固体中药制剂分析课件.pptx

1、 固体中药制剂分析固体中药制剂分析丸剂丸剂片剂片剂颗粒剂颗粒剂散剂散剂栓剂栓剂固体制剂质量分析固体制剂质量分析特点特点 *固体制剂中常含在大量药材细粉，可选用显固体制剂中常含在大量药材细粉，可选用显 微鉴别法。微鉴别法。*待测成分存在于固体剂型中，分析前必须选待测成分存在于固体剂型中，分析前必须选 择合适的溶剂将其提取出来。择合适的溶剂将其提取出来。*细粉中的成分仍存在于植物组织、细胞中，细粉中的成分仍存在于植物组织、细胞中，增加了提取的困难。增加了提取的困难。一、丸剂的质量分析一、丸剂的质量分析 丸剂（丸剂（Piluae）系指饮片细粉或药材提）系指饮片细粉或药材提取物加适宜的黏合剂或其他辅料

2、制成的取物加适宜的黏合剂或其他辅料制成的球形或类球形制剂，分为蜜丸、水蜜丸、球形或类球形制剂，分为蜜丸、水蜜丸、水丸、糊丸、腊丸和浓缩丸等类型。水丸、糊丸、腊丸和浓缩丸等类型。（一）丸剂的一般质量要求（一）丸剂的一般质量要求*黄帝内经黄帝内经最早记载最早记载*伤寒论伤寒论和和金匮药略金匮药略 首次记述首次记述用动物胶汁、炼蜜和淀粉作为黏合剂用动物胶汁、炼蜜和淀粉作为黏合剂制备丸剂。制备丸剂。*太平惠民和剂局方太平惠民和剂局方收载了收载了300种左种左右丸剂。右丸剂。丸剂的特点丸剂的特点*“丸者，缓也丸者，缓也”“大毒者须用丸大毒者须用丸”*在胃肠道崩解缓慢，逐渐释放药物，作用持久在胃肠道崩解缓

3、慢，逐渐释放药物，作用持久*对毒、剧、刺激性药物可延缓吸收，减弱毒性和对毒、剧、刺激性药物可延缓吸收，减弱毒性和不良反应不良反应*在制备中可容纳固体、半固体粘性药材或浸出液，在制备中可容纳固体、半固体粘性药材或浸出液，一些难入煎剂的药物或贵重芳香不宜久煎的药一些难入煎剂的药物或贵重芳香不宜久煎的药物更宜制成丸剂物更宜制成丸剂*利用蜜作为赋形剂或丸衣可掩盖主药的不良气味利用蜜作为赋形剂或丸衣可掩盖主药的不良气味蜜丸蜜丸 以蜂蜜为黏合剂制成的丸剂。以蜂蜜为黏合剂制成的丸剂。大蜜丸大蜜丸 0.5g/丸丸 小蜜丸小蜜丸 0.5g/丸丸水蜜丸水蜜丸 以蜂蜜和水为黏合剂制成丸剂。以蜂蜜和水为黏合剂制成丸剂

4、。水丸水丸 以水（或根据制法用黄酒、醋、稀以水（或根据制法用黄酒、醋、稀 药汁、糖液等）黏合制成的丸剂。药汁、糖液等）黏合制成的丸剂。糊丸糊丸 药材细粉以米糊或面糊等为黏合剂制药材细粉以米糊或面糊等为黏合剂制 成的丸剂。成的丸剂。浓缩丸浓缩丸 药材或部分药材提取的清膏或浸膏，药材或部分药材提取的清膏或浸膏，与适宜的辅料或药物细粉，以水、蜂与适宜的辅料或药物细粉，以水、蜂 蜜或蜂蜜和水为黏合剂制成的丸剂。蜜或蜂蜜和水为黏合剂制成的丸剂。根据所用黏合剂的不同，分为浓缩水根据所用黏合剂的不同，分为浓缩水 丸、浓缩蜜丸、浓缩水蜜丸。丸、浓缩蜜丸、浓缩水蜜丸。微丸微丸 直径小于直径小于2.5mm的各类丸

