药理学实验课件实用.ppt
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1、药理学实验课药理学实验课 药理教研室药理教研室药学专业实验课程安排药学专业实验课程安排实验课程安排实验课程安排共共18学时学时(1)实验基本技能)实验基本技能(2)不同给药途径对药物的影响)不同给药途径对药物的影响(4)药物对家兔离体肠平滑肌的)药物对家兔离体肠平滑肌的作用作用(5)吗啡镇痛实验)吗啡镇痛实验(3)药物抗炎实验)药物抗炎实验 足肿胀法 耳片法热板法 扭体法临床医学(本)实验课程临床医学(本)实验课程实验课程安排实验课程安排共共27学时学时(1)实验基本技能)实验基本技能(2)不同给药途径对药物的)不同给药途径对药物的 影响影响(5)药物对家兔离体肠平滑肌的作用)药物对家兔离体肠
2、平滑肌的作用(7)药物对肠推进实验的影响)药物对肠推进实验的影响(4)吗啡镇痛实验)吗啡镇痛实验(3)药物抗炎实验)药物抗炎实验(8)药物对家兔心电图的影响)药物对家兔心电图的影响(6)药物对家兔动脉血压的影响)药物对家兔动脉血压的影响实验课程学习要求实验课程学习要求实验前实验前实验中实验中实验后实验后1.1.预习实验指导预习实验指导,明确实验目的,明确实验目的和要求,充分了和要求,充分了解实验方法解实验方法 2.2.进入实验室,进入实验室,必须穿白大衣必须穿白大衣.3.3.检查实验器材检查实验器材 1.1.根据实验内容根据实验内容进行小组内分工进行小组内分工 2.2.严格、准确地严格、准确地
3、按照指导中的实按照指导中的实验方法进行实验验方法进行实验操作。操作。3.3.仔细、真实的仔细、真实的记录实验结果。记录实验结果。1.1.死亡动物放在死亡动物放在指定地点;存活指定地点;存活动物放入笼内。动物放入笼内。2.2.将器材洗净擦将器材洗净擦干,放回原处干,放回原处3.3.每小组轮流负每小组轮流负责搞好实验室内责搞好实验室内卫生卫生 。u实验课程学习目的实验课程学习目的巩固药理学基本理论巩固药理学基本理论学习基本的实验方法学习基本的实验方法培养实事求是的学习作风培养实事求是的学习作风培养动手能力、科研能力培养动手能力、科研能力药理学实验药理学实验一、基本实验操作一、基本实验操作看短片看短
4、片实验报告标题实验目的:实验原理:实验器材:实验方法:结果:讨论:结论:二、不同给药途径对二、不同给药途径对 药物的影响药物的影响 实验目的:掌握小鼠给药的基本方法。实验目的:掌握小鼠给药的基本方法。比较不同给药途径药物起效的时比较不同给药途径药物起效的时 间快慢间快慢 实验原理:不同的给药途径药物吸收不同实验原理:不同的给药途径药物吸收不同实验目的及原理实验目的及原理1 实验动物:小鼠实验动物:小鼠 实验器材:实验器材:0.4%戊巴比妥钠、戊巴比妥钠、1ml注射器、注射器、1ml灌胃器。灌胃器。主要实验材料主要实验材料2 取取6只小鼠,称重、分组只小鼠,称重、分组、标记标记 给给0.4戊巴比
5、妥钠戊巴比妥钠(腹腔、皮下、灌胃)(腹腔、皮下、灌胃)(0.1ml/10g)观察小鼠翻正反射消失及恢复的时间观察小鼠翻正反射消失及恢复的时间 分析、比较实验结果分析、比较实验结果3主要实验过程(二)主要实验过程(二)计时计时 (1)注意给药途径的正确操作。)注意给药途径的正确操作。(2)注意小鼠翻正反射消失时间判定)注意小鼠翻正反射消失时间判定 (1min)。)。实验注意事项实验注意事项4影响药物起效的影响药物起效的因素有哪些?因素有哪些?请分析本次实验请分析本次实验中,那些因素可中,那些因素可影响实验结果。影响实验结果。问题与思考问题与思考仔细观察记录实验仔细观察记录实验结果,结合药理学结果
