第3章血液分析仪检验课件.ppt

1、全国高等学校医学规划教材临床基础检验学 第三章第三章血液分析仪检验血液分析仪检验南通大学第二附属医院南通大学第二附属医院检验医学中心检验医学中心陆永辉陆永辉全国高等学校医学规划教材临床基础检验学 血液分析仪发展史（一）血液分析仪发展史（一）血液分析仪（血液分析仪（hematology hematology analyzer,HAanalyzer,HA）：）：临床血临床血液一般检查最常用仪器。液一般检查最常用仪器。1 9 4 71 9 4 7 年，美 国 人 库 尔 特年，美 国 人 库 尔 特（W.H.CoulterW.H.Coulter）发明电阻抗）发明电阻抗法粒子计数专利技术，法粒子计数专

2、利技术，19531953年库尔特家族研制出全世年库尔特家族研制出全世界第一台血细胞计数仪界第一台血细胞计数仪：Model AModel A，至至9090年代发展为可年代发展为可计数分类的全自动血液分析仪。计数分类的全自动血液分析仪。全国高等学校医学规划教材临床基础检验学 血液分析仪发展史（二）血液分析仪发展史（二）从单成分计数到组合计数分类从单成分计数到组合计数分类 从单通道到多通道从单通道到多通道 从半自动到全自动从半自动到全自动 从白从白细胞细胞二分类到三分类发展为五分类二分类到三分类发展为五分类 形成红形成红细胞细胞、白、白细胞细胞、血小板、网织红、血小板、网织红细胞细胞四类参数系列四类

3、参数系列 融合物理、化学检测方法融合物理、化学检测方法全国高等学校医学规划教材临床基础检验学 血液分析仪的发展血液分析仪的发展 检测自动化 技术多样化 分析智能化 参数系列化 使用普及化全国高等学校医学规划教材临床基础检验学 第三章 血液分析仪检验血液分析仪优势：检测项目多 速度快 精度高 易操作 准确性好全国高等学校医学规划教材临床基础检验学 第三章 血液分析仪检验第一节第一节血液分析仪检测原理血液分析仪检测原理一、仪器基本结构一、仪器基本结构（一）机械系统（一）机械系统（二）电学系统（二）电学系统（三）光学系统（三）光学系统 检测方法：电阻抗法、光散射法检测方法：电阻抗法、光散射法全国高等

4、学校医学规划教材临床基础检验学 第三章 血液分析仪检验 二、电阻抗法二、电阻抗法血细胞分析技术血细胞分析技术（一）电阻抗原理(principle of electrical impedance)，又称库尔特原理（Coulter principle）全国高等学校医学规划教材临床基础检验学 第三章 血液分析仪检验库尔特原理库尔特原理“当一个不良导体颗当一个不良导体颗粒，例如血细粒，例如血细胞，通过两个电极之间胞，通过两个电极之间时时，导，导致电致电路的电路的电阻抗发生变化，产生脉冲电信号。阻抗发生变化，产生脉冲电信号。”脉冲次数脉冲次数细胞数量，脉冲大小细胞数量，脉冲大小细胞体积。细胞体积。全国高

5、等学校医学规划教材临床基础检验学 第三章 血液分析仪检验电阻抗原理示意图电阻抗原理示意图负压负压血细胞悬液外电极外电极内电极内电极小孔小孔小孔管小孔电流小孔电流样品杯小孔近观库尔特原理三要库尔特原理三要素：小孔、负压、素：小孔、负压、电极电极检测：阻抗大小检测：阻抗大小-细胞体积，细胞体积，脉冲脉冲数量数量-细胞个数细胞个数全国高等学校医学规划教材临床基础检验学 第三章 血液分析仪检验检测区域红细胞Oscilloscope示波镜示波镜全国高等学校医学规划教材临床基础检验学 第三章 血液分析仪检验检测区域白细胞示波镜示波镜全国高等学校医学规划教材临床基础检验学 第三章 血液分析仪检验电阻抗原理电

6、阻抗原理 血细胞相对非导电，悬浮在电解质溶液中血细胞相对非导电，悬浮在电解质溶液中受负压吸引通过计数小孔时，引起电阻瞬受负压吸引通过计数小孔时，引起电阻瞬间变化产生脉冲信号，脉冲振幅代表细胞间变化产生脉冲信号，脉冲振幅代表细胞体积，脉冲数量即细胞个数。体积，脉冲数量即细胞个数。用于红细胞、白细胞、血小板计数和体积用于红细胞、白细胞、血小板计数和体积测定测定全国高等学校医学规划教材临床基础检验学 第三章 血液分析仪检验（二）电阻抗法白细胞检测原理（二）电阻抗法白细胞检测原理35-450fl范围内分析白细胞（计数和范围内分析白细胞（计数和体积三分类）体积三分类）%3590160300400450(

