环境微生物-病毒课件.ppt

1、2022-12-151 第二章 病 毒 非细胞结构的超微生物2022-12-152p 六界学说六界学说王大耜王大耜 非细胞结构非细胞结构病毒界病毒界 原核生物（细菌、放线菌、蓝藻）原核生物（细菌、放线菌、蓝藻）原核生物界原核生物界 具具 细细 原生动物、真核藻类原生动物、真核藻类真核原生生物界真核原生生物界 胞胞 真核生物真核生物 酵母菌、霉菌酵母菌、霉菌真菌界真菌界 结结 微型后生动物微型后生动物动物界动物界 构构 低、高等植物低、高等植物植物界植物界生生 物物2022-12-153本章学习目标本章学习目标1.掌握病毒的形态特征及病毒的化学组成和结构；掌握病毒的形态特征及病毒的化学组成和结构

2、；2.掌握病毒的主要特点，了解病毒的分类和命名；掌握病毒的主要特点，了解病毒的分类和命名；3.了解亚病毒的特点和新兴病毒出现的原因；了解亚病毒的特点和新兴病毒出现的原因；4.掌握病毒的增殖过程；掌握病毒的增殖过程；5.了解两种类型的噬菌体：毒（烈）性噬菌体、温和噬菌体；了解两种类型的噬菌体：毒（烈）性噬菌体、温和噬菌体；6.了解病毒的培养特征、培养方法以及环境因子对病毒的影响。了解病毒的培养特征、培养方法以及环境因子对病毒的影响。2022-12-154具体学习内容具体学习内容第一节第一节 病毒的形态和结构病毒的形态和结构p病毒的形态大小病毒的形态大小p病毒的化学组成和结构；病毒的化学组成和结构

3、；第二节第二节 病毒的特征及分类病毒的特征及分类p病毒的特点病毒的特点p病毒的分类病毒的分类第三节第三节 亚病毒和新兴病毒亚病毒和新兴病毒 第四节第四节 病毒的增殖病毒的增殖p病毒的增殖过程病毒的增殖过程p病毒的溶原性病毒的溶原性第五节第五节 病毒的培养和计数病毒的培养和计数p病毒的培养特征病毒的培养特征p病毒的培养基病毒的培养基p病毒的培养病毒的培养第六节第六节 环境因子对病毒的影响和病毒的存活环境因子对病毒的影响和病毒的存活2022-12-155第一节第一节 病毒的形态与结构病毒的形态与结构一、病毒的形态和大小一、病毒的形态和大小p病毒的形状多样，依种类不同而不同病毒的形状多样，依种类不同

4、而不同p动物病毒动物病毒球状、球状、卵圆形、砖形p植物病毒植物病毒杆状、杆状、丝状p噬菌体噬菌体蝌蚪状、蝌蚪状、丝状2022-12-156流感病毒流感病毒H5N1:高致病性禽流感病毒高致病性禽流感病毒。属于。属于RNA病毒，病毒，流感病毒颗粒外腊由两流感病毒颗粒外腊由两型型表面糖蛋白表面糖蛋白覆盖，一型为植物血覆盖，一型为植物血凝素（即凝素（即H），一型为神经氨酸酶），一型为神经氨酸酶（即（即N），），H又分又分15个亚型，个亚型，N分分9个亚型。个亚型。7 72022-12-157 72022-12-15采用各种电镜技术观察毒粒的形态结构图采用各种电镜技术观察毒粒的形态结构图 Orf vir

5、us：口疮病毒(接触性脓疱皮炎病毒)（负染技术）Ebola virus：埃博拉病毒（正染技术）Vaccinia virus 痘苗病毒（投影技术）Vaccinia virus 痘苗病毒在病毒中体积最大，光学显微镜下勉强可见痘苗病毒在病毒中体积最大，光学显微镜下勉强可见。2022-12-158“非典型肺炎非典型肺炎”元凶元凶-冠状病毒冠状病毒SARS2022-12-159p病毒的大小常用纳米来表示（病毒的大小常用纳米来表示（1nm=10-9m）p痘病毒（痘病毒（Poxvirus）:100nm200nm300nm，为砖形；为砖形；p口蹄疫病毒口蹄疫病毒(Foot and Mouth Virus):直

