荆楚理工学院细胞生物学课件.ppt
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- 理工学院 细胞生物学 课件
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1、 第三章第三章 细胞生物学研究方法细胞生物学研究方法细胞的显微结构细胞的显微结构 (光镜下)(光镜下)细胞的亚显微结构细胞的亚显微结构 (电镜下)(电镜下)第四章 细胞质膜与细胞表面第一节第一节 细胞质膜与细胞表面特化结构细胞质膜与细胞表面特化结构第二节第二节 细胞连接细胞连接第三节第三节 细胞外被和细胞外基质细胞外被和细胞外基质第四章 细胞质膜与细胞表面教学要求:教学要求:n掌握生物膜的流动镶嵌模型。掌握生物膜的流动镶嵌模型。n掌握生物膜的组成成分、基本特征及膜的主要掌握生物膜的组成成分、基本特征及膜的主要功能。功能。n掌握细胞连接的类型。掌握细胞连接的类型。n了解细胞表面特化结构。了解细胞
2、表面特化结构。一、一、细胞质膜的结构模型细胞质膜的结构模型二、二、质膜质膜的化学组成的化学组成三、生物膜的基本特征与三、生物膜的基本特征与功能功能四、细胞表面特化结构四、细胞表面特化结构膜骨架膜骨架第一节 细胞质膜与细胞表面特化结构细胞质膜与细胞表面特化结构相关概念:相关概念:T质膜质膜(cell membranecell membrane,又称细胞膜,又称细胞膜)指围绕在细胞最外层,由指围绕在细胞最外层,由脂质脂质和和蛋白质蛋白质组成的组成的生物膜。生物膜。T内膜系统(内膜系统(endo-membrane system)endo-membrane system)T生物膜生物膜(biologi
3、cal membrane)(biological membrane)细胞质膜细胞质膜内膜系统内膜系统一、一、质质膜结膜结构的研究历史构的研究历史脂质脂质时间:20世纪初实验:科学家对哺乳动物红细胞的细胞膜进行了化学分析成果:确定细胞膜的主要成分的确是脂质和蛋白质。实验:鉴定出膜的化学成分实验:鉴定出膜的化学成分 膜膜是由是由脂质(磷脂)脂质(磷脂)和和蛋白质蛋白质组成的组成的脂质分子与蛋白质在膜中是如何排列参与膜的构建的?磷脂分子1925年 荷兰的两位科学家Gorter和Grendel用有机溶剂提取了人的红细胞质膜的脂类成分,在空气-水界面上铺展成单分子层,测得单分子层的面积恰为红细胞表面积的
4、2倍。GORTER脂质分子必然排列为连续的两层推测:推测:2.2.细胞膜中脂质的排列方式细胞膜中脂质的排列方式磷脂分子可以在空气和水的界面上展开为一层磷脂分子可以在空气和水的界面上展开为一层连连续续两两层层排排列列探测脂质分子的排列方式探测脂质分子的排列方式膜中脂质分子排列为连续两膜中脂质分子排列为连续两层层3、1931年年Plowe用微针触及植物原生质体,用微针触及植物原生质体,指出质膜有弹性,可伸展指出质膜有弹性,可伸展,不同于细胞质的,不同于细胞质的部分。部分。用微针穿过质膜,引起局部的可恢复的用微针穿过质膜,引起局部的可恢复的损伤,但是大量广泛的损伤会导致细胞死亡。损伤,但是大量广泛的