7、fl)全国高等学校医学规划教材临床基础检验学 第三章 血液分析仪检验（三）电阻抗法红细胞检测原（三）电阻抗法红细胞检测原理理 红细胞计数和血细胞比容测定36-360fl范围内计数红细胞100200300400(fl)%全国高等学校医学规划教材临床基础检验学 第三章 血液分析仪检验（四）电阻抗法血小板检测原理（四）电阻抗法血小板检测原理 血小板计数：血小板计数：2-20fl2-20fl范围计数为血小板范围计数为血小板 因体积较小，可与红细胞在一个系统中进行检测。因体积较小，可与红细胞在一个系统中进行检测。直方图在230fl（不同仪器范围有差异）。血小板平均体积（mean platelet vol

8、ume,MPV）。10 20 30(fl)10 20 30(fl)%全国高等学校医学规划教材临床基础检验学 第三章 血液分析仪检验细胞计数的几点说明 适宜的孔径：适宜的孔径：RBC宝石微孔直径宝石微孔直径80m，WBC微孔直微孔直径径100m 适度的稀释：抗凝全血经适度的稀释：抗凝全血经1：500稀释计数稀释计数WBC，1：50000稀释计数稀释计数RBC、PLT 加入溶血剂（溶解加入溶血剂（溶解RBC，转换血红蛋白），转换血红蛋白）,打气泡混匀打气泡混匀后计数后计数WBC，Hb比色比色 RBC（36-360fl）与）与PLT（2-20fl）体积差异大，容易）体积差异大，容易区别，可在同一计数

9、池内同时计数区别，可在同一计数池内同时计数 RBC:WBC100:1，故，故WBC对对RBC计数影响忽略。计数影响忽略。全国高等学校医学规划教材临床基础检验学 第三章 血液分析仪检验（二）白细胞分类计数原理仪器将体积为35450fL的血细胞，分为256个通道（channel）。每个通道：1.64fl。根据细胞大小，分别置于不同的通道中，显示血细胞体积分布直方图（Histogram）。全国高等学校医学规划教材临床基础检验学 第三章 血液分析仪检验三分类原理：三分类原理：白细胞经溶血素处理，胞质渗出，细胞皱缩，白细胞经溶血素处理，胞质渗出，细胞皱缩，胞膜紧裹核与颗粒，体积发生变化胞膜紧裹核与颗粒，

10、体积发生变化第一群第一群（3590fl）小细胞区小细胞区：淋巴细胞（体：淋巴细胞（体积最小，一般在积最小，一般在3590fl）。）。第二群第二群（90160fl）是）是单个核细胞区单个核细胞区（中间（中间细胞）：包括单核细胞、嗜酸性粒细胞、嗜细胞）：包括单核细胞、嗜酸性粒细胞、嗜碱性粒细胞、原始、幼稚细胞、异常细胞等碱性粒细胞、原始、幼稚细胞、异常细胞等第三群第三群（160fl）大细胞区大细胞区：嗜中性粒细胞：嗜中性粒细胞（体积最大，一般在（体积最大，一般在135-350fl）。）。全国高等学校医学规划教材临床基础检验学 第三章 血液分析仪检验白细胞体积白细胞体积 生理状态下：单核细胞生理状态

11、下：单核细胞嗜酸细胞嗜酸细胞中性粒细胞中性粒细胞嗜碱细胞嗜碱细胞淋巴细胞淋巴细胞 溶血素处理后：溶血素处理后：中性粒细胞中性粒细胞嗜酸细胞嗜酸细胞单核细单核细胞胞嗜碱细胞嗜碱细胞淋巴细胞淋巴细胞全国高等学校医学规划教材临床基础检验学 第三章 血液分析仪检验三分群血液分析仪正常白细胞分类模式图（直方图）%3590160300400450(fl)全国高等学校医学规划教材临床基础检验学 第三章 血液分析仪检验LymphocyteMonocyteGranulocyte小细胞小细胞单个核细胞单个核细胞粒细胞粒细胞淋巴淋巴嗜碱嗜碱单核单核嗜酸嗜酸中性粒细胞中性粒细胞全国高等学校医学规划教材临床基础检验学

12、第三章 血液分析仪检验从三分群到五分类从三分群到五分类 三分群：淋巴细胞 单个核细胞 中性粒细胞 五分类：淋巴细胞 单核细胞 中性粒细胞 嗜酸细胞 嗜碱细胞全国高等学校医学规划教材临床基础检验学 第三章 血液分析仪检验检测原理：检测原理：组合应用组合应用 电学电学 光学光学 细胞化学等细胞化学等三、光散射法血细胞分析技术三、光散射法血细胞分析技术全国高等学校医学规划教材临床基础检验学 第三章 血液分析仪检验三、光散射法三、光散射法血细胞分析方法血细胞分析方法 1、容量、电导、光散射（、容量、电导、光散射（VCS）测量法）测量法 2、电阻抗与射频技术联合检测法、电阻抗与射频技术联合检测法 3、光