6、径为直径为22nm。痘病毒痘病毒2022-12-1510有代表性的若干病毒的直径或大小有代表性的若干病毒的直径或大小 2022-12-1511二、病毒的化学组成和结构二、病毒的化学组成和结构 1.1.病毒的化学组成病毒的化学组成 -蛋白质蛋白质+核酸核酸-蛋白质蛋白质 -核酸核酸-有些病毒具有被膜（囊膜）有些病毒具有被膜（囊膜）类脂质（磷脂、胆固醇等）类脂质（磷脂、胆固醇等）多糖多糖2022-12-15122022-12-15132.病毒的结构病毒的结构（1）病毒的基本结构病毒的基本结构 核衣壳核衣壳 nucleocapsid 蛋白质衣壳蛋白质衣壳+核酸内芯核酸内芯 被膜结构被膜结构 enve

7、lope 不具被膜（囊膜）的裸露病毒粒子；不具被膜（囊膜）的裸露病毒粒子；有被膜包围的病毒粒子有被膜包围的病毒粒子 2022-12-1514p 典型的病毒粒子结构典型的病毒粒子结构 核衣壳核衣壳病毒粒子病毒粒子 被膜：类脂被膜：类脂质质、多糖、多糖核心：核心：DNA或或RNA衣壳：衣壳粒蛋白衣壳：衣壳粒蛋白2022-12-15152022-12-1516（2）衣壳粒的基本结构衣壳粒的基本结构p 衣壳粒（衣壳粒（capsomere）：用电镜观察到由规则排用电镜观察到由规则排列着的许多列着的许多蛋白质蛋白质亚单位小粒子构成。亚单位小粒子构成。2022-12-1517p基本结构基本结构 螺旋对称螺旋

8、对称 helical symmetry 多面体对称（多面体对称（20面体）面体）icosahedral symmetry 复合对称复合对称 bismmetry2022-12-1518p 螺旋对称螺旋对称 helical symmetry：杆状病毒、线状病毒杆状病毒、线状病毒 烟草花叶病毒、流感病毒、狂犬病毒烟草花叶病毒、流感病毒、狂犬病毒19192022-12-1519192022-12-15n烟草花叶病毒烟草花叶病毒(TMV)-螺旋对称衣壳衣壳蛋白：占95%，2130个衣壳粒核心RNA：占5%TMV是一种RNA病毒，专门感染植物，尤其是烟草及其他茄科植物，使叶上出现花叶症状，生长陷于不良状态

9、，叶常呈畸形。已知最耐热的植物病毒，在未经稀释的汁液中，其致死温度为93，而在干叶中，加热至120维持30分钟，病毒仍有侵染力。TMV病毒病毒2022-12-1520p多面体对称（多面体对称（20面体）面体）icosahedral symmetry：球状球状 病毒、卵圆形病毒病毒、卵圆形病毒 由至少由至少60个衣壳粒组成个衣壳粒组成20面体面体 腺病毒（腺病毒（Adenovirus）、疱疹病毒、脊髓灰质炎病毒、禽）、疱疹病毒、脊髓灰质炎病毒、禽流感病毒流感病毒安徽师范大学环境科学学院21212022-12-15安徽师范大学环境科学学院21212022-12-15腺病毒腺病毒(ADENOVIRU

10、S)-20面体立体对称n1953年发现n是一群分布十分广泛的DNA病毒n能引起人类呼吸道、胃肠道、泌尿系及眼的疾病。少数对动物有致癌作用。形状：二十面体腺质体致病性：消化道炎症等12个顶角20个面30个边衣壳：252个衣壳粒 12个五邻体，240个六邻体核心：线状2022-12-1522p复合对称复合对称 bismmetry 头部：多面体对称头部：多面体对称 尾部：螺旋对称尾部：螺旋对称 少数病毒壳体为复合对称结构少数病毒壳体为复合对称结构 有尾噬菌体有尾噬菌体 tailed phage：大肠杆菌：大肠杆菌T系噬菌体系噬菌体头部头部尾部尾部 椭圆形椭圆形 20面体面体衣壳粒衣壳粒 212个个内

11、含内含DNA和中心蛋白和中心蛋白螺旋对称螺旋对称衣壳粒衣壳粒 144个个注射核酸的通道（尾鞘）注射核酸的通道（尾鞘）蝌蚪状蝌蚪状安徽师范大学环境科学学院23232022-12-15安徽师范大学环境科学学院23232022-12-15七种七种毒性毒性的大肠杆菌噬菌体的大肠杆菌噬菌体T1T7的总称（的总称（T为为type的缩写）。的缩写）。在完全偶然的情况下发现其中的在完全偶然的情况下发现其中的T2、T4、T6三种噬菌体在性质和形态方面有许多相似之处，三种噬菌体在性质和形态方面有许多相似之处，所以把它们称为所以把它们称为T偶数噬菌体偶数噬菌体。此后又进一步证明，。此后又进一步证明，这些噬菌体的这些

