法医物证学-课件.ppt

1、法医物证学法医物证学 法医物证学法医物证学以法医物证为以法医物证为研究对象，以提供科学证据为目研究对象，以提供科学证据为目的，应用生命科学技术解决案件的，应用生命科学技术解决案件中与人体有关的生物检材鉴定的中与人体有关的生物检材鉴定的一门学科一门学科。物证物证（material evidencematerial evidence）：对案件的真实情况有证）：对案件的真实情况有证明作用的物品或痕迹。明作用的物品或痕迹。法医物证法医物证：主要指与：主要指与人体人体有关的有关的生物性生物性检材。包括检材。包括人体组织与器官、体液、分泌物、排泄物及由它人体组织与器官、体液、分泌物、排泄物及由它们形成的斑

2、痕，如血液、精液、唾液、骨骼、牙们形成的斑痕，如血液、精液、唾液、骨骼、牙齿、毛发、肌肉、皮肤、粘膜等。齿、毛发、肌肉、皮肤、粘膜等。物证检验物证检验（examination of material evidenceexamination of material evidence）：为了）：为了侦破或审理案件，对与案件有关的物证进行检验侦破或审理案件，对与案件有关的物证进行检验鉴定的过程。鉴定的过程。法医物证的特点法医物证的特点 法医物证的稳定性受法医物证的稳定性受环境环境影响影响 法医物证属于法医物证属于“科学证据科学证据”-是查明案件事实的依据（案件重现）是查明案件事实的依据（案件重现）-

3、是审查其他证据的手段（客观、是审查其他证据的手段（客观、可靠可靠、逻辑、逻辑性）性）“物证不怕恫吓，物证不会遗忘，物证不会受外界影响而情绪物证不怕恫吓，物证不会遗忘，物证不会受外界影响而情绪激动。激动。在审判过程中，被告人会说谎，证人会说谎，辩在审判过程中，被告人会说谎，证人会说谎，辩护律师和检查官会说谎，甚至法官也会说谎，惟有物证不会护律师和检查官会说谎，甚至法官也会说谎，惟有物证不会说谎。说谎。”(美美)郝伯特郝伯特麦克唐奈麦克唐奈让证据说话。让证据说话。(美美)李昌钰李昌钰法医物证学的基本任务：法医物证学的基本任务：个人识别（personal identification）:刑事案件的痕

4、迹、强奸轮奸的精斑、交通事故的责任认定、灾难事故（空难、海啸、地震、火灾等个体确认）亲子鉴定（Paternity testing)：血缘关系（私生、错调、拐骗、财产继承、移民等）亲子鉴定Paternity testing“亲子鉴定热亲子鉴定热”摧毁家庭的基摧毁家庭的基石石 造福人类还是戕害家庭？造福人类还是戕害家庭？亲子鉴定杀死了中国人的家庭忠诚亲子鉴定杀死了中国人的家庭忠诚“亲子鉴定亲子鉴定”折射家庭信任危折射家庭信任危机机亲子鉴定拷问亲子鉴定拷问“真实的谎言真实的谎言”亲子鉴定有什么错亲子鉴定有什么错亲权鉴定亲权鉴定（indentification in disputed patermit

5、y）：是指应用医学、生物学、和人类学的方法检测遗传标记，并依据遗传学理论进行分析，从而对被检者之间是否存在生物学亲缘关系所作的科学判定。亲子鉴定亲子鉴定：判断父母与子女之间是否存在生物学亲缘关系，称为亲子鉴定。父权鉴定父权鉴定：在亲子鉴定中，母子关系确定，要求判断争议父亲和子女间是否存在亲子关系。滴血认亲滴血认亲三国：滴骨验亲三国：滴骨验亲明代：合血法明代：合血法电视剧洗冤录中滴骨验亲剧照电影九品芝麻官中滴血认亲剧照1920年，欧洲将血型用于亲子鉴定年，欧洲将血型用于亲子鉴定1935年，美国开始亲子鉴定年，美国开始亲子鉴定1985年，年，PCR技术发明技术发明/使亲子鉴定从排除走向认定使亲子鉴

6、定从排除走向认定基于基于PCR的的STR分型已成为非常成熟的技术手段，商业化试剂盒的开发分型已成为非常成熟的技术手段，商业化试剂盒的开发和自动测序仪的应用，结果科学可靠。和自动测序仪的应用，结果科学可靠。亲子鉴定类型亲子鉴定类型涉及民事纠纷涉及民事纠纷涉及刑事案件涉及刑事案件涉及行政事务涉及行政事务子女抚养、财产继承子女抚养、财产继承怀疑产院调错婴儿怀疑产院调错婴儿强奸致孕案的生父确认强奸致孕案的生父确认碎尸案的身源认定碎尸案的身源认定杀婴或拐卖儿童案孩子身源认定杀婴或拐卖儿童案孩子身源认定移民涉外公证移民涉外公证失散亲人亲缘关系认定失散亲人亲缘关系认定计划外生育责任人确认或上户口计划外生育责