5、剂。的各类丸剂。蜡丸蜡丸 以蜂蜡为黏合剂制成的丸剂。以蜂蜡为黏合剂制成的丸剂。（一）丸剂的一般质量要求（一）丸剂的一般质量要求 照中国药典照中国药典“制剂通则制剂通则”丸剂（附录丸剂（附录 A）项下的规定）项下的规定检查。检查。*蜡丸表面应光滑无裂纹，丸内蜡丸表面应光滑无裂纹，丸内 不得有蜡点和颗粒。不得有蜡点和颗粒。1.性状性状*外观应圆整均匀、色泽一致。外观应圆整均匀、色泽一致。*蜜丸应细腻滋润，软硬适中。蜜丸应细腻滋润，软硬适中。2.水分水分照水分测定法（附录照水分测定法（附录 H）测定。）测定。蜡丸蜡丸 不检查水分不检查水分大蜜丸大蜜丸小蜜丸小蜜丸浓缩蜜丸浓缩蜜丸15.0%水丸水丸糊丸

6、糊丸浓缩水丸浓缩水丸9.0%水蜜丸水蜜丸浓缩水蜜丸浓缩水蜜丸12.0%(烘干法、甲苯法、减压干燥法、烘干法、甲苯法、减压干燥法、GC法法)3.重量差异重量差异或或装量差异装量差异按丸服用的丸剂按丸服用的丸剂 重量差异第一法重量差异第一法单剂量分装的丸剂单剂量分装的丸剂 裝量差异裝量差异按重量服用的丸剂按重量服用的丸剂 重量差异第二法重量差异第二法4.溶散时限溶散时限 照崩解时限检查法片剂（附录照崩解时限检查法片剂（附录 A）项下的方法加档板进行检查。）项下的方法加档板进行检查。小蜜丸小蜜丸水蜜丸水蜜丸水丸水丸1小时小时浓缩丸浓缩丸糊丸糊丸2小时小时大蜜丸大蜜丸 不检查溶散时限不检查溶散时限蜡丸

7、蜡丸 照崩解时限检查法项下肠溶衣片检查照崩解时限检查法项下肠溶衣片检查法法样品黏附档板时则不用档板样品黏附档板时则不用档板丸剂直径丸剂直径2.5mm 用孔径用孔径0.42mm筛网筛网丸剂直径丸剂直径2.53.5mm 用孔径用孔径1.0mm筛网筛网丸剂直径丸剂直径3.5mm 用孔径用孔径2.0mm筛网筛网孔径孔径2.0mm5.微生物限度微生物限度（个（个/g）细菌细菌 霉菌霉菌 大肠杆菌大肠杆菌 酵母菌酵母菌不含原药材粉不含原药材粉 1000 100 含原药材粉含原药材粉 30000 100 （二）丸剂质量分析特点（二）丸剂质量分析特点1.样品的预处理样品的预处理 丸剂所用原料是药材细丸剂所用原

8、料是药材细粉或药材提取物，组成复杂。粉或药材提取物，组成复杂。在对丸剂进行分析前，一般在对丸剂进行分析前，一般需对样品进行处理。需对样品进行处理。水蜜丸、水丸、糊丸、蜡丸、浓缩丸水蜜丸、水丸、糊丸、蜡丸、浓缩丸 样品直接研细粉碎样品直接研细粉碎蜜丸蜜丸 *用小刀切成小块，直接加溶剂提取。用小刀切成小块，直接加溶剂提取。*加分散剂如加分散剂如硅藻土硅藻土1:0.52(g/g)在研钵在研钵 中研磨至蜜丸分散均匀。中研磨至蜜丸分散均匀。*加水加水/醇溶散后加醇溶散后加硅藻土硅藻土搅匀，溶剂提取。搅匀，溶剂提取。对某些成分有吸附能力对某些成分有吸附能力 含含Fe3+时对测定黄酮有干扰时对测定黄酮有干扰

9、还可用石英砂、硅胶还可用石英砂、硅胶2.样品的提取样品的提取振荡提取法振荡提取法 超声波提取法超声波提取法室温浸渍法室温浸渍法 低温浸渍法低温浸渍法回流提取法回流提取法 连续回流提取法连续回流提取法3.样品的净化样品的净化溶剂萃取法溶剂萃取法 包括梯度萃取法包括梯度萃取法沉淀法沉淀法 Pb(Ac)2、硫氰酸铬铵、硫氰酸铬铵柱色谱法柱色谱法 氧化铝、氧化铝、大孔大孔树脂、树脂、硅胶、聚酰胺硅胶、聚酰胺硅胶硅胶 是一种酸性吸附剂，适用于中性或酸性是一种酸性吸附剂，适用于中性或酸性成分的层析。成分的层析。氧化铝氧化铝 氧化铝可能带有碱性（因其中可混有碳氧化铝可能带有碱性（因其中可混有碳酸钠等成分），