12、噬菌体的DNA分子有许多部分相同。分子有许多部分相同。与此相应地把与此相应地把T1、T3、T5、T7称为称为T奇数噬菌体奇数噬菌体，T3和和T7的的DNA仅稍有相同部分，仅稍有相同部分，较之较之T偶数噬菌体，它们相似性较少。偶数噬菌体，它们相似性较少。2022-12-152425252022-12-1525252022-12-15病毒的蛋白质病毒的蛋白质n分类分类病毒蛋白质根据其是否存在于毒粒中分为：结构蛋白和非结构蛋白n结构蛋白结构蛋白是构成一个形态成熟的有感染性的病毒颗粒所必需的蛋白质，包括壳体蛋白壳体蛋白、包膜蛋白包膜蛋白和存在于毒粒中的酶酶等；n非结构蛋白非结构蛋白指在病毒复制过程中产

13、生并具有一定功能，但并不结合于毒粒中的蛋白质。26262022-12-1526262022-12-15n病毒结构蛋白的主要生理功能病毒结构蛋白的主要生理功能构成蛋白质外壳，保护病毒核酸免受核酸酶及其它理构成蛋白质外壳，保护病毒核酸免受核酸酶及其它理化因子的破坏；化因子的破坏；决定病毒感染的特异性，与宿主细胞表面存在的受体决定病毒感染的特异性，与宿主细胞表面存在的受体具特异性亲和力，促使病毒粒子的吸附和入侵。具特异性亲和力，促使病毒粒子的吸附和入侵。27272022-12-1527272022-12-15 病毒的核酸病毒的核酸n动物病毒的核酸动物病毒的核酸一一部分是部分是DNA，一一部分是部分是

14、RNA；n大多数植物病毒的核酸为大多数植物病毒的核酸为RNA，少数为，少数为DNA；n噬菌体的核酸大多数为噬菌体的核酸大多数为DNA，少数为，少数为RNA；nRNA病毒多数是单链，极少数为双链；病毒多数是单链，极少数为双链；DNA病毒多数为双链，少数单链。病毒多数为双链，少数单链。n病毒核酸功能：遗传、变异和对敏感宿主病毒核酸功能：遗传、变异和对敏感宿主细胞细胞的感染力的感染力RNA病毒病毒2022-12-15282022-12-1529第二节第二节 病毒的特征和分类病毒的特征和分类一、病毒的特点一、病毒的特点1.1.体积极小，形态多样体积极小，形态多样 0.20.2 m m，用纳米（，用纳米

15、（nmnm）来衡量）来衡量2.2.无细胞结构，大多数由蛋白质和核酸组成，有的无细胞结构，大多数由蛋白质和核酸组成，有的含有类脂质、多糖等结构含有类脂质、多糖等结构。2022-12-15303.3.专性寄生专性寄生p无合成蛋白质的机构无合成蛋白质的机构核糖体；核糖体；p无合成细胞物质和繁殖所必备的酶系统；无合成细胞物质和繁殖所必备的酶系统；p不具独立的代谢能力，必须不具独立的代谢能力，必须专性寄生专性寄生在活的敏感宿主细胞内，在活的敏感宿主细胞内，依靠宿主细胞合成病毒的化学组成，繁殖新个体。依靠宿主细胞合成病毒的化学组成，繁殖新个体。4.4.只有一种核酸（只有一种核酸（DNADNA或或RNARN

16、A）pDNA病毒（大多数为双链病毒（大多数为双链DNA）pRNA病毒（大多数为单链病毒（大多数为单链RNA）2022-12-1531p 病毒的分类病毒的分类p病毒有单独的分类系统，分类依据：病毒有单独的分类系统，分类依据：p病毒的宿主、所致疾病、核酸种类、病毒粒子的大小、病毒的宿主、所致疾病、核酸种类、病毒粒子的大小、病毒的结构、有无被膜等。病毒的结构、有无被膜等。p根据病毒专性宿主的不同进行分类：根据病毒专性宿主的不同进行分类：p动物病毒、植物病毒、细菌病毒（噬菌体）、放线菌病毒动物病毒、植物病毒、细菌病毒（噬菌体）、放线菌病毒（噬放线菌体）、藻类病毒（噬藻类体）、真菌病毒（噬（噬放线菌体）