6、,结合药理学总论知识思考,何总论知识思考,何种给药途径起效最种给药途径起效最快。为什么?快。为什么?药理学实验药理学实验 二、抗炎实验二、抗炎实验 1 1、大鼠足肿胀法、大鼠足肿胀法 2 2、小鼠耳片法、小鼠耳片法 1 1、大鼠足肿胀法、大鼠足肿胀法1.1 实验目的:实验目的:l 学习利用鸡蛋清制急性炎症动物模型方法。l 观察糖皮质激素的抗炎作用。1.2 实验原理:实验原理:u鸡蛋清为异性蛋白,可致动物急性炎症,出现局部肿胀,容积增加。比较給药组与对照组动物局部容积的变化,从而观察到药物的抗炎作用。实验目的及原理实验目的及原理1和 实验动物:大鼠实验动物:大鼠(雄性雄性)实验药物:实验药物:0
7、.5%氢化可的松氢化可的松、10%鸡蛋清、鸡蛋清、生理盐水生理盐水 主要仪器:(主要仪器:(PV-200足趾肿胀测定仪足趾肿胀测定仪)主要实验材料主要实验材料 大鼠两只:称重、标记大鼠两只:称重、标记 甲、乙二鼠右踝关节的突起点处用笔划线作为测甲、乙二鼠右踝关节的突起点处用笔划线作为测量标志,测定大鼠正常足容积量标志,测定大鼠正常足容积(见后图见后图)动物动物 给药给药30min,从右后足掌心向掌跖关节方向进从右后足掌心向掌跖关节方向进针,皮下注射针,皮下注射10%新鲜蛋清新鲜蛋清0.1ml。(见后图)注射蛋清后注射蛋清后15min、30 min、45min、,测量右后足的体积,记录、,测量右
8、后足的体积,记录数据。数据。计算肿胀计算肿胀率率=(药后药后-药前药前体积)体积)/药前药前体积体积100%实验主要步骤(大鼠足肿胀)实验主要步骤(大鼠足肿胀)甲(给药组):腹腔注射甲(给药组):腹腔注射0.5%氢化可的松溶液氢化可的松溶液 0.3ml/100g 体重体重乙(对照组):腹腔注射生理盐水乙(对照组):腹腔注射生理盐水0.3ml/100g 体重体重计计时时皮下注射新鲜蛋清皮下注射新鲜蛋清 抗炎实验中动物性别的选择:抗炎实验中动物性别的选择:雄性雄性 测定大鼠足体积时,选定测定大鼠足体积时,选定统一测量位置统一测量位置(大鼠足(大鼠足外踝关节突起)外踝关节突起)注意测量时别把鼠足插得
9、过深,避免测量杯中水注意测量时别把鼠足插得过深,避免测量杯中水溢出,影响准确性。溢出,影响准确性。大鼠捉拿时别捉得过紧,避免其窒息死亡。大鼠捉拿时别捉得过紧,避免其窒息死亡。鸡蛋清现配现用。鸡蛋清现配现用。实验注意事项实验注意事项2、小鼠耳片法2.1 实验目的:实验目的:l 学习利用化学药物刺激制急性炎症动物模型方法。l 观察糖皮质激素的抗炎作用。2.2 实验原理:实验原理:u化学刺激物,可致动物急性炎症,出现局部肿胀,重量改变,比较給予药物前后动物局部肿胀程度的变化从而观察到药物的抗炎作用。实验目的及原理实验目的及原理和 实验动物:小鼠实验动物:小鼠(雄性雄性)实验药物:实验药物:0.1%地
10、塞米松、二甲苯、地塞米松、二甲苯、生理盐水生理盐水 主要仪器:主要仪器:分析天平、打孔器、手术剪等分析天平、打孔器、手术剪等2主要实验材料主要实验材料 小鼠小鼠4只,称重、标记只,称重、标记 四只分二组四只分二组 30min后用二甲苯后用二甲苯0.05ml均匀涂抹每只鼠均匀涂抹每只鼠的右耳的右耳 涂抹涂抹45min后小鼠脱臼处死,分别用打孔器取相后小鼠脱臼处死,分别用打孔器取相同部位左右耳片,电子天平称重。计算:同部位左右耳片,电子天平称重。计算:右耳右耳-左耳左耳=肿胀度;肿胀度;肿胀率肿胀率=(右耳右耳-左耳左耳)/左耳左耳100%给药组:腹腔注射给药组:腹腔注射0.1地塞米松地塞米松 0