5、损伤会导致细胞死亡。Plowe的工作的工作不仅证实了质膜的存在,也证明不仅证实了质膜的存在,也证明了膜具有保护作用了膜具有保护作用。4.J.Danielli&H.Davson 1935 提出了提出了“蛋白质蛋白质-脂类脂类-蛋白质蛋白质”的的三明治模型三明治模型。认为。认为质膜由双层脂类质膜由双层脂类分子及其内外表面附着的蛋白质构成的分子及其内外表面附着的蛋白质构成的。1959年提年提出了修正模型,认为膜上还具有贯穿脂双层的蛋白出了修正模型,认为膜上还具有贯穿脂双层的蛋白质通道,供亲水物质通过。质通道,供亲水物质通过。5.J.D.Robertson 1959 用超薄切片技术获得了清晰用超薄切片
6、技术获得了清晰的细胞膜照片,显示的细胞膜照片,显示暗暗-明明-暗暗三层结构,厚约三层结构,厚约7.5nm。这就是所谓的这就是所谓的“单位膜单位膜”模型模型。它由厚约。它由厚约3.5nm的双的双层脂分子层脂分子(明带)(明带)和内外表面各厚约和内外表面各厚约2nm的蛋白质的蛋白质(暗暗带)带)构成。构成。单位膜的不足点:单位膜的不足点:n膜是静止的、不变的。膜是静止的、不变的。三层三层静态模型静态模型n膜的厚度一致膜的厚度一致n蛋白质在脂双分子层上为伸展构型蛋白质在脂双分子层上为伸展构型单位膜的内容:单位膜的内容:n两暗一明,细胞共有,厚约两暗一明,细胞共有,厚约7.5nm,各种膜都各种膜都具有
7、相似的分子排列与起源。具有相似的分子排列与起源。单位膜模型无法解释的现象单位膜模型无法解释的现象阿米巴运动阿米巴运动 单位膜模型无法解释的现象单位膜模型无法解释的现象 研究膜蛋白或膜脂流动性的基本实验技术研究膜蛋白或膜脂流动性的基本实验技术之。之。课本课本5656页:图页:图3-103-10 程序:程序:光脱色恢复技术(光脱色恢复技术(FRAP)利用利用荧光素荧光素标记膜蛋白标记膜蛋白或或膜脂膜脂,然后用,然后用激光束激光束照射照射细胞表面某一区域细胞表面某一区域,使被,使被照射区的照射区的荧光淬灭变暗荧光淬灭变暗。由于膜的流动性,淬灭区由于膜的流动性,淬灭区域的亮度逐渐增加域的亮度逐渐增加,
8、最后最后恢复到与周围的荧光强度恢复到与周围的荧光强度相等。相等。根据荧光恢复的速根据荧光恢复的速度可推算出度可推算出膜蛋白膜蛋白或或膜脂膜脂扩散速度扩散速度。新的观察和实验证据新的观察和实验证据推翻静止模型的观点推翻静止模型的观点提出:细胞膜具有流动性提出:细胞膜具有流动性提出:新的细胞膜模型提出:新的细胞膜模型新技术带来新模型新技术带来新模型6 6、在新的观察和实验证据的基础上,、在新的观察和实验证据的基础上,19721972年年S.J.S.J.Singer&G.NicolsonSinger&G.Nicolson(桑格和尼克森)提出了新(桑格和尼克森)提出了新的生物膜模型的生物膜模型流动镶嵌
9、模型流动镶嵌模型,强调了膜的流动性,强调了膜的流动性和膜蛋白分布的不对称性。为多数人所接受。和膜蛋白分布的不对称性。为多数人所接受。支架支架糖蛋白:识别、保护、润滑糖蛋白:识别、保护、润滑,位于细胞膜外侧,位于细胞膜外侧镶镶在在嵌嵌入入贯贯穿穿不不均均匀匀分分布布糖脂糖脂蛋白质或镶嵌在脂双层的表面,或嵌插蛋白质或镶嵌在脂双层的表面,或嵌插在其内部,或横跨整个磷脂双分子层,表现在其内部,或横跨整个磷脂双分子层,表现出出分布的不对称性分布的不对称性。膜各部分脂质分布不均一。膜各部分脂质分布不均一。脂筏(脂筏(lipid rafts):膜脂双层内含有膜脂双层内含有特殊脂质特殊脂质(胆固醇胆固醇和和鞘