10、对于分离一些碱性中草酸钠等成分），对于分离一些碱性中草药成分，如药成分，如生物碱类生物碱类的分离颇为理想。的分离颇为理想。(除去氧化铝中碱性杂质可用水洗至中性，除去氧化铝中碱性杂质可用水洗至中性，称为称为中性氧化铝中性氧化铝)中性氧化铝中性氧化铝 仍属于碱性吸附剂的范畴，仍属于碱性吸附剂的范畴，不不适用适用于于酸性成分酸性成分的分离。的分离。测定蜜丸中脂溶性成分的含量时，可测定蜜丸中脂溶性成分的含量时，可采用哪种方法除去蜂蜜：采用哪种方法除去蜂蜜：A 水洗法水洗法B 超声法超声法C 回流法回流法D 吸附法吸附法E 浸渍法浸渍法A例例 逍遥丸逍遥丸（大蜜丸（大蜜丸）Ch.P.（2010）【处方【

11、处方】柴胡柴胡 100g 当归当归 100g 白芍白芍 100g 白术白术(炒炒)100g 茯苓茯苓 100g 炙甘草炙甘草 80g 薄荷薄荷 20g 实例分析实例分析【方药分析【方药分析】*柴胡：疏肝解郁为柴胡：疏肝解郁为君药君药 *当归、白芍：补血和营，滋养肝阴，当归、白芍：补血和营，滋养肝阴，薄荷：增强柴胡疏肝功能，为薄荷：增强柴胡疏肝功能，为臣药臣药 *白术、茯苓、甘草健脾补中，为白术、茯苓、甘草健脾补中，为佐药佐药【制法【制法】以上七味，粉成细粉，过筛，混以上七味，粉成细粉，过筛，混匀。每匀。每100g粉末加炼蜜粉末加炼蜜135145g制成大蜜制成大蜜丸，即得。丸，即得。从处方药材的

12、性质和疗效上确定：从处方药材的性质和疗效上确定：体积大、质坚硬、纤维质多的药材，体积大、质坚硬、纤维质多的药材，宜作成浸膏或清膏宜作成浸膏或清膏药粉太粗，不宜成型，泛成的丸粒表面粗糙，药粉太粗，不宜成型，泛成的丸粒表面粗糙，会出现花斑和纤维，且患者服用后不易吸收。会出现花斑和纤维，且患者服用后不易吸收。药粉太细，成丸后影响溶散时限药粉太细，成丸后影响溶散时限。逍遥丸逍遥丸（水丸（水丸）【制法【制法】以上七味，粉碎成细粉，过筛，以上七味，粉碎成细粉，过筛，混匀。另取生姜混匀。另取生姜100g，加水煎煮二次，每次，加水煎煮二次，每次20分钟，滤过。取上述粉末，用煎液泛丸，分钟，滤过。取上述粉末，用

13、煎液泛丸，或与煎液混合后制丸，干燥，即得。或与煎液混合后制丸，干燥，即得。柴胡柴胡 柴胡皂苷柴胡皂苷 当归当归 阿魏酸阿魏酸白芍白芍 芍药苷芍药苷薄荷薄荷 薄荷脑薄荷脑白术白术 苍术酮苍术酮 苍术内酯苍术内酯茯苓茯苓 茯苓多糖茯苓多糖 三萜苷类三萜苷类甘草甘草 甘草酸甘草酸 甘草次酸甘草次酸 对照药材对照药材TLC显微、芍药苷显微、芍药苷TLC、HPLC显微、对照药材显微、对照药材TLC 显微显微 显微显微 显微显微【鉴别】【鉴别】(1)取本品，置显微镜下观察：不规取本品，置显微镜下观察：不规则分枝状团块无色，遇水合氯醛液溶化；菌丝则分枝状团块无色，遇水合氯醛液溶化；菌丝无色或淡棕色，直径无色