11、.1ml/10g 体重体重对照组:腹腔注射生理盐水对照组:腹腔注射生理盐水0.1ml/10g 体重体重3主要实验步骤主要实验步骤(小鼠耳肿胀小鼠耳肿胀)计时计时白白左左右右头头左左右右背背左左右右尾尾左左右右 抗炎实验中动物性别的选择:抗炎实验中动物性别的选择:雄性雄性 小鼠耳廓滴加二甲苯时,正反面均匀涂抹。避免小鼠耳廓滴加二甲苯时,正反面均匀涂抹。避免滴入耳廓内。滴入耳廓内。小鼠左右耳小鼠左右耳打耳片位置统一打耳片位置统一(耳廓中间部位)。(耳廓中间部位)。使用打孔器注意:使用打孔器注意:1、安全;、安全;2、别打硬物。、别打硬物。注意时间合理分配。注意时间合理分配。实验注意事项实验注意事项
12、4炎症的表现炎症的表现以及炎症的以及炎症的类型有哪些类型有哪些?问题与思考问题与思考?本实验中选本实验中选择雄性动物择雄性动物的原因?的原因?药理学实验药理学实验四、四、药物对家兔离体肠平滑肌的作用药物对家兔离体肠平滑肌的作用药物对家兔离体肠平滑肌的作用药物对家兔离体肠平滑肌的作用浴槽实验前准备浴槽实验前准备(预热):预热):1、领取器材、领取器材2、浴槽内加水、浴槽内加水3、测定筒内加液、测定筒内加液4、接通电源、接通电源5、按压温度调节旋钮、按压温度调节旋钮6、调温为、调温为371.1 实验目的:实验目的:学习离体平滑肌器官的实验方法。观察拟胆碱药和抗胆碱药对离体家兔肠平滑肌的作用。1.2
13、 实验原理:实验原理:u乙酰胆碱通过激动M受体兴奋胃肠平滑肌;阿托平可阻断M受体;氯化钡直接兴奋胃肠平滑肌。实验目的及原理实验目的及原理1和 实验动物:家兔实验动物:家兔 实验药物:乙酰胆碱溶液(实验药物:乙酰胆碱溶液(1/10万)、万)、0.1%硫酸阿托品溶液、硫酸阿托品溶液、1%氯化钡溶液氯化钡溶液 实验试剂:台氏液实验试剂:台氏液 主要仪器:离体平滑肌槽(浴槽)主要仪器:离体平滑肌槽(浴槽)2主要实验材料主要实验材料 在浴槽(大试管)中,加入台氏液在浴槽(大试管)中,加入台氏液70ml(标(标线处),加热,维持水线处),加热,维持水370.5 。实验主要步骤实验主要步骤3安装离体实验装置
14、安装离体实验装置实验主要步骤实验主要步骤3安装离体实验装置安装离体实验装置换能器插入第一通道换能器插入第一通道斜角在上斜角在上 取家兔一只,颈椎脱臼处死。取家兔一只,颈椎脱臼处死。立即打开腹腔,找到幽门部,分离十二指肠,以立即打开腹腔,找到幽门部,分离十二指肠,以2cm左右穿左右穿线,分段结扎,剪取肠段(一只兔取三段)。线,分段结扎,剪取肠段(一只兔取三段)。每组取一肠段,在上下结扎线内侧边缘各剪一小口。肠段贯通。每组取一肠段,在上下结扎线内侧边缘各剪一小口。肠段贯通。实验主要步骤实验主要步骤3离体肠肌的制备离体肠肌的制备 将肠段,一端连结通气钩,置测定管(麦氏浴槽)中。另一将肠段,一端连结通
15、气钩,置测定管(麦氏浴槽)中。另一端连结张力换能器弹簧片上。上下调节双凹夹,控制张力的大小。端连结张力换能器弹簧片上。上下调节双凹夹,控制张力的大小。实验主要步骤实验主要步骤3离体肠肌连接及记录离体肠肌连接及记录 打开气量调节旋钮,让气泡缓慢通入,打开气量调节旋钮,让气泡缓慢通入,1-2个气泡个气泡/秒即可。秒即可。打开电脑,点击桌面中打开电脑,点击桌面中BL-420图标,进入主菜单,点击工具图标,进入主菜单,点击工具栏上的栏上的“实验项目实验项目”,消化道实验,消化道实验,消化道平滑肌生理消化道平滑肌生理特性(特性(2)双击双击正常曲线正常曲线乙酰胆碱乙酰胆碱阿托品阿托品乙酰胆碱乙酰胆碱1.
