医学课件-护理讲课微生态学粪菌移植教学课件.ppt
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- 医学 课件 护理 讲课 生态学 移植 教学
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1、.1功能性粪菌移植简介.2内容提要 功能性粪菌移植定义及发展史 功能性粪菌移植适应症 功能性粪菌移植的方法 功能性粪菌移植的安全性及效果评估 功能性粪菌移植展望.3消化道菌群消化道菌群构成构成宏基因组学(Metagenome)研究人体微生物群进化型:其种类达1000-1150种,分属于7个菌门,其中厚壁菌门厚壁菌门和拟杆菌门拟杆菌门占95%以上。.4正常菌群的分子进化分类正常菌群的分子进化分类 厚壁菌门厚壁菌门:厚壁菌门:厚壁菌门(65.0%-79.4%)是一大类细菌,多为革兰阳是一大类细菌,多为革兰阳性,包括芽孢杆菌属、李斯特菌属、葡萄球菌属、肠球菌属、乳性,包括芽孢杆菌属、李斯特菌属、葡萄
2、球菌属、肠球菌属、乳杆菌属、乳球菌属、明串珠菌属、链球菌属、梭菌属和优杆菌属杆菌属、乳球菌属、明串珠菌属、链球菌属、梭菌属和优杆菌属 拟杆菌拟杆菌门门:拟杆菌门:拟杆菌门(16.9%-32.0%)包括拟杆菌属、黄杆菌刚包括拟杆菌属、黄杆菌刚 放线菌门放线菌门:放线菌门:放线菌门(2.5%)为革兰阳性细菌,包括双歧杆菌属和为革兰阳性细菌,包括双歧杆菌属和微球菌属等微球菌属等 变形菌门变形菌门:变形菌门:变形菌门(1.0%)是细菌中最大的一门,均为革兰阴性是细菌中最大的一门,均为革兰阴性菌,包括大多数肠道致病菌,如埃希菌属、沙门菌属、克雷伯菌菌,包括大多数肠道致病菌,如埃希菌属、沙门菌属、克雷伯菌
3、属、志贺菌属、结肠耶尔森菌属、假单胞菌属、弧菌属等属、志贺菌属、结肠耶尔森菌属、假单胞菌属、弧菌属等 梭杆菌门梭杆菌门:梭杆菌门:梭杆菌门(0.1%)是一个小类群的革兰阴性细菌,包括是一个小类群的革兰阴性细菌,包括梭杆菌属等梭杆菌属等 疣微球菌门疣微球菌门:疣微球菌门疣微球菌门(0.1%)包括疣微菌属和突柄杆菌属包括疣微菌属和突柄杆菌属 蓝细菌门蓝细菌门:蓝细菌门:蓝细菌门(0.1%).5 2008年,关于年,关于“人体细菌人体细菌”的研究被的研究被Science评为十大科学评为十大科学研究热点之一,被研究热点之一,被Nature Medicine评选为五大医学研究进评选为五大医学研究进展之一
4、。展之一。2011年,肠道菌群研究被年,肠道菌群研究被Science杂志评为杂志评为2011年十大科学年十大科学突破之一;肠道菌群相关研究被突破之一;肠道菌群相关研究被Nature Medicine杂志评为杂志评为2011年八大生物医学研究进展之一。年八大生物医学研究进展之一。2012年,人体微生物(包括肠道菌群)被时代杂志评为年,人体微生物(包括肠道菌群)被时代杂志评为2012年世界十大医学突破之一。年世界十大医学突破之一。2013年,微生物与健康的研究被年,微生物与健康的研究被Science杂志评为十大医学杂志评为十大医学突破之一;发明突破之一;发明“粪便粪便”药片的研究被时代杂志评为十大