14、或淡棕色，直径46 m（茯苓）茯苓）。薄壁细。薄壁细胞纺锤形，壁略厚，有极微细的斜向交错纹理。胞纺锤形，壁略厚，有极微细的斜向交错纹理。草酸钙簇晶草酸钙簇晶存在于薄壁细胞中，常排列存在于薄壁细胞中，常排列成行成行，或一个细胞中含数个簇晶（白芍）。或一个细胞中含数个簇晶（白芍）。草酸钙针草酸钙针晶晶细小细小（炒白术）。油管含黄色或（炒白术）。油管含黄色或棕黄色棕黄色分泌物分泌物，直径，直径8-25 m（柴胡）。（柴胡）。【鉴别【鉴别】（2）TLC法法供试品溶液供试品溶液 样品样品2g，剪碎，加乙醇，剪碎，加乙醇15ml，放置，放置1小时，时时振摇，滤过，滤液蒸小时，时时振摇，滤过，滤液蒸干，残渣

15、加丙酮干，残渣加丙酮1ml使溶解。使溶解。对照品溶液对照品溶液 当归对照药材当归对照药材薄层板薄层板 硅胶硅胶G展开剂展开剂 正己烷正己烷-乙酸乙酯（乙酸乙酯（9:1）观察结果观察结果 UV 365nm 供试品溶液供试品溶液 本品本品18g，硅藻土，硅藻土10g，研匀，加，研匀，加乙醇乙醇60ml，超声处理，超声处理30分钟，滤过，滤液蒸干，分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加水残渣加水30ml使溶解，用乙醚振摇提取使溶解，用乙醚振摇提取2次，次，每次每次10ml，弃去乙醚液，弃去乙醚液，用水饱和的正丁醇用水饱和的正丁醇振振摇提取摇提取3次，每次次，每次30ml，合并正丁醇液，正丁，合并正丁醇液，正丁

16、醇液蒸干，残渣加甲醇醇液蒸干，残渣加甲醇1ml溶解。溶解。【鉴别【鉴别】（3）TLC法法对照品溶液对照品溶液 甘草对照药材甘草对照药材薄层板薄层板 硅胶硅胶G（1%氢氧化钠氢氧化钠）展开剂展开剂 乙酸乙酯乙酸乙酯-甲酸甲酸-冰醋酸冰醋酸-水水 （15:1:1:2）显色剂显色剂 10硫酸乙醇溶液，硫酸乙醇溶液，1100C，UV 365nm 供试品溶液供试品溶液 （2）项供试溶液，加少量中性）项供试溶液，加少量中性氧化铝，置水浴上搅匀，干燥，装在中性氧氧化铝，置水浴上搅匀，干燥，装在中性氧化铝柱上，用乙酸乙酯化铝柱上，用乙酸乙酯-甲醇甲醇(1:1)的混合溶液的混合溶液洗脱，收集洗脱液，蒸干，残渣加

17、乙醇洗脱，收集洗脱液，蒸干，残渣加乙醇1ml使溶解。使溶解。对照品溶液对照品溶液 芍药苷对照品芍药苷对照品【鉴别【鉴别】（4）TLC法法样品样品2g，剪碎，加乙醇，剪碎，加乙醇15ml，放置，放置1小时，时时振摇，小时，时时振摇，滤过，滤液蒸干，残渣加丙酮滤过，滤液蒸干，残渣加丙酮1ml使溶解。使溶解。薄层板薄层板 硅胶硅胶G展开剂展开剂 三氯甲烷三氯甲烷-乙酸乙酯乙酸乙酯-甲醇甲醇-甲酸甲酸 （40:5:10:0.2）显色剂显色剂 5香草醛硫酸溶液香草醛硫酸溶液【检查】应符丸剂项下有关的各项规定（附录【检查】应符丸剂项下有关的各项规定（附录 A）重量差异重量差异 装量差异装量差异 微生物限度