16、肠管肠管稳定稳定10分分钟,记录钟,记录一段正常一段正常活动曲活动曲线线。2.加入加入1:10万乙酰胆碱万乙酰胆碱溶液溶液0.2ml,记录其收缩记录其收缩幅度,待收幅度,待收缩明显后。缩明显后。3.立即加入立即加入0.05%硫酸阿硫酸阿托品托品0.2ml。观察结果。观察结果。4.平滑肌收缩平滑肌收缩曲线稳定后,曲线稳定后,再次加入再次加入1:10万乙酰胆碱溶万乙酰胆碱溶液液0.2ml,结,结果与(果与(1)相)相比较,观察结比较,观察结果有何不同。果有何不同。实验主要步骤实验主要步骤3 5.加入加入1%氯化钡溶液氯化钡溶液0.2ml,观察实验结果。,观察实验结果。实验主要步骤实验主要步骤3加药
17、加药6.待作用明显后,加入待作用明显后,加入0.05%硫酸阿托品溶液硫酸阿托品溶液0.2ml,再次观察结果,再次观察结果。反演窗口及剪辑1拖2点击剪辑板(同时复制)冲洗和分离肠管时动作应轻柔,尽量避免牵拉肠管。冲洗和分离肠管时动作应轻柔,尽量避免牵拉肠管。如需换液,台氏液液面高度及温度应与以前保持一致。如需换液,台氏液液面高度及温度应与以前保持一致。加药时不要把药液直接加到标本上,以免影响结果。加药时不要把药液直接加到标本上,以免影响结果。浴温和肠肌的张力均可影响实验结果,应注意调节。浴温和肠肌的张力均可影响实验结果,应注意调节。实验注意事项实验注意事项4阿托品是否阿托品是否对于乙酰胆对于乙酰
18、胆碱和氯化钡碱和氯化钡均有拮抗作均有拮抗作用?为什么用?为什么?问题与思考问题与思考?实验中能影实验中能影响离体肠肌响离体肠肌收缩活性的收缩活性的必要条件有必要条件有哪些?哪些?药理学实验药理学实验 三、吗啡镇痛实验实验目的实验目的:掌握镇痛药的实验方法掌握镇痛药的实验方法 (热板法、扭体法)(热板法、扭体法)观察药物的镇痛作用观察药物的镇痛作用实验原理:实验原理:热刺激或者化学刺激物使小鼠热刺激或者化学刺激物使小鼠 产生不同的疼痛反应,观察给产生不同的疼痛反应,观察给 药前后小鼠疼痛反应的变化。药前后小鼠疼痛反应的变化。(痛阈值、扭体次数)(痛阈值、扭体次数)实验目的及原理实验目的及原理1p
19、 实验动物:小鼠实验动物:小鼠(热板法中小鼠为(热板法中小鼠为雌性雌性)p 实验药物:实验药物:0.1%吗啡吗啡 p 实验试剂:实验试剂:0.1酒石酸锑钾(或酒石酸锑钾(或0.7%冰醋酸)、冰醋酸)、生理盐水生理盐水p 主要仪器:热板测痛仪(主要仪器:热板测痛仪(RB-200智能热板仪智能热板仪)主要实验材料主要实验材料23主要实验过程主要实验过程(热板法)(热板法)打开实验仪器、设定温度(打开实验仪器、设定温度(55)动物初筛动物初筛(选出四只),(选出四只),称重,合格动物分二组称重,合格动物分二组测定药前痛阈值。测定药前痛阈值。给药组:腹腔注射给药组:腹腔注射0.1%吗啡吗啡 0.1ml
20、/10g体重体重对照组:腹腔注射对照组:腹腔注射生理盐水生理盐水 0.1ml/10g体重体重 给药后给药后15min、30min、45min再次测定各组再次测定各组小鼠痛阈值小鼠痛阈值1次。次。实验数据记录、整理、分析实验数据记录、整理、分析二组二组痛阈值痛阈值即小鼠出现疼痛反应的时间。即小鼠出现疼痛反应的时间。(以小鼠添后足作为出现疼痛观察指标。)(以小鼠添后足作为出现疼痛观察指标。)筛选指标筛选指标以痛阈值大于以痛阈值大于5秒,小于秒,小于30秒,秒,做为筛选合格动物。做为筛选合格动物。药前痛阈值药前痛阈值测定测定2次痛阈值,次痛阈值,2次间隔时间次间隔时间5min,取平均值,取平均值,为