13、散射与细胞化学技术联合检测法、光散射与细胞化学技术联合检测法 4、多角度偏振光散射检测法、多角度偏振光散射检测法全国高等学校医学规划教材临床基础检验学 第三章 血液分析仪检验（一）容量、电导、光散射（一）容量、电导、光散射（VCS）测量法）测量法全国高等学校医学规划教材临床基础检验学 第三章 血液分析仪检验五分类五分类VCSVCS技术技术 运用运用V V、C C、S S三种探针三种探针,在在流式通道的某一位点流式通道的某一位点,对通对通过的单列白细胞，进行逐过的单列白细胞，进行逐个的、同时的、三重的检个的、同时的、三重的检测，以及三维分析测，以及三维分析,以确定以确定其亚群性质。其亚群性质。V

14、-V-低频波，分析细胞体低频波，分析细胞体积；积；C-C-高频波，分析细胞核高频波，分析细胞核型；型；S-S-激光，分析细胞的颗激光，分析细胞的颗粒特性。粒特性。全国高等学校医学规划教材临床基础检验学 第三章 血液分析仪检验采用三个截然不同的方采用三个截然不同的方法，逐个、同时地分析法，逐个、同时地分析每一个白细胞的特性，每一个白细胞的特性，即体积、内部结构、颗即体积、内部结构、颗粒特性和膜表面特征，粒特性和膜表面特征，对每个细胞的三项检测对每个细胞的三项检测值作综合分析，定义出值作综合分析，定义出亚群类型，实现真正意亚群类型，实现真正意义上的五分类。义上的五分类。VCS技术物理检测技术物理检

15、测全国高等学校医学规划教材临床基础检验学 第三章 血液分析仪检验白细胞接近原态的分析白细胞接近原态的分析 Scatter Pak双试剂系统的作用溶血剂(E-lyse):溶解红细胞终止剂(S-lyse):令溶解作用停止，并使白细胞恢复到“接近原态”全国高等学校医学规划教材临床基础检验学 第三章 血液分析仪检验接近原态的接近原态的WBCWBC分析分析接近原态的白细胞全国高等学校医学规划教材临床基础检验学 第三章 血液分析仪检验正常压力差：标本压力大于鞘流压力正常压力差：标本压力大于鞘流压力全国高等学校医学规划教材临床基础检验学 第三章 血液分析仪检验VCSVCS检测检测八千多个白细胞逐个、直八千多

16、个白细胞逐个、直接、同时地在流式通道内接、同时地在流式通道内接受接受VCS三重检测，得到三重检测，得到各自的三维座标值各自的三维座标值VCS全国高等学校医学规划教材临床基础检验学 第三章 血液分析仪检验体积检测体积检测(V)(V)V是以库尔特原理检测细胞的体积获得的是完全的细胞体积VCS-DC全国高等学校医学规划教材临床基础检验学 第三章 血液分析仪检验细胞内部结构检测细胞内部结构检测(C)C 运用高频电磁探针检测细胞的内部结构获得细胞核复杂程度、核质比例的信息区分分叶核和非分叶核细胞VCS-RF全国高等学校医学规划教材临床基础检验学 第三章 血液分析仪检验VCS-LaserS 是激光单色光束

17、扫描细胞产生宽角度的散射光（10-70）来测量细胞表面形态及颗粒构型和质量，更好地根据颗粒特性区分淋巴细胞、中性粒细胞和嗜酸细胞细胞颗粒特性检测细胞颗粒特性检测(S)全国高等学校医学规划教材临床基础检验学 第三章 血液分析仪检验细胞的三维定位细胞的三维定位全国高等学校医学规划教材临床基础检验学 第三章 血液分析仪检验三维分析技术三维分析技术 将检测过的将检测过的8,1928,192个细胞个细胞分布到一个以分布到一个以V V、C C、S S为为三维坐标的空间内，显三维坐标的空间内，显示出细胞群特征。示出细胞群特征。高智能的计算机软件分高智能的计算机软件分析分析细胞群的位置、析分析细胞群的位置、相

18、对密度、轮廓、和大相对密度、轮廓、和大小。小。三维坐标的数据分析位三维坐标的数据分析位点多过点多过 16 16 10 106 6个。个。全国高等学校医学规划教材临床基础检验学 第三章 血液分析仪检验全国高等学校医学规划教材临床基础检验学 第三章 血液分析仪检验三维细胞定位三维细胞定位全国高等学校医学规划教材临床基础检验学 第三章 血液分析仪检验VCSVCS三维分析的技术特点三维分析的技术特点 接近原态的白细胞分析接近原态的白细胞分析一个分类试剂包一个分类试剂包 增强型流式通道，增强型流式通道，VCSVCS直接、同时、三重检测直接、同时、三重检测分析细胞的视角与手工相似分析细胞的视角与手工相似真