18、微生物限度不检不检细菌细菌30000个个/g霉菌霉菌100个个/g不得检出大肠杆菌不得检出大肠杆菌大蜜丸按第一法大蜜丸按第一法水蜜丸、小蜜丸按第二法水蜜丸、小蜜丸按第二法含量测定含量测定HPLC法法色谱柱色谱柱 十八烷基硅烷键合硅胶十八烷基硅烷键合硅胶流动相流动相 乙腈乙腈-0.1磷酸溶液（磷酸溶液（15:85）检测波长检测波长 230nm对照品溶液对照品溶液 芍药苷芍药苷本品每丸含白芍以芍药苷计，不得少于本品每丸含白芍以芍药苷计，不得少于6.3mg例例 万氏牛黄清心丸万氏牛黄清心丸 Ch.P.（2010）【处方】牛黄【处方】牛黄10g，朱砂，朱砂60g，黄连，黄连200g，黄芩，黄芩120g

19、，栀子，栀子120g，郁金，郁金80g 【制法】【制法】以上六味，除牛黄外，朱砂水飞成以上六味，除牛黄外，朱砂水飞成极细粉；其余黄连等四味粉碎成细粉；将牛黄研极细粉；其余黄连等四味粉碎成细粉；将牛黄研细，与上述粉末配研，过筛，混匀。每细，与上述粉末配研，过筛，混匀。每100g粉末粉末加炼蜜加炼蜜100120g制成大蜜丸；即得。制成大蜜丸；即得。实例分析实例分析【方药分析【方药分析】*牛黄清心解毒，豁痰开窍为君药；牛黄清心解毒，豁痰开窍为君药；*黄连、黄芩、栀子清热泻火为臣药；黄连、黄芩、栀子清热泻火为臣药；*朱砂清心、重镇安神，郁金行气开窍共为佐朱砂清心、重镇安神，郁金行气开窍共为佐使药。使药

20、。*合用以奏透邪邪热，开窍安神之效。合用以奏透邪邪热，开窍安神之效。【性状】【性状】本品为红棕色至棕褐色的大蜜丸；本品为红棕色至棕褐色的大蜜丸；气特异，味甜、微涩、苦。气特异，味甜、微涩、苦。牛黄牛黄 贵重药贵重药 君药君药 显微显微 TLC朱砂朱砂 毒剧药毒剧药 佐使药佐使药 显微显微 化学法化学法黄连黄连 有效成分清楚有效成分清楚 臣药臣药 显微显微 TLC/TLCS黄芩黄芩 TLC栀子栀子 显微显微 TLC郁金郁金 【鉴别【鉴别】（1）取本品，置显微镜下观察：取本品，置显微镜下观察：糊化淀粉粒团块几乎无色（郁金）。种皮石糊化淀粉粒团块几乎无色（郁金）。种皮石细胞黄色或淡棕色，多破碎，完整

21、者长多角细胞黄色或淡棕色，多破碎，完整者长多角形、长方形或不规则形，壁厚，有大的圆形形、长方形或不规则形，壁厚，有大的圆形纹孔，胞腔棕红色（栀子）。韧皮纤维淡黄纹孔，胞腔棕红色（栀子）。韧皮纤维淡黄色，梭形，壁厚，孔沟细（黄芩）。纤维束色，梭形，壁厚，孔沟细（黄芩）。纤维束鲜黄色，壁稍厚，纹孔明显（黄连）。不规鲜黄色，壁稍厚，纹孔明显（黄连）。不规则细小颗粒暗棕色，有光泽，边缘暗黑色则细小颗粒暗棕色，有光泽，边缘暗黑色（朱砂）。（朱砂）。（2）取本品）取本品3g，加水适量，研匀，反复洗，加水适量，研匀，反复洗去悬浮物，可得少量朱红色沉淀，取出，去悬浮物，可得少量朱红色沉淀，取出，加入盐酸加入盐

22、酸1ml 及铜片少量，加热煮沸，铜片及铜片少量，加热煮沸，铜片由黄色变为银白色。由黄色变为银白色。（3）取本品取本品3 g，剪碎，加硅藻土，剪碎，加硅藻土0.6 g，研匀，加三氯，研匀，加三氯甲烷甲烷10 ml、冰醋酸、冰醋酸0.5 ml，加热回流，加热回流30分钟，放冷，分钟，放冷，滤过，滤液蒸干，残渣加乙醇滤过，滤液蒸干，残渣加乙醇2 ml使溶解，滤过，滤使溶解，滤过，滤液作为供试品溶液。另取胆酸对照品，加乙醇制成每液作为供试品溶液。另取胆酸对照品，加乙醇制成每1 ml含含1 mg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法（附录（附录VI B）试验，吸取上述两