7、任人确认或上户口亲子鉴定的依据亲子鉴定的依据妊娠期限妊娠期限如果有充分证据证明被怀疑的男子在女如果有充分证据证明被怀疑的男子在女方受孕期间，由于各种原因没有条件与方受孕期间，由于各种原因没有条件与女方性交，就可能否定亲子关系。女方性交，就可能否定亲子关系。性交及生性交及生育能力育能力如被控男子确实存在性交及生育能力障如被控男子确实存在性交及生育能力障碍，可以初步得到排除。碍，可以初步得到排除。遗传特征遗传特征多基因遗传特征如毛发、皮肤、眼睛多基因遗传特征如毛发、皮肤、眼睛的颜色、脸型及多指畸形等。的颜色、脸型及多指畸形等。单基因遗传特征如血型（红单基因遗传特征如血型（红/白细胞与白细胞与血浆的

8、遗传标记），血浆的遗传标记），DNA多态性等。多态性等。遗传性状遗传性状：生物体表现的一切形态特征、生理特征和代谢类型的统称。单位性状单位性状：其中可检测的、由遗传决定的特征，并能够按预期的方式从一代遗传给下一代的性状，在遗传学上称为单位性状。遗传标记遗传标记（genetic marker)：这种具有相对差异相对差异的单位性状作为标志来识别携带它的个体、细胞和染色体或用以研究细胞、个体、家系、群体的遗传方式时称为遗传标记。遗传标记的传递遵循遗传标记的传递遵循孟德尔遗传规律：规律：同基因座等位基因在配子形成过程中彼此分同基因座等位基因在配子形成过程中彼此分离，分别进入各自的配子细胞（离，分别进入

9、各自的配子细胞（分离律分离律）；）；不同基因座等位基因在配子形成过程中，可不同基因座等位基因在配子形成过程中，可分可合，随机组合进入同一配子细胞（分可合，随机组合进入同一配子细胞（自由自由组合律组合律）。）。红细胞型、白细胞型、血小板型基因产物水平遗传标记DNA水平遗传标记血液细胞表面的遗传标记血液蛋白质的遗传标记红细胞酶型、血清酶型、血清型长度多态性序列多态性RFLP，VNTR，STRSTR SNP、mtDNA遗传标记分类遗传标记分类用于亲权鉴定的遗传标记的要求用于亲权鉴定的遗传标记的要求 遗传方式明确遗传方式明确 遗传标记的分型终身不变，具有体细胞的稳定性和遗传标记的分型终身不变，具有体细

10、胞的稳定性和遗传的稳定性遗传的稳定性 检测方法稳定检测方法稳定,不同实验室、不同批次的结果相同不同实验室、不同批次的结果相同 具有遗传多态性具有遗传多态性基因产物水平遗传标记的局限性基因产物水平遗传标记的局限性 为基因编码产物，多态信息容量小，应用价值有限为基因编码产物，多态信息容量小，应用价值有限 在基因表达过程中受许多因素影响，不能正确反映在基因表达过程中受许多因素影响，不能正确反映DNADNA多态多态性情况性情况 某些血型系统存在生理性变异和病理性变异，使判型错误某些血型系统存在生理性变异和病理性变异，使判型错误 易受环境中各种理化因素影响而失活，检材难以保存易受环境中各种理化因素影响而

11、失活，检材难以保存 检测方法多样、复杂，技术、人为误差较大检测方法多样、复杂，技术、人为误差较大DNA遗传标记的优点遗传标记的优点遗传标记多，信息量大。DNA多态性标记在生物体内的分布远多于蛋白质标记,标记多态性程度大大超过蛋白质标记。仅分析其中的少部分遗传标记就完全可以直接进行个体同一认定与亲子鉴定,具有非常高的识别率和鉴定能力。标记的遗传类型全。有按孟德尔分离和自由组合律遗传的常染色体遗传标记常染色体遗传标记,也有只父系遗传的Y Y染色体的遗传标记染色体的遗传标记和母系遗传的线粒体线粒体DNADNA序列差异序列差异。利用DNA遗传标记可以进行几代甚至隔代、多代的血缘关系的鉴定。DNA遗传标