10、磷脂鞘磷脂)和和蛋白质蛋白质的微区,比膜的其他部分厚,更的微区,比膜的其他部分厚,更有秩序有秩序且较且较少流动少流动。约约70nm左右,是一种动态结构。左右,是一种动态结构。质膜上的质膜上的脂筏脂筏与与微囊蛋白微囊蛋白1(Caveolin-1)结合后形成结合后形成小窝小窝caveole。意义:信号转导意义:信号转导 蛋白质转运蛋白质转运 7 7、脂筏模型(脂筏模型(lipid rafts modellipid rafts model)()(19198888)微囊蛋白微囊蛋白1(caveolin-1)是胞膜)是胞膜上的一种上的一种内在膜蛋白内在膜蛋白,它是形成,它是形成微囊的主要成分。它在许多细
11、胞微囊的主要成分。它在许多细胞内高表达。内高表达。caveolin-1对物质的转对物质的转运,信号转导和肿瘤的发生起重运,信号转导和肿瘤的发生起重要的调节作用。要的调节作用。Caveolin-1可能可能是一种是一种抑癌基因抑癌基因,在人类肿瘤中,在人类肿瘤中已检测到它的突变。已检测到它的突变。Caveolin-1也参与了结肠癌的发生。也参与了结肠癌的发生。文献:文献:nCaveolin-1在炎症反应中的作用 nCaveolin-1在肿瘤中的研究进展模型构建的基本方法模型构建的基本方法实验现象实验现象提出假说提出假说 构建模型构建模型实验验证实验验证科技进步科技进步修正完善修正完善膜主要成分:磷
12、脂、蛋白质膜主要成分:磷脂、蛋白质膜中的脂质排列为两层膜中的脂质排列为两层三层静态结构模型三层静态结构模型电镜冰冻蚀刻技术电镜冰冻蚀刻技术 人鼠细胞融合实验人鼠细胞融合实验 流动镶嵌结构模型流动镶嵌结构模型电镜观察膜结构电镜观察膜结构过过程程回回顾顾脂筏模型脂筏模型二、生物膜结构特征二、生物膜结构特征1、细胞膜由细胞膜由流动的脂双层流动的脂双层和和嵌在其中的蛋白质嵌在其中的蛋白质组成。组成。膜的流膜的流动性是生物膜的基本特征之一动性是生物膜的基本特征之一,是细胞进行生命活动的必是细胞进行生命活动的必要条件。要条件。2、磷脂分子以磷脂分子以疏水性尾部相对疏水性尾部相对,极性头部朝向水相极性头部朝
13、向水相组成生物组成生物膜骨架;膜骨架;3、蛋白质蛋白质或嵌在双脂层表面,或嵌在其内部,或横跨整个双或嵌在双脂层表面,或嵌在其内部,或横跨整个双脂层,表现出分布的脂层,表现出分布的不对称性不对称性。膜蛋白是赋予生物膜功能膜蛋白是赋予生物膜功能的主要决定者;的主要决定者;4 4、磷脂双分子层磷脂双分子层是组成是组成生物膜的基本结构成分生物膜的基本结构成分,尚未发现膜尚未发现膜结构中起组织作用的蛋白;结构中起组织作用的蛋白;二、二、质膜的化学组成质膜的化学组成n膜脂膜脂生物膜生物膜基本骨架基本骨架膜蛋白膜蛋白功能的功能的主要担负者主要担负者膜糖膜糖质膜表面质膜表面细胞外被细胞外被磷脂磷脂糖脂糖脂胆固
14、醇胆固醇与脂类结合与脂类结合-糖脂糖脂与蛋白结合与蛋白结合-糖蛋白糖蛋白细胞膜的基本成分(一)一)膜脂膜脂n成分:成分:主要包括主要包括磷脂、糖脂磷脂、糖脂和和胆固醇胆固醇三种类三种类型。型。n(1 1)磷脂)磷脂(phospholipid)(phospholipid)n是构成膜脂的基本成分,约占整个膜脂的是构成膜脂的基本成分,约占整个膜脂的 50 50以上。以上。l磷脂磷脂分为二类分为二类:l甘油磷脂甘油磷脂和和鞘磷脂鞘磷脂l主要特征:主要特征:l具有具有一个极性头部一个极性头部和和两个非极性的尾部两个非极性的尾部(心磷(心磷脂除外);脂除外);l脂肪酸碳链脂肪酸碳链碳原子碳原子为为偶数偶数