23、种溶液各）试验，吸取上述两种溶液各10 l，分别，分别点于同一硅胶点于同一硅胶G薄层板上，以正己烷薄层板上，以正己烷-乙酸乙酯乙酸乙酯-甲醇甲醇-醋酸（醋酸（6 32 1 1）为展开剂，展开，取出，晾干，）为展开剂，展开，取出，晾干，喷以喷以10磷钼酸乙醇溶液，在磷钼酸乙醇溶液，在110加热约加热约10分钟。分钟。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。同颜色的斑点。（4）取本品取本品3 g，剪碎，加硅藻土，剪碎，加硅藻土0.5 g，研匀，加甲醇，研匀，加甲醇20 ml，加热回流，加热回流1小时，放冷，滤过，滤液作为供试小时，放

24、冷，滤过，滤液作为供试品溶液。另取黄芩苷对照品，加甲醇制成每品溶液。另取黄芩苷对照品，加甲醇制成每1 ml含含1 mg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法（附录的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法（附录VI B）试验，吸取上述两种溶液各）试验，吸取上述两种溶液各5 l，分别点于同，分别点于同一以含一以含4%醋酸钠的羧甲基纤维素钠溶液为黏合剂的醋酸钠的羧甲基纤维素钠溶液为黏合剂的硅胶硅胶G薄层板上，以乙酸乙酯薄层板上，以乙酸乙酯-丁酮丁酮-甲酸甲酸-水水（5 3 1 1）为展开剂，展开，取出，晾干，喷以）为展开剂，展开，取出，晾干，喷以2%三氯化铁乙醇溶液。供试品色谱中，在与对照品三氯化铁乙醇溶

25、液。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。（5）取本品取本品3 g，加乙醚，加乙醚15 ml，研磨，弃去乙醚液，研磨，弃去乙醚液，药渣挥去乙醚，加乙酸乙酯药渣挥去乙醚，加乙酸乙酯30 ml，加热回流，加热回流1小时，小时，放冷，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇放冷，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇3 ml使溶解，使溶解，滤过，滤液作为供试品溶液。另取栀子苷对照品，滤过，滤液作为供试品溶液。另取栀子苷对照品，加甲醇制成每加甲醇制成每1 ml含含1 mg的溶液，作为对照品溶液。的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法（附录照薄层色谱法（附录VI B）试验，

26、吸取上述两种溶）试验，吸取上述两种溶液各液各5 l，分别点于同一硅胶，分别点于同一硅胶G薄层板上，以乙酸薄层板上，以乙酸乙酯乙酯-丙酮丙酮-甲酸甲酸-水（水（10 7 2 0.5）为展开剂，展）为展开剂，展开，取出，晾干，喷以开，取出，晾干，喷以10硫酸乙醇溶液，在硫酸乙醇溶液，在105加热加热10分钟。供试品色谱中，在与对照品色分钟。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。（6）取黄连对照药材取黄连对照药材50 mg，加甲醇，加甲醇10 ml，加热回流，加热回流15分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇1 ml使

27、溶解，使溶解，作为对照药材溶液。另取盐酸小檗碱对照品，加甲醇作为对照药材溶液。另取盐酸小檗碱对照品，加甲醇制成每制成每1 ml含含0.5 mg 的溶液，作为对照品溶液。照薄的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法（附录层色谱法（附录VI B）试验，吸取黄连含量测定项下）试验，吸取黄连含量测定项下的备用溶液及上述两种溶液各的备用溶液及上述两种溶液各2 l，分别点于同一硅，分别点于同一硅胶胶G薄层板上，以苯薄层板上，以苯-乙酸乙酯乙酸乙酯-异丙醇异丙醇-甲醇甲醇-浓氨试液浓氨试液（12 6 3 3 1）为展开剂，展开，取出，晾干，）为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯（置紫外光灯（365nm）下检视