12、记的优点遗传标记的优点 可分析的物证种类多，存在比较广泛。凡是含有细胞的生物材料均能进行DNA分析，这类物质可在很多种案件中提取到。具有检材的多样性与应用的广泛性。对于自然环境具有相对比较高的稳定性。DNA遗传标记相对稳定，保存几十年的血痕、精斑仍可以进行DNA分析,甚至历时数千年的木乃伊也可以获得含有一定遗传信息的结果。方法灵敏,检材用量少。当前的主流技术都是以 PCR 技术为基础,具有比较高的灵敏度，理论上一个细胞的DNA即可分析。实际应用中，灵敏度为ng 级 DNA,只需很少的检材，即可获得检验结果。同一个体物证具有比对的通用性。同一个体的各种组织 DNA 具有相同的序列特征，即个体组织

13、的同一性，可以用同一个体的任一部分组织或体液得到该个体的相同的全部信息，进行比对和鉴定，而不必一定要采用相同的组织。自动化程度高，速度快。可以建立数据库，进行查档比对，检索破案。DNA遗传标记的优点遗传标记的优点DNA标记的发展标记的发展 19801980：WhiteWhite首次描述限制片段长度多态性首次描述限制片段长度多态性 (RFLP)(RFLP)标记标记 19851985：JeffreysJeffreys发现可变数目串联重复发现可变数目串联重复(VNTR)(VNTR)19851985：聚合酶链反应：聚合酶链反应(PCR)(PCR)第一篇论文发表第一篇论文发表 19881988：FBIF

14、BI开始利用开始利用DNADNA分析协助办案分析协助办案 19911991：短串联重复序列：短串联重复序列(STR)(STR)第一篇论文发表第一篇论文发表n19951995：英国开始建立：英国开始建立DNADNA数据库数据库n19981998：美国启动：美国启动CODISCODIS（DNADNA检索系统）数据库检索系统）数据库n20012001：人类基因组计划：人类基因组计划HGPHGP完成完成/同时发现同时发现300300万万SNPSNPn 即即DNADNA的结构在不同的个体或等位基因之间的结构在不同的个体或等位基因之间存在差异。其本质就是由于进化过程中各种原因存在差异。其本质就是由于进化过

15、程中各种原因引起染色体引起染色体DNADNA中核苷酸排列顺序发生了改变中核苷酸排列顺序发生了改变/即即产生的产生的DNADNA片段和片段和DNADNA序列在个体间的差异。序列在个体间的差异。长度多态性长度多态性序列多态性序列多态性DNA多态性多态性1.DNA长度多态性长度多态性(DNA length polymorphisms)人类基因组人类基因组DNA长长3109bp，编码基因序列约占，编码基因序列约占不到不到5%，非编码序列包括间隔序列，基因调控序列，非编码序列包括间隔序列，基因调控序列，基因内含子等。基因内含子等。基因组基因组DNA中大约中大约10%是串联重复（是串联重复（tandem

16、repeats）DNA，结构形式是以一个序列相对恒定的，结构形式是以一个序列相对恒定的DNA片段构成片段构成核心序列核心序列（core sequence），作为重复），作为重复单位，首尾相接，串联重复。这种特殊的串联重复序列单位，首尾相接，串联重复。这种特殊的串联重复序列叫作：叫作：卫星卫星 DNA(satellite DNA)。CGATCGATCGATCGATCGATCGAT.卫星卫星DNADNA分类：分类：按照核心序列的碱基结构特征，卫星按照核心序列的碱基结构特征，卫星DNA分为：分为：大卫星大卫星(macro satellite DNA)小卫星小卫星(mini satellite DNA

17、)微卫星微卫星(micro satellite DNA)DNA长度遗传标记主要位于长度遗传标记主要位于小卫星小卫星和和微卫微卫星星DNA序列序列中。中。小卫星和微卫星小卫星和微卫星 小卫星和微卫星是依据核心序列的长度小卫星和微卫星是依据核心序列的长度人为的分类。人为的分类。小卫星重复单位小卫星重复单位：1530bp，重复次数，重复次数数次至数百次；数次至数百次；微卫星重复单位微卫星重复单位：26bp，重复次数至，重复次数至数十次。小卫星和微卫星是数十次。小卫星和微卫星是DNA长度多态性长度多态性的主要序特征性序列的主要序特征性序列。可变数目串联重复序列可变数目串联重复序列 小卫星和微卫星都具有