15、,大多数由大多数由16,1816,18或或2020个组成;个组成;l含有含有饱和脂肪酸饱和脂肪酸(如软脂酸如软脂酸)和和不饱和脂肪酸不饱和脂肪酸(如如油酸油酸);甘油磷脂甘油磷脂胆胆 碱碱 磷磷 酸酸 甘甘 油油脂脂 肪肪 酸酸 链链极性头部(亲水基团)极性头部(亲水基团)非极性尾部(疏水基团)非极性尾部(疏水基团)肪肪 酸酸链链不不 饱饱 和和脂脂(2)糖脂)糖脂 l 糖脂普遍存在于糖脂普遍存在于原核原核和和真核细胞真核细胞的的质膜上质膜上(5 5以下)以下),神经细胞神经细胞糖脂含量较高糖脂含量较高;n含糖而不含磷酸的脂类含糖而不含磷酸的脂类,由一个或多个糖残,由一个或多个糖残基代替磷脂酰
16、胆碱而与鞘氨醇的羟基结合。基代替磷脂酰胆碱而与鞘氨醇的羟基结合。n最简单的糖脂最简单的糖脂是是半乳糖脑苷脂半乳糖脑苷脂,它只有一个半乳,它只有一个半乳糖残基作为极性头部;糖残基作为极性头部;n变化最多、最复杂的糖脂变化最多、最复杂的糖脂是是神经节苷脂神经节苷脂。儿童所。儿童所患的患的家族性白痴病家族性白痴病(Tay-sachs disease)和和神神经节苷脂经节苷脂有关。神经节苷脂本身还是一类膜上的有关。神经节苷脂本身还是一类膜上的受体,破伤风毒素、霍乱毒素、干扰素等的受体受体,破伤风毒素、霍乱毒素、干扰素等的受体就是不同的神经节苷脂。就是不同的神经节苷脂。(2)糖脂)糖脂 (3)胆固醇)胆
17、固醇n存在存在真核细胞膜真核细胞膜上,含量约含量约膜脂的膜脂的1/31/3。n功能是功能是提高膜的稳定性提高膜的稳定性;n调节流动性调节流动性(相变温度,防止膜由液态转为相变温度,防止膜由液态转为固态固态);n降低水溶性物质的通透性降低水溶性物质的通透性;n细菌细菌质膜不含有胆固醇质膜不含有胆固醇,但某些细菌的膜脂,但某些细菌的膜脂中含有中含有甘油脂甘油脂等等中性脂类中性脂类。胆固醇胆固醇胆固醇在脂双层中的位置胆固醇在脂双层中的位置 胆固醇分子的作用:胆固醇分子的作用:调节膜的流动性调节膜的流动性 加强膜的稳定性加强膜的稳定性(4)脂质体()脂质体(Liposome)n脂质体脂质体(lipos
18、omeliposome)是根据磷脂分子在水相中形是根据磷脂分子在水相中形成稳定的脂双层膜的趋势而制备的一种成稳定的脂双层膜的趋势而制备的一种人工膜人工膜。一种人工制备的连续脂双层球形小囊。一种人工制备的连续脂双层球形小囊。n人工脂质体可用于:人工脂质体可用于:研究膜脂与膜蛋白及其生物学性质;研究膜脂与膜蛋白及其生物学性质;脂质体中裹入脂质体中裹入DNA可用于基因转移;可用于基因转移;在临床治疗中在临床治疗中,脂质体作为药物或酶等载体脂质体作为药物或酶等载体 (a)(a)水溶液中的磷脂分子团;水溶液中的磷脂分子团;(b)(b)球形脂质体;球形脂质体;(c)(c)平面脂质体膜;平面脂质体膜;(d(
19、d)用于疾病治疗的脂质体的示意图)用于疾病治疗的脂质体的示意图(a)膜包被的膜包被的脂溶性药物脂溶性药物水溶性水溶性药物结晶药物结晶n(二)膜脂的功能(二)膜脂的功能 1 1)支撑,膜脂是细胞的骨架;)支撑,膜脂是细胞的骨架;n2 2)是)是膜蛋白膜蛋白的的溶剂溶剂,一些膜蛋白通过疏水,一些膜蛋白通过疏水端同膜脂作用,使蛋白镶嵌在膜上。端同膜脂作用,使蛋白镶嵌在膜上。n3 3)膜脂为某些膜蛋白(酶)维持构象及行)膜脂为某些膜蛋白(酶)维持构象及行使功能提供环境使功能提供环境;n4 4)膜上很多酶的活性依赖于膜脂的存在。)膜上很多酶的活性依赖于膜脂的存在。(二)膜脂的功能(二)膜脂的功能(三)(
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