7-电解质.ppt

1、血脂检测,检验科 谭爱国 PhD,Examination of Blood Lipids,血脂(blood lipids),脂质(lipids),蛋白(protein),胆固醇(cholesterol),甘油酯(glyceride),磷脂(phospholipids),脂肪酸(fatty acids),载脂蛋白,Classification of Clinically Important Lipids,1 脂质是能量的来源和细胞结构的重要成分； 2 胆固醇和磷脂为细胞膜所必须； 3 胆固醇是维D、胆汁酸和类固醇的前体； 4 不溶于水的脂质由肠道消化、吸收，再和蛋白结合形成可溶性的脂蛋白，随血液

2、循环运送到身体各处 5 与脂质结合形成脂蛋白的蛋白叫载脂蛋白；,血脂概述,脂蛋白和载脂蛋白,脂蛋白,脂蛋白是由脂质和载脂蛋白组成 的一类物质，它的结构相似，多 呈球形。球的中央为非极性物质， 如甘油三酯和胆固醇酯；在球形 颗粒的表面为极性分子，如非酯 化胆固醇、载脂蛋白和磷脂等。,1）超速离心法： 根据密度不同的脂蛋白在离心后所处的位置层次不同而分类； 由上而下：CM、VLDL、IDL、LDL、HDL 2）电泳法： 根据脂蛋白所带电荷不同，在电场中泳动速度不同而分类； 从阳极到阴极：-LP（HDL）、Pre-Lp（VLDL）、-Lp、CM,脂蛋白分类依据,Lipids and Apolipro

3、tein,CM,-Lp,Pre-Lp,-LP,超速离心,琼脂糖凝胶电泳,-,+,ALB-FFA complex,Characters of Lipoprotein by Ultracentrifuge and Electrophoresis,Composition and Function of Lipoprotein,构成各种脂蛋白的成分不同，功能也不同,定义:构成lipoprotein 中的蛋白部分 功能: 1 构成并稳定脂蛋白的结构 2 修饰并影响和脂蛋白有关酶的代谢和活性 同时是一些酶的辅助因子. 3 是脂蛋白受体的配体(ligand) 4 决定和参与脂蛋白和细胞表面脂蛋白受体 的结合

4、及其代谢过程. 来源：主要在肝脏合成，小肠也合成少量 分类: apoA、B、C、E、（a）五大类，每类中又有亚类,Apoliprotein,Location and Function of Apolipoprotein,在脂蛋白的代谢中，各种脂蛋白之间的载脂蛋白、脂质和其它成分相互之间均处在不断交换之中。脂蛋白颗粒形态和成分也会随之发生改变，这些变化影响到在脂蛋白表面的载脂蛋白，从而使载脂蛋白上的受体结合点暴露，而易于和细胞上的受体结合，参与细胞内的脂代谢。,小结,1）脂蛋白被细胞上相关的受体识别和结合，并摄取进入细胞内，在血液中运转和进行代谢。 2）三种脂蛋白受体： LDL 受体、清道夫受体

5、和VLDL受体,脂蛋白受体,1）广泛分布于肝细胞、动脉壁平滑肌细胞、血管内皮细胞、淋巴细胞、单核细胞和巨嗜细胞表面； 2）还可识别apoB100和apoE,又称apoB和apoE受体； 3）能与LDL结合外，还可以与含apoE的VLDL、-VLDL、LDL残粒等结合，将他们吞入细胞内，使细胞从所摄取的脂蛋白中获得脂质，此代谢称为 LDL受体途径。,低密度脂蛋白受体,1) 广泛分布于心肌、骨骼肌、脂肪 等组织细胞； 2) 肝脏中未发现； 3）只与含apoE的VLDL、-VLDL、LDL残粒等结合，进行细胞内代谢。,VLDL受体,1) 配体有：经过修饰的乙酰LDL或氧化LDL、某些磷脂、某些细菌内

6、毒素、某些核甘酸等； 2) LDL在巨嗜细胞、血管内皮细胞和平滑肌细胞内脂质过氧化反应，形成氧化LDL，通过清道夫受体无限制地被巨噬细胞摄取，形成泡沫细胞。,清道夫受体,1）脂蛋白酯酶 催化CM和VLDL核心中的TG分解，将其分解为脂肪酸和甘油三酯 2）肝酯酶 与脂蛋白酯酶功能相似 3）卵磷脂胆固醇酰基转移酶（LCAT） HDL是LCAT的选择性底物 4） 胆固醇酯转移蛋白 维持血浆脂蛋白，特别是甘油三酯和胆固醇酯的平衡 5) HMG-CoA 还原酶 合成胆固醇的限速酶,脂代谢有关酶类,血脂的检查内容,1）预测blood lipids 的水平。 2）对发生atherosclerosis 的危险