18、特定的基因座位，小卫星和微卫星都具有特定的基因座位，其中部分卫星其中部分卫星DNA序列，因不同个体、不同等序列，因不同个体、不同等位基因之间，重复单位的串联重复的次数不同位基因之间，重复单位的串联重复的次数不同形成了形成了DNA片段长度差异，称作片段长度差异，称作可变数目串联可变数目串联重复序列重复序列（variable number of tandem repeats,VNTR），），VNTR序列大约占一半左序列大约占一半左右，是构成右，是构成DNA片段长度多态性的主要原因。片段长度多态性的主要原因。DNADNA长度多态性长度多态性 小卫星小卫星序列都位于基因组高变区，是基因组序列都位于基因

19、组高变区，是基因组中的重组热点。其中中的重组热点。其中VNTR序列呈现极其复杂的长序列呈现极其复杂的长度多态性。度多态性。例如：某小卫星例如：某小卫星VNTR座位座位 重复单位重复单位17bp，重复次数，重复次数70450次次 则最短的基因长：则最短的基因长：17bp701190bp 最长的基因有：最长的基因有：17bp4507650bp 早期的法医早期的法医DNA分型是针对分型是针对小卫星小卫星靶序列，应用靶序列，应用限限制性片段长度多态性制性片段长度多态性（restriction fragment length polymorphism,RFLP）分析，）分析，RFLP 图谱具有高度个图谱

20、具有高度个体特异性，被称为体特异性，被称为DNA fingerprint。以小卫星核心序列为探针，对人类基因组以小卫星核心序列为探针，对人类基因组DNA作作RFLP分析，显示图谱类似超市商品条码，由分析，显示图谱类似超市商品条码，由1030条谱条谱带组成，不同个体间，谱带数目不同，谱带的位置不同。带组成，不同个体间，谱带数目不同，谱带的位置不同。人群中随机两个体的人群中随机两个体的DNA指纹完全相同的几率为指纹完全相同的几率为10-1210-19。法医物证鉴定：法医物证鉴定：从蛋白质水平进入从蛋白质水平进入DNA水平水平 实现从否定到认定的飞跃实现从否定到认定的飞跃电泳电泳电泳电泳转移转移杂交

21、显影杂交显影RFLP 分析过程分析过程限制性内切酶切限制性内切酶切1，2，4，5，6，7：均为随机个体。3为凶器上血痕。与现场收集的血痕的DNA指纹一致。35 微卫星微卫星：DNA重复单位26bp,重复次数1030次，又称短串联重复序列短串联重复序列(short tandem repeats，STR)l 30,000 个l 每 10 kb存在一个STR位点l扩增片段为100-400bp重复单位的长度重复单位的长度2CA3AAT4AGAT5AAAGA二核苷二核苷三核苷三核苷四核苷四核苷五核苷五核苷法医学上使用四核苷酸重复序列法医学上使用四核苷酸重复序列 二、三核苷酸重复序列会出现非特异性PCR产

22、物 三核苷酸重复序列与疾病有关 四核苷酸重复序列位点比二、三核苷酸重复序列的等位基因更容易彼此区分（3 3）STRSTR分型基本技术分型基本技术 PCR-STR分型技术技术：参照STR重复序列的侧翼序列设计引物，PCR扩增STR片段长度等位基因。扩增产物用聚丙烯酰胺(polyacrylamide gel，PAG)凝胶电泳分离，不同长度等位基因按重复次数(allelic ladder)参照,以重复次数命名等位基因。银染技术银染技术，电泳分离后用银染显带。荧光标记PCR引物，扩增产物携带荧光，毛细管电泳毛细管电泳，然后利用激光激发荧光显色基团，检测仪自动记录荧光波长和迁移率(由genotyper软

23、件)自动分型。不同荧光标记引物，致等位基因扩增产物携带有荧光示踪基团，按不同波长区分基因座。在毛细管电泳中，记录电泳加样点至检测窗口的时间，迁移时间表示片段长度。三个样本的等位基因分型图三个样本的等位基因分型图PCR-STR分型的技术优势技术优势：1 高灵敏度，利用PCR的高灵敏度特征，理论上单个细胞的DNA可以扩增出靶DNA片段。目前法医学鉴定的灵敏度达到ng级DNA水平。2 高特异性，针对靶基因座侧翼序列设计的PCR引物，引物的特异性决定了扩增产物的特异性。3 等位基因片段长度多在300bp以下，适用于腐败、降解、陈旧法医检材。4 种属特异性好，引物具有人的种属特异性，材料中混合有动物血痕

24、，不影响人血的STR分析。5 复合扩增，提高单次检测的信息量，常规使用10-16个STR基因座，识别能力达到DNA指纹的鉴别水平。6 实现标准化、自动化的分型，加上计算机技术辅助，建立全国范围的罪犯DNA数据库成为现实。2.DNA序列多态性序列多态性 在基因组特定的基因座位，等位基因的碱在基因组特定的基因座位，等位基因的碱基序列差异构成的多态性叫作基序列差异构成的多态性叫作序列多态性序列多态性(sequence polymorphism)。序列多态性形成的主要原因是序列多态性形成的主要原因是点突变点突变。在。在同基因座位上，因为碱基的替换构成不同等位基同基因座位上，因为碱基的替换构成不同等位基