17、、藻类病毒（噬藻类体）、真菌病毒（噬真菌体）真菌体）p按照所致的疾病进行分类：烟草花叶病毒、流感病毒按照所致的疾病进行分类：烟草花叶病毒、流感病毒p按核酸分类，可把病毒分为：按核酸分类，可把病毒分为：DNA病毒和病毒和RNA病毒病毒二、病毒的分类和命名二、病毒的分类和命名2022-12-1532p病毒的命名病毒的命名p 病毒的命名没有明确规定病毒的命名没有明确规定p以所引起的疾病命名以所引起的疾病命名p痘病毒、疱疹病毒痘病毒、疱疹病毒p以其形态特点命名以其形态特点命名p冠状病毒：形状像帽子冠状病毒：形状像帽子p弹状病毒（狂犬病毒）：形状像子弹（杆状）弹状病毒（狂犬病毒）：形状像子弹（杆状）冠状

18、病毒冠状病毒弹状病毒弹状病毒33p以发现地命名以发现地命名p科萨奇病毒（在美国科萨奇小镇最早被分离）科萨奇病毒（在美国科萨奇小镇最早被分离）一种肠病毒（一种肠病毒（enteroviruses），分为），分为AB两类，妊娠期感两类，妊娠期感染可引起非麻痹性脊髓灰质炎性病变，并致胎儿宫内感染可引起非麻痹性脊髓灰质炎性病变，并致胎儿宫内感染和致畸。染和致畸。p以发现人者姓名命名以发现人者姓名命名pEpstein-Barr病毒病毒科萨奇病毒科萨奇病毒感染科萨奇病毒症状感染科萨奇病毒症状2022-12-1534第三节 亚病毒和新兴病毒 p一些新的病毒类型出现，是一些比病毒更小一些新的病毒类型出现，是一些

19、比病毒更小的不明致病因子。的不明致病因子。p结构比病毒更简单结构比病毒更简单(亚病毒亚病毒)p有的只有一段核酸而无蛋白质外壳有的只有一段核酸而无蛋白质外壳-类病毒；类病毒；p有的甚至无任何遗传物质存在有的甚至无任何遗传物质存在-朊病毒。朊病毒。2022-12-1535p一类寄生于高等生物细胞中最小的病原体；一类寄生于高等生物细胞中最小的病原体；p与病毒类似，营严格专性寄生；与病毒类似，营严格专性寄生；p化学组成和结构比病毒更简单，仅有一段单链化学组成和结构比病毒更简单，仅有一段单链RNA,长约长约50-70nm，呈游离的棒状结构，呈游离的棒状结构，无蛋白质衣壳无蛋白质衣壳。p1971年发现第一

20、种类病毒年发现第一种类病毒马铃薯纺锤块茎类病毒；马铃薯纺锤块茎类病毒；p目前对类病毒的结构、组成、复制的机理等方面积累目前对类病毒的结构、组成、复制的机理等方面积累的知识还不多，发现的多种类病毒都是以植物为宿主。的知识还不多，发现的多种类病毒都是以植物为宿主。类病毒（类病毒（ViroidViroid）2022-12-1536 又称类类病毒、壳内类病毒、卫星病毒等又称类类病毒、壳内类病毒、卫星病毒等p一类包裹在病毒体中的有缺陷的一类包裹在病毒体中的有缺陷的类病毒，类病毒，具有环状单链具有环状单链RNA；p感染对象不是细胞，而是病毒；感染对象不是细胞，而是病毒；p被拟病毒感染的病毒称为辅助病毒；被

21、拟病毒感染的病毒称为辅助病毒；p拟病毒必须通过辅助病毒的帮助才能复制，拟病毒又会拟病毒必须通过辅助病毒的帮助才能复制，拟病毒又会 对辅助病毒的感染和复制起作用；对辅助病毒的感染和复制起作用；p拟病毒的侵染对象是植物病毒，近年来在乙型、丁型肝拟病毒的侵染对象是植物病毒，近年来在乙型、丁型肝 炎病毒中也有发现；炎病毒中也有发现；p最早在植物绒毛烟斑驳病毒中发现。最早在植物绒毛烟斑驳病毒中发现。拟病毒（拟病毒（VirusoidsVirusoids）2022-12-1537 拟病毒拟病毒2022-12-1538p即普立昂（即普立昂（Prion），），Proteinaceous infectious p