21、给药前正常痛阈值。为给药前正常痛阈值。注释:注释:返回返回吗啡热板法镇痛结果 用药后平均痛阈值用药后平均痛阈值-用药前平均痛阈值用药前平均痛阈值 用药前平均痛阈值用药前平均痛阈值 组别 剂量(mg/kg)动物数 药前痛阈值(s)药后痛阈值(s)药后痛阈值提高百分率(%)15min 30min 45min 15min 30min 45min 生理盐水组 0.1ml/10g 2 0.1%吗啡组 0.1ml/10g 2 痛阈值提高百分率痛阈值提高百分率=100%b3主要实验过程主要实验过程(扭体法)(扭体法)四只小鼠随机分二组四只小鼠随机分二组给药组:腹腔注射给药组:腹腔注射0.1%吗啡吗啡 0.1
22、ml/10g体重体重对照组:腹腔注射对照组:腹腔注射生理盐水生理盐水 0.1ml/10g体重体重 各组小鼠均腹腔注射各组小鼠均腹腔注射0.7%冰醋酸(冰醋酸(0.1%酒石酸锑钾)酒石酸锑钾)0.2ml/只只记录各组小鼠记录各组小鼠潜伏期潜伏期、15min内的内的扭体次数扭体次数小鼠扭体反应小鼠扭体反应(给药(给药出现扭体时间)出现扭体时间)30min后后吗啡对小鼠的镇痛作用(扭体法)组别鼠号体重药物与剂量疼痛潜伏期(s)潜伏期均值(s)15min内扭体次数15min内扭体次数均值吗啡组12对照组12注:疼痛潜伏期超过15mim,以15mim(900s)计。热板仪温度设定:热板仪温度设定:550
23、.5 室温室温:以以15 20C为宜为宜 热板法中动物性别的选择:热板法中动物性别的选择:雌性雌性痛阈值判定指标:痛阈值判定指标:添后足添后足初筛:初筛:(5s 痛阈值时间痛阈值时间 30s)。)。超过超过60s动物未添足,将动物取动物未添足,将动物取出,痛阈值以出,痛阈值以60s计算计算实验中保持小鼠实验中保持小鼠足底及热板内干净、干燥。足底及热板内干净、干燥。热板仪测量中注意:热板仪测量中注意:及时盖鼠盒盖,避免温度散失。及时盖鼠盒盖,避免温度散失。扭体法实验中观察:扭体法实验中观察:潜伏期:以注射刺激物到出现疼痛反应(开始腹潜伏期:以注射刺激物到出现疼痛反应(开始腹部凹陷或扭体)计时。扭
24、体次数:只数扭体反应的次数。部凹陷或扭体)计时。扭体次数:只数扭体反应的次数。酒石酸锑钾、冰醋酸酒石酸锑钾、冰醋酸现用现配现用现配实验注意事项实验注意事项4两种镇痛模两种镇痛模型的区别?型的区别?吗啡药理学吗啡药理学作用、机制作用、机制?问题与思考问题与思考?药理学实验药理学实验 八、药物对家兔动脉血压的影响八、药物对家兔动脉血压的影响1.1 实验目的:实验目的:学习麻醉动物急性血压实验的方法。观察传出神经药物对动物血压的影响。1.2 实验原理:实验原理:u盐酸肾上腺素溶液、酚妥拉明溶液等药物能与心肌或者血管平滑肌上的相应受体结合,从而影响家兔的血压。实验目的及原理实验目的及原理1和 实验动物
25、:家兔实验动物:家兔 实验药物:实验药物:肝素生理盐水液肝素生理盐水液(500ml 生理盐水加肝生理盐水加肝素素12ml)、1.5%戊巴比妥钠溶液、戊巴比妥钠溶液、0.01%肾上腺素溶液、肾上腺素溶液、0.1%酚妥拉明溶液。酚妥拉明溶液。2主要实验材料主要实验材料和主要仪器:主要仪器:压力换能器压力换能器1台、台、BL-420生物机能实验系统生物机能实验系统1套、手术刀套、手术刀1把、手术剪把、手术剪1把、止血钳把、止血钳2把、把、眼科剪眼科剪1把、三通把、三通2个、气管插管个、气管插管1个、动脉个、动脉插管(留置针)插管(留置针)1根、动脉夹根、动脉夹1个、输液针个、输液针1根、根、20ml
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