7、程度进行评估。 3）降脂治疗的疗效观察。 4）但不能用于心、脑血管疾病的诊断。 5）对家族性lipoprotein代谢异常引起的高血脂或 低血脂疾病，blood lipids测 定具有诊断意义。,测定血脂的目的,1)lipids 2)apolipoprotein 3)lipoprotein 4)receptor 5)enzyme,Blood lipids的检测内容,性质: 人体的主要sterol(固醇) 正常人体含量 ：2g/kg，来自食物，90%内源性Cholesterol 在肝内合成 分类：Cholesteryl esters（60-70%） and free cholesterol（30

8、-40%） 平衡：血浆和组织中胆固醇经常处于交换状态，其交换率因不同组织而 异胆固醇不断进出血液，血浆胆固醇不仅反映胆固醇的摄取和合 成情况，还反映携带胆固醇的各种脂蛋白和合成速度以及影响脂 蛋白代谢的受体情况 存在：主要是LDL中，其次存在于HDL和 VLDL中，而CM中含量最少。,总胆固醇测定 （Measurement of total cholesterol）,1 胆固醇的主要功能： 1） 所有细胞膜、亚细胞器膜上的重要组成成分。 2） 是胆汁酸的唯一前体。 3） 是所有类固醇激素，包括性腺和肾上腺激素等 的前体。 2 胆固醇测定： 1） 将胆固醇酯水解为游离胆固醇。 2 ）胆固醇氧化酶

9、-过氧化酶偶联的CHOD-PAP法检测,总胆固醇测定 （Measurement of total cholesterol）,合适范围：5.18mmol/L(200mg/dl) 边缘升高:5.186.19mmol/L(200 239mg/dl) 升高:6.22mmol/L(240mg/dl),总胆固醇测定 （Measurement of total cholesterol）,参考范围,临床意义: 升高: 1 作为动脉粥样硬化的预防、发病估计、疗效观察的参 考指标。 相关研究： 1）动物实验 2）人体动脉粥样斑块的组织病理学和化学研究 3）临床上动脉粥样硬化病人的血脂检查 4）流行病学研究 5）干

10、预性预防治疗实验的结果,总胆固醇测定 （Measurement of total cholesterol）,2 见于各种高脂蛋白症、梗阻性黄疸、甲状腺功能低下、慢性肾功能衰竭、肾病综合征、糖尿病等影响脂代谢的疾病。 3 吸烟、饮酒、紧张、血液浓度等也可使血液胆固醇升高. 4 妊娠中、后期可见生理性升高，产后恢复原有水平。 女性在绝经后可升高。 5 应用某种药物：环孢霉素、糖皮质激素等,总胆固醇测定 （Measurement of total cholesterol）,降低 1 见于各种脂蛋白缺陷、肝硬化、恶性肿瘤、 营养吸收不良、巨幼红细胞贫血等 2 雌激素、甲状腺激素、钙离子通道拮抗 剂等药

11、物。 3 女性月经期也可降低。,总胆固醇测定 （Measurement of total cholesterol）,性质:中性脂肪 组成:甘油骨架上连接三个分子脂肪酸 储存:人体中储存大量甘油酯,首要功能为细 胞代谢提供能量,血浆中90%95%的甘 油酯为甘油三脂. 乳糜微粒:饮食中脂肪消化吸收后,甘油三脂以形成乳糜微粒的形 式循环于血液中,80%为甘油三脂.由于乳糜微粒分子较 大,能使光线散射,而使血浆呈现混浊状态. 血中乳糜微粒的半寿期为10-15分钟,正常人进食后12小时血中几乎没有乳糜微粒,甘油三脂几乎恢复到原有水平.故检测时一定要空腹12小时以上。,甘油三脂测定 （Measureme

12、nt of triglyceride),测定方法: 1 酯酶将甘油三脂水解为脂肪酸和甘油 2 甘油激酶催化甘油磷酸化为甘油-3-磷酸 3 甘油-3-磷酸可偶联甘油磷酸氧化酶-过氧化 酶的GPO-PAP比色法或丙酮酸激酶-乳酸脱 氢酶的动力学紫外测定法检测.,甘油三脂测定 （Measurement of triglyceride),参考范围: 合适范围:1.7mmol/L(150mg/dl) 升高: 1.7mmol/L(200mg/dl) 临床意义:冠心病发病的危险因素，当升高，应给予饮食控 制和药物治疗 升高: I型、 IV型和 V型高脂蛋白血症，糖尿病、痛 风、梗阻性黄疸、甲状旁腺功能低下、