25、因的序列差异。可以出现在编码区，也可以出现因的序列差异。可以出现在编码区，也可以出现在非编码区。在非编码区。总体思路总体思路 检测遗传标记的表型否符合相应遗传规律，并进行统计学计算，判断血缘关系。DNA核核DNA线粒体线粒体DNA常染色体常染色体性染色体性染色体X染色体染色体Y染色体染色体父系遗传父系遗传母系遗传母系遗传22对对/孟德尔孟德尔DNA类型类型奶奶父父孙女孙女核核 DNA与线粒体与线粒体DNA 人类线粒体人类线粒体DNA（mitochondrial DNA）mtDNA是唯一的核外DNA，呈环状裸露的双股螺旋结构，分重链(H)和轻链(L)，长度16569bp，编码37个与氧化磷酸化相

26、关的蛋白质和RNA。其中有5%7%的序列为非编码区，成为控制区（control region），长度大约1100bp。在控制区碱基序列处于高度变异状态。大约2/3的碱基有变异，大约90%为转换，10%为颠换。521.线粒体存在于所有组织的细胞中，无组织特异性；2.为多拷贝基因组，其含量占总DNA的0.5%；3.结构为共价、闭合、环状，分子量在几百kb以下4.呈现严格的母系遗传；线粒体线粒体DNA的遗传特征的遗传特征动物线粒体遗传方式动物线粒体遗传方式 在动物受精过程，精子尾鞘携带的大量线粒体不能进入卵子内，精子头部所携带的线粒体虽然能够进入卵子，但数量极少。小鼠精子大约将50个父本mtDNA分

27、子带进卵子，但卵子中原有的mtDNA分子大约为105个，约占受精卵中mtDNA总量的99.9%。因此mtDNA表现为母系遗传。53一、亲子鉴定案件一、亲子鉴定案件 亲子鉴定是法医DNA分析应用的一个重要领域，随着技术与经济展，越来越多的案件涉及到亲子鉴定，亲子鉴定的案件大致有:丈夫怀疑孩子非亲生。非婚生育，男方怀疑孩子非亲生或女方想搞清孩子的生父究竟是谁。强奸致孕，女方指控某男为孩子生父等。认亲、移民、继承财产、上户口。怀疑产房或育婴室调错婴儿。计划生育确认孩子是否为该对夫妇所超生或领养。被拐骗儿童或失散家庭成员的确认。尸体（碎尸块、尸骨等）身份（尸源）确定。需确定现场物证或犯罪嫌疑人衣服或家

28、里斑迹是否为受害人所留，但受害人DNA 已被销毁，无法得到；或如进行强奸案件中精斑同一认定，但嫌疑人在逃，通过亲 子鉴定确认精斑是否为嫌疑人所留。54三联体：三联体：母-子（儿子或女儿，下同）-男三方均参加检验的 情况。这样的鉴定为双亲检验。真三联体：真实存在的母-子-父关系的三联体。假三联体：不存在母-子-父关系的三联体。其中被检验的男子称为假设父亲或被告父亲。如果父母均需要确定的,则称被检验的某男、某女为假设父亲和假设母亲,亦属于双亲检验。二联体：二联体：当受检者仅为假设父或假设母和孩子二方时，称二联体。单亲检验：只有父母一方的二联体的亲子鉴定。反转亲子鉴定：反转亲子鉴定：指父母已确定，检

29、验孩子是否为他们亲生的亲子鉴定，主要见于失踪者（活体、尸体）的身份确定。亲子鉴定原理亲子鉴定原理 亲子鉴定的基本原理有以下两点亲子鉴定的基本原理有以下两点：在肯定孩子的某个等位基因是来自生父，而被控父亲（AF）并不带有这个基因的情况下，可以排除他是孩子的生父。检查的遗传标记越多，非生物学父亲被排除的概率就越大。在肯定孩子的某些等位基因是来自生父，而AF也带有这些基因的情况下，不能排除他是孩子的生父。这时可以计算如果判断他是孩子生父，理论上的把握度究竟有多大。在肯定孩子的某一遗传基因必然来自生父（生父基因在肯定孩子的某一遗传基因必然来自生父（生父基因obligatory gene/OG）/而假设