19、正的三维检测真正的三维检测VCSVCS，汇集最全面的物理检测工具，汇集最全面的物理检测工具 三维分析的高分辨率三维分析的高分辨率 (256(256 256 256 256)256)白细胞五项分类白细胞五项分类1010多种异常细胞的检测多种异常细胞的检测全国高等学校医学规划教材临床基础检验学 第三章 血液分析仪检验血液分析仪的不足血液分析仪的不足 起筛查作用起筛查作用 识别异常细胞和幼稚细胞有局限性识别异常细胞和幼稚细胞有局限性 识别血液寄生虫能力不足识别血液寄生虫能力不足 血涂片显微镜形态学检查补充不足血涂片显微镜形态学检查补充不足全国高等学校医学规划教材临床基础检验学 第三章 血液分析仪检验

20、（二）电阻抗与射频法（二）电阻抗与射频法（能透入细胞内，测量核的大小及颗粒的多少）：RF:射频电流射频电流细胞内部结构信息细胞内部结构信息DC:直流电直流电细胞大小的信息细胞大小的信息全国高等学校医学规划教材临床基础检验学 第三章 血液分析仪检验嗜酸性粒细胞检测系统嗜碱性粒细胞检测系统5种白细胞分类检测系统：直流电（direct current，DC）为横坐标，以射频（radio frequency，RF）为纵坐标的二维分析图。幼稚细胞检测系统：全国高等学校医学规划教材临床基础检验学 第三章 血液分析仪检验 （三）激光与细胞化学法（三）激光与细胞化学法 1）过氧化物酶检测通道；2）嗜碱性粒细胞

21、/分叶核检测通道。全国高等学校医学规划教材临床基础检验学 第三章 血液分析仪检验过氧化物酶光散射检测 光散射测细胞大小，根据过氧化物酶含量高低区分为嗜酸粒细胞、中性粒细胞、单嗜酸粒细胞、中性粒细胞、单核细胞、淋巴细胞、嗜碱粒细胞核细胞、淋巴细胞、嗜碱粒细胞 物理、化学联合检测物理、化学联合检测全国高等学校医学规划教材临床基础检验学 第三章 血液分析仪检验（四）多角度偏振光散射（四）多角度偏振光散射 （multi-angle multi-angle polarized scatter separation of white cell,polarized scatter separation of

22、 white cell,MAPSSMAPSS）法）法0 0：前角散射光：前角散射光（1 13 3），可粗略测定细胞大小。），可粗略测定细胞大小。1010：狭角散射光：狭角散射光（7 71111），可测定细胞内部结），可测定细胞内部结构相对特征。构相对特征。9090：垂直散射光：垂直散射光（7070110110），测定细胞内部颗），测定细胞内部颗粒和胞质情况。粒和胞质情况。9090：消偏振光散射：消偏振光散射（7070110110），区分嗜酸性粒），区分嗜酸性粒细胞与其他细胞。细胞与其他细胞。全国高等学校医学规划教材临床基础检验学 第三章 血液分析仪检验全国高等学校医学规划教材临床基础检验学 第

23、三章 血液分析仪检验光散射法红细胞检测原理光散射法红细胞检测原理 低角度低角度(2(23 3)光散射光散射：测量红细胞：测量红细胞体积与数量体积与数量高角度高角度(5(51515)光散射光散射：测定单个红：测定单个红细胞血红蛋白浓度细胞血红蛋白浓度得到得到MCVMCV、MCHMCH、MCHCMCHC测定值。测定值。全国高等学校医学规划教材临床基础检验学 第三章 血液分析仪检验光散射法血小板检测原理光散射法血小板检测原理 MieMie理论（理论（Mie theory of light scatter Mie theory of light scatter for homogeneous sphe

24、resfor homogeneous spheres）：当球形化的血）：当球形化的血小板一个一个通过激光照射区时：小板一个一个通过激光照射区时：全国高等学校医学规划教材临床基础检验学 第三章 血液分析仪检验低角度低角度（2 23 3）：测量细胞大小，）：测量细胞大小，高角度高角度（5 51515）：检测细胞折射指数）：检测细胞折射指数（reactive indexreactive index，RIRI）与细胞密度有关；）与细胞密度有关；大血小板与各种碎片如果体积相似，但由于内容大血小板与各种碎片如果体积相似，但由于内容物不同，物不同，RIRI相差较大，二维散射图能鉴别。相差较大，二维散射图能鉴

25、别。折射系数折射系数:血小板血小板 1.351.351.401.40RBCRBC含高浓度含高浓度HbHb 1.35 1.351.441.44 全国高等学校医学规划教材临床基础检验学 第三章 血液分析仪检验四、血红蛋白检测原理四、血红蛋白检测原理比色法比色法全国高等学校医学规划教材临床基础检验学 第三章 血液分析仪检验血红蛋白检测原理血红蛋白检测原理 溶血剂破坏红细胞释放血红蛋白，溶血剂破坏红细胞释放血红蛋白，Hb与溶与溶血剂某些成分结合成血红蛋白衍生物，特血剂某些成分结合成血红蛋白衍生物，特定波长下比色，吸光度变化与血红蛋白含定波长下比色，吸光度变化与血红蛋白含量成正比量成正比 ICSHICS