13、胰腺炎等 降低：见于低脂蛋白血症、营养吸收不良、甲状腺功能亢 进、甲状旁腺功能亢进、过度饥恶、运动等 注：乳糜微粒中含有大量甘油三脂，故检测时一定要空腹12小时以上,甘油三脂测定 （Measurement of triglyceride),定义：运输血脂的大分子物质。 测定方法：1 超速离心法 2 电泳法 3 化学法和免疫法 （常规测定）,脂蛋白检测（measurement of lipoprotein）,HDL 是体积最小的脂蛋白，和其他脂蛋白相比，蛋白含量最大（50%）,其主要的载脂蛋白为APOA-I、A-II及少量的APO-C、E、D，磷脂是其主要的脂质,高密度脂蛋白胆固醇测定 （Mea

14、surement of high density lipoprotein cholesterol）,Lipid composition of HDL particles,合成场所：肝脏和小肠 生理功能；把胆固醇从末梢组织运送到肝内进行代谢。防止胆固醇在细胞内堆积，维持细胞内胆固醇的相对恒定，从而限制动脉粥样硬化的发生、发展，起到抗动脉粥样硬化的作用。 血浆中HDL浓度与动脉粥样硬化呈相反的关系。 测定：测定HDL-C来了解HDL的状况。准确地说，HDL-C表示的是体积大小、化学性质和构成相似的同属于HDL一族脂蛋白颗粒中的胆固醇。由于它在HDL中所含比例基本恒定，故可用其中的胆固醇来表示HDL

15、的相对含量，而不必直接测定HDL。,高密度脂蛋白胆固醇测定 （Measurement of high density lipoprotein cholesterol）,参考范围： 合适范围：1.041.55mmol/l(40-60mg/dl) 减低: 1.04mmol/L(40mg/dl) 临床意义: 对防止动脉粥样硬化有保护作用，可用于评价冠心病的危险性 升高可见于： 1 慢性肝炎、原发性胆汁性肝硬化。 2 药物：雌激素、苯妥英等可使HDL-C升高。 3 绝经妇女常用雌激素做替代疗法，可升高HDL-C，降低患冠心病 的风险。,高密度脂蛋白胆固醇测定 （Measurement of high

16、density lipoprotein cholesterol）,HDL-C降低： 1 急性感染、糖尿病、慢性肾功能衰竭、肾病综合征等。 2 雄激素、孕酮等药物可导致HDL-C降低。 测定方法很多，主要根据方法的性能进行选择,高密度脂蛋白胆固醇测定 （Measurement of high density lipoprotein cholesterol）,性质： 1 球形分子 2 中心由疏水性的胆固醇酯和甘油三脂构成。外 周为亲水性的磷脂、游离胆固醇、载脂蛋白B- 100及极少量的apo C-III和apo E。 3 是富含胆固醇的脂蛋白。 4 正常人空腹时血浆中的胆固醇三分之二结合于 LDL

17、中，其余的则由VLDL、HDL携带，也有极 少部分在IDL（中间密度脂蛋白）和Lp（a）上。,低密度脂蛋白胆固醇测定 （Measurement of low density lipoprotein cholesterol ）,组成： 蛋白：21% （95% apoB） 脂质：79% 胆固醇脂：38% 磷脂： 22% 甘油三脂：11% 非酯化的胆固醇：8% 来源： 1 肝脏合成，但主要来源于VLDL 2 VLDL代谢的终末产物：VLDL中甘油三脂被水解，除apo B 以外的其他载脂蛋白被移走，形成中间产物IDL并最终形成 LDL。 清除：65%-70%依赖于肝细胞LDL受体清除。因此，一旦受体缺

18、乏，可以使 血中的LDL增加。,低密度脂蛋白胆固醇测定 （Measurement of low density lipoprotein cholesterol ）,是动脉粥样硬化危险因素之一 LDL经过化学修饰（氧化或乙酰化）后，其中的apo B-100变性，通 过清道夫受体（Scavenger receptor）被巨噬细胞摄取，形成泡沫细 胞并停留在血管壁内，导致大量的胆固醇沉积，促使动脉壁形成粥样硬 化斑块（atheromatous plaque）。,低密度脂蛋白胆固醇测定 （Measurement of low density lipoprotein cholesterol ）,参考范围

19、： 合适范围： 3.37mmol/L(130mg/dl) 边缘升高:3.37-4.12mmol/L(130-159mg/dl) 升高: 4.14mmol/L(160mg/dl) 临床意义:为动脉粥样硬化的危险因素。临床上常将LDL-C水平用于判断发生冠心病的危险性。 升高见于： 1 遗传性高脂蛋白血症、甲状腺功能低下、肾病综合征、梗阻性黄疸、 慢性肾功能衰竭等 2 高脂肪食物、肥胖、和药物，如：雄激素等可使其升高。 3 妊娠早期开始缓慢升高，到末3个月时可高于基线的50%，产后恢复 至原水平。,低密度脂蛋白胆固醇测定 （Measurement of low density lipoprotei