30、父（而假设父（alleged father/AF）不带有这个基因时）不带有这个基因时/可以排除他是孩子的生父。可以排除他是孩子的生父。14/1513/1715/17否定亲生否定亲生MAF在肯定孩子的某一遗传基因必然来自生父在肯定孩子的某一遗传基因必然来自生父/而而AF也带也带有这个基因时有这个基因时/不能排除他是孩子的生父不能排除他是孩子的生父/这时可以计这时可以计算他与孩子具有亲生关系的相对机会有多大。算他与孩子具有亲生关系的相对机会有多大。13/1513/1715/17不排除亲生不排除亲生肯定亲生？肯定亲生？MAF59 在一个家庭中，遗传规律可概括为：在一个家庭中，遗传规律可概括为：孩子不

31、可能带有双亲均无的等位基因。孩子必定得到双亲各方的一对等位基因中的一个。除了在双亲都带有相同基因（如A）的情况下，孩子不可能有两个相同基因（AA）。某个基因在双亲中的一方或双方为纯合子时（AA），必定要在孩子中表现出来（A）。对于父系遗传的Y-染色体的标记，子代的分型必定与父亲的分型一致，而且同一父系的所有个体的分型一致。对于母系遗传的线粒体DNA，子代的分型必定与母亲的分型一致，而且同一母系的所有个体的分型一致。双等位基因遗传标记亲子鉴定的基本遗传原理可以推广到多个等位基因的遗传标记，如STR系统。否定父权否定父权 一、排除亲子关系一、排除亲子关系 排除亲子关系可以归纳为如下两种情况：孩子带

32、有母亲和AF双方都没有的一个基因。孩子没有AF必定要传递给其后代的一个基因。根据亲子鉴定原理，AF与孩子在一个遗传标记上不符合遗传规律即可以排除其父子关系，但由于突变的存在，一个不符合遗传规律，可能是由于突变造成的，而且有文献报道在真实的家系中存在两个遗传标记的突变。因此，一个遗传标记的不符合不能否定其亲子关系，要求在2个以上不同基因座同时不符合才能否定其亲子关系。错误否定父权的风险错误否定父权的风险 测试的遗传标记增多，遇到遗传变异的可能性也增加。遗传变异使亲子之间的遗传关系呈现为不符合遗传规律。如果缺乏这方面的知识，容易错误否定父权。遗传变异主要有：基因突变、沉默基因、替代等位基因、基因缺

33、失、血型变异、基因互换、弱抗原、嵌合体、镶嵌抗原、生理与病理性变异等。尽管遇到遗传变异的概率很低，但为了避免潜在遗传变异的影响，排除父权至少应根据两个以上遗传标记。突变率突变率 基因突变：基因突变：减数分裂过程中，存在有基因的交换与重组，或由于某些因素的作用，导致基因的核苷酸顺序发生改变。突变是导致亲代与子代的遗传标记不符合遗传规律的重要原因。突变可能会影响到亲子鉴定结果的正确性，从而对案件的侦破与审判产生误导。因此在亲子鉴定中，应选取那些突变率低的遗传标记。突变率：突变率：是指每代细胞发生突变的百分率，是评估遗传标记稳定性与亲子鉴定可靠性的指标。为了避免因遗传标记的突变而错误地排除亲子关系，

34、法医学亲子鉴定所选用的遗传标记必须经家系调查，且至少观察500次减数分裂，选用的遗传标记突变率应低于0.2。防止错误否定父权的方法防止错误否定父权的方法 由于突变或其他因素的存在，国际上对亲子鉴定的排除提出一些建议，主要是：、只有一个遗传标记不符合遗传规律，不能轻易作出排除结论，必须加测其他系统。、2个STR基因座或同一染色体上的两个遗传标记不符合遗传规律，需慎重对待，宜加测遗传标记后再具体分析。、有3个及以上独立遗传关系（非连锁）的遗传标记不符合遗传规律，则可作出排除亲子关系的结论。、如果只检测STR基因座，一般需检测16个以上。肯定父权的机会肯定父权的机会 在亲子鉴定中，当不能排除受检者与

35、孩子有父子或母子关系，则倾向于认同受检者与孩子有亲子关系。此时需要评价假设父与孩子有亲生关系可能性大小（即亲权机会），以判定是否具有亲生关系。常用评价亲权机会的指标有：父权指数（父权指数（PIPI）和父权相对机会）和父权相对机会。n 父权指数（父权指数（paternity index/PI）是判断亲子关系所需的两个概率的似然比，即具有AF遗传表型的男子是孩子生物学父亲的概率(X)与随机男子是孩子生物学父亲的概率(Y)的比值。PI AF是小孩生父的可能性是小孩生父的可能性RM是小孩生父的可能性是小孩生父的可能性两个概念两个概念父权相对机会父权相对机会 PI是实数，由这个数字不易看出父权的机会，通