22、article 一词的一词的 缩写，意为缩写，意为“蛋白质性质的感染颗粒蛋白质性质的感染颗粒”；1982年，美国病毒学家年，美国病毒学家Prusiner发现羊搔痒病致病因子为一种蛋白质，发现羊搔痒病致病因子为一种蛋白质，是一种是一种不含核酸的微蛋白颗粒不含核酸的微蛋白颗粒。p能自行增殖；变异后耐能自行增殖；变异后耐100高温。高温。p形态为杆状颗粒，直径形态为杆状颗粒，直径25nm，长，长 100-200nm，成丛排列；成丛排列；p侵染动物，侵染动物，prion diseases Scrapie:sheep 羊搔痒病羊搔痒病 BSE(bovine spongiform encephalopat

23、hy):cows疯牛病疯牛病 CJD(Creutzfeld-Jacob Disease):human库鲁病、克库鲁病、克-雅氏病雅氏病朊病毒（朊病毒（VirinoVirino）39392022-12-1539392022-12-15n中心法则指出遗传信息不能由蛋白质蛋白质转移到蛋白质或核酸之中The central dogma of molecular biology deals with the detailed residue-by-residue transfer of sequential information.It states that such information cann

24、ot be transferred from protein to either protein or nucleic acid.）换句话说，遗传信息传到蛋白质之后，不能回流到核酸之中。遗传信息的标准流程 “DNA 制造 RNA，RNA 制造蛋白质，蛋白质反过来协助前两项流程，并协助 DNA 自我复制”，或者更简单的“DNA RNA 蛋白质”。所以整个过程可以分为三大步骤：转录转录、翻译和DNA复制复制。朊病毒朊病毒是中心法则现时已知的唯一例外。40402022-12-1540402022-12-15n中心法则中心法则理由1：RNA核苷酸比 DNA核苷酸更容易合成，DNA可能是从RNA进化 来

25、的，比RNA更稳定，其作为遗传力的保管员 的作用要胜过RNA。如逆转录病毒，它仍携 带遗传信息；理由2：新近发现RNA具 有酶的功能，称酢酶。进化的结果蛋白质完全 担负起了催化的功能。如朊病毒也能携带信息。2022-12-1541新兴病毒新兴病毒2022-12-1542第四节第四节 病毒的增殖病毒的增殖 一、病毒的增殖过程一、病毒的增殖过程p 病毒必须专性寄生在活的敏感宿主细胞内，依靠宿主的合成病毒必须专性寄生在活的敏感宿主细胞内，依靠宿主的合成机构，进行自身的核酸复制和蛋白质合成。机构，进行自身的核酸复制和蛋白质合成。p各类病毒的增殖过程基本相似，各类病毒的增殖过程基本相似，以以E.coli

26、 T系列噬菌体为例系列噬菌体为例（烈性噬菌体）（烈性噬菌体），可分成五步：可分成五步：p吸附吸附p侵入侵入p增殖（复制）增殖（复制）p成熟（装配）成熟（装配）p裂解和释放裂解和释放43432022-12-1543432022-12-151 吸附吸附 adsorption，attachment 吸附吸附n噬菌体与细菌表面受体发生特异性结合的过程噬菌体与细菌表面受体发生特异性结合的过程n其特异性取决于噬菌体蛋白与宿主菌表面受体分子结构其特异性取决于噬菌体蛋白与宿主菌表面受体分子结构的互补性位点的互补性位点过程过程n随机碰撞、尾丝散开、固着随机碰撞、尾丝散开、固着2022-12-15442.侵入侵入

27、p过程：尾丝展开、释放溶菌酶、过程：尾丝展开、释放溶菌酶、水解细菌细胞壁、水解细菌细胞壁、尾丝尾鞘收尾丝尾鞘收 缩、缩、DNA注入注入、小孔被修复小孔被修复2022-12-15453.增殖（复制）增殖（复制）p过程：过程：细菌自身的细菌自身的DNA被破坏，噬菌被破坏，噬菌体借助于细菌的合成机构（核糖体、体借助于细菌的合成机构（核糖体、mRNA、tRNA、酶等），噬菌体进、酶等），噬菌体进行自身的核酸复制和蛋白质合成。行自身的核酸复制和蛋白质合成。46462022-12-15安徽师范大学环境科学学院46462022-12-15 DNA分子的缩合分子的缩合通过衣壳包裹通过衣壳包裹DNA而形成头部而