5、医药片的研究被时代杂志评为十大医学突破之一。学突破之一。肠道菌群的研究成就肠道菌群的研究成就.6黏膜深层:类黏膜深层:类杆杆菌、消化链球菌、菌、消化链球菌、韦荣球菌和优杆菌韦荣球菌和优杆菌 黏膜表层:大黏膜表层:大肠杆菌肠杆菌和肠球菌和肠球菌 黏膜黏膜中层:中层:双歧杆双歧杆菌和厌菌和厌 氧乳杆菌氧乳杆菌肠道菌群分布特点.7肠道功能对人体健康的影响肠道功能对人体健康的影响.8功能性粪菌移植的定义功能性粪菌移植的定义 将健康者粪便中的功能菌群通过鼻胃管或十二将健康者粪便中的功能菌群通过鼻胃管或十二指肠管、胃镜或结肠镜、直肠导管灌肠等方式指肠管、胃镜或结肠镜、直肠导管灌肠等方式移植到患者胃肠道内,
6、重建肠道菌群的平衡,移植到患者胃肠道内,重建肠道菌群的平衡,修复肠道粘膜的屏障,实现对特定肠道内及肠修复肠道粘膜的屏障,实现对特定肠道内及肠道外疾病的治疗。道外疾病的治疗。20122012年,年,BorodyBorody and and KhorutsKhoruts 将粪菌移植定义将粪菌移植定义为一种特殊的器官移植。为一种特殊的器官移植。Borody TJ,et al.Nat Rev Gastroenterol Hepatol,2012,9(2):88-96.9功能性粪菌移植的发展史功能性粪菌移植的发展史 最早(公元最早(公元4世纪)由我国葛洪记载将粪便悬液治疗食物中毒或严重世纪)由我国葛洪记
7、载将粪便悬液治疗食物中毒或严重腹泻。腹泻。1596年,由李时珍用来治疗严重腹泻、发热、腹痛、呕吐等。年,由李时珍用来治疗严重腹泻、发热、腹痛、呕吐等。1958年英国外科大夫年英国外科大夫Ben Eiseman等首次报到等首次报到FMI治疗严重伪膜性治疗严重伪膜性肠炎。肠炎。1983年年FMT治疗难辨梭状芽孢杆菌感染(治疗难辨梭状芽孢杆菌感染(Clostridium.Difficile Infection.CDI)。1989年,年,Borody用以治疗用以治疗慢性便秘、溃疡性结肠炎、克罗恩病慢性便秘、溃疡性结肠炎、克罗恩病。目前,全球范围内共治疗目前,全球范围内共治疗500例例CDI病例,成功率
8、高达病例,成功率高达90%以上。以上。由于全球由于全球CDICDI的挑战,胃肠道微生物复杂性在健康中和和预防疾病的的挑战,胃肠道微生物复杂性在健康中和和预防疾病的作用凸现,粪菌移植引起了极大的关注。作用凸现,粪菌移植引起了极大的关注。.10有关功能性粪菌移植的研究成就 2012年年7月美国胃肠病学杂志重点推荐了月美国胃肠病学杂志重点推荐了Brandt等最新等最新应用粪菌移植治疗难辨梭状芽孢杆菌感染多中心研究结果,应用粪菌移植治疗难辨梭状芽孢杆菌感染多中心研究结果,成功率高达成功率高达98%,其中,其中91%的患者通过一次移植即可治愈。的患者通过一次移植即可治愈。2013年新英格兰医学杂志报道了
9、粪菌移植成功治疗难辨年新英格兰医学杂志报道了粪菌移植成功治疗难辨梭状芽孢杆菌相关性疾病,其效果显著优于万古霉素。梭状芽孢杆菌相关性疾病,其效果显著优于万古霉素。2014年,粪菌移植技术被美国时代周刊评为年,粪菌移植技术被美国时代周刊评为2013年十大年十大医学突破之一。医学突破之一。.11有关功能性粪菌移植的文献有关功能性粪菌移植的文献基于PubMed和EMBASE 20082014年有关粪菌移植文献2008年3篇2009年9篇2010年9篇2011年20篇2012年42篇2013年80篇2014年68篇美国在粪菌移植研究领域具有领先地位,加拿大、美国、澳大利亚、芬兰也有开展和研究,我国最早由