36、常将PI值换算成换算成一个条件概率即父权相对机会（RCP）。父权相对机会既是亲子关系概率，也代表了判断AF是孩子生父的把握度大小。RCP PI PI(1-)PIPI1=0.5前概率（前概率（）：非遗传学证据）：非遗传学证据相信争议父是孩子生父的概率相信争议父是孩子生父的概率 RCP值值是一个概率含义，从理论上而言，永是一个概率含义，从理论上而言，永远达不到远达不到100%100%。实际上。实际上RCP值值是鉴定人对判定亲是鉴定人对判定亲生父子关系的一种生父子关系的一种“把握度把握度”。目前学术界比较。目前学术界比较一致的意见是一致的意见是RCP99.99%作为判定亲生关系的作为判定亲生关系的界

37、限。即在界限。即在RCP在在99.99%的前提下，的前提下，“我我”鉴鉴定人有定人有99.99%的的“把握把握”认为：认为：AF100%是是C的的BF。DNA提取PCR扩增电泳分离检测结果分析评估一般流程图Chelex法、酚-氯仿法单基因座或复合扩增激光诱导荧光检测或银染各种检材血液、唾液、精斑、毛发、肌肉、骨骼、牙齿等根据等位基因ladder分型亲子鉴定方法亲子鉴定方法法医亲子鉴定标准法医亲子鉴定标准 为了确保法医亲子鉴定的可靠性，使之规范化，科学化和标准化，国内目前已有法医亲子鉴定标准，要点如下。一、排除父权的标准 1、经标准化实验检测遗传标记，假定为父亲的男子不能提供给孩子必需的等位基因

38、，在不存在遗传变异的前提下在不存在遗传变异的前提下，可以排除假定父亲的父权。即可以断定他不是小孩的生物学父亲。2、为了避免潜在遗传变异影响，排除父权至少应根据两个以上遗传标记。任何情况下都不能仅根据一个遗传标记排除父权。3、目前常用的STR较蛋白质遗传标记有相对更高的突变率，仅仅依靠STR排除父权时，需要更多STR基因座。二、认定父权的标准二、认定父权的标准 经标准化实验检测遗传标记，假定为父亲的男子不能被排除父权。计算概率后如同时满足下列两项指标，可以认定假定父亲的父权，即可以断定他是小孩的生物学父亲。1、实验检测遗传标记的累积非父排除率等于或大于99.99；2、假定父亲的累计父权指数等于或

39、大于10 000，即在前概率相同的条件下，假定父亲的相对父权机会等于或大于99.99。多个遗传标记联合检测结果没有基因座违反/W99.99%12个基因座违反3个及以上基因座违反双亲鉴定排除亲权关系单亲鉴定肯定亲权关系不排除亲权关系增加更多基因座/计算PI无违反/W99.99%新违反结果评估结果评估案例分析案例分析 案例1 毛发、羊水确定胎儿身源 鉴定事由：对送检毛发身源者与范所怀胎儿之间有无亲生血缘关系的技术咨询。案情摘要：范携带所怀胎儿羊水和陆姓男士血样做亲子鉴定。经分析，该男士和胎儿之间无亲生血缘关系，范着急，又携带李某头发数根，对毛发身源者与范某所怀胎儿之间进行有无亲生血缘关系的技术咨询

40、。检测基因座检测基因座李某李某羊水羊水范某范某D3S1358D3S135814,1514,1514,1614,1616,1716,17D13S317D13S3178,128,128,108,1010,1210,12D7S820D7S8209,129,1212,1212,1211,1211,12D16S539D16S53911,1311,1311,1111,1110,1110,11Penta EPenta E10,1810,1818,1918,195,195,19D2S441D2S44111,1411,1414,1414,1411,1411,14TPOXTPOX8,118,118,88,88,8

41、8,8TH01TH017,87,88,98,99,99,9D2S1338D2S133820,2020,2019,2019,2019,1919,19CSF1POCSF1PO10,1110,1110,1210,1212,1212,12Penta DPenta D9,149,147,97,97,97,9D10S1248D10S124812,1612,1613,1613,1613,1613,16D19S433D19S43313,1413,1414,1414,1413,1413,14vWAvWA16,1916,1917,1917,1917,2017,20D21S11D21S1130,3030,3029,

42、3029,3029,3029,30D18S51D18S5113,1513,1515,1615,1616,1816,18D6S1043D6S104312,1212,1212,1212,1211,1211,12D8S1179D8S117913,1413,1414,1414,1410,1410,14D5S818D5S8189,119,1111,1111,1110,1110,11D12S391D12S39119,2419,2422,2422,2418,2218,22FGAFGA22,2322,2323,2423,2424,2524,25累计父权指数10000，支持李某（毛发身源者）与范所怀胎儿之间有亲