28、。供试品色谱中，在与）下检视。供试品色谱中，在与对照药材色谱和对照品色谱相应的位置上，显相同的对照药材色谱和对照品色谱相应的位置上，显相同的黄色荧光斑点。黄色荧光斑点。【检查】应符丸剂项下有关的各项规定（附录【检查】应符丸剂项下有关的各项规定（附录 A）重量差异重量差异 装量差异装量差异 微生物限度微生物限度不检不检细菌细菌30000个个/g霉菌霉菌100个个/g不得检出大肠杆菌不得检出大肠杆菌大蜜丸按第一法大蜜丸按第一法水蜜丸、小蜜丸按第二法水蜜丸、小蜜丸按第二法 【含量测定】取重量差异项下的本品，剪碎，混匀，取【含量测定】取重量差异项下的本品，剪碎，混匀，取约约5 g，精密称定，置，精密称

29、定，置250 ml凯氏烧瓶中，加硫酸凯氏烧瓶中，加硫酸30 ml与硝酸钾与硝酸钾8 g，加热俟溶液至近无色，放冷，转入，加热俟溶液至近无色，放冷，转入250 ml锥形瓶中，用水锥形瓶中，用水50 ml分次洗涤烧瓶，洗液并入溶液中，分次洗涤烧瓶，洗液并入溶液中，加加1%高锰酸钾溶液至显粉红色且两分钟内不消失，再高锰酸钾溶液至显粉红色且两分钟内不消失，再滴加滴加2%硫酸亚铁溶液至红色消失后，加硫酸铁铵指示硫酸亚铁溶液至红色消失后，加硫酸铁铵指示液液2 ml，用硫氰酸铵滴定液（，用硫氰酸铵滴定液（0.1 mol/L）滴定。每）滴定。每1 ml硫氰酸铵滴定液（硫氰酸铵滴定液（0.1 mol/L）相当于

30、）相当于11.63 mg的硫化汞的硫化汞（HgS）。本品每丸含朱砂以硫化汞（）。本品每丸含朱砂以硫化汞（HgS）计，（）计，（1）应为应为6990 mg；（；（2）应为）应为138180 mg。黄连黄连 取重量差异项下的本品，剪碎，混匀，取约取重量差异项下的本品，剪碎，混匀，取约0.8 g，精密，精密称定，加入等量硅藻土，研匀，置索氏提取器中，加盐称定，加入等量硅藻土，研匀，置索氏提取器中，加盐酸酸-甲醇（甲醇（1 100）混合溶液适量，加热回流提取至提取）混合溶液适量，加热回流提取至提取液无色，提取液转移至液无色，提取液转移至100 ml量瓶中，用少量盐酸量瓶中，用少量盐酸-甲醇甲醇（1 1

31、00）混合溶液洗涤容器，洗液并入同一量瓶中，）混合溶液洗涤容器，洗液并入同一量瓶中，加混合溶液至刻度，摇匀，精密量取加混合溶液至刻度，摇匀，精密量取10 ml（剩余的溶液（剩余的溶液备用），置备用），置50 ml量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，作量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，作为供试品溶液。另精密称取盐酸小檗碱对照品，加甲醇为供试品溶液。另精密称取盐酸小檗碱对照品，加甲醇制成每制成每1 ml 含含0.02 mg的溶液，作为对照品溶液。的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法（附录照薄层色谱法（附录VI B）试验，精密吸取供试品溶液）试验，精密吸取供试品溶液4 l，对照品溶液，对照品溶液2 l与与

32、6 l，分别交叉点于同一硅胶，分别交叉点于同一硅胶G薄层板上，以苯薄层板上，以苯-乙酸乙酯乙酸乙酯-异丙醇异丙醇-甲醇甲醇-水水（4 2 1 1 0.2）为展开剂，在另一槽中加入等体）为展开剂，在另一槽中加入等体积的浓氨试液，预平衡积的浓氨试液，预平衡15分钟后展开，取出，晾干，分钟后展开，取出，晾干，照薄层色谱法（附录照薄层色谱法（附录VI B薄层色谱扫描法）进行荧光薄层色谱扫描法）进行荧光扫描，激发波长扫描，激发波长 =366 nm，测量供试品荧光强度的，测量供试品荧光强度的积分值与对照品荧光强度的积分值，计算，即得。积分值与对照品荧光强度的积分值，计算，即得。本品每丸含黄连以盐酸小檗碱计，小丸不得少于本品每丸含黄连以盐酸小檗碱计，小丸不得少于7.5 mg；大丸不得少于；大丸不得少于15.0 mg。