26、H和和WHOWHO推荐氰化高铁血红蛋白法推荐氰化高铁血红蛋白法全国高等学校医学规划教材临床基础检验学 第三章 血液分析仪检验五.网织红细胞计数（reticulocyte，RET）原理 20世纪90年代起，有多种检测原理相似的网织红细胞分析仪。血液分析仪检测原理：用新亚甲蓝染色使红细胞RNA着色或用荧光染料对RNA进行染色，VCS检测。全国高等学校医学规划教材临床基础检验学 第三章 血液分析仪检验网网 织织 红红 细细 胞胞 计计 数数新亚甲蓝新亚甲蓝-VCS-VCS检测法检测法 以经典的超活染料新亚甲以经典的超活染料新亚甲蓝（蓝（NMBNMB）着色网织红细胞）着色网织红细胞内残存的内残存的RN

27、ARNA 漂去红细胞内血红蛋白漂去红细胞内血红蛋白（酸性漂洗液）（酸性漂洗液）在流式通道，运用在流式通道，运用VCSVCS三维三维技术，将网织红细胞与成技术，将网织红细胞与成熟红细胞、白细胞、血小熟红细胞、白细胞、血小板、和有核红细胞区分开板、和有核红细胞区分开来来全国高等学校医学规划教材临床基础检验学 第三章 血液分析仪检验全国高等学校医学规划教材临床基础检验学 第三章 血液分析仪检验网织红细胞网织红细胞VCS三维散点图分析三维散点图分析网织红细胞网织红细胞全国高等学校医学规划教材临床基础检验学 第三章 血液分析仪检验光散射法网织红细胞检测散点图 全国高等学校医学规划教材临床基础检验学 第三

28、章 血液分析仪检验第二节第二节 血细胞分析仪检验参数血细胞分析仪检验参数（一）检测参数 中高档仪器检测参数：20项左右至超过40项（二）相关参数的临床应用全国高等学校医学规划教材临床基础检验学 第三章 血液分析仪检验血细胞参数介绍血细胞参数介绍 WBC、NE%、NE#、LY%、LY#、MO%、MO#、EO%、EO#、BA%、BA#；RBC、Hgb、Hct、MCV、MCH、MCHC、RDW PLT、MPV、PCT、PDW RET%、RET#、MRV、RMI全国高等学校医学规划教材临床基础检验学 第三章 血液分析仪检验白细胞系列参数白细胞系列参数WBC：白细胞数量，正常人参考为：白细胞数量，正常人

29、参考为3.5-10109/LNE%：中性粒细胞百分比，正常参考为：中性粒细胞百分比，正常参考为50%-75%NE#：中性粒细胞绝对值：中性粒细胞绝对值LY%：淋巴细胞百分比，正常参考为：淋巴细胞百分比，正常参考为20%-40%LY#：淋巴细胞绝对值淋巴细胞绝对值MO%：单核细胞百分比，正常参考为：单核细胞百分比，正常参考为3%-10%MO#：单核细胞绝对值：单核细胞绝对值EO%：嗜酸细胞百分比，正常参考为：嗜酸细胞百分比，正常参考为0.5%-5%EO#：嗜酸细胞绝对值：嗜酸细胞绝对值BA%：嗜碱细胞百分比，正常参考为：嗜碱细胞百分比，正常参考为0-2%BA#：嗜碱细胞绝对值：嗜碱细胞绝对值全国

30、高等学校医学规划教材临床基础检验学 第三章 血液分析仪检验红细胞系列参数红细胞系列参数RBC：红细胞数量，正常参考男性为：红细胞数量，正常参考男性为4.0-5.51012/L正常参考女性为正常参考女性为3.5-5.01012/LHgb：外周血中血红蛋白浓度，正常参考为：外周血中血红蛋白浓度，正常参考为110-160g/LHct：血细胞压积，也可指红细胞压积，正常参考为：血细胞压积，也可指红细胞压积，正常参考为0.35-0.50MCV：红细胞平均体积，正常参考为：红细胞平均体积，正常参考为80-100fLMCH：红细胞平均血红蛋白含量，指平均每个红细胞含的血红蛋白：红细胞平均血红蛋白含量，指平均

31、每个红细胞含的血红蛋白量，正常参考为量，正常参考为27-34pgMCHC：红细胞平均血红蛋白浓度，指每升红细胞血红蛋白浓度，：红细胞平均血红蛋白浓度，指每升红细胞血红蛋白浓度，正常参考为正常参考为320-360g/LRDW：红细胞分布宽度，正常参考为：红细胞分布宽度，正常参考为10.5%-15%全国高等学校医学规划教材临床基础检验学 第三章 血液分析仪检验血小板系列参数血小板系列参数 PLT：血小板数量，正常参考为：血小板数量，正常参考为100-300109/L MPV：血小板平均体积，正常参考为：血小板平均体积，正常参考为6.5-13.5fL Pct：血小板压积，正常参考为：血小板压积，正常

32、参考为0.07%-0.30%PDW：血小板分布宽度，正常参考为：血小板分布宽度，正常参考为10.5%-18%全国高等学校医学规划教材临床基础检验学 第三章 血液分析仪检验网织红细胞系列参数网织红细胞系列参数 RET%：网织红细胞百分率，正常参考为：网织红细胞百分率，正常参考为0.5%-2.0%RET#：网织红细胞绝对值：网织红细胞绝对值 MCVr：网织红细胞平均体积，正常参考为：网织红细胞平均体积，正常参考为100-125fL RMI：网织红细胞：网织红细胞成熟指数成熟指数，即不成熟网织红细胞占所有，即不成熟网织红细胞占所有网织红细胞的比率，正常参考为网织红细胞的比率，正常参考为0.09-0.