28、形成头部尾丝和尾部其它部件独立装配完成尾丝和尾部其它部件独立装配完成头部与尾部相结合头部与尾部相结合装上尾丝装上尾丝4 成熟（装配）成熟（装配）maturity，assembly 2022-12-15475.裂解和释放裂解和释放p宿主细胞裂解和成熟噬菌体宿主细胞裂解和成熟噬菌体粒子的释放，粒子的释放，101000个（平个（平均为均为300个个）；）；p释放出的新的病毒粒子又可释放出的新的病毒粒子又可去感染新的宿主细胞。去感染新的宿主细胞。2022-12-1548二、毒（烈）性噬菌体和温和噬菌体二、毒（烈）性噬菌体和温和噬菌体p毒（烈）性噬菌体毒（烈）性噬菌体p侵入宿主细胞后立即引起宿主细胞破裂

29、的噬菌体。侵入宿主细胞后立即引起宿主细胞破裂的噬菌体。（E.coli T系列噬菌体系列噬菌体）p温和噬菌体温和噬菌体p侵入宿主细胞后，其核酸附着并整合在宿主染色体上，侵入宿主细胞后，其核酸附着并整合在宿主染色体上，和宿主染色体一起同步复制，不引起宿主细胞裂解的噬和宿主染色体一起同步复制，不引起宿主细胞裂解的噬菌体。菌体。2022-12-15492022-12-1550p含有温和噬菌体的宿主细胞称为含有温和噬菌体的宿主细胞称为溶原细胞溶原细胞。p在溶原细胞内的温和噬菌体在溶原细胞内的温和噬菌体核酸核酸，称为，称为原噬菌体原噬菌体（前噬菌体（前噬菌体 prophageprophage）。p溶原性具

30、有遗传性，温和噬菌体一旦发生变异（自溶原性具有遗传性，温和噬菌体一旦发生变异（自发或诱发），会转化成毒性噬菌体，引起细菌裂解。发或诱发），会转化成毒性噬菌体，引起细菌裂解。p应用：温和噬菌体的核酸从宿主染色体上脱离时，会携带应用：温和噬菌体的核酸从宿主染色体上脱离时，会携带部分宿主的基因。基因工程中，用温和噬菌体进行基因转部分宿主的基因。基因工程中，用温和噬菌体进行基因转移。移。2022-12-1551第五节 病毒的培养和计数一、病毒的培养基特点一、病毒的培养基特点p 病毒专性寄生的习性，培养较困难。病毒专性寄生的习性，培养较困难。p须提供活的敏感细胞须提供活的敏感细胞p 须能提供病毒附着的受

31、体，不对侵入的病毒核酸进行破坏须能提供病毒附着的受体，不对侵入的病毒核酸进行破坏（没有破坏特异性病毒的限制性核酸内切酶）。（没有破坏特异性病毒的限制性核酸内切酶）。p限制性核酸内切酶限制性核酸内切酶p识别识别DNA的特异序列，并在识别位点或其周围切割双链的特异序列，并在识别位点或其周围切割双链DNA的一类的一类内切酶。内切酶。2022-12-1552p不同种类的病毒培养基不同不同种类的病毒培养基不同p噬菌体的培养基噬菌体的培养基p相应的敏感细菌相应的敏感细菌p植物病毒的培养基植物病毒的培养基p与之相应的敏感植株和敏感的植物组织细胞与之相应的敏感植株和敏感的植物组织细胞p脊椎动物病毒的培养基脊椎

32、动物病毒的培养基p动物组织细胞、鸡鸭胚细胞、人胚组织细胞、人肿动物组织细胞、鸡鸭胚细胞、人胚组织细胞、人肿瘤细胞、敏感动物。瘤细胞、敏感动物。p乙型脑炎乙型脑炎-猪肾细胞猪肾细胞 2022-12-1553二、病毒（噬菌体）的培养特征（一）（一）在液体培养基中在液体培养基中 接种敏感细菌接种敏感细菌 细菌均匀分布，培养基浑浊细菌均匀分布，培养基浑浊 接种噬菌体接种噬菌体 敏感细菌被感染后裂敏感细菌被感染后裂解，培养基溶液透明解，培养基溶液透明 2022-12-1554（二）在琼脂固体培养基中（二）在琼脂固体培养基中p将少量噬菌体与大量宿主细胞混合，将混合液与将少量噬菌体与大量宿主细胞混合，将混合