10、康白教授在50年代早期开展。.12内容提要 功能性粪菌移植定义及发展史 功能性粪菌移植适应症 功能性粪菌移植的方法 功能性粪菌移植的安全性评估 小结.13粪菌移植适应症粪菌移植适应症胃肠道疾病适应症:难辨梭状芽孢杆菌感染肠炎(伪膜性肠炎)(CDI)炎症性肠病(IBD、UC)抗生素相关性腹泻肠易激综合征(IBS)复发性CDI坏死性小肠结肠炎便秘食物肠道过敏自身免疫相关性肠病Olga C.Aroniadis,MD et al.Gastroenterol Hepatol(NY).Apr 2014;10(4):230-237Pierog A,et al.Pediatr Infect Dis J.201
11、4 May 21.Epub ahead of print.14粪菌移植适应症粪菌移植适应症非胃肠疾病适应症:帕金森病 慢性疲劳综合征 多发性硬化 肥胖症 代谢综合症 肌痉挛-肌紧张障碍综合 重度抑郁症 严重失眠特发性血小板减少性紫癜(ITP)类风湿关节炎口臭痤疮.15内容提要 功能性粪菌移植定义及发展史 功能性粪菌移植适应症 功能性粪菌移植的方法 功能性粪菌移植的安全性评估 小结.16绝对排除标准未能提供知情同意书未能提供知情同意书当地微生物感染当地微生物感染(如致病性细菌、病毒、卵子和寄生虫如致病性细菌、病毒、卵子和寄生虫)正在患传染病者正在患传染病者恶性肿瘤化疗者恶性肿瘤化疗者慢性胃肠道疾
12、病慢性胃肠道疾病消化性溃疡病消化性溃疡病胃食管返流病胃食管返流病胃肠道息肉胃肠道息肉炎症性肠病炎症性肠病肠易激综合征肠易激综合征慢性便秘慢性便秘旅行者腹泻旅行者腹泻当前有胃肠道症状当前有胃肠道症状抗生素治疗者抗生素治疗者免疫抑制药物和生物制剂的治疗者免疫抑制药物和生物制剂的治疗者对肠道微生物群的药物影响(如质子泵抑制剂对肠道微生物群的药物影响(如质子泵抑制剂,促胃肠动促胃肠动力药、类固醇、阿司匹林、益生菌等力药、类固醇、阿司匹林、益生菌等)高风险的生活方式高风险的生活方式(如静脉吸毒、性风险行为等如静脉吸毒、性风险行为等)相对排除标准胃肠道胃肠道外科外科手术史手术史代谢综合征代谢综合征糖尿病糖
13、尿病异常的异常的身体质量指数身体质量指数(要在要在18-25岁之间岁之间,kg/m2)系统性自身免疫性疾病系统性自身免疫性疾病过敏性疾病过敏性疾病(如如哮喘和湿疹哮喘和湿疹)慢性疼痛综合征慢性疼痛综合征(如慢性疲劳综合症和纤维肌痛如慢性疲劳综合症和纤维肌痛)神经疾病神经疾病功能性粪菌移植成人供体的选择功能性粪菌移植成人供体的选择.17功能性粪菌移植成人供体的筛查功能性粪菌移植成人供体的筛查 供者筛查条件:(1)无传染病史(结核、肝炎、梅毒、HIV感染等)(2)无代谢性疾病(糖尿病、肥胖症、代谢综合征等)(3)无腹泻、便秘、腹痛等消化道症状、IBD、IBS、结直肠息肉,肿瘤(4)无过敏性疾病(食
14、物、湿疹、屁多、过敏性胃肠炎等)(5)近3个月未接受过抗生素治疗者(6)无胃肠道外科手术史(7)无自身免疫性疾病者(8)无特殊用药史(如PPI,促胃肠动力药、类固醇、阿司匹林、益生菌等))(9)非月经期、妊娠期(10)无心理障碍者(11)无精神疾病者.18功能性粪菌移植成人供体的筛查功能性粪菌移植成人供体的筛查类 别项 目1、血清学检查(1)血常规、肝肾功能电解质、凝血功能、血脂全套、(2)输血前八项(乙型肝炎五项+丙型肝炎病毒(HCV-Ab)+HIV-Ab、梅毒)(3)结核:T-spot(3)病毒学检测:CMV、EBV(4)寄生虫:寄生虫全套(感染科实验室)(5)食物过敏原(SIgE)(6)