33、34 RDWrRDWr：网织红细胞分布宽度：网织红细胞分布宽度全国高等学校医学规划教材临床基础检验学 第三章 血液分析仪检验第三节第三节血液分析仪检验图形血液分析仪检验图形一、血细胞直方图 横坐标为血细胞体积大小纵坐标为不同体积细胞的相对频率（数量或百分比）。（一）白细胞直方图（一）白细胞直方图全国高等学校医学规划教材临床基础检验学 第三章 血液分析仪检验1.正常白细胞直方图正常白细胞直方图%3590160300400450(fl)全国高等学校医学规划教材临床基础检验学 第三章 血液分析仪检验2异常白细胞直方图异常白细胞直方图淋单区：异淋、嗜酸、嗜碱、淋单区：异淋、嗜酸、嗜碱、原始细胞增多原始

34、细胞增多单粒区：未成熟单粒区：未成熟N、嗜酸、嗜酸、异常细胞增多异常细胞增多PLT聚集、巨大聚集、巨大PLT、NRBC、未溶未溶RBC、脂质颗粒脂质颗粒中性粒细胞增多中性粒细胞增多全国高等学校医学规划教材临床基础检验学 第三章 血液分析仪检验（二）红细胞直方图 1.正常红细胞分布：50200fl 100200300400(fl)全国高等学校医学规划教材临床基础检验学 第三章 血液分析仪检验 2.异常红细胞直方图波峰左移（波峰左移（MCV减小），减小），峰底变宽（峰底变宽（RDW增大），增大），见于缺铁性贫血见于缺铁性贫血波峰左移（波峰左移（MCV减小），减小），峰底基本正常（峰底基本正常（RD

35、W正正常），见于常），见于珠蛋白生成珠蛋白生成障碍障碍全国高等学校医学规划教材临床基础检验学 第三章 血液分析仪检验异常红细胞直方图波峰右移（波峰右移（MCV增大），增大），峰底变宽（峰底变宽（RDW增大），增大），见于巨幼细胞贫血见于巨幼细胞贫血出现双峰，见于铁粒出现双峰，见于铁粒幼细胞性贫血、贫幼细胞性贫血、贫血治疗后血治疗后全国高等学校医学规划教材临床基础检验学 第三章 血液分析仪检验（三）血小板直方图 1.正常血小板直方图呈左偏态分布：230fl分布，主要在220fl。数数量量体积体积fl全国高等学校医学规划教材临床基础检验学 第三章 血液分析仪检验2.异常血小板直方图波峰右移（波峰右

36、移（MPV增大），增大），与横坐标接近或重合点右与横坐标接近或重合点右移，见于巨大血小板增多移，见于巨大血小板增多波峰左移（波峰左移（MPV减小），减小），与横坐标接近或重合点左与横坐标接近或重合点左移，见于小血小板增多移，见于小血小板增多全国高等学校医学规划教材临床基础检验学 第三章 血液分析仪检验异常血小板直方图波峰右移（波峰右移（MPV增大），增大），不与横坐标重合，见于不与横坐标重合，见于血小板聚集干扰血小板聚集干扰峰右侧明显抬高上扬，峰右侧明显抬高上扬，可能是小红细胞或红细可能是小红细胞或红细胞碎片干扰胞碎片干扰全国高等学校医学规划教材临床基础检验学 第三章 血液分析仪检验第四节第四

37、节 仪器质量保证仪器质量保证 血液分析仪的血液分析仪的性能评价性能评价1.1.总重复性总重复性(overall precision)(overall precision)指同一份标指同一份标本多次测量的结果接近的程度。本多次测量的结果接近的程度。重复测定重复测定1 1份抗凝静脉血份抗凝静脉血1010次，计算次，计算CVCV值。值。2.2.精密度精密度 (precision)(precision)批内（批内（within-batchwithin-batch）精密度）精密度：同一批样本重复：同一批样本重复测定结果的评价。测定结果的评价。批间批间(between-batch)(between-bat

38、ch)精密度精密度：对两批或两批以上：对两批或两批以上样本重复测定结果的评价。样本重复测定结果的评价。全国高等学校医学规划教材临床基础检验学 第三章 血液分析仪检验 3.3.准确性准确性 (accuracy)(accuracy)准确性是指测定准确性是指测定结果与真值一致性的程度。结果与真值一致性的程度。溯源性溯源性通过具有不确定度的不间断的通过具有不确定度的不间断的比较链，使测量结果联系参考标准的特性。比较链，使测量结果联系参考标准的特性。精密度和准确度精密度和准确度:全国高等学校医学规划教材临床基础检验学 第三章 血液分析仪检验4.4.可比性可比性 (comparability)(compa