33、液与4545左右的琼脂培养基在培养皿中充分混匀，铺左右的琼脂培养基在培养皿中充分混匀，铺平后培养。平后培养。p经数小时经数小时-10-10余小时后，在平板表面布满宿主细余小时后，在平板表面布满宿主细胞的菌苔上，可以用肉眼看到一个个透亮不长菌胞的菌苔上，可以用肉眼看到一个个透亮不长菌的小圆斑，这就是的小圆斑，这就是噬菌斑噬菌斑(plaque)(plaque)。2022-12-1555 接种噬菌体敏感细菌接种噬菌体敏感细菌 形成细菌菌落形成细菌菌落 接种噬菌体接种噬菌体 反复增殖感染反复增殖感染 细菌被裂解形成空斑（噬菌斑，细菌被裂解形成空斑（噬菌斑，plaqueplaque）p宿主细菌菌落上出现

34、空斑（噬菌斑）宿主细菌菌落上出现空斑（噬菌斑）p每一个噬菌斑一般由一个噬菌体粒子形成每一个噬菌斑一般由一个噬菌体粒子形成。2022-12-15562022-12-1557噬菌斑噬菌斑荧光假单胞菌荧光假单胞菌2022-12-1558p动物病毒的培养动物病毒的培养p动物接种动物接种p鸡胚接种鸡胚接种p组织培养组织培养p植物病毒的培养植物病毒的培养p 噬菌体的培养噬菌体的培养p双层琼脂法双层琼脂法三、病毒的培养三、病毒的培养2022-12-15592022-12-15602022-12-1561第六节 病毒对物理、化学因素的抵抗力及在污水处理中的去除效果2022-12-1562p物理因素物理因素p温

35、度：高温和低温温度：高温和低温p光：光：紫外辐射、可见光紫外辐射、可见光 p干燥干燥p化学因素化学因素p各种化学因子，会对病毒产生影响；各种化学因子，会对病毒产生影响；p抗菌物质抗菌物质p由于病毒的非细胞结构，一般情况下作用于由于病毒的非细胞结构，一般情况下作用于细胞结构的抗生素对病毒无效。细胞结构的抗生素对病毒无效。2022-12-1563一、物理因素一、物理因素p温度温度p高温高温使病毒的核酸和蛋白质衣壳受损伤；使病毒的核酸和蛋白质衣壳受损伤；p蛋白质蛋白质的变性作用阻碍病毒吸附到宿主细胞上，削弱了病的变性作用阻碍病毒吸附到宿主细胞上，削弱了病毒的感染力。毒的感染力。p在宿主细胞外的病毒，

36、大多数在在宿主细胞外的病毒，大多数在55-65范围内不到范围内不到1h灭灭活。活。p低温低温不会灭活病毒，通常在不会灭活病毒，通常在-75 保存病毒。保存病毒。p天花病毒在鸡胚膜中冰冻天花病毒在鸡胚膜中冰冻15年仍能存活。年仍能存活。2022-12-1564p光和其它辐射光和其它辐射p紫外辐射：有灭活作用紫外辐射：有灭活作用p灭活的部位是病毒的灭活的部位是病毒的核酸核酸，形成胸腺嘧啶二聚体（，形成胸腺嘧啶二聚体（T-T二聚体（二聚体（TT dimer），在相邻的胸腺嘧啶直接形成共价键。），在相邻的胸腺嘧啶直接形成共价键。p可见光可见光p在氧气和染料（美兰、中性红）存在条件下，大多数肠在氧气和染

37、料（美兰、中性红）存在条件下，大多数肠道病毒对可见光很敏感而被杀死，称为道病毒对可见光很敏感而被杀死，称为“光灭活作用光灭活作用”。p染料附着在病毒的染料附着在病毒的核酸核酸上，能催化光氧化作用，引起病毒灭活。上，能催化光氧化作用，引起病毒灭活。p离子辐射离子辐射pX射线、射线、r射线射线2022-12-1565p干燥干燥p控制环境中病毒的重要因素控制环境中病毒的重要因素p空气湿度和土壤水分较低时，会加速病毒的灭活。空气湿度和土壤水分较低时，会加速病毒的灭活。p在土壤中，水分含量低于在土壤中，水分含量低于10时，病毒会迅速灭活。时，病毒会迅速灭活。2022-12-1566二、化学因素二、化学因

