洗去多余酒精,再滴蒸馏洗去多余酒精,再滴蒸馏水水1-21-2滴,盖盖玻片滴,盖盖玻片观察:观察:低倍镜低倍镜 高倍镜(橘黄色(红色)脂肪颗高倍镜(橘黄色(红色)脂肪颗粒)粒)制作切片:制作切片:生物组织中脂肪的鉴定生物组织中脂肪的鉴定在生物组织中可溶性还原糖、脂肪、蛋白质的鉴定在生物组织中可溶性还原糖、脂肪、蛋白质的鉴定实验中,对实验材料的选择叙述中,错误的是实验中,对实验材料的选择叙述中,错误的是 ()A甘蔗茎的薄壁组织、甜菜的块根、马铃薯块甘蔗茎的薄壁组织、甜菜的块根、马铃薯块茎等,都含有较多的糖且近于白色,因此
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