39、rability)指血液分析仪测定结果与常规方法所测指血液分析仪测定结果与常规方法所测结果或不同血液分析仪测定结果之间相结果或不同血液分析仪测定结果之间相比较。显微镜法是血细胞检验基础。比较。显微镜法是血细胞检验基础。P P0.050.05有可比性。有可比性。P P0.050.05无可比性无可比性结论：结论：计数细胞越多、选用吸管、计数计数细胞越多、选用吸管、计数盘越多，计数结果越接近真值。盘越多，计数结果越接近真值。实际工作中，镜检法很难达到此要求。实际工作中，镜检法很难达到此要求。全国高等学校医学规划教材临床基础检验学 第三章 血液分析仪检验5.5.携带污染率携带污染率(carry ove

40、r)(carry over)：连续测定连续测定1 1份高值样本份高值样本3 3次（次（i1i1、i2i2、i3i3）再）再测定测定1 1份低值样本份低值样本3 3次（次（j1j1、j2j2、j3j3）携带污染率（携带污染率（%）（）（j1-j3j1-j3）/（i3-J3i3-J3）全国高等学校医学规划教材临床基础检验学 第三章 血液分析仪检验6.6.稀释效果稀释效果 指测定值与稀释倍数是否呈比例关系。指测定值与稀释倍数是否呈比例关系。线性关系范围应包括正常及常见病理范线性关系范围应包括正常及常见病理范围，越宽越理想。围，越宽越理想。P P 0.01,0.01,非线性相关。非线性相关。P P 0

41、.050.05，未偏离线性。，未偏离线性。全国高等学校医学规划教材临床基础检验学 第三章 血液分析仪检验稀释效果稀释效果 MCH MCV MCHC RBC全国高等学校医学规划教材临床基础检验学 第三章 血液分析仪检验血液分析仪全面质量管理血液分析仪全面质量管理 1.分析前的质量控制分析前的质量控制 2.分析中的质量控制分析中的质量控制 3.分析后的质量控制分析后的质量控制全国高等学校医学规划教材临床基础检验学 第三章 血液分析仪检验1.分析前的质量控制分析前的质量控制 人员培训、仪器管理人员培训、仪器管理 标本采集和运送：真空采血系统标本采集和运送：真空采血系统EDTA-K2(1.5-2mg/

42、ml)抗凝静脉血，抗凝静脉血，6h内测完，血涂片内测完，血涂片2h内制备内制备全国高等学校医学规划教材临床基础检验学 第三章 血液分析仪检验2.分析中的质量控制分析中的质量控制 严格执行操作规程严格执行操作规程 做好仪器维护做好仪器维护 每天室内质控每天室内质控 注意干扰因素注意干扰因素 严重异常结果的复查严重异常结果的复查全国高等学校医学规划教材临床基础检验学 第三章 血液分析仪检验3.分析后的质量控制分析后的质量控制 观察直方图或散点图观察直方图或散点图 决定是否镜检决定是否镜检 是否重采血样是否重采血样 审核结果审核结果全国高等学校医学规划教材临床基础检验学 第三章 血液分析仪检验常见的

43、旗标和代码常见的旗标和代码旗标旗标(数值后数值后):R结果需复核结果需复核*R计数受干扰计数受干扰 H结果高于参考范结果高于参考范围上限围上限 L结果低于参考结果低于参考范围下限范围下限代码代码(替代数值替代数值):-三次计数不统一三次计数不统一.不完全计算不完全计算+结果超出操作结果超出操作范围范围:流式通道堵塞流式通道堵塞?数据无效数据无效全国高等学校医学规划教材临床基础检验学 第三章 血液分析仪检验白细胞计数值后出现白细胞计数值后出现*R的临的临床意义床意义 说明白细胞在说明白细胞在35fl处的检测受到干扰处的检测受到干扰.在白细胞计数孔有在白细胞计数孔有35fl大小的颗粒通过并大小的颗

44、粒通过并被当作白细胞计数被当作白细胞计数,且超过一定数量且超过一定数量,触发触发报警报警 在白细胞直方图上看在白细胞直方图上看,曲线在曲线在35fl处上抬处上抬全国高等学校医学规划教材临床基础检验学 第三章 血液分析仪检验正常情况正常情况全国高等学校医学规划教材临床基础检验学 第三章 血液分析仪检验异常情况异常情况全国高等学校医学规划教材临床基础检验学 第三章 血液分析仪检验导致导致*R出现的可能原因出现的可能原因 小白细胞小白细胞 有核红细胞、抗溶红细胞有核红细胞、抗溶红细胞 红细胞聚集红细胞聚集,大血小板大血小板,血小板聚集血小板聚集 溶血剂输送系统故障溶血剂输送系统故障全国高等学校医学规