38、素p体内灭活体内灭活p抗体抗体p抗原：入侵的病毒抗原：入侵的病毒p抗体：机体产生的特异蛋白抗体：机体产生的特异蛋白p干扰素干扰素p机体产生的一种糖蛋白，进而诱导宿主产生抗病毒蛋白。机体产生的一种糖蛋白，进而诱导宿主产生抗病毒蛋白。p体外灭活体外灭活p破坏蛋白质：酚、低离子强度（低渗缓冲溶液）破坏蛋白质：酚、低离子强度（低渗缓冲溶液）p破坏核酸：甲醛、亚硝酸、氨破坏核酸：甲醛、亚硝酸、氨p对蛋白质和核酸均有作用：氯（次氯酸、漂白粉、二对蛋白质和核酸均有作用：氯（次氯酸、漂白粉、二氧化氯）氧化氯）p影响脂质被膜：醚、氯仿、去氧胆酸钠、影响脂质被膜：醚、氯仿、去氧胆酸钠、（十二烷基（十二烷基硫酸钠）

39、硫酸钠）p可用上述脂溶剂鉴别病毒有无被膜可用上述脂溶剂鉴别病毒有无被膜2022-12-1567 三、抗菌物质抗菌物质 p 一般情况下，由于病毒的一般情况下，由于病毒的非细胞结构非细胞结构，作用于细，作用于细胞结构的抗生素对病毒无效。胞结构的抗生素对病毒无效。p特例特例p链霉菌、青霉菌等产生一些抗菌物质，影响某些病毒存活；链霉菌、青霉菌等产生一些抗菌物质，影响某些病毒存活；p藻类产生的代谢物，如丙烯酸和多酚，可使病毒灭活；藻类产生的代谢物，如丙烯酸和多酚，可使病毒灭活；p枯草杆菌、绿脓杆菌、大肠杆菌等具有可分解病毒蛋白衣壳枯草杆菌、绿脓杆菌、大肠杆菌等具有可分解病毒蛋白衣壳的酶，使病毒灭活。的酶

40、，使病毒灭活。2022-12-1568四、病毒在环境中的存活四、病毒在环境中的存活、水体、水体p 温度是影响病毒存活的重要因素，病毒类型不同，抵抗温度是影响病毒存活的重要因素，病毒类型不同，抵抗力不同。力不同。、土壤、土壤p 土壤的基本理化特性土壤的基本理化特性p土壤温度、湿度、土壤温度、湿度、土土壤类型，孔隙度，酸碱度，有机质含量等壤类型，孔隙度，酸碱度，有机质含量等、空气、空气p干燥程度、湿度、温度、光、紫外辐射等影响干燥程度、湿度、温度、光、紫外辐射等影响2022-12-1569p污水处理的不同程度，对病毒的去除效污水处理的不同程度，对病毒的去除效果也不同。果也不同。p一级处理：病毒处理

41、率很低，最多一级处理：病毒处理率很低，最多30%p二级处理：二级处理：90-99%p三级（深度）处理：混凝、沉淀、过滤、消毒（加三级（深度）处理：混凝、沉淀、过滤、消毒（加氯、臭氧）氯、臭氧）p病毒进一步减少病毒进一步减少五、病毒在污水处理中的去除效果五、病毒在污水处理中的去除效果2022-12-1570复习思考题复习思考题1什么是病毒什么是病毒?2病毒的一般大小如何？病毒的一般大小如何？3试解释以下名词，并图示其间的关系：病毒粒试解释以下名词，并图示其间的关系：病毒粒 子，子，核心，衣壳，衣壳粒，核衣壳，被膜，刺突。核心，衣壳，衣壳粒，核衣壳，被膜，刺突。4病毒粒子有哪几种对称方式？每种对称方式又有病毒粒子有哪几种对称方式？每种对称方式又有几类特殊的外形？试各举一例。几类特殊的外形？试各举一例。5什么是病毒的噬菌班？什么是病毒的噬菌班？6什么是烈性噬菌体？简述其裂解性生活史。什么是烈性噬菌体？简述其裂解性生活史。7什么是温和噬菌体、溶源菌？什么是温和噬菌体、溶源菌？2022-12-1571视频欣赏：病毒2022-12-1572