43、生血缘关系 案例2 血斑检验认定男孩生父 鉴定事由：认定张某和吴某俩人谁是男孩生父 案情摘要：女士李某已结婚，育有一子，三岁。李某忧心忡忡，寝食不安。原来李某与吴某关系甚密，而与丈夫张某感情淡薄，儿子的生父究竟是谁自己也吃不准。李某、吴某悄悄带孩子做亲子鉴定。检测系统检测系统吴某血样吴某血样男孩血样男孩血样李某血样李某血样张某血样张某血样（丈夫）（丈夫）D3S1358D3S135815,1715,1716,1716,1716,1616,1615,1615,16D13S317D13S3178,108,108,98,98,98,912,1212,12D7S820D7S8209,129,1212,1

44、212,1210,1210,1211,1111,11D16S539D16S53912,1312,1312,1312,139,139,139,99,9Penta EPenta E5,185,185,195,195,195,1911,1111,11D2S441D2S44110,1410,1411,1411,1411,1111,1111.3,1211.3,12TPOXTPOX8,88,88,88,88,118,118,98,9TH01TH016,96,96,96,99,99,99,9.39,9.3D2S1338D2S133818,1918,1919,2419,2424,2424,2423,2323,

45、23CSF1POCSF1PO11,1111,1110,1110,1110,1210,1211,1211,12Penta DPenta D9,139,139,139,139,119,1110,1110,11D10S1248D10S124815,1715,1716,1716,1713,1613,1612,1312,13D19S433D19S43314,1414,1414,16.214,16.213.2,16.213.2,16.213,1413,14vWAvWA17,1817,1816,1816,1816,1916,1916,1816,18D21S11D21S1130,3030,3030,3030,

46、3030,3030,3031,32.231,32.2D18S51D18S5114,1414,1414,1914,1916,1916,1913,1613,16D6S1043D6S104314,1914,1910,1910,1910,1410,1411,1311,13D8S1179D8S117913,1413,1414,1414,1414,1614,1611,1511,15D5S818D5S81811,1111,119,119,119,119,1110,1110,11D12S391D12S39121,2221,2219,2219,2219,2119,2118,1818,18FGAFGA23,232

47、3,2320,2320,2320,2620,2623,2423,24支持吴某与男孩之间存在亲生血缘关系；排除张某与男孩之间存在亲生血缘关系。案例3 自述不育男子有亲儿 委托事由：确认女孩是否梁先生亲生 案情摘要：梁先生常常被烦恼所困。他去医院作精液检查，结果显示精子浓度不足2000万/ml，且活力不好的精子约占50%，医生认为有男性无生育能力的可疑。他对家中5岁女孩是否为自己亲生产生怀疑，且根本听不进妻子的解释，频频发生口角，甚至步入家庭崩溃的边缘，因此做亲子鉴定。检测系统检测系统梁先生梁先生女孩女孩梁夫人梁夫人D3S1358D3S135814,1814,1814,1714,1716,1716

48、,17D13S317D13S3178,118,118,88,88,88,8D7S820D7S82011,1111,1111,1111,118,118,11D16S539D16S53910,1210,1210,1110,1111,1111,11Penta EPenta E5,125,1211,1211,1211,1211,12D2S441D2S44112,1412,1410.1,1210.1,1210.1,1410.1,14TPOXTPOX11,1211,1211,1211,1210,1110,11TH01TH016,76,77,87,88,98,9D2S1338D2S133824,2424,2

49、423,2423,2423,2523,25CSF1POCSF1PO12,1212,1212,1212,1211,1211,12Penta DPenta D9,129,129,109,1010,1010,10D10S1248D10S124813,1513,1513,1513,1513,1513,15D19S433D19S43313,14.213,14.213,16.213,16.214,16.214,16.2vWAvWA17,1817,1817,1817,1817,1817,18D21S11D21S1130,32.230,32.232,32.232,32.229,3229,32D18S51D18

50、S5113,1513,1513,1513,1513,1313,13D6S1043D6S104312,1312,1312,1312,1312,1412,14D8S1179D8S117914,1714,1715,1715,1710,1510,15D5S818D5S81810,1210,1212,1212,129,129,12D12S391D12S39118,1818,1815,1815,1815,2115,21FGAFGA24,2424,2423,2423,2421,2321,23TPOXTPOX11,1211,1211,1211,1210,1110,11累计父权指数10000，支持梁先生与该女孩