15、炎症指标:CRP、ESR2、粪检(1)粪便常规+OB(2)粪便找真菌+找虫卵(白色念珠菌、寄生虫卵)(2)粪便普通细菌培养+药敏(沙门氏菌、志贺氏菌)、难辨梭菌toxinA/B(4)病毒学:轮状病毒抗原3、其他检查(1)胸片(结核)(2)心电图(3)C13呼气检查(4)腹部B超(5)血压测定.19功能性粪菌移植受者的术前检查功能性粪菌移植受者的术前检查类 别项 目1、血清学检查(1)血常规、肝肾功能电解质、凝血功能、血脂全套、(2)输血前八项(乙型肝炎五项+丙型肝炎病毒(HCV-Ab)+HIV-Ab、梅毒)(3)结核:T-spot(3)病毒学检测:CMV-DNA、EBV-DNA(4)风湿、免疫
16、全套+ANCA(5)炎症指标:CRP、ESR(6)肿瘤标志物:CEA(7)食物过敏原(SIgE)2、粪检(1)粪便常规+OB(2)粪便找真菌+找虫卵(白色念珠菌、寄生虫卵)(2)粪便普通细菌培养+药敏(沙门氏菌、志贺氏菌)、艰难梭菌toxinA/B检测(4)病毒学:轮状病毒抗原3、其他检查(1)胸片(结核)(2)心电图(3)C13呼气检查(Hp)(4)腹部B超(5)CTE(6)肠镜+活检+肠黏膜CMV-DNA检测+肠黏膜TB-DNA检测.20功能性粪菌液的制备准备器械1、粪菌分离手术间2、无菌手套、手术衣3、灭菌器械(烧杯、烧瓶、漏斗、玻棒、压舌板、换药碗、纱布)4、治疗盘5、50ml注射器X
17、6支6、生理盐水500mlX1袋.21功能性粪菌液的制备经严格检查项目符合供菌条件者健康供者粪便 在粪便收集2小时以内进行粪菌液的提取和粪菌移植术 将粪便放入无菌透明玻璃厌氧菌罩内 移植者洗手、戴口罩、穿无菌手术衣、戴手套 将生理盐水与粪便充分混匀粪便:生理盐水=1.5-2:1 用无菌过滤玻璃漏斗及三层纱布过滤粪菌液 再次用两层纱布过滤粪菌液 抽取50ml粪菌液6管备用 供、受者签署粪菌移植知情同意书.22粪菌移植途径 325例例 成功率成功率 鼻胃管鼻胃管 鼻肠管鼻肠管 76%胃十二指肠胃十二指肠 结肠镜结肠镜 89%灌肠灌肠 95%.23功能性粪菌的移植量 成人结肠移植量成人结肠移植量30
18、0ml 保留保留4h 上消化道移植为上消化道移植为65-75ml 500ml 治愈率治愈率97.3%,复发率,复发率4.7%新鲜或冷冻粪便新鲜或冷冻粪便 新鲜粪便指从正常健康人排出的粪便新鲜粪便指从正常健康人排出的粪便6小时之内进行移小时之内进行移植植.24功能性粪菌移植方式的比较经上消化道给予的问题:经上消化道给予的问题:黄金汤不可口黄金汤不可口 臭味(异物)呕吐等臭味(异物)呕吐等 低位结肠微生物不适合肠道生理学低位结肠微生物不适合肠道生理学 可能破坏局部的肠道正常菌群平衡可能破坏局部的肠道正常菌群平衡 给药的成功率给药的成功率26%82%.25结肠镜优势 直观评估结肠粘膜的病变程度并排除
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