20、n cholesterol ）,4 成年人LDL-C逐渐升高，女性高于男性。 LDL-C降低见于： 1 急性病、无-脂蛋白血症、甲状腺功能亢进、消化吸收不良、营 养不良、肝硬化、恶性肿瘤等。 2 低脂肪食物和运动，应用雌激素、甲状腺素等，也可使其降低。,低密度脂蛋白胆固醇测定 （Measurement of low density lipoprotein cholesterol ）,Friedewald Equation公式： LDL-C（mg/dl）=TC（mg/dl）-HDL-C（mg/dl）+TG/5（mg/dl）,特点： 1 1963年，Kare Berg研究发现了一种特殊的脂蛋白，命

21、名为脂蛋（a） 2 蛋白质部分同时具有：apo B-100和apo（a），两者以二硫键相连。 3 不能用经典的超速离心和电泳方法来分类。 4 电泳行为与VLDL相似，位于前带。 5 超速离心中则存在于LDL到HDL的整个范围内。 6 由常染色体遗传，其产生完全由基因决定。 7 与纤溶酶原有同源性，可以竞争结合纤维蛋白位点，从而抑制纤维蛋白水解作用。,脂蛋白（a）的测定 （Measurement of lipoprotein）,参考范围： 300mg/L 临床意义： 1 升高与冠心病有关 2 不同人种水平不同 3 在胰岛素依赖型糖尿病、肾脏疾病、血透析、腹 腔透析、肾移植术后进行治疗的病人，浓度

22、都可 能升高。,脂蛋白（a）的测定 （Measurement of lipoprotein）,载脂蛋白测定 （Determination of apoliprotein）,1 HDL的主要结构蛋白，乳糜微粒中也有少许 2 产生于肝和小肠 3 为组织液中浓度最高的载脂蛋白 4 血浆中半衰期为45天,载脂蛋白A-I性质,1 组成HDL并维持其结构的稳定性和完整性 2 激活卵磷脂胆固醇酰基转移酶（LCAT），以催化 胆固醇酯化，移去肝外组织的游离胆固醇，降低 冠心病的危险性。 3 作为高密度脂蛋白受体的配体。,载脂蛋白A-I主要功能,1) 速率散射免疫比浊法 2) 免疫透射比浊法,载脂蛋白A-I检测

23、方法,载脂蛋白A-I参考范围,中老年：男性 1.05-1.72g/L 女性 1.17-1.74g/L,1 评价冠心病的危险性:与测定HDL-C有相同或更好的作用。 2 家族性Apo A-I缺乏症，合并HDL-C降低。 3 家族性脂蛋白缺乏症，降低，合并胆固醇和HDL-C 降低。 4 家族性卵磷脂胆固醇酰基转移酶缺乏症，降低，合并 HDL-C降低。 5 家族性低HDL，降低，合并甘油三脂增高。 6 未控制的糖尿病、慢性肝病、肾病综合征、慢性肾衰等， 降低。 7 高脂蛋白血症：升高,载脂蛋白A-I（ApoA-I）临床意义,载脂蛋白B测定,1)重要的载脂蛋白; 2)是LDL中含量最多的蛋白; 3)

24、90%存在于LDL,载脂蛋白B性质,1)apo B-100： 大B，存在于由肝脏合成的 脂蛋白中。 2)apo B-48： 小B，其分子量为apo B的48%，可能由小肠壁合成，存在于淋巴乳糜微粒中，不能与脂蛋白受体结合。 （含apo B-100序列中开始48%） 除红细胞和神经系统外，几乎所有组织都有识别LDL上apoB的受体。,载脂蛋白B分类,载脂蛋白B的检测方法,1) 速率散射免疫比浊法 2) 免疫透射比浊法,男性：0.59-1.43g/L 女性: 0.61-1.56g/L,载脂蛋白B的参考范围,1 为冠心病的危险因素.可用于估计冠心病的危险性, 降脂治疗效果等. 2 高、低和无脂蛋白血征的辅助诊断 3 糖尿病、甲状腺功能低下、肾病综合症、肾功能 衰竭、梗阻性黄疸， 升高。 4 恶性肿瘤、营养不良、甲亢等降低。 5 糖耐量降低和2型糖尿病患者，冠心病的风险预测。,载脂蛋白B测定的临床意义,