45、划教材临床基础检验学 第三章 血液分析仪检验PLT结果后出现结果后出现R旗标的临床意义旗标的临床意义 仪器进行血小板计数时仪器进行血小板计数时,计数计数2fl20fl的的血小板数量血小板数量,再拟合出一条再拟合出一条0fl70fl的曲的曲线线,目的是为了排除计数干扰目的是为了排除计数干扰.但条件不满但条件不满足时仪器不能给出拟合曲线足时仪器不能给出拟合曲线,这时候血小这时候血小板数值后出现板数值后出现R.全国高等学校医学规划教材临床基础检验学 第三章 血液分析仪检验拟拟合合曲曲线线在血小板的直方图上可见两条曲线在血小板的直方图上可见两条曲线：一条是一条是 2fl-20fl 的原始数据检测曲线的

46、原始数据检测曲线;另一条是另一条是 0fl-70fl 的拟合曲线的拟合曲线.全国高等学校医学规划教材临床基础检验学 第三章 血液分析仪检验血小板血小板拟合曲线的作用拟合曲线的作用 与参考方法有最好的相关性与参考方法有最好的相关性 不遗漏大、小不遗漏大、小血小板血小板 排除排除20fl小红细胞、其它小红细胞、其它细胞和自身聚集的干扰细胞和自身聚集的干扰 增加了血小板计数的线性范围增加了血小板计数的线性范围全国高等学校医学规划教材临床基础检验学 第三章 血液分析仪检验血小板曲线不拟合的原因血小板曲线不拟合的原因 血小板计数血小板计数 2020 血小板曲线不呈正态分布血小板曲线不呈正态分布 大多数血

47、小板分布在大多数血小板分布在 3fl3fl或或 15fl15fl区域内区域内 PDW PDW 20%.20%.全国高等学校医学规划教材临床基础检验学 第三章 血液分析仪检验血小板曲线不拟合的原因（一）血小板曲线不拟合的原因（一）1.血小板计数血小板计数20%全国高等学校医学规划教材临床基础检验学 第三章 血液分析仪检验导致血小板后出现导致血小板后出现R的原因的原因 小红细胞或红细胞碎片小红细胞或红细胞碎片;白细胞碎片白细胞碎片;大血小板大血小板,血小板聚集血小板聚集;血小板大小不一血小板大小不一(输血后输血后);电磁波或噪音干扰小孔计数电磁波或噪音干扰小孔计数全国高等学校医学规划教材临床基础检

48、验学 第三章 血液分析仪检验处理方法处理方法 1.1.手工涂片镜检手工涂片镜检,如发现小红细胞如发现小红细胞,细胞碎细胞碎片等异常细胞片等异常细胞,则手工计数血小板则手工计数血小板;2.2.如果大血小板影响到白细胞或红细胞数如果大血小板影响到白细胞或红细胞数值值,重新复核重新复核;3.3.如果出现血小板聚集如果出现血小板聚集,将标本以枸橼酸钠将标本以枸橼酸钠抗凝抗凝,检测血小板数值检测血小板数值,但最终数值须乘以但最终数值须乘以1.1(10%1.1(10%稀释比例稀释比例).).全国高等学校医学规划教材临床基础检验学 第三章 血液分析仪检验+出现的临床意义出现的临床意义+(+(代码代码)：结果

49、超出仪器的操作范围：结果超出仪器的操作范围 处理方法处理方法：用用ISOTON IIIISOTON III液稀释标本至线性范围内再测液稀释标本至线性范围内再测 注注:1.:1.先做一空白循环以防止携带污染先做一空白循环以防止携带污染 2.2.不能报告白细胞分类结果，需镜检不能报告白细胞分类结果，需镜检 检查仪器稀释液和溶血剂输送系统有无故障检查仪器稀释液和溶血剂输送系统有无故障全国高等学校医学规划教材临床基础检验学 第三章 血液分析仪检验代码代码-出现的临床意义出现的临床意义-出现代表三次计数不统一出现代表三次计数不统一 可能导致的原因可能导致的原因：小孔堵塞或部分堵塞小孔堵塞或部分堵塞;标本

50、有凝块或丝状纤维蛋白标本有凝块或丝状纤维蛋白;白细胞聚集白细胞聚集,红细胞凝集红细胞凝集;大血小板大血小板,血小板凝集血小板凝集;标本稀释后未气泡混匀标本稀释后未气泡混匀.处理方法：处理方法：参照维修手册清洗小孔参照维修手册清洗小孔;查看标本有无凝块查看标本有无凝块,涂片镜检有无细胞聚集涂片镜检有无细胞聚集;检测标本混匀系统检测标本混匀系统.全国高等学校医学规划教材临床基础检验学 第三章 血液分析仪检验代码代码.出现的临床意义出现的临床意义.出现表示数据不完整出现表示数据不完整,不完全计数不完全计数 通常当一个参数由于三次计数不统一或通常当一个参数由于三次计数不统一或超过范围得不到确切数值时超